生物扩散室的制作方法

相关申请的引证

本申请要求享有2018年1月24日提交的标题为“biodiffusionchamber”的美国临时专利申请序列号62/621,295的优先权和权益，其公开通过引证以其全部内容结于本文中。

本公开涉及医疗设备和药物领域。更具体地，本公开涉及一种适合于插入和取出受试者身体的生物扩散室。

序列表

本申请包含序列表，其已经以ascii格式电子提交，并在此通过引证以其全部内容引入。所述ascii副本于2019年1月23日创建，命名为imvx_006_01wo_seqlist_st25.txt，大小为6kb。

背景技术：

可植入生物扩散室(biodiffusionchamber)用于各种应用，包括全身和局部药物递送、基因治疗和自体细胞疫苗接种。生物扩散室可以在手术期间植入受试者体内，并且在治疗有效量的时间之后取出。

本领域已知的生物扩散室通常难以取出，增加取出期间对患者造成不必要伤害的机会。例如，本领域已知的生物扩散室在取出期间必须用镊子抓住其整个直径，增加错误引导镊子和刺破腔室的风险。位于患者体内深处的生物扩散室可能需要手指取出(digitalremoval)，使患者感到不适。因此，在本领域中仍然需要构造为利于腔室从受试者中取出的改进的生物扩散室。

技术实现要素：

在一些实施方式中，配置为插入和取出身体的生物扩散室包括腔室主体、第一半渗透膜和第二半渗透膜。腔室主体包括第一表面和第二表面。该腔室主体限定中空腔，其配置为至少暂时容纳一定量的组合物，例如，至少包括细胞和反义分子的混合物的组合物。该腔室主体的一部分配置为接合于配置为使得能够从身体中取出该生物扩散室的取出构件。第一半渗透膜配置为连接至该腔室主体的第一表面，且第二半渗透膜配置为连接至腔室主体的第二表面。在一些实施方式中，第一半渗透膜和第二半渗透膜中的每一个对反义分子是可渗透的且对细胞是不可渗透的。

在一些实施方式中，生物扩散室配置为插入和取出受试者，该生物扩散室包括腔室主体，该腔室主体包括第一表面、第二表面和凸缘(flange)，该凸缘限定配置为接收取出构件的至少一部分的开口。该腔室主体限定中空腔和与该中空腔流体连通的注入端口，其中该注入端口配置为将组合物，例如包括至少一定量的生物因子的组合物，输送到中空腔中。该生物扩散室还包括与第一表面接触的第一半渗透膜，与第二表面接触的第二半渗透膜，固定地连接于第一表面的第一定位器(retainer)，使得第一半渗透膜的一部分置于第一定位器和第一表面之间，固定地连接于第二表面的第二定位器，使得一部分第二半渗透膜设置于该第二定位器和第二表面之间。在一些实施方式中，第一半渗透膜和第二半渗透膜对生物因子是可渗透的且对细胞是不可渗透的。

在一些实施方式中，一种制造生物扩散室的方法包括：(i)形成腔室主体，该腔室主体限定中空腔和与该中空腔流体连通的注入端口，该腔室主体具有第一表面、第二表面和凸缘，该凸缘限定开口；(ii)将第一半渗透膜与该腔室主体的第一表面接触；(iii)将第二半渗透膜与该腔室主体的第二表面接触；(iv)将第一定位器连接于该腔室主体的第一表面，使得第一半渗透膜的一部分固定地置于第一表面和第一定位器之间；(v)将第二定位器连接于该腔室主体的第二表面，使得第二半渗透膜的一部分固定地置于第二表面和第二定位器之间；(vi)在将第一定位器连接至第一表面并将第二定位器连接于第二表面之后，经由注入端口将组合物(例如，包括细胞和反义分子的混合物的组合物)输送至中空腔中；和(vii)在输送之后密封该注入端口。

