一种利用人胚肾上皮细胞重组表达Lp-PLA2的工艺方法与流程

文档序号:17814295发布日期:2019-06-05 21:25阅读:来源:国知局

技术特征:

技术总结
本发明提供一种利用人胚肾上皮细胞重组表达磷脂酶A2(Lp‑PLA2)的工艺方法,包括以下步骤:首先将Lp‑PLA2基因片段采用密码子优化软件进行优化,通过PCR合成Lp‑PLA2基因片段,然后将合成的基因片段插入到表达载体中,构建Lp‑PLA2表达质粒,利用转染试剂介导Lp‑PLA2表达质粒转入人胚肾细胞(HEK293)中,从而瞬时表达可溶性Lp‑PLA2蛋白,最后通过亲和层析方法提取获得重组表达的Lp‑PLA2蛋白。本发明提供的方法可获得具有翻译后修饰的生物功能活性Lp‑PLA2蛋白,同时提高Lp‑PLA2在人胚肾细胞(HEK293)中表达产量,这对于Lp‑PLA2蛋白的功能研究和免疫诊断试剂盒开发带来了很好的应用前景。

技术研发人员:戴瞻
受保护的技术使用者:南京欧凯生物科技有限公司
技术研发日:2019.03.18
技术公布日:2019.06.04
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