本发明属于化学医药领域，具体而言，涉及一种蓝萼甲素衍生物及其制备方法和用途。
背景技术：
恶性肿瘤是当前危害人类生命和健康的严重疾病之一，据世界卫生组织(wto)统计，全世界每年约有600万人被其夺去生命，并把1000万人置于死亡边缘，其引起的死亡率占所有疾病死亡率的第二位，仅次于心血管疾病。我国癌症死亡人数从70年代约70万人，到现在发病人数在120万左右，死亡增至约90万人，且仍呈现急剧上升趋势。
蓝萼甲素(glaucocalyxina,gla)，又名leukameninf，分子式为c20h28o4，分子量：332.43，cas编号：79498-31-0，其结构式为
体内外抗肿瘤实验表明，蓝萼香茶菜甲素对多种人癌瘤细胞株如ce-1、u87、a549、mcf-7、hela、k562、hepg2、nci-h460、kb、leg-3、k562、hl-60等具有显著的抑制增殖作用，特别对非激素依赖性前列腺癌(du-145)、直肠癌(lovo)细胞最为敏感，抗瘤谱广；能抑制lewis肺癌、s180实体型以及hca实体型等实体瘤的生长，明显增加荷s180腹水型和荷hca腹水型小鼠的生命延长率，其抗肿瘤的强弱呈剂量依赖关系。
但是，蓝萼甲素极性小，水溶性差，不适合直接作为药物给药；体外具有较强的抗肿瘤作用，但体内需要大剂量长时间才能产生药效，药物在体内消除快、半衰期短、生物利用度低，尚不能直接作为药物使用。因此在保留药效基团α,β-不饱和环戊酬的前提下，对其7位和14位羟基进行结构修饰，合成抗肿瘤药效更强的衍生物，是一条解决其作为药物存在的缺陷的有效途径。
技术实现要素：
根据本发明的一个方面，提供了一类由以下通式(1)表示的蓝萼甲素衍生物，其对映异构体、非对映异构体、外消旋体及其混合物，以及其药学上可接受的盐、结晶水合物及溶剂合物：
其中，取代基r选自以下基团中的任意一种：c1–6直链或支链烷基、c2–6直链或支链烯基、c2–6直链或支链炔基、c3–6环烷基、-nrarb、硝基、氰基、羟基、卤素；
其中所述取代基ra和rb各自独立地选自氢、c1–6直链或支链烷基、c2–6直链或支链烯基、c2–6直链或支链炔基、c3–6环烷基。
优选地，取代基r选自以下基团中的任意一种：c1–4直链或支链烷基、c2–4直链或支链烯基、c2–4直链或支链炔基、c3–6环烷基、-nrarb；
其中所述取代基ra和rb各自独立地选自氢、c1–4直链或支链烷基、c2–4直链或支链烯基、c2–4直链或支链炔基、c3–6环烷基。
优选地，取代基r选自以下基团中的任意一种：甲基、乙基、正丙基、异丙基、环丙基、乙烯基、烯丙基、正丁基、仲丁基、异丁基、叔丁基、环丁基、环己基、丙烯基、丁烯基、-nrarb；
其中所述取代基ra和rb各自独立地选自甲基、乙基、正丙基、异丙基、环丙基、乙烯基、烯丙基、正丁基、仲丁基、异丁基、叔丁基、环丁基、环己基、丙烯基、丁烯基、环丙基、环丁基。
取代基r1和r2各自独立地选自为氢、c1–6直链或支链烷基、c2–6直链或支链烯基、c2–6直链或支链炔基、c3–6环烷基、含有一个或多个取代基或未取代的四元至十元芳基、硝基、羟基，或者r1和r2彼此连接形成含有一个或多个取代基或未取代的四元至十元脂肪族环；