在一些实施方式中，一种治疗对其需要的患者的方法包括向该患者给予本公开的生物扩散室。在一些实施方式中，该患者患有癌症，如神经胶质瘤或其他实体瘤。

附图说明

以下附图构成本说明书的部分，并被包括在内以进一步图示说明本公开的某些方面。结合这些附图并结合本文给出的具体实施方式的详细描述，就可以更好地理解本公开。

图1是根据一个实施方式的适合于插入和取出受试者的生物扩散室的透视示意图。

图2是根据一个实施方式的适合于插入和取出受试者的生物扩散室的透视示意图。

图3是根据一个实施方式的适于插入和取出受试者的生物扩散室的透视图。

图4是图3的生物扩散室的分解透视图。

图5-7是包括于图3的生物扩散室中的腔室主体的俯视图、后部透视图和侧视图。

图8是示出注入端口的图5-7的腔室主体的剖视图。

图9和10是包括于图3的生物扩散室中的第一定位器和第二定位器的透视图。

图11是图3的生物扩散室的剖视图。

图12和图13是配置为用于图3的生物扩散室的塞子的侧面透视图和后视图。

图14是图12所示的塞子的剖视图。

图15是插入图8所示的腔室主体的注入端口中的图12的塞子的剖视图。

图16是示出制造根据一个实施方式的生物扩散室的方法的流程图。

具体实施方式

在一些实施方式中，该生物扩散室包括：(i)腔室主体，该腔室主体限定中空腔并且具有第一表面和第二表面；(ii)连接于该第一表面的第一半渗透膜；(iii)连接于该第二表面的第二半渗透膜；(iii)适于取出和/或辅助从人体取出该生物扩散室的过程的元件和/或特征。在一些实施方式中，该元件和/或特征是腔室主体中的孔(或该腔室主体的限定该孔的表面)，该孔从腔室的第一表面延伸至第二表面。本公开的生物扩散室可以用于各种应用，包括但不限于，全身和局部药物递送，基因疗法，自体细胞疫苗接种和/或类似方法。

根据以下详细描述，本公开的其他目的、特征和/或优点将变得显而易见。然而，应该理解的是，该详细说明和具体实例虽然指示了本公开的具体实施方式，但仅以举例说明的方式给出。根据该详细描述，本公开的精神和范围内的各种改变和/或修改对于本领域技术人员将变得显而易见。

在一些实施方式中，配置为插入和取出身体的生物扩散室包括腔室主体、第一半渗透膜和第二半渗透膜。该腔室主体包括第一表面和第二表面。该腔室主体限定中空腔，该中空腔配置为至少暂时容纳一定量的组合物(例如，至少包括细胞和反义分子的混合物的组合物)。该腔室主体的一部分配置为接合于配置为使得能够从身体中取出生物扩散室的取出构件。该第一半渗透膜配置为连接于该腔室主体的第一表面，且第二半渗透膜配置为连接于该腔室主体的第二表面。第一半渗透膜和第二半渗透膜中的每一个对反义分子是可渗透的且对细胞是不可渗透的。

在一些实施方式中，配置为插入和取出身体的生物扩散室包括腔室主体、第一半渗透膜、第二半渗透膜、第一定位器和第二定位器。该腔室主体包括第一表面、第二表面和凸缘。该凸缘限定开口，其配置为容纳至少一部分取出构件。该腔室主体限定中空腔和与该中空腔流体连通并配置为将一定量的组合物，如至少包括生物因子的组合物，输送到中空腔中的注入端口。该第一半渗透膜与第一表面接触，并且第一定位器固定地连接于第一表面，使得第一半渗透膜的一部分设置于该第一定位器和该第一表面之间。第二半渗透膜与第二表面接触，并且第二定位器固定地连接于第二表面，使得第二半渗透膜的一部分设置于第二定位器和第二表面之间。该第一半渗透膜和该第二半渗透膜中的每一个对至少一部分组合物是可渗透的且对细胞是不可渗透的。

在一些实施方式中，一种制造生物扩散室的方法包括：形成腔室主体，使得该腔室主体(i)限定中空腔和与该中空腔流体连通的注入端口并且(ii)具有第一表面、第二表面和限定开口的凸缘。将第一半渗透膜放置与该腔室主体的第一表面接触，将第二半渗透膜放置与该腔室主体的第二表面接触。第一定位器连接于腔室主体的第一表面，使得第一半渗透膜的一部分固定地设置于第一表面和第一定位器之间。第二定位器连接于腔室主体的第二表面，使得第二半渗透膜的一部分固定地设置于第二表面和第二定位器之间。在第一定位器连接于第一表面且第二定位器连接于第二表面之后，一定量的组合物(例如，至少包括细胞和反义分子的混合物的组合物)通过注入端口输送至中空腔中。在输送该组合物之后将注入端口密封。

如本说明书中所用，单数形式“一个”、“引证”和“该”除非上下文另外明确指出，均包括复数指示物。因此，例如，术语“构件”旨在是指单个构件或构件的组合，“材料”旨在是指一种或多种材料或其组合。

