一种赤芍协同美白提取物的提取方法及应用
【技术领域】
[0001] 本发明属于中药产品提取分离领域，尤其设及一种赤巧协同美白提取物的提取方 法及应用。
【背景技术】
[0002] 由于中药具有低毒安全、多成分多祀点的特点，所W成为美白化妆品开发关注的 焦点，目前的中药美白化妆品，主要存在W下问题：（1)市场上的所谓中药化妆品有其名无 其实，只是象征性加入微量或没有加入中药成分；（2)只能算是添加了植物成分的化妆品， 没有体现中医药多成分、多祀点的综合效果；（3)含中药的化妆品，一般为中药粗提取物制 成，颜色较深，味道较重，不为消费者所接受。
[0003] 赤巧，中药名，为毛良科植物赤巧或川赤巧的干燥根，春、秋二季采挖，除去根茎、 须根及泥沙，晒干。性苦、微寒、归肝经，是著名野生地道中药材，应用历史悠久，产量较大、 用途广泛，有清热凉血的功效。由于赤巧产量较大W及用途广泛，目前，已经有一些中药美 白化妆品中添加赤巧提取物用W达到美白功效，但是现有的添加赤巧提取物中药美白化妆 品一般由中药粗提取物制成，主要存在色素含量高W及美白效果差的问题。
[0004] 因此，研发出一种赤巧协同美白提取物的提取方法，通过该提取方法得到的产品， 色素含量低，可W有效提升产品的美白效果，成为了本领域技术人员亟待解决的问题。
【发明内容】
[0005] 有鉴于此，本发明提供了一种赤巧协同美白提取物的提取方法，通过该提取方法 制得的产品可W有效解决色素等杂质含量高的问题，同时还可W有效提升产品的美白效 果。进一步地，本发明通过借助现代分析手段，进一步分离产品得到产品各组成成分，从机 理上证明了中药化妆品成分功效多样性发挥协调美白作用的特点体现。
[0006] 本发明提供的一种赤巧协同美白提取物的提取方法，所述提取方法包括:浸泡:将 赤巧粉末浸泡于乙醇，得第一产物；醇提:将所述第一产物水浴回流加热，得第二产物;浓 缩:将所述第二产物浓缩，得第=产物;溶解:将所述第=产物溶于去离子水，得第四产物； 离屯、:将所述第四产物离屯、，取上清液，得第五产物;纯化:将所述第五产物流经大孔树脂层 析柱后，再用去离子水冲洗大孔树脂，最后用乙醇溶液冲洗大孔树脂，收集大孔树脂下端液 体，得产品。
[0007] 优选地，所述赤巧粉末的直径为24目，赤巧粉末与乙醇的质量比为1: (6~18)。
[000引优选地，所述第一份量乙醇溶液的体积浓度为50~90%，所述第一产品与所述第 一份量乙醇溶液的质量比为1: (6~18)。
[0009] 优选地，所述水浴回流加热的溫度为40~80°C，所述水浴回流加热的时间为0.5~ 2.5h，所述水浴回流加热的次数为1~3次。
[0010] 优选地，所述浓缩的溫度为70~80°C，所述浓缩产物含水量为5%。
[0011] 优选地，所述第=产物与所述去离子水的质量比为:1:10。
[0012] 优选地,300化/min,所述离屯、的时间为30min。
[0013] 优选地，所述大孔树脂为DlOl型大孔树脂，所述第五产物与所述大孔树脂的体积 比为（1~2):1。
[0014] 优选地，所述去离子水与所述大孔树脂的体积比为（3~7): 1，所述第二份量乙醇 溶液的浓度为50~70%，所述第二份量乙醇溶液与所述大孔树脂的体积比为(1~3): 1。
[0015] 优选地，所述大孔树脂层析柱的径高比为1: (3~9)，所述第五产物、去离子水、第 二份量乙醇溶液流经所述大孔树脂的吸附流速为2柱体积/小时。
[0016] 本发明还提供了一种包括W上任意一项的制备方法得到的产品在美白化妆品中 的应用。
[0017] 综上所述，本发明提供的一种赤巧协同美白提取物的提取方法，经过浸泡、醇提、 浓缩、溶解、离屯、W及纯化步骤制得产品，通过该提取方法制得的产品于传统提取方法得到 的对照产品相比，可W有效提升美白效果。
【附图说明】
[0018] 为了更清楚地说明本发明实施例或现有技术中的技术方案，下面将对实施例或现 有技术描述中所需要使用的附图作简单地介绍，显而易见地，下面描述中的附图仅仅是本 发明的实施例，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动的前提下，还可W根据 提供的附图获得其他的附图。
[0019] 图1为本发明实施例一种赤巧协同美白提取物中巧药巧亚硫酸醋的质谱示意图；
[0020] 图2为本发明实施例一种赤巧协同美白提取物中氧化巧药巧的质谱示意图；
[0021] 图3为本发明实施例一种赤巧协同美白提取物中巧药内醋巧的质谱示意图；
[0022] 图4为本发明实施例一种赤巧协同美白提取物中巧药巧的质谱示意图；
[0023] 图5为本发明实施例一种赤巧协同美白提取物中没食子酷基巧药巧的质谱示意 图；
[0024] 图6为本发明实施例一种赤巧协同美白提取物中苯甲酯氧巧药巧的质谱示意图；
[0025] 图7为本发明实施例一种赤巧协同美白提取物苯甲酯巧药巧的质谱示意图；
[0026] 图8为本发明实施例一种赤巧协同美白提取物二氨搬皮素的质谱示意图；
[0027] 图9为本发明实施例一种赤巧协同美白提取物紫云英巧的质谱示意图；
