细胞组合物及治疗方法与流程

发明领域本公开涉及经修饰以引入核酸或表达所述核酸的载体的细胞组合物。此类组合物可用于将核酸递送至靶细胞并治疗疾病诸如癌症。发明背景已经表明，单链或双链或两者都有的核酸可以通过由经修饰以表达连接蛋白的hela细胞对中的连接蛋白形成的缝隙连接。通过将荧光标记的寡核苷酸单电极递送到供体细胞并通过缝隙连接介导的通讯确定它们转移到靶细胞而证明了转移。需要改进的向靶细胞递送核酸的方法。发明概述本发明人已鉴定了间充质谱系前体或干细胞能够以高速率将核酸转移至靶细胞。本发明人还确定了间充质谱系前体或干细胞可以将核酸递送至癌细胞以减少癌细胞生长。令人惊讶的是，尽管参与细胞间核酸转移的关键蛋白被敲除，但间充质谱系前体或干细胞的这些能力仍得以保持。使用间充质谱系前体或干细胞将核酸递送至靶细胞的另一个有利方面是这些细胞归巢于靶组织的能力。间充质谱系前体或干细胞的迁移和粘附能力使它们特别适合于此目的。因此，在一个实例中，本公开涉及将寡核苷酸递送到靶细胞中的方法，该方法包括将靶细胞与表达一种或多种选自α1、α2、α3、α4和α5、αv、β1和β3的标志物的间充质谱系前体或干细胞接触，其中已修饰所述细胞以引入寡核苷酸或表达所述寡核苷酸的载体。在一个实例中，接触在允许间充质谱系前体或干细胞与靶细胞形成缝隙连接的条件下发生，由此通过穿过该缝隙连接而将寡核苷酸递送至靶细胞。在一个实例中，缝隙连接由cx40或cx43形成。在另一个实例中，缝隙连接由cx43形成。在另一个实例中，寡核苷酸的递送是通过除cx43外的机制。例如，寡核苷酸可以通过穿过由cx40、cx45、cx30.3、cx31或cx31.1形成的缝隙连接来递送。在另一个实例中，寡核苷酸可通过形成外体来递送。在另一个实例中，寡核苷酸的递送独立于细胞与细胞的接触。在该实例中，寡核苷酸的递送不是通过连接蛋白进行的。在一个实例中，目标细胞是癌细胞或白细胞。例如，癌细胞可以是肺癌、胰腺癌、结直肠癌、肝癌、宫颈癌、前列腺癌、骨肉瘤或黑色素瘤细胞。在另一个实例中，靶细胞是合胞体细胞。例如，合胞体细胞可以是心肌细胞、平滑肌细胞、上皮细胞、结缔组织细胞或合胞体癌细胞。在另一个实例中，本公开涉及治疗受试者癌症的方法，该方法包括向受试者施用包含间充质谱系前体或干细胞的组合物，所述间充质谱系前体或干细胞表达一种或多种选自α1、α2、α3、α4和α5、αv、β1和β3的标志物，其中修饰所述细胞以引入表达所述寡核苷酸的寡核苷酸或质粒。在一个实例中，所述间充质谱系前体或干细胞表达连接蛋白，该连接蛋白也由构成受试者癌症的细胞表达。在一个实例中，连接蛋白是cx40或cx43。在一个实例中，包含受试者癌症的细胞表达cx43。在另一个实例中，所述间充质谱系前体或干细胞表达cd46。在一个实例中，癌症选自肺癌、胰腺癌、结直肠癌、肝癌、宫颈癌、前列腺癌、骨肉瘤和黑色素瘤。在一个实例中，该方法包括施用根据本公开的组合物。在一个实例中，所述寡核苷酸的长度约为12-24个核苷酸。在另一个实例中，所述寡核苷酸是rna。在另一个实例中，所述寡核苷酸是反义分子。在另一个实例中，所述寡核苷酸是shrna。在另一个实例中，所述寡核苷酸是sirna。在一个实例中，所述sirna是kif11sirna或plk1sirna。在另一个实例中，所述sirna是kif11sirna。在一个实例中，所述kif11sirna结合于如seqidno:1(ncbi参考号nm_004523.3)所示kif11mrna的5’末端。在一个实例中，所述kif11sirna结合从5’端开始的bp800与bp3,600之间的kif11mrna转录物。在另一个实例中，所述kif11sirna结合从5’端开始的bp900与bp3,200之间的kif11mrna转录物。在一个实例中，所述寡核苷酸包含如seqidno:2、3、4、5、6或7中任一个所示的核酸序列。在一个实例中，所述寡核苷酸由seqidno:2、3、4、5、6或7中任一个所示的核酸序列组成。在一个实例中，所述寡核苷酸包含seqidno:3中所示的核酸序列。在另一个实例中，所述寡核苷酸由seqidno:3中所示的核酸序列组成。在一个实例中，所述寡核苷酸包含seqidno:4中所示的核酸序列。在另一个实例中，所述寡核苷酸由seqidno:4中所示的核酸序列组成。在一个实例中，所述寡核苷酸包含seqidno:7中所示的核酸序列。在另一个实例中，所述寡核苷酸由seqidno:7中所示的核酸序列组成。在一个实例中，所述寡核苷酸包含如seqidno:3、4或7中任一项所示的核酸序列。在另一个实例中，所述寡核苷酸由seqidno:3、4或7中任一项所示的核酸序列组成。在这些实例中，所述靶细胞可以是骨癌细胞。在一个实例中，所述癌症可能是肉瘤。在另一个实例中，所述靶细胞可以是胰腺癌细胞。在一个实例中，所述癌症可以是胰腺癌。在另一个实例中，所述靶细胞可以是前列腺癌细胞。在一个实例中，所述癌症可以是前列腺癌。在另一个实例中，所述寡核苷酸包含如seqidno:2、3、4、5、6、7、8或9中任一个所示的核酸序列。在一个实例中，所述寡核苷酸由seqidno:2、3、4、5、6、7、8或9中任一个所示的核酸序列组成。在一个实例中，所述寡核苷酸由seqidno:8或9中所示的核酸序列组成。在另一个实例中，所述寡核苷酸长度为18-22个核苷酸。在另一个实例中，所述寡核苷酸是mirna。在一个实例中，所述mirna可以选自mir-155、mir-155-inh、mir-181-b1、mir-15a、mir-16-1、mir-21、mir-34a、mir-221、mir-29a、let-7b。在另一个实例中，修饰间充质谱系前体或干细胞进以引入杀死靶细胞但基本上不影响间充质谱系前体或干细胞生存力的寡核苷酸或表达所述寡核苷酸的载体。在另一个实例中，修饰间充质谱系前体或干细胞以引入抑制性寡核苷酸或表达所述抑制性寡核苷酸的载体，所述抑制性寡核苷酸在间充质谱系前体或干细胞能够将抑制性寡核苷酸递送至靶细胞诸如癌细胞之前不杀死间充质谱系前体或干细胞。本发明人还鉴定了可修饰间充质谱系前体或干细胞以引入已知杀死癌细胞和/或减少癌细胞生长的各种抑制性寡核苷酸。令人惊讶的是，这些经修饰的间充质谱系前体或干细胞仍然存活，并且能够以足以杀死癌细胞和/或减少细胞生长的水平将抑制性寡核苷酸递送至癌细胞。因此，在另一个实例中，本公开涉及包含表达一种或多种选自α1、α2、α3、α4和α5、αv、β1和β3的标志物的间充质谱系前体或干细胞的组合物，其中修饰所述细胞以引入抑制性寡核苷酸或包含表达所述抑制性寡核苷酸的载体。在一个实例中，抑制性寡核苷酸的长度约为12-24个核苷酸。在另一个实例中，抑制性寡核苷酸是rna。在另一个实例中，抑制性寡核苷酸是反义分子。在另一个实例中，抑制性寡核苷酸是shrna。在另一个实例中，抑制性寡核苷酸是sirna。在另一个实例中，抑制性寡核苷酸的长度为18-22个核苷酸。在另一个实例中，抑制性寡核苷酸是mirna。在一个实例中，mirna可以选自mir-155、mir-155-inh、mir-181-b1、mir-15a、mir-16-1、mir-21、mir-34a、mir-221、mir-29a、let-7b。在一个实例中，间充质谱系前体或干细胞也表达stro-1。因此，在一个实例中，本公开涉及将寡核苷酸递送到靶细胞中的方法，该方法包括将靶细胞与表达stro-1和一种或多种选自α1、α2、α3、α4和α5、αv、β1和β3的标志物的间充质谱系前体或干细胞接触，其中所述细胞已被修饰以引入寡核苷酸或表达所述寡核苷酸的载体。在另一个实施例中，本公开涉及治疗受试者癌症的方法，该方法包括向受试者施用包含间充质谱系前体或干细胞的组合物，所述间充质谱系前体或干细胞表达stro-1和一种或多种选自α1、α2、α3、α4和α5、αv、β1和β3的标志物，其中所述细胞被修饰以引入寡核苷酸或表达所述寡核苷酸的质粒。在另一个实施例中，本公开涉及包含表达stro-1和一种或多种选自α1、α2、α3、α4和α5、αv、β1和β3的标志物的间充质谱系前体或干细胞的组合物，其中修饰所述细胞以引入抑制性寡核苷酸或包含表达所述抑制性寡核苷酸的载体。在另一个实例中，所述间充质谱系前体或干细胞基本上是stro-1bri。在另一个实例中，所述间充质谱系前体或干细胞未被修饰而表达cx40或cx43。在一个实例中，经修饰的间充质谱系前体或干细胞包含足够水平的寡核苷酸，以减弱靶细胞诸如癌细胞的生存力。在一个实例中，经修饰的间充质谱系前体或干细胞包含足够水平的抑制性寡核苷酸，以将0.25至5nm的抑制性寡核苷酸转移至靶细胞。在另一个实例中，经修饰的间充质谱系前体或干细胞包含足够水平的抑制性寡核苷酸，以实现0.5至5nm的抑制性寡核苷酸向靶细胞的转移。在另一个实例中，经修饰的间充质谱系前体或干细胞包含足够水平的抑制性寡核苷酸，以实现0.5至4nm的抑制性寡核苷酸向靶细胞的转移。在另一个实例中，经修饰的间充质谱系前体或干细胞包含足够水平的抑制性寡核苷酸，以实现0.5至3.5nm的抑制性寡核苷酸向靶细胞的转移。在另一个实例中，间充质谱系前体或干细胞来源于多能细胞。例如，间充质谱系前体或干细胞可来源于诱导的多能干(ips)细胞。在一个实例中，使用病毒载体修饰间充质谱系前体或干细胞以引入寡核苷酸。在一个实例中，所述病毒载体选自慢病毒、杆状病毒、逆转录病毒、腺病毒(adv)、腺相关病毒(aav)或其重组形式。在另一个实例中，所述病毒载体是aav病毒。在另一个实例中，所述病毒载体是重组aav。在一个实例中，已处理经修饰的间充质谱系前体或干细胞以实现间充质谱系前体或干细胞上的细胞表面聚糖的修饰。在一个实例中，所述处理涉及在导致间充质前体谱系细胞或干细胞上的细胞表面聚糖修饰的条件下，将间充质谱系前体或干细胞暴露于糖基转移酶。在一个实例中，将间充质谱系前体或干细胞暴露于外源糖基转移酶。在另一个实例中，已修饰间充质谱系前体或干细胞以表达糖基转移酶。在一个实例中，已修饰间充质谱系前体或干细胞以引入编码糖基转移酶的核酸，其中糖基转移酶在细胞中的表达导致所述细胞在体内炎症部位的滞留增强。在一个实例中，糖基转移酶是岩藻糖基转移酶、半乳糖基转移酶或唾液酸转移酶。在一个实例中，岩藻糖基转移酶是α1,3岩藻糖基转移酶，诸如α1,3岩藻糖基转移酶iii、α1,3岩藻糖基转移酶iv、α1,3岩藻糖基转移酶vi、α1,3岩藻糖基转移酶vii或α1,3岩藻糖基转移酶ix。除非另有特别说明，否则本文中的任何实例应被视为在细节上作必要的修改后适用于任何其他实例。本公开的范围不受本文所述的具体实例的限制，这些实例仅用于举例说明的目的。如本文中所述，功能等同的产品、组合物和方法显然在本公开的范围内。在整个说明书中，除非另有具体说明或上下文另有要求，否则对单个步骤、物质组成、步骤组或物质组成组的引用应被理解为包括这些步骤、物质组成、步骤组或物质组成组中的一个和多个(即一种或多种)。下文通过以下非限制性实例并参考附图来描述本公开。附图简述图1.mpc(a)和msc(b)表达缝隙连接蛋白：连接蛋白cx43和cx40。图2.膜片钳技术—功能性缝隙连接的mpc表达。图3.筛选小组中肿瘤细胞系中的cx43表达。图4.使用lipofectamine利用花青素3荧光标记的sirnal转染的mpc：细胞外浓度1-1000nm。图5.(i).mpc通过缝隙连接将cy-5-mir16转移到(a)表达gfp的hela-cx43细胞和(b)表达gfp的panc-1细胞。(ii).mpc将kif11sirna转移至表达gfp的panc-1细胞。图6.(a)载有kif11sirna(100nm)的mpc和panc-1肿瘤细胞的共培养。(b)载有kif11sirna(500nm)的mpc和panc-1肿瘤细胞的共培养。图7.载有kif11sirna(500nm)的mpc和snuc2a肿瘤细胞的共培养。图8.(a)和(b)载有kif11sirna(500nm)的mpc和saos2肿瘤细胞的共培养。图9.(a)载有mir-16(100nm)的mpc和panc-1肿瘤细胞的共培养。(b)载有mir-16(100nm)的mpc和未转染的mpc的共培养。图10.(a)载有let7b(500nm)的mpc和panc-1(crisp/cas9cx43ko)或panc-1的共培养。还显示了用let7b转染的panc-1细胞和未转染的panc-1细胞的生长。(b)用let7b转染的mpc和未转染的mpc的生长。图11.(a)载有kif11sirna(500nm)的mpc和panc-1(crisp/cas9cx43ko)或panc-1的共培养。还显示了panc-1(crisp/cas9cx43ko)细胞与未转染的mpc的生长。(b)载有kif11sirna(500nm)的mpc和未转染的mpc的生长。图12.数据组合：载有kif11sirna(500nm)的mpc和panc-1(crisp/cas9cx43ko)或panc-1的共培养。还显示了与panc-1(crisp/cas9cx43ko)或panc-1共培养的未转染的mpc的生长，以及用kif11转染的panc-1(crisp/cas9cx43ko)的生长。图13.(a)载有mir-34a(500nm)的mpc和panc-1(crisp/cas9cx43ko)或panc-1的共培养。还显示了panc-1与未转染的mpc的生长以及panc-1转染的细胞的生长。(b)载有mir-34a(500nm)的mpc和未转染的mpc的生长。图14.(a)用mir-模拟物、plk1sirna或kif11sirna转染的mpc的死亡，第5天；用非靶向sirna、死亡sirna、plk1sirna和kif11sirna转染的mpc的细胞数的荧光测定；(b)用mir-模拟物、plk1sirna或kif11sirna转染的mpc的wst测定，第5天。图15.(a)用mir-模拟物、plk1sirna或kif11sirna转染的panc-1的细胞死亡，第5天；(b)用mir-模拟物、plk1sirna或kif11sirna转染的panc-1细胞的wst测定，第5天。图16.(a)用mir-模拟物、plk1sirna或kif11sirna转染的pc3细胞死亡，第5天(ii)；(b)用mir-模拟物、plk1sirna或kif11sirna转染的pc3细胞的wst测定，第5天。图17.(a)用mir-模拟物、plk1sirna或kif11sirna转染的saos2细胞的死亡，第5天(ii)；(b)用mir-模拟物、plk1sirna或kif11sirna转染的saos2细胞的wst测定，第5天。图18.细胞死亡和wst测定的比较分析(mpc；panc-1)。图19.细胞死亡和wst测定的比较分析(pc3；saos2)。图20.pc3前列腺异种移植肿瘤模型。在利用(处理)或不利用(对照)50万个载有500nm的针对kif11的sirna的mpc的情况下，将50万个表达荧光素酶的pc3细胞原位植入小鼠的前列腺中。一周后，给小鼠注射萤光素并成像以使肿瘤可视化。图(a)显示了对照组小鼠，图(b)显示了经mpc处理的小鼠。图(c)显示了经处理的和未经处理的小鼠的存活曲线。图21.在与用500nmkif11转染的mpc共培养后，总的(图a)和活的(图b)panc-1细胞(mpc/panc-1细胞的比率为1/1)的测量。图a和图b的x轴：-panc-1，第1天：培养1天后panc-1细胞的数量(单独培养的panc-1细胞)；-panc-1-kif11sirna，第1天：用500nmkif11转染的panc-1培养1天后测量的数量；-mpc-panc-1，第1天：与mpc共培养(比率为1/1)1天后的panc-1细胞数量；-mpc_kif11-panc-1:与用kif11(500nm；1/1的比率)转染的mpc共培养1天后panc-1细胞的数量；-panc-1，第6天：培养(单独培养的panc-1细胞)6天后panc-1细胞的数量；-panc-1-kif11sirna，第6天：用500nmkif11转染的panc-1培养6天后测量的数量；-mpc-panc-1，第1天：与mpc共培养(1/1的比率)6天后panc-1细胞的数量；-mpc_kif11-panc-1:与用kif11(500nm；1/1的比率)转染的mpc共培养6天后panc-1细胞的数量。图22.共培养中kif11sirna从mpc到panc-1细胞的效应。图a显示了与载有kif11-sirna(0–500nm)的mpc共培养的panc-1细胞生长的时间过程。图b显示了在细胞培养的第5天，与载有kif11-sirna(0–500nm)的mpc共培养的panc-1细胞生长的剂量-反应曲线。图c显示了在与panc-1共培养中，用kif11sirna(0–500nm)转染后mpc生长的时间过程。结果代表三次独立测量的平均值。图23.kif11(直接转染)对panc-1细胞生存力的剂量依赖性抑制。图24.sirna对panc-1细胞生长的影响。图a显示了用kif11sirna(0–500nm)转染后panc1细胞生长的时间过程。图b显示了在细胞培养的第6天用kif11sirna(0–500nm)转染后panc-1细胞生长的剂量-反应曲线。图25.kif11sirna对mpc细胞生长的影响。图a显示了用kif11sirna(0–500nm)转染后mpc生长的时间过程。图b显示了在细胞培养的第6天用kif11sirna(0–500nm)转染后mpc细胞生长的剂量-反应曲线。图26.共培养中kif11sirna从mpc到pc3细胞的效应。图a显示了与载有kif11sirna(0–500nm)的mpc共培养的pc3细胞生长的时间过程。