本文列出的所有范围旨在包括端点值。例如，5-10的整数范围包括值5、6、7、8、9和10。术语“约”和“大约”是指所指示的值的正负10％的范围。例如，约0.5包括0.45和0.55，约10包括9-11，约1000包括900-1100。

当与几何构造和/或几何关系结合使用时，术语“基本上”旨在表达如此定义的结构名义上是几何构造结构和/或几何关系。作为一个实例，被描述为“基本上环形”的腔室主体的一部分旨在表达的是，尽管该部分的环形(例如，环形形状)是期望的，但在“基本上环形”部分中还可能发生一些变化。这种变化可以由制造公差或其他实际考虑因素(例如，施加到该腔室主体的压力或力)引起。因此，由术语“基本上”修饰的几何构造结构包括，例如，几何构造结构的正负10％的公差内的这种几何性质。

腔室主体

腔室主体可以包括，包含任何生物相容性材料，如一种或多种生物相容性聚合物，和/或由其组成。生物相容性聚合物可以是直链聚合物，支链聚合物，交联聚合物，网络聚合物等。例如，生物相容性聚合物可以包括，包含以下，和/或由以下构成：聚(丙交酯)，聚(乙交酯)，聚(丙交酯-共-乙交酯)，聚(乳酸)，聚(乙醇酸)，聚碳酸酯，聚酯酰胺，聚酐，聚原酸酯，聚(二噁烷酮)，聚己内酯，聚氨酯，聚氰基丙烯酸酯及其共混物和共聚物。生物相容性聚合物的实例包括聚(丙交酯-共-乙交酯)(plga)，泊洛沙姆，聚乙烯吡咯烷酮(聚维酮或pvp)，pvp乙基纤维素，吡咯烷酮羧酸钠，聚乙二醇(peg)，聚(乙烯醇)(pva)，聚(d,l-丙交酯-共-乙交酯)，聚(n-异丙基丙烯酰胺)(pipa)，聚乳酸(plla或pla)，peg-pla，聚氯乙烯(pvc)，聚四氟乙烯(ptfe)，聚醚砜(pes)，聚乙烯(pe)，聚醚醚酮(peek)，聚砜(ps)，聚丙烯(pp)，聚(甲基丙烯酸甲酯)(pmma)，聚(n-异丙基丙烯酰胺)(nipaam)，明胶，胶原蛋白，淀粉或其共混物或共聚物。在一些具体实施方式中，腔室主体包括pmma和/或至少部分地由pmma构成。在其他实施方式中，该腔室主体包括pmma和/或由纯pmma构成。在其他实施方式中，该腔室主体包括聚碳酸酯和/或由聚碳酸酯和/或基本上纯的聚碳酸酯构成。

在一些实施方式中，该生物扩散室基本上不含杂质或添加剂，添加剂包括，但不限于，例如抗氧化剂，着色剂，固化剂和/或增塑剂。在一些实施方式中，腔室主体包含小于5％，3％，1％，0.75％，0.5％，0.25％，0.1％，0.05％或0.01％的杂质或添加剂。在一些实施方式中，腔室主体包含大于0.0001％其小于5％，3％，1％，0.75％，0.5％，0.25％，0.1％，0.05％或0.01％的杂质或添加剂。在具体实施方式中，腔室主体包含大于0.0001％且小于1％的杂质或添加剂。

在一些实施方式中，腔室主体包括和/或包含遮光器。遮光剂可以包括，包含以下和/或由以下构成：例如，二氧化钛；乳白玻璃；云母晶体；铝、钙、钡和镁的氟化物；氧化锡；氧化锆；氧化锌；钡；和/或钨。在一些实施方式中，腔室主体包括和/或包含少于5％，3％，1％，0.75％，0.5％，0.25％，0.1％，0.05％，0.01％或更少的遮光剂。在一些实施方式中，该腔室主体包括和/或包含大于0.0001％且小于5％，3％，1％，0.75％，0.5％，0.25％，0.1％，0.05％或0.01％的遮光剂。在具体实施方式中，该腔室主体包括和/或包含大于0.0001％且小于1％的遮光剂。