优选地，取代基r1和r2各自独立地选自为氢、c1–4直链或支链烷基、c2–4直链或支链烯基、c2–4直链或支链炔基、c3–6环烷基、含有1至4个取代基或未取代的四元至六元芳基、硝基、羟基，或者r1和r2彼此连接形成含有1至4个取代基或未取代的四元至六元脂肪族环；
优选地，所述含有一个或多个取代基的四元至十元芳基和含有一个或多个取代基或未取代的四元至十元脂肪族环中的取代基选自：c1–6直链或支链烷基、c2–6直链或支链烯基、c2–6直链或支链炔基、c3–6环烷基、c1–6直链或支链烷氧基、c3–6环烷氧基、硝基、氰基、羟基、卤素。
优选地，所述含有一个或多个取代基的四元至十元芳基和含有一个或多个取代基或未取代的四元至十元脂肪族环中的取代基选自：c1–4直链或支链烷基、c2–4直链或支链烯基、c2–4直链或支链炔基、c3–6环烷基、c1–4直链或支链烷氧基、c3–6环烷氧基、硝基、氰基、羟基、卤素。
优选地，所述含有一个或多个取代基的四元至十元芳基和含有一个或多个取代基或未取代的四元至十元脂肪族环中的取代基选自：甲基、乙基、正丙基、异丙基、环丙基、乙烯基、烯丙基、正丁基、仲丁基、异丁基、叔丁基、环丁基、环己基、丙烯基、丁烯基、环丙基、环丁基、甲氧基、乙氧基、正丙氧基、异丙氧基、丁氧基、环丙氧基、环丁氧基、硝基、氰基、羟基、卤素。
优选地，所述卤素为氟、氯、溴或碘。
优选地，取代基r1和r2各自独立地选自为氢、甲基、乙基、正丙基、异丙基、环丙基、乙烯基、烯丙基、正丁基、仲丁基、异丁基、叔丁基、环丁基、环己基、丙烯基、丁烯基、环丙基、环丁基、甲氧基、乙氧基、正丙氧基、异丙氧基、丁氧基、环丙氧基、环丁氧基、苯基、甲基苯基、乙基苯基、丙基苯基、甲氧基苯基、乙氧基苯基、丙氧基苯基、二甲基苯基、二乙基苯基、二丙基苯基、三甲基苯基、三乙基苯基、三丙基苯基、硝基苯基、氰基苯基、一氯苯基、二氯苯基、三氯苯基、四氯苯基、一氟苯基、二氟苯基、三氟苯基、四氟苯基、硝基、氰基、羟基、氟、氯或溴；或者r1和r2彼此连接形成环丙基、甲基环丙基、乙基环丙基、环丁基、甲基环丁基、乙基环丁基、环戊基、甲基环戊基、甲基环戊基、环己基、甲基环己基或乙基环己基。
优选地，根据本发明的所述由通式(1)表示的蓝萼甲素衍生物选自以下化合物中：
所述通式(1)表示的蓝萼甲素衍生物的药学上可接受的盐为所述通式(1)表示的蓝萼甲素衍生物与有机酸或无机酸形成的药学上可接受的盐，所述无机酸包括盐酸、氢溴酸、硫酸、硝酸、胺基磺酸和磷酸等，以及所述有机酸包括柠檬酸、酒石酸、乳酸、丙酮酸、乙酸、苯磺酸、对甲苯磺酸、甲磺酸、萘磺酸、乙磺酸、萘二磺酸、马来酸、苹果酸、丙二酸、富马酸、琥珀酸、丙酸、草酸、三氟乙酸、硬酯酸、扑酸、羟基马来酸、苯乙酸、苯甲酸、水杨酸、谷氨酸、抗坏血酸、对胺基苯磺酸、2-乙酰氧基苯甲酸和羟乙磺酸等。或者通式(1)表示的蓝萼甲素衍生物与丙酸、草酸、丙二酸、琥珀酸、富马酸、马来酸、乳酸、苹果酸、酒石酸、柠檬酸、天冬氨酸或谷氨酸形成酯后再与无机碱形成的钠盐、钾盐、钙盐、铝盐或铵盐；或者通式(1)表示的蓝萼甲素衍生物与有机碱形成的甲胺盐、乙胺盐或乙醇胺盐；或者通式(1)表示的蓝萼甲素衍生物与赖氨酸、精氨酸、鸟氨酸形成酯后再与盐酸、氢溴酸、氢氟酸、硫酸、硝酸、磷酸形成的对应的无机酸盐或与甲酸、乙酸、苦味酸、甲磺酸和乙磺酸形成的对应的有机酸盐。