图b显示了在细胞培养的第5天，与载有kif11-sirna(0–500nm)的mpc共培养的pc3细胞生长的剂量-反应曲线。图c显示了与pc3细胞共培养的用kif11sirna(0–500nm)转染后的mpc生长的时间过程。结果代表三次独立测量的平均值图27.kif11sirna对pc3细胞生长的影响。图a显示了在用kif11sirna(0–500nm)转染后pc3细胞生长的时间过程。图b显示了在细胞培养的第6天用kif11sirna(0–500nm)转染后pc3细胞生长的剂量-反应曲线。图28.mpc供体细胞kif11sirna加载。图29.mpc供体细胞kif11sirna向肿瘤细胞的转移。图30.kif11sirna转染的细胞中kif11mrna的水平。图31.在与载有kif11sirna的mpc共培养后panc-1细胞中的kif11mrna水平。mpc＝直接用kif11sirna转染的mpc；mpc-co＝直接用kif11sirna转染并与panc1共培养的mpc；panc1-co＝与用kif11sirna转染的mpc共培养24小时的panc1细胞；转染后48小时测定kif11的表达。用于分析qrt-pcr数据的比较ct法(δδct法)-1。样品kif11平均ct-gapdh平均ct＝δctkif11-gapdh；2。δδct＝δct处理的-δct未处理的；3。相对于未处理的kif11的倍数变化＝2-δδct。图32.sirna与人kif11mrna序列的比对。图33.kif11sirna对mpc和肿瘤细胞生存力的影响。图34.用kif11sirna转染的mpc和msc与对照相比的基因表达分析。序列表要点seqidno:1:kif11mrna(ncbi参考号nm_004523.3)seqidno:2:hs_kif11_8sirnaseqidno:3:hs_kif11_9sirnaseqidno:4:hs_kif11_6sirnaseqidno:5:hs_kif11_12sirnaseqidno:6:hs_kif11_7sirnaseqidno:7:hs_kif11_4sirna发明详述通用技术和选择的定义除非另有明确定义，否则本文使用的所有技术和科学术语应被视为具有与本领域(例如，分子生物学、细胞培养、干细胞分化、细胞疗法、遗传修饰、生物化学、生理学和临床研究)普通技术人员通常理解的相同含义。除非另有说明，否则本公开中使用的分子和统计技术是本领域技术人员熟知的标准程序。此类技术在整个诸如以下的文献来源中进行了描述和解释：j.perbal、apracticalguidetomolecularcloning、johnwileyandsons(1984)、j.sambrook等人，molecularcloning:alaboratorymanual、coldspringharbourlaboratorypress(1989)、t.a.brown(编辑)、essentialmolecularbiology:apracticalapproach，第1和2卷，irlpress(1991)、d.m.glover和b.d.hames(编辑)、dnacloning:apracticalapproach，第1-4卷，irlpress(1995和1996)，以及f.m.ausubel等人(编辑)、currentprotocolsinmolecularbiology、greenepub.associatesandwiley-interscience(1988，包括所有直至目前的更新)、edharlow和davidlane(编辑)antibodies:alaboratorymanual、coldspringharbourlaboratory、(1988)、以及j.e.coligan等人(编辑)currentprotocolsinimmunology、johnwiley&sons(includingallupdatesuntilpresent)。如在本说明书和所附权利要求书中所用，除非内容另外明确指出，否则单数和单数形式的术语“一个/种”、“所述”和“该”例如任选地包括复数指代物。因此，例如，提及“一个/种分析物”任选地包括一种或多种分析物。如本文中所用，除非另有说明，否则术语“约”是指指定值的+/-10％，更优选+/-5％，更优选+/-1％。术语“和/或”，例如“x和/或y”应理解为表示“x和y”或“x或y”，并应理解为对两种含义或任一种含义的明确支持。在整个说明书中，词语“包含”或诸如“包括”或“具有”的变型将被理解为暗示包括所陈述的要素、整数或步骤，或者要素、整数或步骤的组，但不排除任何其他要素、整数或步骤，或者要素、整数或步骤的组。如本文中所用，术语“连接蛋白”意指一个大的跨膜蛋白家族，其允许细胞间通讯和离子及小信号分子的转移，并组装形成缝隙连接。连接蛋白是四通道跨膜蛋白，具有c和n两个细胞质末端，一个细胞质环(cl)和两个额外的细胞环(e1-1)和(e1-2)。连接蛋白以六个一组的方式组装形成半通道，或称接合体(connexon),然后两个半通道(每个细胞上一个)组合形成两个细胞之间的缝隙连接。术语连接蛋白缩写为cx，编码其的基因缩写为cx。如本文中所用，术语“缝隙连接”意指细胞类型之间的特殊细胞间连接。缝隙连接直接连接两个细胞的细胞质，这使得各种分子诸如核酸、离子和电脉冲直接通过细胞间的调节门。可以向各种受试者施用根据本公开的细胞组合物。在一个实例中，受试者是哺乳动物。哺乳动物可以是陪伴动物诸如狗或猫，或家畜诸如马或牛。在另一个实例中，受试者是人。诸如“受试者”、“患者”或“个体”的术语是可以根据上下文在本公开中互换使用的术语。如本文中所用，术语“治疗”是指设计用于在临床病理学过程中改变被治疗的个体或细胞的自然病程的临床干预。治疗的理想效果包括降低疾病进展速度、改善或减轻疾病状态、缓解或改善预后。例如，如果与疾病相关的一种或多种症状被减轻或消除，则个体被成功地“治疗”。“有效量”是指在必要的剂量和时间内有效达到所需的治疗或预防效果的至少量。可以在一次或多次施用中提供有效量。在本公开的一些实施例中，术语“有效量”用于指实现如上文所述的疾病或病况的治疗所必需的量。有效量可以根据待治疗的疾病或病况以及根据体重、年龄、种族背景、性别、健康和/或身体状况和与待治疗的哺乳动物相关的其他因素而变化。通常，有效量将落在相对宽的范围内(例如“剂量”范围)，该范围可由医生通过常规试验和实验来确定。有效量可以以单剂量施用或在一个治疗周期内以重复一次或多次的剂量施用。“治疗有效量”至少是实现特定病症(例如癌症)的可测量改善所需的最低浓度。本文的治疗有效量可根据诸如患者的疾病状态、年龄、性别和体重以及细胞组合物在个体中引发所需反应的能力等因素而变化。治疗有效量也是其中组合物的任何毒性或有害作用被治疗有益作用抵消的量。在癌症的情况下，治疗有效量可以减少癌细胞的数量；减小原发肿瘤的大小；抑制(即，在一定程度上减慢，在一些实例中停止)癌细胞向外周器官的浸润；抑制(即，在一定程度上减缓，并且在一些实例中停止)肿瘤转移；在一定程度上抑制或延迟肿瘤生长或肿瘤进展；和/或在一定程度上缓解与该病症相关的一种或多种症状。就根据本公开的组合物可以阻止现有癌细胞生长和/或杀死现有癌细胞而言，其可以是细胞抑制性的和/或细胞毒性的。对于癌症疗法，体内功效可以例如通过评估存活持续时间、至疾病进展的时间(timetodiseaseprogression，ttp)、响应率(responserates，rr)、响应持续时间和/或生活质量来测量。间充质谱系前体(mpc)或干细胞如本文中所用，术语“间充质谱系前体或干细胞”是指未分化的多能细胞，其具有自我更新的能力，同时保持多能性和分化成多种细胞类型的能力，所述细胞类型为间充质来源的，例如成骨细胞、软骨细胞、脂肪细胞、基质细胞、成纤维细胞和腱，或非中胚层来源的，例如肝细胞、神经细胞和上皮细胞。术语“间充质谱系前体或干细胞”包括亲代细胞和它们的未分化的后代。该术语还包括间充质谱系前体或干细胞(mpc)、多能基质细胞、间充质干细胞、血管周围间充质谱系前体或干细胞及其未分化的子代。间充质谱系前体或干细胞可以是自体的、同种异体的、异种的、同系的或同基因的。自体细胞是从它们将被再次植入的同一个体中分离出来的。同种异体细胞是从同一物种的供体中分离出来的。异种细胞是从另一物种的供体中分离出来的。同系或同基因细胞是从遗传上相同的生物体(诸如双胞胎、克隆或高度近交的研究动物模型)中分离出来的。间充质谱系前体或干细胞主要存在于骨髓中，但也已显示存在于多种宿主组织中，包括例如脐带血和脐带、成人外周血、脂肪组织、小梁骨和牙髓。在一个实例中，间充质谱系前体或干细胞表达stro-1和一种或多种整联蛋白。整联蛋白是一类细胞粘附受体，其介导细胞间和细胞-细胞外基质粘附事件。整联蛋白由异二聚多肽组成，其中单个α链多肽与单个β链非共价缔合。现有约16种不同的α链多肽和至少约8种不同的β链多肽组成细胞粘附受体的整联蛋白家族。一般来说，不同的结合特异性和组织分布来自α和β链多肽或整联蛋白亚单位的独特组合。与特定整联蛋白相关的家族通常以β亚单位为特征。然而，整联蛋白的配体结合活性很大程度上受α亚单位的影响。在一个实例中，根据本公开的间充质谱系前体或干细胞表达stro-1和具有β1(cd29)链多肽的整联蛋白。在另一个实例中，根据本公开的间充质谱系前体或干细胞表达stro-1和具有选自α1(cd49a)、α2(cd49b)、α3(cd49c)、α4(cd49d)、α5(cd49e)和αv(cd51)的α链多肽的整联蛋白。因此，在一个实例中，根据本公开的间充质谱系前体或干细胞表达stro-1和α1。在另一个实例中，间充质谱系前体或干细胞表达stro-1和α2。在另一个实例中，间充质谱系前体或干细胞表达stro-1和α3。在另一个实例中，间充质谱系前体或干细胞表达stro-1和α4。在另一个实例中，间充质谱系前体或干细胞表达stro-1和α5。在另一个实例中，间充质谱系前体或干细胞表达stro-1和αv。在另一个实例中，间充质谱系前体或干细胞表达stro-1、α2和α3。在另一个实例中，间充质谱系前体或干细胞表达stro-1、α2和α5。在另一个实例中，间充质谱系前体或干细胞表达stro-1、α3和α5。在另一个实例中，间充质谱系前体或干细胞表达stro-1、α2、α3和α5。在另一个实例中，本公开包括富含stro-1+和α1+细胞的间充质谱系前体或干细胞的群体。在该实例中，富含α1+细胞的群体可包含至少约3％或4％或5％的α1+细胞。在另一个实例中，本公开包括富含stro-1+和α2+细胞的间充质谱系前体或干细胞的群体。在该实例中，富含α2+细胞的群体可包含至少约30％或40％或50％的α2+细胞。在另一个实例中，本公开包括富含stro-1+和α3+细胞的间充质谱系前体或干细胞的群体。在该实例中，富含α3+细胞的群体包含至少约40％或45％或50％的α3+细胞。在另一个实例中，本公开包括富含stro-1+和α4+细胞的间充质谱系前体或干细胞的群体。在该实例中，富含α4+细胞的群体包含至少约5％或6％或7％的α4+细胞。在另一个实例中，本公开包括富含stro-1+和α5+细胞的间充质谱系前体或干细胞的群体。在该实例中，富含α5+细胞的群体包含至少约45％或50％或55％的α5+细胞。在另一个实例中，本公开包括富含stro-1+和αv+细胞的间充质谱系前体或干细胞的群体。在该实例中，富含αv+细胞的群体包含至少约5％或6％或7％的αv+细胞。在另一个实例中，本发明包括富含stro-1、α1+、α3+、α4+和α5+细胞的间充质谱系前体或干细胞的群体。在另一个实例中，根据本公开的间充质谱系前体或干细胞可以表达选自α1β1、α2β1、α3β1、α4β1和α5β1的整联蛋白。因此，在一个实例中，根据本公开的间充质谱系前体或干细胞表达stro-1和α1β1。在另一个实例中，间充质谱系前体或干细胞表达stro-1和α2β1。在另一个实例中，间充质谱系前体或干细胞表达stro-1和α4β1。在另一个实例中，间充质谱系前体或干细胞表达stro-1和α5β1。在另一个实例中，根据本公开的间充质谱系前体或干细胞表达stro-1和具有β3(cd61)链多肽的整联蛋白。在一个实例中，本公开包括富含stro-1+和β3+细胞的间充质谱系前体或干细胞的群体。在该实例中，富含β3+细胞的群体包含至少约8％或10％或15％的β3+细胞。在另一个实例中，间充质谱系前体或干细胞表达stro-1和αvβ3。在另一个实例中，根据本公开的间充质谱系前体或干细胞表达stro-1和具有β5(itgb5)链多肽的整联蛋白。在一个实例中，间充质谱系前体或干细胞表达stro-1和αvβ5。在另一个实例中，间充质谱系前体或干细胞表达stro-1和αvβ6。可使用本领域已知的各种方法来鉴定和/或富集表达上述整联蛋白的间充质谱系前体或干细胞。在一个实例中，荧光激活细胞分选(facs)可被采用来使用商购可得的抗体(例如，thermofisher；pharmingen；abcam)鉴定和选择表达所需整联蛋白多肽链或其组合的细胞。在一个实例中，间充质谱系前体或干细胞表达stro-1以及柯萨奇病毒和腺病毒受体。在另一个实例中，间充质谱系前体或干细胞表达stro-1、柯萨奇病毒和腺病毒受体以及上述整联蛋白中的一种或多种。在另一个实例中，间充质谱系前体或干细胞表达stro-1、柯萨奇病毒和腺病毒受体、αvβ3以及αvβ5。在一个实例中，遗传修饰间充质谱系前体或干细胞以在其细胞表面表达上述整联蛋白或柯萨奇病毒和腺病毒受体中的一种或多种。在一个实例中，间充质谱系前体或干细胞表达stro-1和嵌合抗原受体(car)。在一个实例中，间充质谱系前体或干细胞表达stro-1、car、αvβ3和αvβ5。在一个实例中，表达car的间充质谱系前体或干细胞可以触发t细胞介导的免疫反应。在另一个实例中，car充当将间充质谱系前体或干细胞附着到癌细胞的工具。在另一个实例中，car充当触发间充质谱系前体或干细胞至癌细胞的增强粘附的工具。在一个实例中，car由细胞外抗原结合结构域、跨膜结构域和细胞内结构域组成。在一个实例中，所述抗原结合结构域对一种或多种肿瘤抗原具有亲和力。示例性的肿瘤抗原包括her2、clpp、707-ap、afp、art-4、bage、mage、gage、sage、b-连环蛋白/m、bcr-abl、camel、cap-1、cea、casp-8、cdk/4、cdc-27、cyp-b、dam-8、dam-10、elv-m2、etv6、g250、gp100、hage、her-2/neu、epv-e6、lage、htert、survivin、ice、mart-1、酪氨酸酶、muc-1、mc1-r、tel/aml和wt-1。示例性的细胞内结构域包括cd3-ζ、cd28和4-ibb。在一些实例中，car可包含cd3-ζ、cd28、4-1bb、tlr-4的组合。示例性的跨膜结构域可源自(即，至少包含以下的一个或多个跨膜区域)t细胞受体的α、β或ζ链、cd28、cd3ε、cd45、cd4、cd5、cds、cd9、cd16、cd22、cd33、cd37、cd64、cd80、cd86、cd134、cd137、35cd154。在另一个实例中，跨膜结构域可以是合成的，在这种情况下，其将主要包含疏水残基，诸如亮氨酸和缬氨酸。间充质谱系前体或干细胞可从宿主组织(诸如上面提到的那些组织)中分离出来，并通过免疫选择来富集。例如，可用针对stro-1或tnap的抗体进一步处理受试者的骨髓吸出物，以使得能够选择间充质谱系前体或干细胞。在一个实例中，间充质谱系前体或干细胞可通过使用simmons&torok-storb、1991中描述的stro-1抗体来富集。stro-1+细胞是在骨髓、血液、牙髓细胞、脂肪组织、皮肤、脾、胰腺、脑、肾、肝、心、视网膜、脑、毛囊、肠、肺、淋巴结、胸腺、骨、韧带、腱、骨骼肌、真皮和骨膜中发现的细胞；并且能够分化成生殖系，诸如中胚层和/或内胚层和/或外胚层。因此，stro-1+细胞能够分化成大量细胞类型，包括但不限于脂肪、骨、软骨、弹性、肌肉和纤维结缔组织。这些细胞进入的具体的谱系定向(lineage-commitment)和分化途径取决于来自机械影响和/或内源性生物活性因子(诸如生长因子、细胞因子和/或宿主组织建立的局部微环境条件)的各种影响。如本文中所用，术语“富集的”描述了其中当与未处理的细胞群体(例如，在其天然环境中的细胞)相比时，一种特定细胞类型的比例或多种特定细胞类型的比例增加的细胞群体。在一个实例中，富含stro-1+细胞的群体包含至少约0.1％或0.5％或1％或2％或5％或10％或15％或20％或25％或30％或50％或75％的stro-1+细胞。在这方面，术语“富含stro-1+细胞的细胞群”将被理解为对术语“包含x％stro-1+细胞的细胞群”的明确支持，其中x％是本文所述的百分比。在一些实例中，stro-1+细胞可以形成克隆形成集落，例如，cfu-f(成纤维细胞)或其亚组(例如，50％或60％或70％或70％或90％或95％)可具有这种活性。在一个实施例中，从包含呈可选择的形式的stro-1+细胞的细胞制剂中富集细胞群。在这方面，术语“可选择的形式”将被理解为意指细胞表达允许选择stro-1+细胞的标志物(例如，细胞表面标志物)。标志物可以是stro-1，但不必是此。例如，如本文所述和/或举例说明的，表达stro-2和/或stro-3(tnap)和/或stro-4和/或vcam-1和/或cd146和/或3g5的细胞(例如，mpc)也表达stro-1(并且可以是stro-1bright)。因此，细胞是stro-1+的指示并不意味着细胞是通过stro-1表达选择的。