腔室主体可以具有任何形状，如球形，圆柱形，环形或环状形状，矩形，正方形，多边形或任何其他合适的形状。在一些具体实施方式中，腔室主体具有环形形状。在进一步的实施方式中，腔室主体基本上是环形的，除了从腔室主体延伸出的部分(或腔室主体的表面或侧面)以辅助该生物扩散室从受试者(例如，从人体)中取出。从腔室主体延伸出的部分可以形成和/或包含凸缘、突片、夹子、环、钩结构或其他抓握结构或其组合。在一些实施方式中，从腔室主体延伸出的部分可以限定孔、开孔、开口、狭缝和/或空隙。在具体实施方式中，从腔室主体延伸出的部分和/或由此限定的孔、开孔、开口、狭缝和/或空隙可以辅助该生物扩散室从受试者中取出。

在一些实施方式中，腔室主体包括和/或包含第一表面和第二表面。在一些实施方式中，第一表面(例如，顶表面)和第二表面(例如，底表面)基本平行。在一些实施方式中，第一表面和第二表面之间的距离可以为约3.0毫米(mm)至约10.0mm。例如，第一表面和第二表面之间的距离可以为约3.0mm，4.0mm，5.0mm，6.0mm，7.0mm，8.0mm，9.0mm或10.0mm，或其之间的任何合适的分数。在某些实施方式中，第一表面与第二表面之间的距离为约4.5mm。在一些实施方式中，第一表面和第二表面的至少一个包括，包含和/或限定凹口。在一些实施方式中，第一表面和第二表面均包括，包含和/或限定凹口。在一些实施方式中，第一表面和/或第二表面可以具有配置为有利于生物扩散室的使用和/或性能的任何合适和/或期望的表面光洁度。例如，在一些实施方式中，第一和/或第二表面(或该腔室主体的任何其他表面)可以具有配置为有利于和/或增强半渗透膜与第一和第二表面的连接(例如，可以增强半渗透膜与第一和第二表面之间的摩擦和/或附着力)的粗糙、凹坑、多孔、刻痕和/或其他的非光滑表面。

在一些实施方式中，第一表面和第二表面中的至少一个限定至少一个凹槽，其配置为辅助第一半渗透膜与第一表面和/或第二半渗透膜与第二表面的连接和/或附接。在一些实施方式中，凹槽可以辅助一个或多个制造过程、步骤和/或方法。在一些实施方式中，第一表面的凹槽和第二表面的凹槽可以分别接收第一定位器的一部分和第二定位器的一部分，这可以辅助第一定位器和第二定位器连接至第一表面和第二表面。第一定位器和第二定位器进而将第一和第二半渗透膜分别保持和/或连接于腔室主体的第一和第二表面。

腔室主体可以限定中空腔。在一些实施方式中，中空腔基本上呈圆柱形，其直径约5.0mm至约20.0mm。例如，中空腔的直径可以为约5.0mm，6.0mm，7.0mm，8.0mm，9.0mm，10.0mm，11.0mm，12.0mm，13.0mm，14.0mm，15.0mm，16.0mm，17.0mm，18.0mm，19.0mm或20.0mm，或两者之间的任何合适分数。在某些实施方式中，中空腔具有约10.0mm的直径。在其他实施方式中，中空腔可以是任何合适的形状、尺寸和/或构造。例如，中空腔可以是球形，椭圆形，正方形，矩形，多边形，梯形和/或任何合适的不规则形状。

在一些实施方式中，中空腔配置为容纳预定体积的流体。在一些实施方式中，中空腔具有100.0微升(μl)至1.0ml的容积。在一些具体实施方式中，中空腔具有300.0μl至400.0μl的容积。在其他具体实施方式中，中空腔具有340.0μl至360.0μl的容积。在某些实施方式中，中空腔具有约350.0μl的容积。在一些实施方式中，中空腔具有范围为约100.0μl至约10.0ml的容积。

在一些实施方式中，中空腔盛装或配置为容纳组合物。在一些实施方式中，组合物包含至少一种生物因子。在一些实施方式中，组合物包含细胞，例如，肿瘤细胞。在一些实施方式中，组合物包含一种或多种反义分子。在一些实施方式中，组合物包含细胞和反义分子的混合物。在一些实施方式中，组合物包含一种或多种蛋白质。蛋白质可以选自，例如酶，免疫介体，细胞因子，生长因子，抗体，抗原，信令蛋白，结构蛋白及其片段。在一些实施方式中，组合物包含细胞组分(例如，微泡，例如外来体)、微rna或肽。在一些实施方式中，组合物包含一种或多种小分子药物，如一种或多种信令或免疫途径的激动剂或拮抗剂(例如，toll样受体激动剂)。