根据本发明的另一个方面，提供了一种蓝萼甲素衍生物的制备方法，所述制备方法的反应式如下并包括以下步骤：
1)用氮气置换反应器中气氛三次，将蓝萼甲素和催化剂加入反应器中，然后加入适量溶剂，搅拌使蓝萼甲素溶解；
将反应物rh溶解于适量溶剂中，然后加入反应器中，室温下密闭反应，约3至6小时，得到通式(2)表示的产物；
待反应完成后，通过减压蒸馏除去溶剂，石油醚和乙酸乙酯重结晶得到产品通式(2)表示的化合物；
2)用氮气置换反应器中气氛三次，将通式(2)的化合物和相应的反应物按照摩尔比1:1至1:3的比例加入反应器中，然后加入适量溶剂溶解，加入催化量的催化剂(如对甲苯磺酸)加热回流反应1h至3h，冷却至室温，加入弱碱性水溶液，氯仿提取，干燥，蒸干有机层得粗产物，乙酸乙酯-石油醚重结晶，得到产品通式(1)表示的化合物。
其中步骤1)中所述催化剂选自氢氧化钠、甲醇钠、乙醇钠、叔丁醇钾、三乙胺、吡啶、1,8-二氮杂二环十一碳-7-烯(dbu)、碳酸铯、碳酸钠、碳酸钾、碳酸氢钠、碳酸氢钾中的任意一种或多种。所述催化剂的用量为蓝萼甲素重量的5wt％至10wt％。
优选地，所述催化剂的用量为蓝萼甲素重量的6wt％至8wt％。
优选地，所述反应物rh中的取代基r与上面通式(1)中的定义相同。
优选地，所述反应物rh与蓝萼甲素的摩尔比为1:1至20:1，优选为2:1至15:1，更优选为5:1至8:1。
优选地，所述溶剂选自醇、酮、醚或酯中的一种或几种；所述醇选自甲醇、乙醇、异丙醇、叔丁醇中的一种或几种；所述酮选自丙酮、甲乙酮中的一种或几种；所述醚选自乙醚、二氧六环、异丙醚、甲基叔丁基醚、四氢呋喃中的一种或几种；并且所述酯选自乙酸甲酯、乙酸乙酯、乙酸丙酯、乙酸丁酯中的一种或几种。
优选地，步骤2)中所述碱性溶液为碳酸氢钠溶液、碳酸钠溶液或碳酸钾溶液等。
根据本发明的另一个方面，提供了一种由通式(1)表示的蓝萼甲素衍生物在制备抗肿瘤药物中的用途。
根据所述由通式(1)表示的蓝萼甲素衍生物及其盐在制备抗肿瘤药物中的用途，其中所述肿瘤包括(但不限于)脑胶质瘤、前列腺癌、肺癌、子宫癌、、肝癌、乳腺癌、宫颈癌、食管癌绒毛膜癌、直肠癌：皮肤癌症(如黑色素瘤)、肾癌、睾丸癌、淋巴系统癌症、消化道癌症、脾癌、卵巢癌、结肠癌、头颈部癌、口腔癌、咽喉癌、鼻咽癌、胰腺癌、膀胱癌、神经母细胞瘤等。
所述由通式(1)表示的蓝萼甲素衍生物及其盐在自身免疫性疾病药物中的应用，所述自身免疫性疾病包括系统性红斑狼疮、银屑病。
根据本发明的另一个方面，提供了一种药物组合物，所述药物组合物包括治疗有效量的由通式(1)表示的蓝萼甲素衍生物和至少一种赋形剂、稀释剂或载剂。
有益效果
本发明的蓝萼甲素衍生物，其对映异构体、非对映异构体、外消旋体及其混合物，以及其药学上可接受的盐、结晶水合物及溶剂合物水溶性良好，且生物利用度更高。体外生物学实验证明本发明的蓝萼甲素衍生物具有更高的抗肿瘤活性，对自身免疫性疾病具有良好的效果。
具体实施方式
