一种与大黄鱼抗副溶血弧菌关联的SNP位点、其筛选方法和应用与流程

文档序号:19792830发布日期:2020-01-24 15:43阅读:来源:国知局

技术特征:

1.一种与大黄鱼抗副溶血弧菌相关的单核苷酸多态性(snp)位点,其特征在于,所述snp位点位于大黄鱼如seqidno:1所示的ctrp9基因cdna序列上,且其1147位碱基处存在一个a或g的等位基因突变。

2.权利要求1所述snp位点的筛选方法,其特征在于,包括以下步骤:

(ⅰ)用副溶血弧菌感染大黄鱼幼鱼后,提取其rna并反转录成cdna,其核苷酸序列如seqidno:1所示;

(ⅱ)设计如seqidno:2所述的正向引物和如seqidno:3所示的反向引物的引物对,以步骤(ⅰ)中cdna为模板进行pcr扩增反应;

(ⅲ)经琼脂糖凝胶检测,对步骤(ⅱ)中目的条带清晰无杂带的pcr产物进行测序,筛选得到所述snp位点。

3.根据权利要求2所述snp位点的筛选方法,其特征在于,步骤(ⅱ)中,所述pcr扩增反应体系为:2×mix12.5ul、浓度均为10um的所述正向引物和反向引物各1ul、所述cdna模板1ul和无菌水9.5ul。

4.根据权利要求2所述snp位点的筛选方法,其特征在于,步骤(ⅱ)中,所述pcr扩增反应的程序依次为:95℃预变性5min,94℃变性30s、64℃退火30s、72℃延伸30s(45个循环),72℃终延伸10min。

5.权利要求1所述与大黄鱼抗副溶血弧菌相关的snp位点在抗副溶血弧菌大黄鱼遗传育种上的用途。

当前第2页1 2 3 
网友询问留言 已有0条留言
  • 还没有人留言评论。精彩留言会获得点赞!
1