[0028] 图10为本发明实施例一种赤巧协同美白提取物抽皮素的质谱示意图；
[0029] 图11为本发明实施例一种赤巧协同美白提取物儿茶素的质谱示意图。
【具体实施方式】
[0030] 下面将对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施 例仅仅是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通 技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范 围。
[0031] 为了更详细说明本发明，下面结合实施例对本发明提供的一种赤巧协同美白提取 物的提取方法，进行具体地描述。
[0032] 实施例1
[0033] 称取粒径为24目赤巧粉末100克，于1200mL去离子水中80°C水浴回流加热化后70 °〇条件下浓缩至含水量为5%，即得对照品。
[0034] 实施例2
[0(X3日]称取粒径为24目赤巧粉末100克，浸泡于1200mL50 %乙醇中，浸泡化，得第一产物 1。 将第一产物80°C水浴回流加热0.化得第二产物1。将第二产物170°C条件下浓缩至含水量 为5%，得第S产物1。将第S产物1溶于200mL去离子水中，得第四产物1。将第四产物1于 300化/min下离屯、30min，取上清液，得第五产物1。取IOOmL第五产物1流经径高比为1:9,体 积为IOOmL的DlOl型大孔树脂层析柱吸附后，用400mL去离子水冲洗大孔树脂，最后用300mL 体积浓度为65%的乙醇溶液进行洗脱，收集洗脱液得产品1。上样液、去离子水及乙醇溶液 流经大孔树脂的流速均为2倍柱体积/小时。
[0036] 实施例3
[0037] 称取粒径为24目赤巧粉末100克，浸泡于1200mL70 %乙醇中，浸泡化，得第一产物 2。 将第一产物80°C水浴回流加热0.化得第二产物2。将第二产物270°C条件下浓缩至含水量 为5%，得第S产物2。将第S产物2溶于200mL去离子水中，得第四产物2。将第四产物2于 300化/min下离屯、30min，取上清液，得第五产物2。将IOOmL第五产物2流经径高比为1:9,体 积为IOOmL的DlOl型大孔树脂层析柱吸附后，用400mL去离子水冲洗大孔树脂，最后用300mL 体积浓度为65%的乙醇溶液进行洗脱，收集洗脱液得产品2。上样液、去离子水及乙醇溶液 流经大孔树脂的流速均为2倍柱体积/小时。
[003引实施例4
[0039] 称取粒径为24目赤巧粉末100克，浸泡于1200mL80 %乙醇中，浸泡化，得第一产物 3。 将第一产物80°C水浴回流加热0.化得第二产物3。将第二产物370°C条件下浓缩至含水量 为5%，得第S产物3。将第S产物3溶于200mL去离子水中，得第四产物3。将第四产物3于 300化/min下离屯、30min，取上清液，得第五产物3。将IOOmL第五产物3流经径高比为1:9,体 积为IOOmL的DlOl型大孔树脂层析柱吸附后，用400mL去离子水冲洗大孔树脂，最后用300mL 体积浓度为65%的乙醇溶液进行洗脱，收集洗脱液得产品3。上样液、去离子水及乙醇溶液 流经大孔树脂的流速均为2倍柱体积/小时。
[0040] 实施例5
[0041 ]实施例2~4制得的产品1~3通过UPLC/Q-T0F MS技术分析产品的组成，得到的产 品包括7种巧药单祗巧类化合物(详见表1)和4种黄酬类化合物(详见表2)，分离得到的11种 物质的质谱图请参阅图1~图11。
[0042] 表1:巧药单祗巧类化合物的ESK-)离子模式下的一级质谱测定及鉴别信息
[0043]
[0044]表2:黄酬类化合物的ESI(-)离子模式下的一级质谱测定及鉴别信息
[0046] 实施例6
[0047] 本实施例为实施例1制得的对照品和实施例2~4制得的产品1~3黑色素抑制功效 的实验。
[004引现代研究表明，皮肤色素沉着是由于人体黑素细胞产生过多黑色素所致，而黑色 素经一系列反应得到的物质。而其中，酪氨酸酶是黑色素合成反应中不可缺少的关键酶，也 是合成反应的限速酶，因此，通过抑制酪氨酸酶的活性，可W减少黑色素的生成，达到美白 桂斑的目的。本测定方法利用心酪氨酸与酪氨酸酶的显色反应，考察中药提取物对酪氨酸 酶的抑制功效。
[0049] 配制0.2mol/L pH6.如溝酸缓冲液，配制方法为：砰取化抽P〇4 ? 12此0 17.9g，加蒸 馈水溶解，250mL容量瓶定容，即得0.2mol/L憐酸氨二钢溶液;砰取化此P〇4 ? 2此0 7.8g，加 蒸馈水溶解，250mL容量瓶定容，即得mol/L憐酸二氨钢溶液;精密量取196mL的化抽P〇4溶液 与204mL的Na出P04溶液混合均匀即得到400血的0.2mol?L-lpH6.8的憐酸缓冲液。
[0050] 配制^酪氨酸浓度为0.04 %的^酪氨酸溶液，配制方法为：精确称取^酪氨酸 0.04旨，，用蒸馈水溶解并定容至501111^，然后再用0.2111〇1/1的憐酸缓冲液稀释至1001111^，揽拌 均匀，即得百分浓度分别为0.04%的心酪氨酸溶液。
[005。 配制浓度为120U/mL的酪氨酸酶