以下，将详细地描述本发明。在进行描述之前，应当理解的是，在本说明书和所附的权利要求书中使用的术语不应解释为限制于一般含义和字典含义，而应当在允许发明人适当定义术语以进行最佳解释的原则的基础上，根据与本发明的技术方面相应的含义和概念进行解释。因此，这里提出的描述仅仅是出于举例说明目的的优选实例，并非意图限制本发明的范围，从而应当理解的是，在不偏离本发明的精神和范围的情况下，可以由其获得其他等价方式或改进方式。
本发明所提供的由通式(1)表示的蓝萼甲素衍生物和包含该蓝萼甲素衍生物的药物组合物可以是多种形式，如片剂、胶囊、粉剂、糖浆、溶液状、悬浮液和气雾剂等，并可以存在于适宜的固体或液体的载体或稀释液中以及适宜的用于注射或滴注的消毒器具中。
本发明的药物组合物的各种剂型可按照药学领域的常规制备方法制备。其制剂配方的单位剂量中包含0.05-200mg通式(1)的蓝萼甲素衍生物，优选地，制剂配方的单位剂量中包含0.1mg-100mg通式(1)蓝萼甲素衍生物。
本发明的由通式(1)表示的蓝萼甲素衍生物和药物组合物可对哺乳动物临床使用，包括人和动物，可以通过口、鼻、皮肤、肺、或者胃肠道等的给药途径。最优选为口服。最佳优选日剂量为0.01-200mg/kg体重，一次性服用，或0.01-100mg/kg体重分次服用。不管用何种服用方法，个人的最佳剂量应依据具体的治疗而定。通常情况下是从小剂量开始，逐渐增加剂量一直到找到最适合的剂量。
本发明中，术语“有效量”可指为实现预期的效果所需的剂量和时段的有效的量。此有效量可能因某些因子而产生不同的变化，如疾病的种类或治疗时疾病的病症、被施用的特定标的器官的构造、病人个体大小、或疾病或症状的严重性。本领域具有通常知识者不需要过度实验即可凭经验决定特定化合物的有效量。
典型的配方是通过混合本发明的通式(1)表示的化合物及载体、稀释剂或赋形剂制备而成。适宜的载体、稀释剂或赋形剂是本领域技术人员所熟知的，包括诸如碳水化合物、蜡、水溶性及/或可膨胀性聚合物、亲水性或疏水性物质、明胶、油、溶剂、水等物质。
所用的特定载体、稀释剂或赋形剂，将根据本发明的化合物的使用方式和目的而定。一般以本领域技术人员认为可安全有效地给药至哺乳类动物的溶剂为基础而选择溶剂。一般而言，安全的溶剂是无毒性含水溶剂诸如水，以及其他可溶于水或与水混溶的无毒性溶剂。适宜的含水溶剂包括水、乙醇、丙二醇、聚乙二醇(如peg400、peg300)等中的一种或多种。该配方也可包括一种或多种缓冲剂、安定剂、表面活性剂、润湿剂、润滑剂、乳化剂、悬浮剂、防腐剂、抗氧化剂、遮光剂、助流剂、加工助剂、着色剂、增甜剂、香料剂、调味剂或其它已知的添加剂，使该药物以可被接受的形式制造或使用。
本发明所述的如式(1的蓝萼甲素衍生物与至少一种其它药物的组合使用时，两种药物或多种药物可以分开使用也可以组合使用，优选以药学组合物的形式给药。本发明的如式(1)的蓝萼甲素衍生物或药物组合物能以任一已知的口服、静脉注射、直肠给药、阴道给药、透皮吸收、其它局部或全身给药形式，分开或一起给药至受试者。
这些药物组合物亦可含有一种或多种缓冲剂、安定剂、表面活性剂、润湿剂、润滑剂、乳化剂、悬浮剂、防腐剂、抗氧化剂、遮光剂、助流剂、加工助剂、着色剂、增甜剂、香料剂、调味剂或其它已知的添加剂，使该药物组合物以可被接受的形式制造或使用。