在一个实例中，至少基于stro-3表达来选择细胞，例如，它们是stro-3+(tnap+)。提及细胞或其群体的选择不一定需要从特定的组织来源进行选择。如本文中所述，stro-1+细胞可从多种来源中选择、分离或富集。也就是说，在一些实施例中，这些术语支持从包含stro-1+细胞的任何组织或血管化组织或包含周细胞(例如，stro-1+或3g5+周细胞)的组织或本文所述的任何一种或多种组织中进行选择。在一个实施例中，本发明的间充质谱系前体或干细胞表达一种或多种标志物，所述标志物单独或共同选自nap+、vcam-1+、thy-1+、stro-2+、stro-4+(hsp-90β)、cd45+、cd146+、3g5+。“单独地”意指本公开包含单独列举的标志物或标志物组，并且尽管单独的标志物或标志物组在本文中可能没有单独列出，但所附权利要求可以单独地并且彼此分开地定义这样的标志物或标志物组。“共同地”意指本公开包含所述标志物或标志物组的任意数量或组合，并且尽管标志物或标志物组的此类数量或组合在本文中可能没有具体列出，但所附权利要求可以与标志物或标志物组的任意其他组合分别地和分开地定义这种组合或子组合。根据标志物在细胞表面存在的程度，对于给定标志物被称为“阳性”的细胞可以表达低(低或暗或暗淡)、中(中值)或高(亮、明亮)水平的该标志物，其中所述术语涉及荧光强度或细胞分选过程或细胞的流式细胞术分析中使用的其他标志物。将在于被分选或分析的特定细胞群上使用的标志物的上下文中理解低(低或暗或暗淡)、中(中值)或高(亮、明亮)的区别。对于给定标志物被称为“阴性”的细胞不一定完全不存在于该细胞中。该术语意指该标志物由该细胞以相对非常低的水平表达，并且当被可检测地标记时产生非常低的信号，或不能以高于背景水平(例如，使用同种型对照抗体检测的水平)检测到。如本文中所用，术语“亮”或明亮或bri是指细胞表面上当被可检测地标记时产生相对高的信号的标志物。尽管不希望受到理论的限制，但有人提出“亮”细胞比样品中的其他细胞表达更多的靶标志物蛋白(例如，被stro-1抗体识别的抗原)。例如，当用缀合有fitc的stro-1抗体标记时，如通过荧光激活细胞分选(facs)分析所测定的，与非亮细胞(stro-1lo/暗/暗淡/中等/中位)相比，stro-1bri细胞产生更大的荧光信号。在一个实例中，从骨髓中分离出间充质谱系前体或干细胞，并通过stro-1+细胞的选择来进行富集。在该实例中，“亮”细胞构成包含在起始样品中的最亮标记的骨髓单核细胞的至少约0.1％。在其它实施例中，“亮”细胞构成包含在起始样品中的最亮标记的骨髓单核细胞的至少约0.1％，至少约0.5％，至少约1％，至少约1.5％，或至少约2％。在一个实例中，stro-1亮细胞的stro-1表面表达比“背景”(即stro-1-的细胞)高2个对数量级。相比之下，stro-1lo/暗/暗淡和/或stro-1中/中值的细胞的stro-1表面表达高少于2个对数量级，通常约1个对数量级或低于“背景”。在一个实例中，stro-1+细胞是stro-1明亮。在一个实例中，相对于stro-1lo/暗/暗淡或stro-1中/中值的细胞优先富集stro-1明亮细胞。在一个实例中，stro-1亮细胞另外地是tnap+、vcam-1+、thy-1+、stro-2+、stro-4+(hsp-90β)和/或cd146+中的一种或多种。例如，针对一种或多种前述标志物选择细胞和/或所述细胞显示表达前述标志物中的一种或多种。在这点上，显示表达标志物的细胞不需要特别测试，而是可测试和随后使用先前富集或分离的细胞，可合理地假设分离或富集的细胞也表达相同的标志物。在一个实例中，stro-1亮细胞是血管周围的间充质谱系前体或干细胞，如在wo2004/85630中所定义的，其特征在于血管周围标志物3g5的存在。如本文中所用，术语“tnap”旨在包括组织非特异性碱性磷酸酶的所有同种型。例如，该术语包括肝同种型(lap)、骨同种型(bap)和肾同种型(kap)。在一个实例中，tnap是bap。在一个实例中，tnap指的是能够结合由杂交瘤细胞系产生的stro-3抗体的分子，所述杂交瘤细胞系根据布达佩斯条约的规定于2005年12月19日保藏在atcc，保藏号为pta-7282。此外，在一个实例中，stro-1+细胞能够产生克隆形成cfu-f。在一个实例中，相当大比例的stro-1+细胞能够分化成至少两种不同的生殖系。细胞可定向的谱系的非限制性实例包括骨前体细胞；肝细胞祖细胞，其对于胆管上皮细胞和肝细胞是多能的；神经限制性细胞，其可产生神经胶质细胞前体，该前体发展为少突胶质细胞和星形胶质细胞；发展成神经元的神经元前体；心肌和心肌细胞的前体，分泌葡萄糖响应性胰岛素的胰腺β细胞系。其他谱系包括但不限于成牙本质细胞、牙本质产生细胞和软骨细胞，以及下列细胞的前体细胞:视网膜色素上皮细胞、成纤维细胞、皮肤细胞诸如角质形成细胞、树突细胞、毛囊细胞、肾小管上皮细胞、平滑肌和骨骼肌细胞、睾丸祖细胞、血管内皮细胞、腱、韧带、软骨、脂肪细胞、成纤维细胞、骨髓基质、心肌、平滑肌、骨骼肌、周细胞、血管、上皮、神经胶质、神经元、星形胶质细胞和少突胶质细胞。在一个实例中，间充质谱系前体或干细胞是msc。msc可以是均质的组合物，或者可以是富msc的混合细胞群。通过培养粘附的骨髓或骨膜细胞可以获得均质的msc组合物，并且可以通过用独特的单克隆抗体鉴定的特定细胞表面标志物来鉴定msc。例如，美国专利5486359中描述了获得富含msc的细胞群的方法。通过常规塑料粘附分离制备的msc依赖于cfu-f的非特异性塑料粘附特性。通过基于stro-1的免疫选择从骨髓中分离的间充质谱系前体或干细胞在其它塑粒粘附骨髓群体不存在的情况下，从骨髓群体中特异性分离克隆形成间充质前体。msc的替代来源包括但不限于血液、皮肤、脐带血、肌肉、脂肪、骨骼和软骨膜。在一个实例中，间充质谱系前体或干细胞来源于多能细胞，诸如诱导的多能干细胞(ips细胞)。在一个实施方案中，多能细胞是人多能细胞。用于从多能细胞产生间充质谱系前体或干细胞的合适方法描述于例如us7,615,374和us2014273211、barberi等人；plosmedicine，第2卷(6):0554-0559(2005)、以及vodyanik等人cellstemcell，第7卷：718-728(2010)中。在另一个实例中，使间充质谱系前体或干细胞永生化。用于产生永生化间充质谱系前体或干细胞的示例性方法描述于例如obinatam.、cell，第2卷:235-244(1997)、us9,453,203、akimov等人stemcells，第23卷：1423-1433以及kabara等人laboratoryinvestigation、第94卷：1340-1354(2014)中。在本公开的一个优选实施方案中，间充质谱系前体或干细胞获自源自从健康志愿者的骨髓富集的间充质谱系前体或干细胞的主细胞库。来源于这种来源的间充质谱系前体或干细胞的使用对于没有合适的家庭成员可用作间充质谱系前体或干细胞供体，或者需要立即治疗并且在产生间充质谱系前体或干细胞的时间内处于复发、疾病相关衰退或死亡的高风险中的受试者来说是特别有利的。在另一个实例中，间充质谱系前体细胞表达cx43。在另一个实例中，间充质谱系前体细胞表达cx40。在另一个实例中，间充质谱系前体细胞表达cx43和cx40。在另一个实例中，间充质谱系前体细胞表达cx45、cx32和/或cx37。在一个实例中，间充质谱系前体细胞未被修饰而表达特定的连接蛋白。在另一个实例中，间充质谱系前体细胞表达stro-1和cd46。在该实例中，间充质谱系前体细胞也可以表达一种或多种上述整联蛋白。分离或富集的间充质谱系前体细胞可以通过培养在体外扩增。可将分离或富集的间充质谱系前体细胞冷冻保存、解冻，随后通过培养在体外扩增。在一个实例中，将分离或富集的间充质谱系前体细胞以50,000个活细胞/cm2接种在培养基(无血清或补充血清的)(例如补充有5％胎牛血清(fbs)和谷氨酰胺的α-最低基本培养基(αmem))中，并允许在37℃、20％o2下粘附于培养容器过夜。随后根据需要更换和/或改变培养基，并在37℃、5％o2下将细胞再培养68至72小时。如本领域技术人员所理解的，培养的间充质谱系前体细胞在表型上不同于体内细胞。例如，在一个实施方案中，它们表达一种或多种以下标志物：cd44、cd46、ng2、dc146和cd140b。培养的间充质谱系前体细胞在生物学上也不同于体内细胞，与体内基本上不处于细胞周期(静止)的细胞相比，具有更高的增殖速率。ang1和vegf水平在一个实例中，间充质谱系前体或干细胞以至少0.1μg/106个细胞的量表达ang1。然而，在其他实例中，间充质谱系前体或干细胞以至少0.2μg/106个细胞、0.3μg/106个细胞、0.4μg/106个细胞、0.5μg/106个细胞、0.6μg/106个细胞、0.7μg/106个细胞、0.8μg/106个细胞、0.9μg/106个细胞、1μg/106个细胞、1.1μg/106个细胞、1.2μg/106个细胞、1.3μg/106个细胞、1.4μg/106个细胞、1.5μg/106个细胞的量表达ang1。在另一个实例中，间充质谱系前体或干细胞以小于约0.05μg/106个细胞的量表达vegf。然而，在其他实例中，间充质谱系前体或干细胞以小于约0.05μg/106个细胞、0.04μg/106个细胞、0.03μg/106个细胞、0.02μg/106个细胞、0.01μg/106个细胞、0.009μg/106个细胞、0.008μg/106个细胞、0.007μg/106个细胞、0.006μg/106个细胞、0.005μg/106个细胞、0.004μg/106个细胞、0.003μg/106个细胞、0.002μg/106个细胞、0.001μg/106个细胞的量表达vegf。在间充质谱系前体或干细胞的组合物或培养物中表达的细胞ang1和/或vegf的量可通过本领域技术人员已知的方法来确定。此类方法包括但不限于定量测定，例如，诸如定量elisa测定。在该实例中，将来自间充质谱系前体或干细胞培养物的细胞裂解物加入到elisa板的孔中。该孔可涂覆有针对ang1或vegf的一抗，其可以是单克隆抗体或多克隆抗体。然后洗涤孔，然后与针对一抗的二抗接触，二抗可以是单克隆抗体或多克隆抗体。将二抗缀合于适当的酶，例如辣根过氧化物酶。然后可以孵育该孔，然后在孵育期后进行洗涤。然后将孔与缀合有二抗的酶的合适底物(诸如一种或多种色原)接触。可使用的色原包括但不限于过氧化氢和四甲基联苯胺。加入一种或多种底物后，将孔孵育一段适当的时间。孵育完成后，向孔中加入“终止”溶液，以终止酶与所述底物的反应。然后测量样品的光密度(od)。使样品的光密度与含有已知量的ang1或vegf的样品的光密度相关联，以便确定被测干细胞培养物表达的ang1或vegf的量。在另一方面，间充质谱系前体或干细胞以至少约2∶1的比率表达ang1:vegf。然而，在其他实例中，间充质谱系前体或干细胞以至少约10∶1、15∶1、20∶1、21∶1、22∶1、23∶1、24∶1、25∶1、26∶1、27∶1、28∶1、29∶1、30∶1、31∶1、32∶1、33∶1、34∶1、35∶1、50∶1的比率表达ang1:vegf。确定ang1:vegf表达比率的方法对本领域技术人员来说是显而易见的。例如，如上所述，可以通过如上所述的定量elisa对ang1和vegf的表达水平进行定量。在对ang1和vegf的水平进行定量后，基于ang1和vegf的定量水平的比率可表示为：(ang1的水平/vegf的水平)＝ang1:vegf比率。在一个实例中，未对本公开的间充质谱系前体或干细胞进行遗传修饰以按上述例示的水平或比率表达ang1和/或vegf。未通过用表达或编码ang1和/或vegf的核酸转染来对未被遗传修饰以表达ang1和/或vegf的细胞进行修饰。为了避免疑问，在本公开的说明书中，用编码ang1和/或vegf的核酸转染的间充质谱系前体或干细胞将被认为是被遗传修饰的。在本公开的说明书中，未被遗传修饰以表达ang1和/或vegf的细胞在某种程度上天然表达ang1和/或vegf，而没有编码ang1和/或vegf1的核酸转染。核酸本公开包括各种核酸的使用。术语“核酸”和“核酸分子”在整个公开中可以互换使用。示例性的核酸包括dna(例如，互补的dna(cdna)、基因组dna(gdna))、rna(例如，rna(mrna)、短发夹rna(shrna)、短抑制性rna(sirna)、核糖体rna(rrna)、trna、微小rna、dna或rna类似物(例如，包含碱基类似物、糖类似物和/或非天然主链等)、rna/dna杂交体和聚酰胺核酸(pna)，其全都可以是单链或双链形式。在一个实例中，所述核酸是分离的。如本文中所用，术语“分离的核酸”是指通过人干预从自然状态改变或取出的核酸。另一种示例性的核酸是寡核苷酸。如本文中所用，术语“寡核苷酸”意指短的dna或rna分子。寡核苷酸容易以序列特异性的方式与它们各自的互补寡核苷酸、dna或rna结合，形成双链体。在一个实例中，寡核苷酸可以是dna分子。在另一个实例中，寡核苷酸可以是rna分子。在各种实施例中，寡核苷酸的长度可以是约5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30个核苷酸或更长。在一个实例中，本公开的寡核苷酸是抑制性寡核苷酸。在一个实例中，术语“抑制性寡核苷酸”是指降低一种或多种蛋白质的产量、表达或生物活性的任何寡核苷酸。例如，抑制性寡核苷酸可干扰mrna在核糖体中翻译成蛋白质。在另一个实例中，抑制性寡核苷酸可以与编码一种或多种蛋白质的基因或mrna充分互补，以与靶基因或mrna结合(与其杂交)，从而降低靶蛋白的表达或生物活性。在另一个实例中，抑制性寡核苷酸抑制不编码蛋白质的细胞内核酸的生物活性。例如，抑制性寡核苷酸可以抑制非编码rna的生物活性。示例性的抑制性寡核苷酸包括分离的或合成的反义rna或dna、sirna或sidna、mirna、mirna模拟物、shrna或dna以及嵌合反义dna或rna。如本文中所用，术语“反义”意指与编码序列互补并因此能够与其结合的核苷酸序列，该编码序列可以是经历转录的dna双螺旋的链的序列，或者是信使rna分子的序列。反义dna是与双链dna中的与编码链互补的非编码链。反义链用作信使rna(mrna)合成的模板。术语“短发夹rna”或“shrna”是指具有双链区和环状区的rna结构。术语小干扰rna(sirna)，有时被称为短干扰rna或沉默rna，是一类双链rna分子，长度为20-25个碱基对。抑制或阻止翻译成特定蛋白质的sirna由带有术语sirna的蛋白质名称表示。因此，干扰kif11翻译的sirna被表述为“kif11sirna”。通常，在各种实施方案中，sirna是包含两条核苷酸链的双链核酸分子，每条链具有约19至约28个核苷酸(即约19、20、21、22、23、24、25、26、27或28个核苷酸)。本公开包含的示例性sirna包括kif11sirna、krassirna和plk1sirna。术语“微小rna”(缩写为“mirna”)是在植物、动物和一些病毒中发现的小的非编码的rna分子(含有约22个核苷酸)，其在rna沉默和基因表达的转录后调节发挥作用。前缀“mir”后跟破折号和数字，后者通常表示命名顺序。除一个或两个用额外的小写字母进行注释的核苷酸外，不同的mirnas具有几乎相同的序列。许多mirna在本领域中是已知的(mirbasev.21命名法；kozomara等人2013；griffiths-jones，s.2004)。