在一些实施方式中，该腔室主体还包括，包含和/或限定注入端口。注入端口可以从腔室主体的外表面延伸至内表面。注入端口与中空腔流体连通，并且可以用于向中空腔中注入流体和/或包含至少一种生物因子的组合物(例如，包含细胞、反义分子、缓冲液和/或任何合适的生物因子的混合物，小分子药物和/或类似物的组合物)。在一些实施方式中，注入端口是延伸穿过例如腔室主体的侧壁的孔。在一些实施方式中，注入端口是直径为约0.3mm至8.0mm的孔。在一些实施方式中，注入端口是具有约1.0mm至约8.0mm直径的孔。例如，注入端口可以具有约1.0，约2.0，约3.0，约4.0，约5.0，约6.0，约7.0或约8.0mm，或其之间的任何合适的分数的直径。在一些实施方式中，注入端口是具有约0.3mm至约1.0mm的直径的孔。例如，注入端口可以具有约0.3，约0.4，约0.5，约0.6，约0.7，约0.8，约0.9或约1.0mm的直径。在一些实施方式中，注入端口是具有约1.0mm至约2.0mm直径的孔。例如，注入端口可以具有约1.0mm，约1.1mm，约1.2mm，约1.3mm，约1.4mm，约1.5mm，约1.6mm，约1.7mm，约1.8mm，约1.9mm，或约2.0mm的直径。在具体实施方式中，注入端口是具有直径约1.7mm的孔。在一些实施方式中，注入端口是具有至少部分基于移液管、移液管尖端和/或配置为将材料、产品和/或因子输送到中空腔中的任何其他合适的装置的尺寸的直径的孔。在其他实施方式中，注入端口可以是任何合适的端口、阀、半透性构件或膜等。

在一些实施方式中，在将流体或包括至少生物因子的组合物注入到中空腔中之后，注入端口被密封或至少暂时密封。在一些实施方式中，注入端口被可逆地或不可逆地密封。在一些实施方式中，注入端口使用pmma、橡胶、蜂蜡、石蜡或其混合物密封。在一些实施方式中，注入端口使用骨蜡(例如，蜂蜡、石蜡和棕榈酸异丙酯的无菌混合物)密封。在一些实施方式中，注入端口经由由任何合适的材料构成和/或包括其的密封构件、阻塞件、柱塞、塞子等密封。

在一些实施方式中，腔室主体由单件(例如，单件工件或单件成形组件)形成或由其构成。在一些实施方式中，腔室主体是单个模制结构。在一些实施方式中，腔室主体是单个聚合物模制结构。在一些实施方式中，腔室主体通过连接多于一件，如2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12件或更多件组装。在一些实施方式中，每个件使用医学级胶水、超声焊接等连接至另一件。

腔室主体可以根据几种不同方法形成。在一些实施方式中，腔室使用3d打印形成。在一些实施方式中，腔室主体可以通过注射模制形成。3d打印方法和注射模制方法对于本领域技术人员是已知的。

取出元件

本公开的生物扩散室可以进一步包括、包含、限定和/或以其他方式连接于一个或多个适于从受试者(例如，动物，哺乳动物，人，鼠等)体内取出生物扩散室的元件和/或特征。在一些实施方式中，适于取出生物扩散室的元件和/或特征包括连接于腔室主体或作为其一部分的环、钩、缝线、凸缘、翼片、夹子、孔或其他抓握结构或其组合。在一些实施方式中，这种元件和/或特征通过腔室主体中的孔或开口连接于生物扩散室主体。例如，缝线或绳可以穿过或插入通过孔或开口，并且可选地通过孔或开口系上。该元件和/或特征可以起到允许用户通过该元件和/或特征(例如，环，钩，缝线，凸缘，翼片、夹子或其他抓握结构)抓住生物扩散室，将其拉动，并由此从植入部位(例如，人体部分如腹部)取出生物扩散室的作用。