本发明药物优选口服给药途径。用于口服给药的固态剂型可包括胶囊、片剂、粉末或颗粒制剂。在固态剂型中，本发明的蓝萼甲素衍生物或药物组合物与至少一种惰性赋形剂、稀释剂或载剂混合。适宜的赋形剂、稀释剂或载剂包括诸如柠檬酸钠或磷酸二钙的物质，或淀粉、乳糖、蔗糖、甘露糖醇、硅酸等；粘合剂如羧甲基纤维素、褐藻酸盐、明胶、聚乙烯基吡咯烷酮、蔗糖、阿拉伯胶等；湿润剂如甘油等；崩解剂如琼脂、碳酸钙、马铃薯或木薯淀粉、褐藻酸、特定的络合硅酸盐、碳酸钠等；溶液阻滞剂如石蜡等；吸收促进剂如季铵化合物等；吸附剂如高岭土、膨润土等；润滑剂如滑石、硬脂酸钙、硬脂酸镁、固态聚乙二醇、月桂基硫酸钠等。在胶囊与片剂的情况下，该剂型亦可包括缓冲剂。类似类型的固态组合物亦可作为软式与硬式填充明胶胶囊中的填料，其使用乳糖以及高分子量聚乙二醇等作为赋形剂。
用于口服给药的液态剂型包括药学上可接受的乳化液、溶液、悬浮液、糖浆液与酏剂。除了本发明的蓝萼甲素衍生物或其组合物之外，该液态剂型可含有本领域中常用的惰性稀释剂，诸如水或其他溶剂；增溶剂及乳化剂诸如乙醇、异丙基醇、碳酸乙酯、乙酸乙酯、苄醇、苯甲酸苄基酯、丙二醇、1,3-丁二醇、二甲基甲酰胺；油类(如棉籽油、落花生油、玉米胚芽油、橄榄油、蓖麻油、芝麻油等)；甘油；四氢糠基醇；聚乙二醇与脱水山梨糖醇的脂肪酸酯；或这些物质中的几种的混合物等。
除了这些惰性稀释剂之外，该组合物也可包括赋形剂，诸如润湿剂、乳化剂、悬浮剂、增甜剂、调味剂与香料剂中的一种或多种。
就悬浮液而言，除了本发明的由通式(1)表示的蓝萼甲素衍生物或组合物之外，可进一步含有载剂诸如悬浮剂，如乙氧基化异硬脂醇、聚氧乙烯山梨醣醇、脱水山梨醣醇酯、微晶纤维素、偏氢氧化铝、膨润土、琼脂及黄耆胶，或这些物质中几种的混合物等。
本发明的由通式(1)表示的蓝萼甲素衍生物或药物组合物可采用其它局部给药剂型给药，包括膏、粉末、喷剂及吸入剂。该药物可在无菌条件下与药学上可接受的赋形剂、稀释剂或载剂以及所需要的任一防腐剂、缓冲剂或推进剂混合。眼用配方、眼用油膏、粉末与溶液，亦意欲涵盖于本发明的范围内。
以下实施例仅是作为本发明的实施方案的例子列举，并不对本发明构成任何限制，本领域技术人员可以理解在不偏离本发明的实质和构思的范围内的修改均落入本发明的保护范围。除非特别说明，以下实施例中使用的试剂和仪器均为市售可得产品。
制备实施例1：原料a的合成
将332mg(1.0mmol)蓝萼甲素溶解至40ml甲醇中，室温搅拌，氮气保护，加入2.0m的二甲胺甲醇溶液1ml，在10℃下搅拌8小时，白色固体析出，抽滤，甲醇洗涤，甲醇减压旋干，甲醇中所得固体进行中压分离(洗脱剂为二氯甲烷和乙酸乙酯)，与析出固体合并共得白色固体原料a351.2mg，产率93.2％。1hnmr(dmso-d6)δppm：6.20(s,1h),5.86(s,1h),4.83(s,1h),3.91(s,1h),3.39(m,2h),3.14(m,2h),2.61～2.82(m,8h),2.32(m,1h),1.31～1.65(m,9h),1.05(m,3h),0.98(d,6h).ms-eim/z(％):378(m+1,100).