示例性人mirna包括hsa-let-7d-3p、hsa-mir-101-5p、hsa-mir-106b-3p、hsa-mir-1179、hsa-mir-125a-5p、hsa-mir-141-3p、hsa-mir-148a-3p、hsa-mir-16-5p、hsa-mir-192-5p、hsa-mir-195-5p、hsa-mir-19b-3p、hsa-mir-20a-5p、hsa-mir-200b-3p、hsa-mir-217、hsa-mir-223-3p、hsa-mir-371a-3p、hsa-mir-487b、hsa-mir-515-3p、hsa-mir-605、hsa-let-7a-3p、hsa-let-7a-5p、hsa-let-7b-3p、hsa-let-7b-5p、hsa-let-7c、hsa-let-7d-5p、hsa-let-7e-3p、hsa-let-7e-5p、hsa-let-7f-l-3p、hsa-let-7f-2-3p、hsa-let-7f-5p、hsa-let-7g-3p、hsa-let-7g-5p、hsa-let-7i-3p、hsa-let-7i-5p、hsa-mir-1、hsa-mir-100-3p、hsa-mir-100-5p、hsa-mir-101-3p、hsa-mir-103a-2-5p、hsa-mir-103a-3p、hsa-mir-103b、hsa-mir-105-5p、hsa-mir-106a-3p、hsa-mir-106a-5p、hsa-mir-106b-5p、hsa-mir-107、hsa-mir-10a-3p、hsa-mir-10a-5p、hsa-mir-10b-3p、hsa-mir-10b-5p、hsa-mir-1178-3p、hsa-mir-1180、hsa-mir-1181、hsa-mir-1182、hsa-mir-1183、hsa-mir-1184、hsa-mir-1185-5p、hsa-mir-1204、hsa-mir-1207、hsa-mir-1208、hsa-mir-122-3p、hsa-mir-122-5p、hsa-mir-1224、hsa-mir-1226、hsa-mir-1227-3p、hsa-mir-1228-5p、hsa-mir-1229-3p、hsa-mir-1231、hsa-mir-124-3p、hsa-mir-1245a、hsa-mir-1246、hsa-mir-1249、hsa-mir-125a-3p、hsa-mir-125b-l-3p、hsa-mir-125b-2-3p、hsa-mir-125b-5p、hsa-mir-1251、hsa-mir-1252、hsa-mir-1253、hsa-mir-1255a、hsa-mir-1255b-5p、hsa-mir-126-3p、hsa-mir-1260a、hsa-mir-1260b、hsa-mir-1262、hsa-mir-1263、hsa-mir-1265、hsa-mir-1268a、hsa-mir-127-3p、hsa-mir-1270、hsa-mir-1272、hsa-mir-1273a、hsa-mir-1275、hsa-mir-1276、hsa-mir-1277-3p、hsa-mir-1278、hsa-mir-128、hsa-mir-1285-3p、hsa-mir-1286、hsa-mir-1287、hsa-mir-129-2-3p、hsa-mir-1292-5p、hsa-mir-1293、hsa-mir-1301、hsa-mir-1302、hsa-mir-1303、hsa-mir-1305、hsa-mir-130a-3p、hsa-mir-130a-5p、hsa-mir-130b-3p、hsa-mir-130b-5p、hsa-mir-132-3p、hsa-mir-132-5p、hsa-mir-1321、hsa-mir-1323、hsa-mir-1324、hsa-mir-133a、hsa-mir-133b、hsa-mir-134、hsa-mir-135a-3p、hsa-mir-135a-5p、hsa-mir-135b-3p、hsa-mir-135b-5p、hsa-mir-136-3p、hsa-mir-136-5p、hsa-mir-137、hsa-mir-138-l-3p、hsa-mir-138-2-3p、hsa-mir-138-5p、hsa-mir-139-3p、hsa-mir-139-5p、hsa-mir-140-3p、hsa-mir-140-5p、hsa-mir-142-3p、hsa-mir-142-5p、hsa-mir-143-3p、hsa-mir-143-5p、hsa-mir-144-3p、hsa-mir-144-5p、hsa-mir-145-3p、hsa-mir-145-5p、hsa-mir-1468、hsa-mir-146a-5p、hsa-mir-146b-3p、hsa-mir-146b-5p、hsa-mir-147a、hsa-mir-147b、hsa-mir-148a-5p、hsa-mir-148b-3p、hsa-mir-148b-5p、hsa-mir-149-3p、hsa-mir-149-5p、hsa-mir-150-3p、hsa-mir-150-5p、hsa-mir-151a-3p、hsa-mir-151a-5p、hsa-mir-152、hsa-mir-153、hsa-mir-1538、hsa-mir-1539、hsa-mir-154-3p、hsa-mir-154-5p、hsa-mir-155-5p、hsa-mir-15a-3p、hsa-mir-15a-5p、hsa-mir-15b-3p、hsa-mir-15b-5p、hsa-mir-16-l-3p、hsa-mir-16-2-3p、hsa-mir-17-3p、hsa-mir-17-5p、hsa-mir-181a-2-3p、hsa-mir-181a-3p、hsa-mir-181a-5p、hsa-mir-181b-5p、hsa-mir-181c-3p、hsa-mir-181c-5p、hsa-mir-181d、hsa-mir-182-5p、hsa-mir-1827、hsa-mir-183-3p、hsa-mir-183-5p、hsa-mir-184、hsa-mir-185-3p、hsa-mir-185-5p、hsa-mir-186-3p、hsa-mir-186-5p、hsa-mir-187-3p、hsa-mir-187-5p、hsa-mir-188-5p、hsa-mir-18a-3p、hsa-mir-18a-5p、hsa-mir-18b-3p、hsa-mir-18b-5p、hsa-mir-190a、hsa-mir-190b、hsa-mir-191-3p、hsa-mir-191-5p、hsa-mir-1915-3p、hsa-mir-192-3p、hsa-mir-193a-3p、hsa-mir-193a-5p、hsa-mir-193b-3p、hsa-mir-193b-5p、hsa-mir-194-5p、hsa-mir-195-3p、hsa-mir-196a-3p、hsa-mir-196a-5p、hsa-mir-196b-5p、hsa-mir-197-3p、hsa-mir-198、hsa-mir-199a-3p、hsa-mir-199a-5p、hsa-mir-199b-3p、hsa-mir-199b-5p、hsa-mir-19a-3p、hsa-mir-19a-5p、hsa-mir-1909-3p、hsa-mir-191l-3p、hsa-mir-200a-3p、hsa-mir-200a-5p、hsa-mir-200b-5p、hsa-mir-200c-3p、hsa-mir-200c-5p、hsa-mir-202-3p、hsa-mir-202-5p、hsa-mir-203a、hsa-mir-203b-5p、hsa-mir-204-5p、hsa-mir-205-5p、hsa-mir-206、hsa-mir-208b、hsa-mir-20a-3p、hsa-mir-20b-3p、hsa-mir-20b-5p、hsa-mir-21-3p、hsa-mir-21-5p、hsa-mir-210、hsa-mir-21l-5p、hsa-mir-2110、hsa-mir-212-3p、hsa-mir-214-3p、hsa-mir-214-5p、hsa-mir-215、hsa-mir-216a-5p、hsa-mir-218-l-3p、hsa-mir-218-5p、hsa-mir-219-1-3p、hsa-mir-219-5p、hsa-mir-22-3p、hsa-mir-22-5p、hsa-mir-221-3p、hsa-mir-221-5p、hsa-mir-222-3p、hsa-mir-222-5p、hsa-mir-223-5p、hsa-mir-224-3p、hsa-mir-224-5p、hsa-mir-2355-3p、hsa-mir-23a-3p、hsa-mir-23a-5p、hsa-mir-23b-3p、hsa-mir-23b-5p、hsa-mir-24-l-5p、hsa-mir-24-2-5p、hsa-mir-24-3p、hsa-mir-25-3p、hsa-mir-25-5p、hsa-mir-26a-2-3p、hsa-mir-26a-5p、hsa-mir-26b-3p、hsa-mir-26b-5p、hsa-mir-27a-3p、hsa-mir-27a-5p、hsa-mir-27b-3p、hsa-mir-27b-5p、hsa-mir-28-3p、hsa-mir-28-5p、hsa-mir-296-3p、hsa-mir-296-5p、hsa-mir-297、hsa-mir-298、hsa-mir-299-3p、hsa-mir-299-5p、hsa-mir-29a-3p、hsa-mir-29a-5p、hsa-mir-29b-l-5p、hsa-mir-29b-2-5p、hsa-mir-29b-3p、hsa-mir-29c-3p、hsa-mir-29c-5p、hsa-mir-2909、hsa-mir-301a-3p、hsa-mir-301b、hsa-mir-302a-5p、hsa-mir-302b-5p、hsa-mir-302c-5p、hsa-mir-302d-3p、hsa-mir-302d-5p、hsa-mir-302f、hsa-mir-3064-5p、hsa-mir-3065-3p、hsa-mir-3065-5p、hsa-mir-3074-3p、hsa-mir-3074-5p、hsa-mir-30a-3p、hsa-mir-30a-5p、hsa-mir-30b-3p、hsa-mir-30b-5p、hsa-mir-30c-l-3p、hsa-mir-30c-2-3p、hsa-mir-30c-5p、hsa-mir-30d-3p、hsa-mir-30d-5p、hsa-mir-30e-3p、hsa-mir-30e-5p、hsa-mir-31-3p、hsa-mir-31-5p、hsa-mir-3120-3p、hsa-mir-3120-5p、hsa-mir-3184-5p、hsa-mir-32-3p、hsa-mir-32-5p、hsa-mir-320a、hsa-mir-320b、hsa-mir-320c、hsa-mir-323a-3p、hsa-mir-323b-5p、hsa-mir-324-3p、hsa-mir-324-5p、hsa-mir-325、hsa-mir-326、hsa-mir-328、hsa-mir-329、hsa-mir-330-3p、hsa-mir-330-5p、hsa-mir-331-3p、hsa-mir-331-5p、hsa-mir-335-3p、hsa-mir-335-5p、hsa-mir-337-3p、hsa-mir-337-5p、hsa-mir-338-3p、hsa-mir-338-5p、hsa-mir-339-3p、hsa-mir-339-5p、hsa-mir-33a-5p、hsa-mir-33b-3p、hsa-mir-33b-5p、hsa-mir-340-3p、hsa-mir-340-5p、hsa-mir-342-3p、hsa-mir-342-5p、hsa-mir-345-5p、hsa-mir-346、hsa-mir-34a-3p、hsa-mir-34a-5p、hsa-mir-34b-3p、hsa-mir-34b-5p、hsa-mir-34c-3p、hsa-mir-34c-5p、hsa-mir-3591-3p、hsa-mir-361-3p、hsa-mir-361-5p、hsa-mir-3613-5p、hsa-mir-3615、hsa-mir-3619、hsa-mir-362-3p、hsa-mir-362-5p、hsa-mir-363-3p、hsa-mir-363-5p、hsa-mir-365a-3p、hsa-mir-365a-5p、hsa-mir-3653、hsa-mir-3656、hsa-mir-367-3p、hsa-mir-367-5p、hsa-mir-3676-3p、hsa-mir-369-3p、hsa-mir-369-5p、hsa-mir-370、hsa-mir-372、hsa-mir-373-3p、hsa-mir-373-5p、hsa-mir-374a-3p、hsa-mir-374a-5p、hsa-mir-374b-3p、hsa-mir-374b-5p、hsa-mir-375、hsa-mir-376a-2-5p、hsa-mir-376a-3p、hsa-mir-376a-5p、hsa-mir-376b-3p、hsa-mir-376c-3p、hsa-mir-377-3p、hsa-mir-377-5p、hsa-mir-378a-3p、hsa-mir-378a-5p、hsa-mir-378c、hsa-mir-378d、hsa-mir-379-3p、hsa-mir-379-5p、hsa-mir-380-3p、hsa-mir-380-5p、hsa-mir-381-3p、hsa-mir-382-3p、hsa-mir-382-5p、hsa-mir-383、hsa-mir-384、hsa-mir-3912、hsa-mir-3928、hsa-mir-409-3p、hsa-mir-409-5p、hsa-mir-410、hsa-mir-41l-3p、hsa-mir-41l-5p、hsa-mir-412、hsa-mir-421、hsa-mir-422a、hsa-mir-423-3p、hsa-mir-423-5p、hsa-mir-424-3p、hsa-mir-424-5p、hsa-mir-425-3p、hsa-mir-425-5p、hsa-mir-429、hsa-mir-4291、hsa-mir-431-5p、hsa-mir-432-5p、hsa-mir-433、hsa-mir-4421、hsa-mir-449a、hsa-mir-450a-5p、hsa-mir-450b-3p、hsa-mir-450b-5p、hsa-mir-4505、hsa-mir-4510、hsa-mir-4516、hsa-mir-451a、hsa-mir-452-3p、hsa-mir-452-5p、hsa-mir-4533、hsa-mir-4539、hsa-mir-454-3p、hsa-mir-454-5p、hsa-mir-455-3p、hsa-mir-455-5p、hsa-mir-4634、hsa-mir-4732-3p、hsa-mir-4732-5p、hsa-mir-4747-5p、hsa-mir-4792、hsa-mir-483-3p、hsa-mir-483-5p、hsa-mir-484、hsa-mir-485-5p、hsa-mir-486-3p、hsa-mir-486-5p、hsa-mir-489、hsa-mir-490、hsa-mir-491-3p、hsa-mir-491-5p、hsa-mir-492、hsa-mir-493-3p、hsa-mir-493-5p、hsa-mir-494、hsa-mir-495-3p、hsa-mir-496、hsa-mir-497-3p、hsa-mir-497-5p、hsa-mir-498、hsa-mir-499a-5p、hsa-mir-500a-3p、hsa-mir-501-3p、hsa-mir-501-5p、hsa-mir-502-3p、hsa-mir-502-5p、hsa-mir-503-5p、hsa-mir-504、hsa-mir-505-3p、hsa-mir-505-5p、hsa-mir-506-3p、hsa-mir-508-3p、hsa-mir-508-5p、hsa-mir-509-3p、hsa-mir-511、hsa-mir-512-5p、hsa-mir-513a-3p、hsa-mir-513a-5p、hsa-mir-513b、hsa-mir-514a-3p、hsa-mir-514a-5p、hsa-mir-515-5p、hsa-mir-516b-3p、hsa-mir-516b-5p、hsa-mir-517a-3p、hsa-mir-518a-3p、hsa-mir-518b、hsa-mir-518e-3p、hsa-mir-518e-5p、hsa-mir-518f-3p、hsa-mir-519a-5p、hsa-mir-519b-5p、hsa-mir-519c-3p、hsa-mir-519c-5p、hsa-mir-519d、hsa-mir-519e-5p、hsa-mir-520c-3p、hsa-mir-520e、hsa-mir-520f、hsa-mir-520g、hsa-mir-520h、hsa-mir-521、hsa-mir-522-5p、hsa-mir-523-5p、hsa-mir-525-3p、hsa-mir-532-3p、hsa-mir-532-5p、hsa-mir-539-5p、hsa-mir-541、hsa-mir-542-3p、hsa-mir-542-5p、hsa-mir-543、hsa-mir-545-3p、hsa-mir-545-5p、hsa-mir-548a-3p、hsa-mir-548d-3p、hsa-mir-548e、hsa-mir-548i、hsa-mir-548m、hsa-mir-549、hsa-mir-550a-3p、hsa-mir-550a-5p、hsa-mir-551b-3p、hsa-mir-551b-5p、hsa-mir-552、hsa-mir-553、hsa-mir-554、hsa-mir-557、hsa-mir-563、hsa-mir-564、hsa-mir-567、hsa-mir-569、hsa-mir-570-3p、hsa-mir-571、hsa-mir-572、hsa-mir-574-3p、hsa-mir-574-5p、hsa-mir-575、hsa-mir-576-3p、hsa-mir-576-5p、hsa-mir-577、hsa-mir-578、hsa-mir-580、hsa-mir-582-3p、hsa-mir-582-5p、hsa-mir-583、hsa-mir-584-5p、hsa-mir-585、hsa-mir-586、hsa-mir-589-3p、hsa-mir-589-5p、hsa-mir-590-3p、hsa-mir-590-5p、hsa-mir-593-3p、hsa-mir-593-5p、hsa-mir-595、hsa-mir-598、hsa-mir-601、hsa-mir-602、hsa-mir-603、hsa-mir-606、hsa-mir-