制备实施例2：原料b的合成
合成方法同原料a的合成，以蓝萼甲素和二乙基胺为原料。
1hnmr(dmso-d6)δppm：6.23(s,1h),5.80(s,1h),4.75(s,1h),3.85(s,1h),3.43(m,2h),3.12(m,2h),2.59～2.85(m,12h),2.31(m,1h),1.28～1.62(m,9h),1.03(m,3h),1.01(m,6h).ms-eim/z(％):406(m+1,100).
实施例1：化合物1的合成
将100mg(0.27mmol)原料a溶于20ml甲苯中，加入催化量对甲苯磺酸，加入质量百分比为40％的乙醛水溶液(1ml)，回流5小时，待反应完全后，冷却至室温，分层，甲苯层以饱和碳酸氢钠水溶液和饱和盐水洗，无水硫酸钠干燥，旋干后得化合物1，白色固体97.3mg,产率89.4％。
1hnmr(dmso-d6)δppm:7.02(q,1h),6.21(s,1h),5.83(s,1h),4.83(s,1h),3.91(s,1h),3.39(m,2h),2.62～2.81(m,8h),2.32(m,1h),1.30～1.67(m,12h),1.03(m,3h),0.99(d,6h).ms-eim/z(％):404(m+1,100).
实施例2：化合物2的合成
将100mg(0.27mmol)原料a溶于15ml丙酮中，加入催化量对甲苯磺酸，室温搅拌3小时，减压旋干，剩余物加入二氯甲烷溶解，饱和碳酸氢钠溶液洗三次，饱和盐水洗三次，无水硫酸钠干燥，得化合物2白色固体98.3mg,产率88.9％。
1hnmr(dmso-d6)δppm:6.20(s,1h),5.83(s,1h),4.83(s,1h),3.91(s,1h),3.39(m,2h),2.62～2.81(m,8h),2.32(m,1h),1.30～1.67(m,15h),1.03(m,3h),0.99(d,6h).ms-eim/z(％):418(m+1,100).
实施例3：化合物3的合成
合成方法同实施例2，以原料a和环己酮为原料。
1hnmr(dmso-d6)δppm:6.20(s,1h),5.82(s,1h),4.85(s,1h),3.92(s,1h),3.41(m,2h),2.62～2.82(m,8h),2.31(m,1h),1.33～1.73(m,19h),1.03(m,3h),0.99(d,6h).ms-eim/z(％):458(m+1,100).
实施例4：化合物4的合成
合成方法同实施例2，以原料a和4-甲基环己酮为原料。
1hnmr(dmso-d6)δppm:6.20(s,1h),5.82(s,1h),4.85(s,1h),3.92(s,1h),3.41(m,2h),2.62～2.82(m,8h),2.31(m,1h),1.33～1.73(m,21h),1.03(m,3h),0.97(d,6h).ms-eim/z(％):472(m+1,100).
实施例5：化合物5的合成
将100mg(0.27mmol)原料a溶于20ml甲苯中，加入苯甲醛0.5ml,加入催化量对甲苯磺酸，回流搅拌5小时，减压旋干，剩余物加入二氯甲烷溶解，饱和碳酸氢钠溶液洗三次，饱和盐水洗三次，无水硫酸钠干燥，粗品以中压分离柱分离纯化(洗脱剂：二氯甲烷+甲醇)得化合物5，白色固体,104.5mg,产率83.2％。
1hnmr(dmso-d6)δppm:7.45(d,2h),7.32(d,2h),7.25(t,1h),6.95(s,1h),6.21(s,1h),5.83(s,1h),4.83(s,1h),3.91(s,1h),3.39(m,2h),2.62～2.81(m,8h),2.32(m,1h),1.30～1.65(m,9h),1.03(m,3h),0.99(d,6h).ms-eim/z(％):466(m+1,100).
实施例6：化合物6的合成
合成方法同实施例5，以原料a和对甲苯甲醛为原料。
1hnmr(dmso-d6)δppm:7.44(d,2h),7.32(d,2h),6.95(s,1h),6.21(s,1h),5.83(s,1h),4.83(s,1h),3.91(s,1h),3.39(m,2h),3.0(s,3h),2.62～2.81(m,8h),2.32(m,1h),1.30～1.65(m,9h),1.03(m,3h),0.99(d,6h).ms-eim/z(％):480(m+1,100).
实施例7：化合物7的合成
合成方法同实施例5，以原料a和对氰基苯甲醛为原料。
1hnmr(dmso-d6)δppm:7.54(d,2h),7.30(d,2h),6.95(s,1h),6.21(s,1h),5.83(s,1h),4.83(s,1h),3.91(s,1h),3.39(m,2h),2.62～2.81(m,8h),2.32(m,1h),1.30～1.65(m,9h),1.03(m,3h),0.99(d,6h).ms-eim/z(％):491(m+1,100).
实施例8：化合物8的合成
合成方法同实施例5，以原料a和对氯苯甲醛为原料。
1hnmr(dmso-d6)δppm:7.49(d,2h),7.31(d,2h),6.95(s,1h),6.21(s,1h),5.83(s,1h),4.83(s,1h),3.91(s,1h),3.39(m,2h),2.62～2.81(m,8h),2.32(m,1h),1.30～1.65(m,9h),1.03(m,3h),0.99(d,6h).ms-eim/z(％):500(m+1,100).
实施例9：化合物9的合成
合成方法同实施例5，以原料a和对甲氧基苯甲醛为原料。
1hnmr(dmso-d6)δppm:7.40(d,2h),7.19(d,2h),6.95(s,1h),6.21(s,1h),5.83(s,1h),4.83(s,1h),3.91(s,1h),3.39(m,2h),3.80(s,3h),2.62～2.81(m,8h),2.32(m,1h),1.30～1.65(m,9h),1.03(m,3h),0.99(d,6h).ms-eim/z(％):496(m+1,100).
实施例10：化合物10的合成
合成方法同实施例5，以原料a和间甲基苯甲醛为原料。
1hnmr(dmso-d6)δppm:7.48(t,1h),7.23(s,1h),7.17(d,2h),6.94(s,1h),6.21(s,1h),5.83(s,1h),4.83(s,1h),3.91(s,1h),3.39(m,2h),2.83(s,3h),2.62～2.81(m,8h),2.32(m,1h),1.30～1.65(m,9h),1.03(m,3h),0.99(d,6h).ms-eim/z(％):480(m+1,100).
实施例11：化合物11的合成
合成方法同实施例5，以原料a和间硝基苯甲醛为原料。
1hnmr(dmso-d6)δppm:8.25(s,1h),8.13(d,1h),7.75(d,1h),7.64(t,1h),6.94(s,1h),6.21(s,1h),5.93(s,1h),4.83(s,1h),3.91(s,1h),3.39(m,2h),2.83(s,3h),2.62～2.81(m,8h),2.32(m,1h),1.30～1.65(m,9h),1.03(m,3h),0.99(d,6h).ms-eim/z(％):511(m+1,100).
实施例12：化合物12的合成
合成方法同实施例5，以原料a和2,6-二甲基苯甲醛为原料。
1hnmr(dmso-d6)δppm:7.38(t,1h),7.20(d,2h),6.91(s,1h),6.21(s,1h),5.71(s,1h),4.83(s,1h),3.91(s,1h),3.39(m,2h),2.83(s,3h),2.62～2.81(m,14h),2.32(m,1h),1.30～1.65(m,9h),1.03(m,3h),0.99(d,6h).ms-eim/z(％):494(m+1,100).