608、hsa-mir-609、hsa-mir-611、hsa-mir-612、hsa-mir-613、hsa-mir-615-3p、hsa-mir-615-5p、hsa-mir-616-5p、hsa-mir-618、hsa-mir-619、hsa-mir-620、hsa-mir-623、hsa-mir-625-5p、hsa-mir-626、hsa-mir-627、hsa-mir-628-3p、hsa-mir-628-5p、hsa-mir-629-3p、hsa-mir-629-5p、hsa-mir-630、hsa-mir-631、hsa-mir-634、hsa-mir-635、hsa-mir-636、hsa-mir-638、hsa-mir-639、hsa-mir-641、hsa-mir-642a-3p、hsa-mir-642a-5p、hsa-mir-643、hsa-mir-645、hsa-mir-646、hsa-mir-647、hsa-mir-649、hsa-mir-650、hsa-mir-651、hsa-mir-652-3p、hsa-mir-653、hsa-mir-654-3p、hsa-mir-655、hsa-mir-656、hsa-mir-657、hsa-mir-658、hsa-mir-659-3p、hsa-mir-660-5p、hsa-mir-663a、hsa-mir-663b、hsa-mir-664a-3p、hsa-mir-664a-5p、hsa-mir-668、hsa-mir-671-5p、hsa-mir-675-3p、hsa-mir-675-5p、hsa-mir-7-l-3p、hsa-mir-7-2-3p、hsa-mir-7-5p、hsa-mir-708-3p、hsa-mir-708-5p、hsa-mir-718、hsa-mir-744-3p、hsa-mir-744-5p、hsa-mir-761、hsa-mir-765、hsa-mir-766、hsa-mir-767-3p、hsa-mir-769-3p、hsa-mir-769-5p、hsa-mir-770-5p、hsa-mir-874、hsa-mir-875、hsa-mir-876、hsa-mir-877-3p、hsa-mir-877-5p、hsa-mir-885-3p、hsa-mir-887、hsa-mir-888-3p、hsa-mir-889、hsa-mir-890、hsa-mir-891a、hsa-mir-891b、hsa-mir-9-3p、hsa-mir-9-5p、hsa-mir-92a-3p、hsa-mir-92b-3p、hsa-mir-92b-5p、hsa-mir-921、hsa-mir-922、hsa-mir-93-3p、hsa-mir-93-5p、hsa-mir-935、hsa-mir-940、hsa-mir-941、hsa-mir-942、hsa-mir-95、hsa-mir-96-3p、hsa-mir-96-5p、hsa-mir-98-5p、hsa-mir-99a-3p、hsa-mir-99a-5p、hsa-mir-99b-3p和/或hsa-mir-99b-5p。这些mirna的序列在本领域中是公知的，并且可以在例如万维网站mirbasedotorg上找到。上述列表中合适的示例性mirna包括hsa-mir-155、hsa-mir-155-inh、hsa-mir-181-b1、hsa-mir-15a、hsa-mir-16-1、hsa-mir-21、hsa-mir-34a、hsa-mir-221和hsa-mir-29a。在一个实例中，“抑制性寡核苷酸”模拟一种或多种mirna的活性。如本文中所用，术语“mirna模拟物”是指设计成在引入细胞时模拟内源性成熟mirna分子的小的双链rna分子。mirna模拟物可以从不同供应商诸如sigmaaldrich和thermofisherscientific获得。在另一个实例中，“抑制性寡核苷酸”抑制一种或多种mirna的活性。各种mirna种类适合于此目的。实例包括，但不限于，拮抗mir(antagomir)、干扰性rna、核酶、mirna海绵(mirnasponge)和mir-掩模(mir-mask)。术语“拮抗mir”在本公开的说明书中用于指化学修饰的反义寡核苷酸，其与靶mirna结合并通过阻止所述mirna与其同源基因靶标的结合来抑制mirna功能。antagomirs可包括本领域已知的任何碱基修饰。在一个实例中，上文提到的mirna种类的长度约为10至50个核苷酸。例如，antagomirs可以具有长度为10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49或50个核苷酸的反义部分。在一个实例中，mirna种类是嵌合寡核苷酸，其包含两个或更多个化学上不同的区域，每个区域由至少一个核苷酸组成。这些寡核苷酸通常包含至少一个修饰核苷酸区域(其赋予一种或多种有益特性(例如，增强的核酸酶抗性、增加的至细胞中的摄取、增强的对靶标的结合亲和力))和作为能够切割rna:dna或rna:rna杂交体的酶的底物的区域。在一个实例中，本公开包含的核酸是合成的。术语“合成核酸”是指该核酸不具有天然存在的核酸的化学结构或序列。合成核苷酸包括工程化核酸，诸如dna或rna分子。然而，预期向细胞施用的合成核酸随后可以在细胞中被修饰或改变，使得其结构或序列与非合成或天然存在的核酸(诸如成熟的mirna序列)相同。例如，合成核酸的序列可以不同于前体mirna的序列，但该序列一旦在细胞中就可能会改变，以与内源性的加工mirna相同。因此，可以理解，术语“合成mirna”是指在细胞中或生理条件下作为天然存在的mirna发挥功能的“合成核酸”。在另一个实例中，核酸结构也可以被修饰成在2’氧与4’碳之间具有亚甲基桥以将核糖锁入核酸的a型构象中的3’-endo(north)构象中的被锁核酸(lockednucleicacid，lna)(lennox等人，2011；bader等人，2011)。在mirna的上下文中，这种修饰可以显著增加分子的靶特异性和杂交性质。用于本文公开的方法中的核酸可以根据需要使用常规方法来设计。例如，在抑制性寡核苷酸的情况下，长度为5、6、7、8、9、10或更多个核苷酸、包含种子序列中或与其紧邻的至少五(5)个连续核苷酸的序列段的靶区段被认为适合于靶向基因。示例性的靶区段可包括至少包含从种子序列之一的5’末端开始的所述5个连续核苷酸的序列(其余的核苷酸是同一rna的连续延伸段，其直接从种子序列的5’末端上游开始，并持续至所述核酸包含约5至约30个核苷酸)。在另一个实例中，靶区段由rna序列代表，所述rna序列从种子序列之一的3’-末端开始至少包含所述5个连续核苷酸(其余的核苷酸是同一rna的连续延伸段，其直接从靶区段的3’-末端下游开始，并持续至所述核酸包含约5至约30个核苷酸)。术语“种子序列”在本公开的说明书中用于指在mirna5-末端的前8个核苷酸内的6-8个核苷酸(nt)长的子串(即种子序列)，其为靶特异性的重要决定子。一旦鉴定了一个或多个靶区域、区段或位点，就可选择与靶标充分互补，即足够好地杂交并具有足够的特异性(即，基本上不与其它非靶核酸序列结合)的抑制性核酸化合物，以产生期望的效果。修饰可修饰本公开的间充质谱系前体或干细胞以引入上述核酸。术语“引入”在本公开的说明书中用于指将核酸引入到根据本公开的间充质谱系前体或干细胞的细胞核或细胞质中。当通过任何合适的人工操作手段将核酸转移到细胞中时，或者当细胞是遗传了核酸的最初改变细胞的后代时，间充质谱系前体或干细胞被认为是“修饰的”。在本公开的说明书中，诸如“遗传改变的”、“转染的”、“转导的”或“遗传转化的”等术语也可以互换使用，以指经修饰的间充质谱系前体或干细胞。可以稳定或短暂的方式修饰间充质谱系前体或干细胞。在一个实例中，可修饰本公开的间充质谱系前体或干细胞以引入至少1个、至少2个、至少3个、至少4个、至少5个、至少6个、至少7个、至少8个、至少9个、至少10个、至少15个、至少20个核酸，诸如sirna或mirna。例如，可修饰本公开的间充质谱系前体或干细胞以引入kif11sirna、krassirna、plk1sirna或其组合。例如，可修饰本公开的间充质谱系前体或干细胞以引入kif11sirna。例如，可修饰间充质谱系前体或干细胞以引入结合至如seqidno:1(ncbi参考号nm_004523.3)中所示的kif11mrna的5’末端的kif11sirna。在一个实例中，kif11sirna结合从5’末端开始的bp800与bp3,600之间的kif11mrna转录物。在另一个实例中，kif11sirna结合从5’末端开始的bp900与bp3,200之间的kif11mrna转录物。在另一个实例中，kif11sirna结合从5’末端开始的bp900与bp2,500之间的kif11mrna转录物。在另一个实例中，kif11sirna结合从5’末端开始的bp3,200之前的kif11mrna转录物。在另一个实例中，kif11sirna结合从5’末端开始的bp3,600后的kif11mrna转录物。在另一个实例中，kif11sirna结合从5’末端开始的bp4,000后的kif11mrna转录物。在另一个实例中，kif11sirna结合从5’末端开始的bp3,600与bp5101之间的kif11mrna转录物。在另一个实例中，kif11sirna结合从5’末端开始的bp4,600g与bp5101之间的kif11mrna转录物。在另一个实例中，可修饰本公开的间充质谱系前体或干细胞以引入kif11_4sirna。在另一个实例中，可修饰间充质谱系前体或干细胞以引入kif11_6。在另一个实例中，可修饰间充质谱系前体或干细胞以引入kif11_9。在另一个实例中，可修饰间充质谱系前体或干细胞以引入kif11_8、kif11_9、kif11_6、kif11_12、kif11_7或kif11_4中的一种或多种。在另一个实例中，kif11sirna结合从5’末端开始的bp800与bp4800之间的kif11mrna转录物。在另一个实例中，kif11sirna结合从5’末端开始的bp900与bp4,800之间的kif11mrna转录物。在另一个实例中，可修饰间充质谱系前体或干细胞以引入kif11_8、kif11_9、kif11_6、kif11_12、kif11_7、kif11_4、kif11_15或kif11_13中的一种或多种。在另一个实例中，可修饰间充质谱系前体或干细胞以引入kif11_15或kif11_13。下面在表1中显示了上述kif11sirna的序列细节。表1.kif11sirna序列seqidnokif11sirna参考(#qiagen产品编号)序列seqidno:2hs_kif11_8(#si03019793)ctcgggaagctggaaatataaseqidno:3hs_kif11_9(#si03104038)gagggcgtacaagaacatctaseqidno:4hs_kif11_6(#si02653693)acggaggagatagaacgtttaseqidno:5hs_kif11_12(#si04376358)caggaattgattaatgtactcseqidno:6hs_kif11_7(#si02653770)gccgataagatagaagatcaaseqidno:7hs_kif11_4(#si00064855)ctagatggctttctcagtataseqidno:8hs_kif11_15(#si05064353)cagcttgagcttacataggtaseqidno:9hs_kif11_13(#si04435655)taagcgatggataatacctaa在另一个实例中，可修饰本公开的间充质谱系前体或干细胞以引入has-mir-let7b、hsa-mir-155、hsa-mir-155-inh、hsa-mir-181-b1、hsa-mir-15a、hsa-mir-16-1、hsa-mir-21、hsa-mir-34a、hsa-mir-221、hsa-mir-29a或其组合。在另一个实施例中，修饰间充质谱系前体或干细胞以引入寡核苷酸或表达所述寡核苷酸的载体，与间充质谱系前体或干细胞相比，所述寡核苷酸或载体优先杀死靶细胞。在另一个实例中，修饰间充质谱系前体或干细胞以引入寡核苷酸或表达所述寡核苷酸的载体，所述寡核苷酸或载体杀伤靶细胞但基本上不影响间充质谱系前体或干细胞的生存力。在另一个实例中，修饰间充质谱系前体或干细胞以引入寡核苷酸或表达所述寡核苷酸的载体，所述寡核苷酸或载体在它们可将所述寡核苷酸递送到靶细胞诸如癌细胞之前不会杀伤间充质谱系前体或干细胞。在一个实例中，可修饰本公开的间充质谱系前体或干细胞以引入表达上述核酸的载体。用于在细胞中表达的许多载体是本领域已知的。载体组分通常包括但不限于以下的一种或多种：信号序列、编码核酸如寡核苷酸的序列、增强子元件、启动子和转录终止序列。示例性表达载体包括质粒、噬菌体、自主复制序列(ars)、病毒、着丝粒、人工染色体、染色体或能够在根据本公开的间充质谱系前体或干细胞中表达核酸的其他结构。用于转染到间充质谱系前体或干细胞中的合适载体质粒包括脂质/dna复合物，诸如美国专利第5,578,475号、6,020,202号和6,051,429号中描述的那些。用于制备dna-脂质复合物的合适试剂包括lipofectamine(gibco/lifetechnologies#11668019)和fugenetm6(rochediagnosticscorp.#1814443)；以及lipotaxitm(invitrogencorp.#204110)。在另一个实例中，使用病毒表达载体修饰间充质谱系前体或干细胞以引入寡核苷酸。示例性的病毒表达载体包括慢病毒、杆状病毒、逆转录病毒、腺病毒(adv)、腺相关病毒(aav)，包括重组形式诸如重组的腺相关病毒(raav)及其衍生物诸如自互补的aav病毒(scaav)和非整合型av。在一个实例中，病毒载体是复制缺陷的。在该实施例中，复制基因被缺失或被具有高活性启动子的表达盒替换。例如，在av的情况下，e1/e3基因可以被缺失或替换。在aav的情况下，e1a和e1b基因可被缺失或替换。示例性的高活性启动子包括cmv、ef1a、sv40、pgk1、ubc、人β肌动蛋白、cag、tre、uas和ac5。在一个实例中，使用av载体或其重组形式修饰间充质谱系前体或干细胞以引入寡核苷酸。各种av血清型可以适合用于修饰间充质谱系前体或干细胞以引入寡核苷酸。在一个实例中，使用av血清型1(av1)来修饰间充质谱系前体或干细胞。在另一个实例中，将av2用于修饰间充质谱系前体或干细胞。在其他实例中，将av3、av4、av7、av8、av9、av10、av11、av12或av13用于修饰间充质谱系前体或干细胞。在另一个实例中，将av5用于修饰间充质谱系前体或干细胞。在另一个实例中，将av6用于修饰间充质谱系前体或干细胞。在一个实例中，使用aav载体或其重组形式修饰间充质谱系前体或干细胞以引入寡核苷酸。各种aav血清型也可适用于修饰间充质谱系前体或干细胞以引入寡核苷酸。在一个实例中，将aav血清型1(aav1)用于修饰间充质谱系前体或干细胞。在另一个实例中，将aav2用于修饰间充质谱系前体或干细胞。在其他实例中，将aav3、aav4、aav7、aav8、aav9、aav10、aav11、aav12或aav13用于修饰间充质谱系前体或干细胞。在另一个实例中，将aav5用于修饰间充质谱系前体或干细胞。在另一个实例中，将aav6用于修饰间充质谱系前体或干细胞。可使用本领域已知的各种技术来鉴定最佳载体。在一个实例中，可用表达绿色荧光蛋白(gfp)的各种载体接触/转染间充质谱系前体或干细胞。在该实施例中，可基于转染/转导效率、gfp表达水平、细胞偏好性和/或gfp表达的持久性来鉴定最佳载体。病毒转导的方法是本领域已知的(例如美国专利第6,723,561号、6,627,442号)。各种病毒表达载体系统也可从商业供应商诸如miltenyibiotech(macsductin)、sigma-aldrich(expressmag)和thermofisherscientific(virapower)处获得。修饰的效率很少为100％，并且通常希望富集已被成功修饰的细胞群体。在一个实例中，可通过利用新基因型的功能特征来富集经修饰的细胞。富集经修饰的细胞的一种示例性方法是使用对药物诸如新霉素的抗性进行阳性选择。在一个实例中，经修饰的间充质谱系前体或干细胞包含足够水平的寡核苷酸以降低靶细胞的生存力。在一个实例中，靶细胞是癌细胞。因此，在一个实例中，经修饰的间充质谱系前体或干细胞包含足够水平的寡核苷酸以降低癌细胞的生存力。在一个实例中，经修饰的间充质谱系前体或干细胞包含足够水平的抑制性寡核苷酸，以实现至少0.25nm的抑制性寡核苷酸向靶细胞的转移。在一个实例中，经修饰的间充质谱系前体或干细胞包含足够水平的抑制性寡核苷酸，以实现至少0.3nm的抑制性寡核苷酸向靶细胞的转移。在一个实例中，经修饰的间充质谱系前体或干细胞包含足够水平的抑制性寡核苷酸，以实现至少0.4nm的抑制性寡核苷酸向靶细胞的转移。在一个实例中，经修饰的间充质谱系前体或干细胞包含足够水平的抑制性寡核苷酸，以实现至少0.5nm的抑制性寡核苷酸向靶细胞的转移。在一个实例中，经修饰的间充质谱系前体或干细胞包含足够水平的抑制性寡核苷酸，以实现至少1nm的抑制性寡核苷酸向靶细胞的转移。在一个实例中，经修饰的间充质谱系前体或干细胞包含足够水平的抑制性寡核苷酸，以实现至少3nm的抑制性寡核苷酸向靶细胞的转移。在另一个实例中，经修饰的间充质谱系前体或干细胞包含足够水平的抑制性寡核苷酸，以实现0.25至5nm的抑制性寡核苷酸向靶细胞的转移。在另一个实例中，经修饰的间充质谱系前体或干细胞包含足够水平的抑制性寡核苷酸，以实现0.5至5nm的抑制性寡核苷酸向靶细胞的转移。在另一个实例中，经修饰的间充质谱系前体或干细胞包含足够水平的抑制性寡核苷酸，以实现0.5至4nm的抑制性寡核苷酸向靶细胞的转移。在另一个实例中，经修饰的间充质谱系前体或干细胞包含足够水平的抑制性寡核苷酸，以实现0.5至3.5nm的抑制性寡核苷酸向靶细胞的转移。在另一个实例中，经修饰的间充质谱系前体或干细胞包含至少100nm的抑制性寡核苷酸。在另一个实例中，经修饰的间充质谱系前体或干细胞包含至少200nm的抑制性寡核苷酸。在另一个实例中，经修饰的间充质谱系前体或干细胞包含至少300nm的抑制性寡核苷酸。在另一个实例中，经修饰的间充质谱系前体或干细胞包含至少400nm的抑制性寡核苷酸。在另一个实例中，经修饰的间充质谱系前体或干细胞包含至少500nm的抑制性寡核苷酸。在另一个实例中，经修饰的间充质谱系前体或干细胞包含至少600nm的抑制性寡核苷酸。在另一个实例中，经修饰的间充质谱系前体或干细胞包含至少700nm的抑制性寡核苷酸。在另一个实例中，经修饰的间充质谱系前体或干细胞包含至少1μm的抑制性寡核苷酸。至靶细胞的递送本发明人已经确定间充质谱系前体或干细胞可将核酸转移至靶细胞。因此，在一个实例中，本公开包括通过使靶细胞与间充质谱系前体或干细胞接触而将上述核酸递送至靶细胞的方法，所述间充质谱系前体或干细胞已被修饰而引入了上述核酸或表达所述核酸的载体。为了避免疑问，被递送至靶细胞的核酸是被引入经修饰的间充质谱系前体或干细胞的核酸。术语“接触”在本公开的说明书中用来指“直接”或“间接”接触。“直接接触”在本公开的说明书中用于指靶细胞与促进核酸转移的经修饰的间充质谱系前体或干细胞之间的物理接触。例如，靶细胞和经修饰的间充质谱系前体或干细胞可通过共同的连接蛋白(即靶细胞和经修饰的间充质谱系前体或干细胞均表达的连接蛋白)直接接触。在该实施例中，所述共同连接蛋白促进核酸从间充质谱系前体或干细胞通过缝隙连接转移至靶细胞。因此，在一个实例中，接触在允许间充质谱系前体或干细胞与靶细胞形成缝隙连接的条件下发生，由此通过穿过缝隙连接将核酸递送至靶细胞。在一个实例中，缝隙连接由cx40形成。在另一个实例中，缝隙连接由cx43形成。在另一实例中，缝隙连接由cx45、cx32和/或cx37形成。“间接接触”在本公开的说明书中用于指将核酸从经修饰的间充质谱系前体或干细胞递送至靶细胞而不直接接触。例如，紧邻靶细胞的经修饰的间充质谱系前体或干细胞可以与靶细胞间接接触。在一个实例中，与靶细胞间接接触的经修饰的间充质谱系前体或干细胞可以通过外体将核酸递送至靶细胞。在另一个实例中，与靶细胞直接接触的经修饰的间充质谱系前体或干细胞可以通过共同连接蛋白以及间接地通过外体将核酸递送至靶细胞。接受来自经修饰的间充质谱系前体或干细胞的核酸的靶细胞不受特别限制，只要它们能够直接或间接与经修饰的间充质谱系前体或干细胞接触以促进核酸的转移即可。示例性的靶细胞包括合胞组织中的细胞。术语“合胞体的”在本公开的说明书中用于指由通过具有缝隙连接的特化膜相互连接的细胞组成的组织，所述细胞在动作电位上电同步。示例性的合胞体细胞包括心肌细胞、平滑肌细胞、上皮细胞、结缔组织细胞和合胞体癌细胞。在一个实例中，靶细胞是免疫细胞。例如，靶细胞可以是白细胞。在一个实例中，靶细胞是癌细胞。例如，靶细胞可以是胰腺癌细胞。在另一个实例中，靶细胞可以是肺癌细胞。在另一个实例中，靶细胞可以是宫颈癌细胞。在另一个实例中，靶细胞可以是结肠直肠癌细胞。在另一个实例中，靶细胞可以是肝癌细胞。在另一个实例中，靶细胞可以是骨癌细胞。在另一个实例中，靶细胞可以是骨肉瘤细胞。在另一个实例中，靶细胞可以是前列腺癌细胞。在另一个实例中，靶细胞可以是黑色素瘤细胞。在另一个实例中，靶细胞与经修饰的间充质谱系前体或干细胞具有共同的连接蛋白。在一个实例中，靶细胞表达cx40。在另一个实例中，靶细胞表达cx43。在另一个实例中，靶细胞表达cx45、cx32和/或cx37。可在体外或体内促进核酸从经修饰的间充质谱系前体或干细胞向靶细胞的递送。在一个实例中，通过将经修饰的间充质谱系前体或干细胞与靶细胞共培养，可体外促进核酸从经修饰的间充质谱系前体或干细胞向靶细胞的递送。在一个实例中，通过向受试者施用经修饰的间充质谱系前体或干细胞，可以在体内促进核酸从经修饰的间充质谱系前体或干细胞向靶细胞的递送。例如，可以诸如例如通过静脉内、动脉内或腹膜内施用来全身性施用间充质谱系前体或干细胞。间充质谱系前体或干细胞也可以通过鼻内、肌内或心内施用来施用。在一个实例中，将间充质谱系前体或干细胞施用到与靶细胞非常接近的部位诸如周围组织。在另一个实例中，向包含靶细胞的组织直接施用间充质谱系前体或干细胞。治疗方法在一个实例中，可施用根据本公开的组合物来治疗癌症。术语“癌症”是指或描述哺乳动物中典型特征在于不受控制的细胞生长的生理病况。癌症的实例包括但不限于癌、淋巴瘤、母细胞瘤、肉瘤和白血病或淋巴样恶性肿瘤。此类癌症的更特别的实例包括但不限于鳞状细胞癌(例如，上皮鳞状细胞癌)、肺癌(包括小细胞肺癌、非小细胞肺癌、肺腺癌和肺鳞癌)、腹膜癌、肝细胞癌、胃癌或胃癌(包括胃肠癌和胃肠间质癌)、胰腺癌、胶质母细胞瘤、宫颈癌、卵巢癌、肝癌、膀胱癌、泌尿道癌、肝瘤、乳腺癌、结肠癌、直肠癌、结直肠癌、子宫内膜癌或子宫癌、唾液腺癌、肾癌或肾脏癌症、前列腺癌、外阴癌、甲状腺癌、肝癌、肛门癌、阴茎癌、黑色素瘤、浅表播散性黑色素瘤、恶性雀斑痣黑色素瘤、肢端雀斑痣样黑素瘤、结节性黑色素瘤、多发性骨髓瘤和b细胞淋巴瘤(包括低级/滤泡性非霍奇金淋巴瘤(nhl)；小淋巴细胞性(sl)nhl；中级/滤泡性nhl；中级弥漫性nhl；高级免疫母细胞性nhl；高级淋巴母细胞性nhl；高级小的非分裂细胞nhl；粗大疾病nhl(bulkydisease,nhl)；套细胞淋巴瘤；aids相关淋巴瘤；和瓦尔登斯特伦巨球蛋白血症)；慢性淋巴细胞白血病(cll)；急性淋巴母细胞性白血病(all)；毛细胞白血病；慢性髓细胞性白血病；和移植后淋巴增生性疾病(ptld)，以及与斑痣性错构瘤病、水肿相关的异常血管增生(诸如与脑肿瘤相关的异常血管增生)、梅格斯综合征、脑癌以及头颈癌，和相关的转移。在一个实例中，癌症在kras中具有致癌的g12d突变。本领域技术人员将理解g12d突变是存在于密码子12中的单核苷酸点突变。例如，所述癌症可以选自结肠癌、肺癌、黑色素瘤、肝癌和骨肉瘤，其中所述癌症在kras具有致癌的g12d突变。在一个实例中，癌症是胰腺癌。在另一个实例中，癌症是肺癌。在另一个实例中，癌症是宫颈癌。在另一个实例中，癌症是结直肠癌。在另一个实例中，癌症是肝癌。在另一个实例中，癌症是骨肉瘤。在另一个实例中，癌症是前列腺癌。在另一个实例中，癌症是黑色素瘤。在另一个实例中，根据本公开治疗的癌症包括与根据本公开的间充质谱系前体或干细胞共享共同连接蛋白的细胞。在该实施例中，所述共同连接蛋白促进了核酸从间充质谱系前体或干细胞向癌细胞的转移。在一个实例中，所述癌症包括表达cx40的细胞。在另一个实例中，所述癌症包括表达cx43的细胞。在另一个实例中，所述癌症包括表达cx40和cx43的细胞。经修饰的间充质谱系前体或干细胞的改良的保存和/或归巢一方面，处理本文定义的间充质谱系前体或干细胞，以修饰它们的细胞表面聚糖。细胞表面蛋白诸如cd44上的聚糖的修饰已被证明能产生e-选择蛋白配体，所述配体能够与在体内在炎症部位处的微血管上表达的e-选择蛋白分子结合。这样，间充质谱系前体或干细胞上的细胞表面聚糖的修饰改善了间充质谱系前体或干细胞向体内组织损伤部位的归巢。本发明人还确定了糖基转移酶介导的细胞表面聚糖的修饰提高了冷冻保存后的细胞生存力(即在冻融循环后有更多的细胞存活)。因此，在一个实例中，本公开包括间充质谱系前体或干细胞的冷冻保存群体，所述间充质谱系前体或干细胞已在于细胞上修饰细胞表面聚糖的条件下用糖基转移酶(e.c2.4)进行了处理。在另一个实施例中，本公开包括冷冻保存间充质谱系前体或干细胞的方法，该方法包括:在导致在细胞上修饰细胞表面聚糖的条件下，用糖基转移酶处理间充质谱系前体或干细胞群体，并将细胞冷冻保存在组合物中。在另一个实施例中，本公开包括产生治疗性细胞的方法，该方法包括:在导致在细胞上修饰细胞表面聚糖的条件下，用糖基转移酶处理间充质谱系前体或干细胞群体，并将细胞冷冻保存在组合物中。在一个实例中，间充质谱系前体或干细胞“处理”包括在糖基转移酶具有酶活性的条件下使细胞与糖基转移酶接触。在该实施例中，糖基转移酶修饰间充质谱系前体或干细胞上的细胞表面聚糖。细胞表面聚糖修饰的一个实例是岩藻糖基化。在一个实例中，修饰cd44。在另一个实例中，修饰cd14。在另一个实例中，修饰cd44、cd14、cd3和cd19中的一种或多种。在一个实例中，使用流式细胞术鉴定表面聚糖修饰。在该实例中，经修饰的间充质谱系前体细胞或干细胞具有比未处理的间充质谱系前体细胞高1个对数量级的岩藻糖基化细胞表面聚糖的表达。在另一个实例中，经修饰的间充质谱系前体细胞或干细胞具有比未处理的间充质谱系前体细胞高2个对数量级的岩藻糖基化细胞表面聚糖的表达。在另一个实例中，经修饰的间充质谱系前体细胞或干细胞具有比未处理的间充质谱系前体细胞高3个对数量级的岩藻糖基化细胞表面聚糖的表达。例如，经修饰的间充质谱系前体细胞或干细胞可具有比未处理的间充质谱系前体细胞高1个对数量级的岩藻糖基化cd14的表达。在另一个实例中，经修饰的间充质谱系前体细胞或干细胞具有比未处理的间充质谱系前体细胞高2个对数量级的岩藻糖基化cd14的表达。在另一个实例中，经修饰的间充质谱系前体细胞或干细胞具有比未处理的间充质谱系前体细胞高3个对数量级的岩藻糖基化cd14的表达。在一个实例中，“处理”包括在核苷酸糖供体底物存在的情况下，使间充质谱系前体或干细胞与糖基转移酶接触。合适的供体底物包括岩藻糖、半乳糖、唾液酸或n-乙酰基葡糖胺。例如，底物可以是gdp-岩藻糖。例如，治疗可涉及将间充质谱系前体或干细胞群体与外源糖基转移酶诸如岩藻糖基转移酶接触。在该实例中，可将糖基转移酶添加到包含间充质谱系前体或干细胞的细胞培养基或其他生理学上可接受的溶液中。例如，可在包含糖基转移酶的培养基中培养间充质谱系前体或干细胞。在另一个实例中，将间充质谱系前体或干细胞悬浮在包含糖基转移酶的培养基中。例如，可以将间充质谱系前体或干细胞从培养物中解离出来，并重新悬浮在包含糖基转移酶的合适培养基中。在一个实例中，可使用乙二胺四乙酸(edta)解离细胞。在另一个实例中，可使用蛋白酶诸如单独的胰蛋白酶或与edta组合的胰蛋白酶来解离细胞。在一个实例中，细胞培养基包含至少1.8μg糖基转移酶。在另一个实例中，细胞培养基包含至少2.0μg糖基转移酶。在另一个实例中，细胞培养基包含至少2.5μg糖基转移酶。在另一个实例中，细胞培养基包含2至15μg糖基转移酶。在另一个实例中，细胞培养基包含2至10μg糖基转移酶。在另一个实例中，细胞培养基包含2至5μg糖基转移酶。在一个实例中，细胞培养基包含至少1.8μg岩藻糖基转移酶。在另一个实例中，细胞培养基包含至少2.0μg岩藻糖基转移酶。在另一个实例中，细胞培养基包含至少2.5μg岩藻糖基转移酶。在另一个实例中，细胞培养基包含2至15μg岩藻糖基转移酶。在另一个实例中，细胞培养基包含2至10μg岩藻糖基转移酶。在另一个实例中，向细胞培养基中加入2-5μg岩藻糖基转移酶。在这些实例中，可在30μl反应体积中向约5x105个间充质谱系前体或干细胞提供糖基转移酶。例如，可在称为外岩藻糖基化的过程中用外源糖基转移酶处理间充质谱系前体或干细胞。在该实施方案中，可在具有低水平的二价金属辅因子的生理上可接受的溶液中提供糖基转移酶。在各种实施方案中，对生理上可接受的溶液进行缓冲。生理上可接受的溶液可以是，例如，汉克平衡盐溶液、达尔伯克改良伊格尔培养基、古德缓冲液(参见n.e.good,g.d.winget,w.winter,tn.conolly,s.izawa和r.m.m.singh,biochemistry5,467(1966)；n.e.good,s.izawa,methodsenzymol.24,62(1972))诸如hepes缓冲液、2-吗啉代乙磺酸(mes)缓冲液、磷酸盐缓冲盐水(pbs)。在一个实例中，所述生理上可接受的溶液基本上不含甘油。在另一个实例中，通过修饰细胞以表达糖基转移酶，用糖基转移酶处理间充质谱系前体或干细胞。例如，糖基转移酶可由间充质谱系前体或干细胞在细胞内产生。在本实施方案中，将编码糖基转移酶的核酸分子引入间充质谱系前体或干细胞。然后由间充质谱系前体或干细胞表达糖基转移酶来实现其表面聚糖的修饰。当编码糖基转移酶的核酸已经通过任何合适的人工操作手段转移到间充质谱系前体或干细胞中时，或者当间充质谱系前体或干细胞是携带编码糖基转移酶的核酸的最初改变的细胞的后代时，所述间充质谱系前体或干细胞被认为是“被遗传修饰以表达糖基转移酶”。可对细胞进行稳定或瞬时修饰以表达糖基转移酶。在一个实例中，糖基转移酶在经遗传修饰的间充质谱系前体或干细胞中的表达导致所述细胞在体内炎症部位的滞留增强。例如，经遗传修饰的间充质谱系前体或干细胞可以保留在肿瘤或其转移处。在另一个实例中，经遗传修饰的间充质谱系前体或干细胞可以保留在器官移植排斥的部位。在另一个实例中，经遗传修饰的间充质谱系前体或干细胞可以保留在损伤部位，诸如梗塞的心脏。有多种方法可用于确定经遗传修饰的间充质谱系前体或干细胞是否保留在体内炎症部位。在一个实例中，使用放射性示踪剂或其他合适的标记物对细胞进行体内成像。可以使用本领域已知的各种方法对间充质谱系前体或干细胞进行遗传修饰。在一个实例中，在体外用病毒载体处理间充质谱系前体或干细胞。遗传修饰的病毒已被广泛应用于将核酸递送到细胞中。用于本文所述细胞的遗传修饰的示例性病毒载体包括逆转录病毒载体(诸如γ逆转录病毒载体)、慢病毒、鼠白血病病毒(mlv或mulv)和腺病毒。例如，可将病毒添加到间充质谱系前体或干细胞培养基中。还可使用非病毒方法。实例包括质粒转移和通过使用整合酶或转座酶技术的靶向基因整合的应用、脂质体或蛋白质转导结构域介导的递送和物理方法如电穿孔。遗传修饰的效率很少为100％，通常需要富集已被成功修饰的细胞群体。在一个实例中，可通过利用新基因型的功能特征来富集经修饰的细胞。富集修饰细胞的一种示例性方法是使用对药物诸如新霉素的抗性的阳性选择或基于lacz的表达的比色选择。在各种实施方案中，将间充质谱系前体或干细胞与不止一种糖基转移酶及其合适的供体底物(例如糖)接触。例如，将细胞同时或依次地与两种糖基转移酶接触，每种酶以适当的键联将不同的单糖添加到(延伸的)核心聚糖结构。在另一个实例中，经遗传修饰的细胞表达两种糖基转移酶。在一个实施方案中，经处理的间充质谱系前体或干细胞表达cd44，例如α(2,3)唾液酸化的cd44。在另一个实施方案中，间充质谱系前体或干细胞不表达cd34或psgl-1。在一个实例中，经处理的间充质谱系前体或干细胞结合e-选择蛋白和或l-选择蛋白。在一个实例中，经修饰的间充质谱系前体或干细胞不结合p-选择蛋白。在另一个实例中，cd14在经处理的间充质谱系前体或干细胞上被岩藻糖基化。在另一个实例中，cd14和cd3在经处理的间充质谱系前体或干细胞上被岩藻糖基化。在一个实施方案中，糖基转移酶能够在37℃、ph6.5下每分钟转移1.0mmole糖。在一个实例中，糖基转移酶是岩藻糖基转移酶(催化l-岩藻糖的转移)。在另一个实例中，糖基转移酶是α1,3岩藻糖基转移酶，例如α1,3岩藻糖基转移酶iii、α1,3岩藻糖基转移酶iv、α1,3岩藻糖基转移酶vi、α1,3岩藻糖基转移酶vii、α1,3岩藻糖基转移酶ix、α1,3岩藻糖基转移酶x、α1,3岩藻糖基转移酶xi)。例如，可用α1,3岩藻糖基转移酶vii处理细胞。在另一个实例中，可用α1,3岩藻糖基转移酶vi处理细胞。在这些实施例中，间充质谱系前体或干细胞的岩藻糖基化可通过检测处理过的细胞结合选择蛋白诸如e-选择蛋白的能力的增强和/或处理过的细胞与本领域已知的结合slex的抗体(包括但不限于heca-452)的反应性的增强来鉴定。在另一个实例中，糖基转移酶是半乳糖基转移酶(催化半乳糖的转移)。在另一个实例中，糖基转移酶是唾液酸转移酶(催化唾液酸的转移)。细胞组合物在实施本公开的方法时，间充质谱系前体或干细胞可以以组合物的形式施用。根据本公开的示例性组合物可包含已被修饰以引入sirna或mirna或表达其的载体的间充质谱系前体或干细胞。例如，根据本公开的组合物可包含间充质谱系前体或干细胞，所述间充质谱系前体或干细胞已被修饰以引入kif11sirna、krassirna、plk1sirna、其组合或表达其的载体。在一个实例中，所述组合物包含已被修饰以引入kif11sirna的干细胞，其中kif11sirna结合从5’末端开始的bp800与bp3,600之间的kif11mrna转录物。在另一个实例中，该组合物包含已被修饰以引入kif11sirna的干细胞，其中sirna结合从5’末端开始的bp900与bp3,200之间的kif11mrna转录物。在另一个实例中，该组合物包含已被修饰以引入kif11sirna的干细胞，其中sirna结合从5’末端开始的bp900与bp2,500之间的kif11mrna转录物。在另一个实例中，该组合物包含已被修饰以引入kif11sirna的干细胞，其中sirna结合从5’末端开始的bp3，200之前结合kif11mrna转录物。在这些实例中，kif11mrna转录物是如seqidno:1(ncbi参考号nm_004523.3)中所示的。