实施例13：化合物13的合成
合成方法同实施例5，以原料a和2,6-二氯苯甲醛为原料。
1hnmr(dmso-d6)δppm:7.58(t,1h),7.56(d,2h),6.91(s,1h),6.21(s,1h),5.76(s,1h),4.83(s,1h),3.91(s,1h),3.39(m,2h),2.83(s,3h),2.62～2.81(m,8h),2.32(m,1h),1.30～1.65(m,9h),1.03(m,3h),0.99(d,6h).ms-eim/z(％):535(m+1,100).
实施例14：化合物14的合成
合成方法同实施例5，以原料a和2,6-二氟苯甲醛为原料。
1hnmr(dmso-d6)δppm:7.58(t,1h),7.56(d,2h),6.91(s,1h),6.21(s,1h),5.76(s,1h),4.83(s,1h),3.91(s,1h),3.39(m,2h),2.83(s,3h),2.62～2.81(m,8h),2.32(m,1h),1.30～1.65(m,9h),1.03(m,3h),0.99(d,6h).ms-eim/z(％):501(m+1,100).
实施例15：化合物15的合成
合成方法同实施例5，以原料a和2,4,6-三甲基苯甲醛为原料。
1hnmr(dmso-d6)δppm:7.16(s,2h),6.90(s,1h),6.21(s,1h),5.76(s,1h),4.83(s,1h),3.91(s,1h),3.39(m,2h),2.83(s,3h),2.62～2.81(m,8h),2.35(s,9h),2.32(m,1h),1.30～1.65(m,9h),1.03(m,3h),0.99(d,6h).ms-eim/z(％):508(m+1,100).
实施例16：化合物16的合成
合成方法同实施例5，以原料a和对氟苯甲醛为原料。
1hnmr(dmso-d6)δppm:7.48(d,2h),7.29(d,2h),6.911(s,1h),6.21(s,1h),5.83(s,1h),4.83(s,1h),3.91(s,1h),3.39(m,2h),2.62～2.81(m,8h),2.32(m,1h),1.30～1.65(m,9h),1.03(m,3h),0.97(d,6h).ms-eim/z(％):484(m+1,100).
实施例17：化合物17的合成
合成方法同实施例5，原料b和丙酮为原料。
1hnmr(dmso-d6)δppm:6.22(s,1h),5.84(s,1h),4.82(s,1h),3.91(s,1h),3.39(m,2h),2.62～2.81(m,12h),2.32(m,1h),1.31～1.67(m,15h),1.03(m,3h),0.93(d,6h).ms-eim/z(％):446(m+1,100).
实施例18：化合物18的合成
合成方法同实施例5，以原料b和苯甲醛为原料。
1hnmr(dmso-d6)δppm:7.40(d,2h),7.31(d,2h),7.25(t,1h),6.95(s,1h),6.21(s,1h),5.82(s,1h),4.78(s,1h),3.91(s,1h),3.39(m,2h),2.62～2.81(m,12h),2.32(m,1h),1.30～1.65(m,9h),1.02(m,3h),0.96(d,6h).ms-eim/z(％):494(m+1,100).
实验实施例1：根据本发明的蓝萼甲素衍生物抗肿瘤活性测试
细胞采用人肝癌细胞hepg2，人大细胞肺癌细胞nci-h460，人急性(早幼)粒白细胞hl-60，宫颈癌细胞hela。
四种细胞分别经过消化、计数分别制成5×104个/ml的细胞悬液，96孔板中每孔加入100μl细胞悬液(每孔5×103个细胞)，置于37℃，5％co2培养箱中培养24小时，用培养基稀释药物至所需浓度(浓度为10μmol/l),每孔加入100μl含药培养基，同时设阴性对照组和阳性对照组。96孔板置于37℃，5％co2培养箱中培养48小时。然后，每孔加入20μlmtt(5mg/ml)染色，继续培养4小时，弃去培养基，每孔加入150μldmso溶解，λ＝490nm测od值，计算ic50值，见表1。
表1：根据本发明的蓝萼甲素衍生物的抗肿瘤活性测试数据