在一个实例中，该组合物包含已被修饰以引入kif11_4的干细胞。在另一个实例中，该组合物包含已被修饰以引入kif11_6的干细胞。在另一个实例中，该组合物包含已被修饰以引入kif11_9的干细胞。在另一个实例中，该组合物包含已被修饰以引入kif11_8、kif11_9、kif11_6、kif11_12、kif11_7或kif11_4中的一种或多种的干细胞。在另一个实施例中，该组合物包含已被修饰以引入一种或多种kif11sirna的干细胞，其中所述sirna结合从5’末端开始的bp800与bp4800之间的kif11mrna转录物。在另一个实施例中，该组合物包含已被修饰以引入一种或多种kif11sirna的干细胞，其中所述sirna结合从5’末端开始的bp900与bp4,800之间的kif11mrna转录物。在另一个实施例中，该组合物包含已被修饰以引入一种或多种kif11sirna的干细胞，其中所述sirna结合从5’末端开始的bp3,600之前的kif11mrna转录物。在另一个实施例中，该组合物包含已被修饰以引入一种或多种kif11sirna的干细胞，其中所述sirna结合从5’末端开始的bp3,600之后的kif11mrna转录物。在另一个实施例中，该组合物包含已被修饰以引入一种或多种kif11sirna的干细胞，其中所述sirna结合从5’末端开始的bp4,000之后的kif11mrna转录物。在另一个实例中，所述kif11sirna结合从5’末端开始的bp3,600与bp5101之间的kif11mrna转录物。在另一个实施例中，该组合物包含已被修饰以引入一种或多种kif11sirna的干细胞，其中所述sirna结合从5’末端开始的bp4,600与bp5101之间的kif11mrna转录物。在另一个实例中，该组合物包含已被修饰以引入kif11_8、kif11_9、kif11_6、kif11_12、kif11_7、kif11_4、kif11_15或kif11_13中的一种或多种的干细胞。在另一个实例中，该组合物包含已被修饰以引入kif11_15或kif11_13中的一种或两种的干细胞。上面引用的kif11sirna的序列细节如上面表1中所示。在其他实例中，根据本公开的组合物可包含间充质谱系前体或干细胞，所述间充质谱系前体或干细胞已被修饰以引入上述mirna、其组合或表达其的载体。例如，根据本发明的组合物可包含经修饰以引入hsa-mir-let7b、hsa-mir-155、hsa-mir-155-inh、hsa-mir-181-b1、hsa-mir-15a、hsa-mir-16-1、hsa-mir-21、hsa-mir-34a、hsa-mir-221、hsa-mir-29、其组合或表达其的载体的间充质谱系前体或干细胞。在另一个实例中，根据本公开的组合物可包含经修饰以引入抑制性寡核苷酸或表达其的载体的间充质谱系前体或干细胞，所述抑制性寡核苷酸或载体在所述间充质谱系前体或干细胞能够将所述至少一种类型的抑制性寡核苷酸递送至靶细胞诸如癌细胞之前不会杀死所述间充质谱系前体或干细胞。在一个实例中，这种组合物包含药学上可接受的载体和/或赋形剂。术语“载体”和“赋形剂”是指本领域中常规地用于促进活性化合物的储存、施用和/或生物活性的物质组成(参见，例如，remington'spharmaceuticalsciences，第16版，macpublishingcompany(1980))。载体还可减少活性化合物的任何不良副作用。合适的载体例如是稳定的，例如不能与载体中的其他成分反应。在一个实例中，载体在用于治疗的剂量和浓度下不会在受者中产生明显的局部或全身性副作用。用于本公开的合适载体包括常规使用的那些，例如水、盐水、葡萄糖水溶液、乳糖、林格氏溶液、缓冲溶液、透明质酸和二醇类是示例性液体载体，特别是(当等渗时)用于溶液的液体载体。合适的药物载体和赋形剂包括淀粉、纤维素、葡萄糖、乳糖、蔗糖、明胶、麦芽、大米、面粉、白垩、硅胶、硬脂酸镁、硬脂酸钠、单硬脂酸甘油酯、氯化钠、甘油、丙二醇、水、乙醇等。在另一个实例中，载体是例如细胞在其中生长或悬浮的培养基组合物。这种培养基组合物在其所施用的受试者中不会引发任何副作用。示例性载体和赋形剂不会对细胞的生存能力和/或细胞治疗或预防疾病的能力产生不利影响。在一个实例中，载体或赋形剂提供缓冲活性以将细胞和/或可溶性因子维持在合适的ph，从而发挥生物活性，例如，载体或赋形剂是磷酸盐缓冲盐水(pbs)。pbs代表有吸引力的载体或赋形剂，因为其与细胞和因子的相互作用最小，并允许细胞和因子的快速释放，在这种情况下，本公开的组合物可以作为液体产生，以例如通过注射直接施加到血流或组织内或者组织周围或邻近的区域中。可将本文所述的细胞组合物单独施用或作为与其他细胞的混合物施用。可将不同类型的细胞在施用前立即或不久与本公开的组合物混合，或者可将它们在施用前一起共培养一段时间。在一个实例中，组合物包含有效量或治疗有效量的细胞。例如，组合物包含约1x105个细胞至约1x109个细胞或约1.25x103个细胞至约1.25x107个细胞。待施用的细胞的确切数量取决于多种因素，包括受试者的年龄、体重和性别，以及所治疗疾病的程度和严重程度。示例性剂量包括至少约1.2x108至约8x1010个细胞，诸如约1.3x108至约8x109个细胞、约1.4x108至约8x108个细胞、约1.5x108至约7.2x108个细胞、约1.6x108至约6.4x108个细胞、约1.7x108至约5.6x108个细胞、约1.8x108至约4.8x108个细胞、约1.9x108至约4.0x108个细胞、约2.0x108至约3.2x108个细胞、约2.1x108至约2.4x108个细胞。例如，一个剂量可包括至少约1.5x108个细胞。例如，一个剂量可包括至少约2.0x108个细胞。换句话说，示例性剂量包括至少约1.5x106个细胞/kg(80kg的受试者)。在一个实例中，剂量可包括至少约2.5x106个细胞/kg。在其它实例中，剂量可包括约1.5x106至约1x109个细胞/kg、约1.6x106至约1x108个细胞/kg、约1.8x106至约1x107个细胞/kg、约1.9x106至约9x106个细胞/kg、约2.0x106至约8x106个细胞/kg、约2.1x106至约7x106个细胞/kg、约2.3x106至约6x106个细胞/kg、约2.4x106至约5x106个细胞/kg、约2.5x106至约4x106个细胞/kg、约2.6x106至约3x106个细胞/kg。在一个实例中，经修饰的间充质谱系前体或干细胞为组合物的细胞群的至少约5％、至少约10％、至少约15％、至少约20％、至少约25％、至少约30％、至少约35％、至少约40％、至少约45％、至少约50％、至少约55％、至少约60％、至少约65％、至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约99％。可将本公开的组合物冷冻保存。间充质谱系前体或干细胞的冷冻保存可以使用本领域已知的慢速冷却方法或“快速”冷冻方案来进行。优选地，冷冻保存的方法使冷冻保存的细胞保持了与未冷冻的细胞相比相似的表型、细胞表面标志物和生长速率。冷冻保存的组合物可包含冷冻保存溶液。冷冻保存溶液的ph通常为6.5至8，优选7.4。冷冻保存溶液可包含无菌的、无热原的等渗溶液，例如plasmalyteatm。100mlplasmalyteatm含有526mg氯化钠，usp(nacl)；502mg葡萄糖酸钠(c6h11nao7)；368mg醋酸钠三水合物，usp(c2h3nao2·3h2o)；37mg氯化钾，usp(kcl)；和30mg氯化镁，usp(mgcl2·6h2o)。其不含抗菌剂。用氢氧化钠调节ph。ph为7.4(6.5至8.0)。冷冻保存溶液可包含profreezetm。冷冻保存溶液可以另外或可选地包含培养基，例如αmem。为了便于冷冻，通常向冷冻保存溶液中加入冷冻保护剂，例如二甲基亚砜(dmso)。理想情况下，冷冻保护剂应该对细胞和患者无毒，为非抗原性的，化学惰性的，解冻后存活率高，并且允许不经洗涤进行移植。然而，最常用的冷冻保护剂dmso显示出一定的细胞毒性。羟乙基淀粉(hes)可用作替代品或与dmso结合使用，以降低冷冻保存溶液的细胞毒性。冷冻保存溶液可以包含dmso、羟乙基淀粉、人血清组分和其他蛋白质填充剂中的一种或多种。在一个实例中，冷冻保存溶液包含约5％的人血清白蛋白(hsa)和约10％的dmso。冷冻保存溶液还可包含甲基纤维素、聚乙烯吡咯烷酮(pvp)和海藻糖中的一种或多种。在一个实施方案中，将细胞悬浮在42.5％profreezetm/50％αmem/7.5％dmso中，并在速率受控的冷冻机中冷却。可将冷冻保存的组合物解冻并直接向受试者施用，或添加到另一种溶液，例如包含透明质酸的溶液中。或者，可将冷冻保存的组合物解冻，并在施用前将间充质谱系前体或干细胞重悬于替代载体中。在一个实例中，可将本文所述的细胞组合物以单剂量施用。在另一个实例中，可将细胞组合物以多剂量施用。例如，至少2剂、至少3剂、至少4剂、至少5剂、至少6剂、至少7剂、至少8剂、至少9剂、至少10剂。在一个实例中，分离或者分离并富集所述间充质谱系前体或干细胞是，并在冷冻保存之前进行离体或体外培养扩增。在另一个实例中，分离或者分离并富集所述间充质谱系前体或干细胞是，将其冷冻保存，解冻，随后进行离体或体外培养扩增。在又一个实例中，在冷冻保存之前和之后培养扩增间充质谱系前体或干细胞。例如，可将间充质谱系前体或干细胞解冻，然后进行培养扩增。本领域已知多种间充质谱系前体或干细胞培养的方法。在一个实例中，在施用之前，在无血清培养基中培养扩增间充质谱系前体或干细胞。例如，可在施用之前将间充质谱系前体或干细胞传代至少一次、两次、三次、四次、五次、六次、七次、八次、九次、十次或更多次。可以例如通过静脉内、动脉内或腹膜内施用来全身性施用间充质前体细胞。还可通过鼻内、肌内或心内施用来施用间充质前体细胞。在一个实例中，可将间充质前体细胞直接施用到受试者的肿瘤中。实施例实施例1-间充质前体细胞对mir/sirna的细胞转移通过免疫组织化学和蛋白质印迹法评估人间充质前体细胞(mpc)的连接蛋白表达。所产生的数据表明，mpc表达功能性cx43和cx40，并与也表达共同连接蛋白的靶细胞类型形成功能性缝隙连接(图1a)。通过免疫组织化学和蛋白质印迹法评估人间充质干细胞(msc)的连接蛋白表达。在hmsc上观察到点状cx43和cx40染色(图1b)。使用膜片钳技术也在mpc中证实了功能性缝隙连接(图2)。各种肿瘤细胞也表达cx43(图3)和cx40(数据未显示)。研究了mpc通过缝隙连接转移介导的核酸向靶细胞的传递。用荧光标记的mir证实了mpc的基于脂质的加载。使用基于脂质的横切术(lipofectaminetm；thermofisherscientific；图4)实现了mir和sirna的高水平细胞内加载。还进行了实验以显示mir16向hela-cx43和panc-1肿瘤细胞的转移。将用cy-5mir16(红色；100nm)转染的mpc与表达gfp的hela-cx43和表达gfp的panc-1细胞共培养24小时。图5a显示了cy-5-mir16向hela细胞(a)和panc-1细胞(b)的转移。图5b显示了kif11sirna向表达gfp的panc-1细胞的转移。随后建立了共培养测定，以测定mpc加载的mir和sirna对肿瘤细胞系的抗增殖和细胞毒性作用。图6a中显示了加载有kif11sirna的mpc(100nm)与panc-1的共培养结果。图6b中显示了加载有kif11sirna的mpc(500nm)与panc-1的共培养结果。这些结果表明，在加载有kif11sirna的mpc(100nm)存在的情况下诱导了panc-1细胞死亡，并且在较高剂量(500nm)的kif11sirna存在的情况下增加。图7中显示了加载有kif11sirna的mpc(500nm)与snuc2a细胞共培养的结果。这些结果表明，kif11的mpc转移诱导了snuc2a肿瘤细胞的死亡。图8(a)和图8(b)中显示了加载有kif11sirna的mpc(500nm)与saos2细胞的共培养结果。这些结果表明，kif11的mpc转移诱导了saos2肿瘤细胞死亡。加载有mir-16的mpc(100nm)与panc-1肿瘤细胞系的共培养也诱导肿瘤细胞死亡(图9a)。加载有mir-16的mpc与无负载的mpc的共培养抑制了mpc的增殖，但未显著影响无负载的mpc的生存力(图9b)。随后在panc-1细胞中进行crispr/cas9介导的cx43敲除，以评估缝隙连接在核酸从mpc向靶细胞转移中的作用。加载有let7b的mpc(500nm)与panc-1细胞的共培养抑制了panc-1细胞的生长。然而，敲除了cx43的panc-1细胞的生长在与加载有let7b的mpc共培养时没有受到显著影响，表明let7b的转移是通过cx43发生的(图10a)。图10b显示了在mpc中直接转染let7b导致细胞增殖少，但没有如对于panc-1细胞所观察到的增加的细胞死亡。加载有kif11sirna的mpc与panc-1细胞的共培养诱导细胞死亡。当与加载有kif11sirna的mpc共培养时在敲除了cx43的panc-1细胞中观察到细胞死亡水平降低。然而，在敲除了cx43的panc-1细胞中，令人惊讶地维持了mpc介导的对细胞生长的抑制(图11a和图12)。这表明sirna的转移不仅通过连接蛋白43发生，还通过另一种机制发生，例如不同的连接蛋白(例如cx40、cx45、cx30.3、cx31或cx31.1)或通过外体的形成。图11b表明，在mpc中直接转染kif11sirna导致细胞增殖减少，但没有如对于panc-1细胞所观察到的增加的细胞死亡。加载有mir-34a的mpc与panc-1细胞的共培养也诱导细胞死亡。当与加载有mir-34a的mpc共培养时，在敲除了cx43的panc-1细胞中观察到细胞死亡水平降低。然而，在敲除了cx43的panc-1细胞中，令人惊讶地维持了mpc介导的细胞生长的抑制(图13a)。同样，这表明mir-34a的转移不仅通过连接蛋白43发生，而且还通过另一种机制(例如不同的连接蛋白或通过外体的形成)发生。图13b表明，在mpc中直接转染mir-34a导致细胞增殖减少，但没有如对于panc-1细胞所观察到的增加的细胞死亡。在mpc、panc-1、pc3和soas2细胞中评估了mirnas和sirnas对细胞死亡和细胞增殖的影响。将细胞以ˉ25％的汇合涂铺在96孔板或3.5cm细胞培养板上，并使用lipofectaminernaimax作为转染剂，利用100nmsirna或mir模拟物进行转染。评估了hsa-mir-15a、hsa-mir-16-1、hsa-mir-34a、hsa-mir-155、hsa-let7b、hs_kif11_4sirna和hs_plk1_2sirna的作用。转染后5天，测量sirna和mirna对细胞死亡和细胞生长的影响(图14-17)。细胞死亡和wst分析的对比分析如图18和图19所示。这些数据表明转染的mir和sirna可以杀死和/或抑制各种癌细胞的生长。实施例2:基于mpc的sirna递送的体内功效在50万个加载有500nm的针对kif11的sirna的mpc存在或不存在的情况下(24小时前)，将50万个稳定表达萤光素酶的pc3细胞原位植入6只小鼠的前列腺中。注射体积为60ul(于pbs中)。一周后，给小鼠注射lucifern，然后用ivis成像系统进行成像以使肿瘤可视化(图20a和图20b)。35天后，将100万个加载有500nm的针对kif11的sirna的mpc注射到经mpc处理的小鼠体内。对照组小鼠注射生理盐水。如图20c所示，对照组的中位生存期为38天，经mpc处理的组的中位生存期为57天，p＝0.0067(对数秩检验)。这些结果表明，在小鼠pc3前列腺异种移植瘤模型中，加载有kif11的mpc显著延长了生存期。实施例3:基于mpc的sirna递送和细胞生存力的剂量依赖性降低将panc-1细胞与加载有kif11sirna的mpc(500nmkif11)共培养。共培养6天使panc-1细胞的生存力降低了77％(图21)。还观察到细胞生长速率下降约80％(图22)。然后用递增量的kif11sirna(0–3.3nm)直接转染panc-1细胞。转染后6天测量panc-1细胞的生存力。在直接转染后观察到细胞生存力的剂量依赖性降低(图23)。值得注意的是，3.3nm下的panc-1生存力的最大降低是76％，与在与500nm转染的mpc共培养后观察到的情况相似。如图6(a)和图6(b)所示，相对于用100nmkif11sirna转染的mpc，用500nmkif11sirna转染的mpc抑制panc-1增殖超过30％。这些结果与用浓度为100至500nm的kif11sirna转染的mpc对panc-1活性的逐步抑制一致。由于从3.3至0.5nm，对panc-1生存力的直接寡核苷酸抑制效果降低了约30％，我们得出结论，mpc介导的寡核苷酸向靶肿瘤细胞的转移以足够的水平发生，导致肿瘤细胞内的寡核苷酸浓度为0.5-3.3nm。在进一步的实验中，用递增量的kif11sirna(0–500nm)直接转染mpc或panc-1细胞的培养物。panc-1细胞的剂量反应曲线如图24所示，mpc的剂量反应曲线如图25所示。也将pc3细胞与加载有kif11sirna的mpc(500nmkif11)共培养。共培养6天使细胞生长速率降低了约55％(图26)。然后用递增量的kif11sirna(0–500nm)直接转染pc3细胞。剂量反应曲线如图27所示。实施例4:mpc的加载和生存力使用lipofectaminernaimax转染剂(15μl/孔)，利用kif11-fitc-sirna(0–1000nm)转染来自3个供体的mpc。转染后24小时，通过流式细胞术测定荧光标记物在mpc中的积累(图28)。sirna加载到mpc中的最佳浓度测定为ˉ500nm。然后将加载有kif11-fitc-sirna的mpc与panc-1或pc3细胞共培养。在共培养24小时后，测量sirna从加载有kif11-fitc-sirna的mpc向癌细胞的转移。在24小时内，约10％的sirna被转移到癌细胞中，其中转移显示出相对于mpc供体几乎没有可变性(图29)。然后在6孔板中以1.3x105个细胞/孔培养mpc和panc-1细胞。使用lipofectaminernaimax转染试剂(15μl/孔)，用不同浓度的sirna(最终浓度为0-500nm)转染细胞。转染后2天从细胞中收获rna，并使用qrt-pcr(taqman基因表达测定；appliedbiosystems；s03929097_g1用于管家基因甘油醛-3-磷酸脱氢酶(gapdh)，hs00189698_m1用于kif11)评估基因表达。图30和图31显示，kif11sirna种类在mpc和肿瘤细胞中保留它们的功能(即，转染到mpc中并从mpc转移到肿瘤细胞的sirna能够减少kif11的mrna)。实施例5:kif11sirna对mpc和肿瘤细胞生存力的影响将mpc、sjsa1、panc-1、pc3、saos2和snuc2a细胞以25-50％的汇合率涂铺在96孔板中(每个治疗组n＝3个孔)。用100nm的kif11sirna或对照sirna(lipofectamine；rnaimax；sirna序列细节示于上表1中；kif11序列靶标概述于图32中)转染细胞。转染后5天测量细胞生存力，使用对照细胞数据标准化生存力数据(图33)。令人惊讶的是，靶向kif11mrna转录物的5’末端的kif11sirna具有更强的降低肿瘤细胞生存力的作用，特别是在panc-1和saos2细胞系中。例如，靶向kif11mrna转录物3’末端的kif11_13和kif11_15对肿瘤细胞生存力的影响与其他测试的kif11sirna相比相对较低(图33)。还令人惊讶地注意到，kif11_4、kif11_6和kif11_9sirnas持续降低肿瘤细胞的生存力，同时对mpc生存力的影响最小(图33)。实施例6:kif11sirna对mpc和msc中的基因表达的影响将mpc和msc以1.25x106个细胞/孔涂铺在6孔板中，并使用lipofectamine，利用kif11sirna(100nm)进行转染。仅用lipofectamine处理对照组细胞。在细胞处理后48小时收集rna，并使用人clarioms测定(affymetrix)分析整体基因表达。基因表达分析表明，mpc和msc在被kif-11sirna下调的基因方面是相似的(图34；前10个下调的基因)。kif11sirna在mpc中使kif11mrna水平降低约18倍，在msc中使kif11mrna水平降低约20倍。从前10个下调的基因来看，fstl1:mir198、aldh9a1、elk3和sypl1基因在mpc和msc中也都有所减少。结合以上概述的发现，特别是实施例1(其指出mpc和msc都表达cx43和cx40)，基因表达分析进一步支持mpc和msc都可用作寡核苷酸转移到癌细胞的媒介物。本领域技术人员将会理解，在不脱离广泛描述的本公开的精神或范围的情况下，可对如具体实施方案中所示的本公开进行多种变化和/或修改。因此，本实施方案在所有方面都被认为是说明性的而非限制性的。本申请要求2017年11月22日提交的62/589,764的优先权，其公开内容通过引用并入本文。上面讨论的所有出版物整体并入本文。已经包括在本说明书中的对比文件、操作、材料、装置、物品等的任何讨论仅仅是为了提供本公开的上下文。不应被视为承认任何或所有这些事项形成了现有技术基础的一部分，或者是在本申请的每个权利要求的优先权日之前存在的与本公开相关的领域中的公知常识。参考文献ausubeletal.(editors)(1988,includingallupdatesuntilpresent)currentprotocolsinmolecularbiology,greenepub.associatesandwiley-interscience.baderetal.(2011)genether.18:1121-6.brownta(editor)(1991)essentialmolecularbiology:apracticalapproach,volumes1and2,irlpress.coliganetal.(editors)(includingallupdatesuntilpresent)currentprotocolsinimmunology,johnwiley&sons.gloverandhames(editors)(1995&1996)dnacloning:apracticalapproach,volumes1-4,irlpress.griffiths-jones,s.2004nuclacidsres,32,d109-d111.harlowandlane(editors)(1988)antibodies:alaboratorymanual,coldspringharbourlaboratory.kozomaraetal.2013；nuclacidsres,42,d68-d73.lennoxandbehlke(2011)genether.18”1111-20.perbalj(1984)apracticalguidetomolecularcloning,johnwileyandsons.sambrooketal.,(1989)molecularcloning:alaboratorymanual,coldspringharbourlaboratorypress.simmons&torok-storb(1991)blood.78:55-62.序列表<110>mesoblastinternationalsarl<120>细胞组合物及治疗方法<130>526519pct<160>9<170>patentinversion3.5<210>1<211>5101<212>dna<213>人(homosapiens)<400>1agcgcagccattggtccggctactctgtctctttttcaaattgaggcgccgagtcgttgc60ttagtttctggggattcgggcggagacgagattagtgatttggcggctccgactggcgcg120ggacaaacgccacggccagagtaccgggtagagagcggggacgccgacctgcgtgcgtcg180gtcctccaggccacgccagcgcccgagagggaccagggagactccggcccctgtcggccg240ccaagcccctccgcccctcacagcgcccaggtccgcggccgggccttgattttttggcgg300ggaccgtcatggcgtcgcagccaaattcgtctgcgaagaagaaagaggagaaggggaaga360acatccaggtggtggtgagatgcagaccatttaatttggcagagcggaaagctagcgccc420attcaatagtagaatgtgatcctgtacgaaaagaagttagtgtacgaactggaggattgg480ctgacaagagctcaaggaaaacatacacttttgatatggtgtttggagcatctactaaac540agattgatgtttaccgaagtgttgtttgtccaattctggatgaagttattatgggctata600attgcactatctttgcgtatggccaaactggcactggaaaaacttttacaatggaaggtg660aaaggtcacctaatgaagagtatacctgggaagaggatcccttggctggtataattccac720gtacccttcatcaaatttttgagaaacttactgataatggtactgaattttcagtcaaag780tgtctctgttggagatctataatgaagagctttttgatcttcttaatccatcatctgatg840tttctgagagactacagatgtttgatgatccccgtaacaagagaggagtgataattaaag900gtttagaagaaattacagtacacaacaaggatgaagtctatcaaattttagaaaaggggg960cagcaaaaaggacaactgcagctactctgatgaatgcatactctagtcgttcccactcag1020ttttctctgttacaatacatatgaaagaaactacgattgatggagaagagcttgttaaaa1080tcggaaagttgaacttggttgatcttgcaggaagtgaaaacattggccgttctggagctg1140ttgataagagagctcgggaagctggaaatataaatcaatccctgttgactttgggaaggg1200tcattactgcccttgtagaaagaacacctcatgttccttatcgagaatctaaactaacta1260gaatcctccaggattctcttggagggcgtacaagaacatctataattgcaacaatttctc1320ctgcatctctcaatcttgaggaaactctgagtacattggaatatgctcatagagcaaaga1380acatattgaataagcctgaagtgaatcagaaactcaccaaaaaagctcttattaaggagt1440atacggaggagatagaacgtttaaaacgagatcttgctgcagcccgtgagaaaaatggag1500tgtatatttctgaagaaaattttagagtcatgagtggaaaattaactgttcaagaagagc1560agattgtagaattgattgaaaaaattggtgctgttgaggaggagctgaatagggttacag1620agttgtttatggataataaaaatgaacttgaccagtgtaaatctgacctgcaaaataaaa1680cacaagaacttgaaaccactcaaaaacatttgcaagaaactaaattacaacttgttaaag1740aagaatatatcacatcagctttggaaagtactgaggagaaacttcatgatgctgccagca1800agctgcttaacacagttgaagaaactacaaaagatgtatctggtctccattccaaactgg1860atcgtaagaaggcagttgaccaacacaatgcagaagctcaggatatttttggcaaaaacc1920tgaatagtctgtttaataatatggaagaattaattaaggatggcagctcaaagcaaaagg1980ccatgctagaagtacataagaccttatttggtaatctgctgtcttccagtgtctctgcat2040tagataccattactacagtagcacttggatctctcacatctattccagaaaatgtgtcta2100ctcatgtttctcagatttttaatatgatactaaaagaacaatcattagcagcagaaagta2160aaactgtactacaggaattgattaatgtactcaagactgatcttctaagttcactggaaa2220tgattttatccccaactgtggtgtctatactgaaaatcaatagtcaactaaagcatattt2280tcaagacttcattgacagtggccgataagatagaagatcaaaaaaaggaactagatggct2340ttctcagtatactgtgtaacaatctacatgaactacaagaaaataccatttgttccttgg2400ttgagtcacaaaagcaatgtggaaacctaactgaagacctgaagacaataaagcagaccc2460attcccaggaactttgcaagttaatgaatctttggacagagagattctgtgctttggagg2520aaaagtgtgaaaatatacagaaaccacttagtagtgtccaggaaaatatacagcagaaat2580ctaaggatatagtcaacaaaatgacttttcacagtcaaaaattttgtgctgattctgatg2640gcttctcacaggaactcagaaattttaaccaagaaggtacaaaattggttgaagaatctg2700tgaaacactctgataaactcaatggcaacctggaaaaaatatctcaagagactgaacaga2760gatgtgaatctctgaacacaagaacagtttatttttctgaacagtgggtatcttccttaa2820atgaaagggaacaggaacttcacaacttattggaggttgtaagccaatgttgtgaggctt2880caagttcagacatcactgagaaatcagatggacgtaaggcagctcatgagaaacagcata2940acatttttcttgatcagatgactattgatgaagataaattgatagcacaaaatctagaac3000ttaatgaaaccataaaaattggtttgactaagcttaattgctttctggaacaggatctga3060aactggatatcccaacaggtacgacaccacagaggaaaagttatttatacccatcaacac3120tggtaagaactgaaccacgtgaacatctccttgatcagctgaaaaggaaacagcctgagc3180tgttaatgatgctaaactgttcagaaaacaacaaagaagagacaattccggatgtggatg3240tagaagaggcagttctggggcagtatactgaagaacctctaagtcaagagccatctgtag3300atgctggtgtggattgttcatcaattggcggggttccatttttccagcataaaaaatcac3360atggaaaagacaaagaaaacagaggcattaacacactggagaggtctaaagtggaagaaa3420ctacagagcacttggttacaaagagcagattacctctgcgagcccagatcaacctttaat3480tcacttgggggttggcaattttatttttaaagaaaacttaaaaataaaacctgaaacccc3540agaacttgagccttgtgtatagattttaaaagaatatatatatcagccgggcgcggtggc3600tcatgcctgtaatcccagcactttgggaggctgaggcgggtggattgcttgagcccagga3660gtttgagaccagcctggccaacgtggcaaaacctcgtctctgttaaaaattagccgggcg3720tggtggcacactcctgtaatcccagctactggggaggctgaggcacgagaatcacttgaa3780cccaggaagcggggttgcagtgagccaaaggtacaccactacactccagcctgggcaaca3840gagcaagactcggtctcaaaaacaaaatttaaaaaagatataaggcagtactgtaaattc3900agttgaattttgatatctacccatttttctgtcatccctatagttcactttgtattaaat3960tgggtttcatttgggatttgcaatgtaaatacgtatttctagttttcatataaagtagtt4020cttttataacaaatgaaaagtatttttcttgtatattattaagtaatgaatatataagaa4080ctgtactcttctcagcttgagcttacataggtaaatatcaccaacatctgtccttagaaa4140ggaccatctcatgttttttttcttgctatgacttgtgtattttcttgcatcctccctaga4200cttccctatttcgctttctcctcggctcactttctccctttttatttttcaccaaaccat4260ttgtagagctacaaaaggtatcctttcttattttcagtagtcagaattttatctagaaat4320cttttaacacctttttagtggttatttctaaaatcactgtcaacaataaatctaacccta4380gttgtatccctcctttcagt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