在一些实施方式中，适于取出生物扩散室的元件和/或特征包括和/或限定从腔室主体的第一表面延伸或穿过，并到达或穿过腔室主体的第二表面的腔室主体中的孔或开口。在一些实施方式中，孔或开口可以具有约1.0mm至约1.0cm的直径。例如，孔可以具有1.0mm，2.0mm，3.0mm，4.0mm，5.0mm，6.0mm，7.0mm，8.0mm，9.0mm或1.0cm，或其之间的任何合适的分数的直径。在一些实施方式中，孔或开口的直径范围为约4.0mm至约6.0mm。在其他实施方式中，孔或开口具有约0.1mm-约0.9mm的直径。例如，孔或开口可以具有0.1mm，0.2mm，0.3mm，0.4mm，0.5mm，0.6mm，0.7mm，0.8mm或0.9mm的直径。在一些实施方式中，孔或开口可以具有半圆形或不规则横截面形状(例如，沿着平行于该腔室主体的第一表面和/或第二表面的平面截取)。在一些这样的实施方式中，孔或开口可以具有约1.0mm至约1.0cm的截面积。例如，孔或开口可以具有约1.0mm²，2.0mm²，3.0mm²，4.0mm²，5.0mm²，6.0mm²，7.0mm²，8.0mm²，9.0mm²或1.0mm²的截面积，或其间任何合适的分数的截面积。在某些实施方式中，孔或开口可以具有约8.0mm²的截面积。

在一些实施方式中，适于取出生物扩散室的元件和/或特征包括和/或包含连接于腔室主体的表面和/或从该腔室主体的表面延伸的凸缘。在一些实施方式中，凸缘从腔室主体的侧面或侧壁突出。在一些实施方式中，凸缘的高度小于生物扩散室的高度。在一些实施方式中，凸缘的高度是生物扩散室高度的10％，20％，30％，40％，50％，60％，70％，80％或90％。在一些实施方式中，凸缘包括和/或限定在凸缘的第一表面和凸缘的第二表面之间延伸的孔。在一些实施方式中，该孔相对于凸缘的第一表面或第二表面中至少一个以基本垂直的方向延伸。在一些实施方式中，凸缘包括和/或限定从凸缘的第一侧面横向延伸或横向延伸穿过凸缘的第一侧面并到达或穿过凸缘的第二侧面的孔。在一些实施方式中，该孔具有约1.0mm至约1.0cm的直径。例如，该孔可以具有约1.0mm，2.0mm，3.0mm，4.0mm，5.0mm，6.0mm，7.0mm，8.0mm，9.0mm或1.0cm，或其之间的任何合适的分数的直径。在一些实施方式中，该孔直径范围为约4.0mm至约6.0mm。在其他实施方式中，该孔具有0.1mm至0.9mm的直径。例如，该孔可以具有0.1mm，0.2mm，0.3mm，0.4mm，0.5mm，0.6mm，0.7mm，0.8mm或0.9mm的直径。在一些实施方式中，孔或开口可以具有半圆形或不规则的横截面形状(例如，沿着平行于该腔室主体的第一表面和/或第二表面的平面截取)。在一些这样的实施方式中，孔或开口可以具有约1.0mm至约1.0cm的截面积。例如，孔或开口可以具有约1.0mm²，2.0mm²，3.0mm²，4.0mm²，5.0mm²，6.0mm²，7.0mm²，8.0mm²，9.0mm²或1.0mm²的截面积，或其之间的任何合适分数的截面积。在某些实施方式中，孔或开口可以具有约8.0mm²的截面积。在一些实施方式中，当凸缘在横贯于腔室主体或凸缘的纵向轴线的方向上和/或在平行于腔室主体和/或凸缘的纵向轴线的方向上延伸时，凸缘在其尺寸上是渐缩的。

在一些实施方式中，适于取出生物扩散室的元件和/或特征是穿过或插入腔室主体中的孔或凸缘中的孔的缝线。在一些实施方式中，缝线是2-0vicryl缝线。在一些情况下，该设计特征允许通过抓住缝线尾部取回更深的生物扩散室植入物(例如，相对于先前的实施方式和/或没有这种设计特征的实施方式)，从而允许外科医生在不利用(例如，bonney或adson)镊子的情况下抓住生物扩散室。在一些情况下，该设计特征可以降低在取出期间刺穿一个或多个膜的可能性，该刺穿继而可能导致组合物(例如，细胞)的不期望部分泄漏出生物扩散室并进入受试者体内。在一些情况下，该设计特征可以允许多个生物扩散室串在一起或至少临时连接在一起，这有助于从受试者中取出和/或可以限制一个或多个生物扩散室在取出期间和/或之后留在受试者体内的可能性。

适用于取出生物扩散室的元件和/或特征可以位于腔室主体上有助于从受试者(例如，人体)内取出生物扩散室的任何位置。例如，适于取出生物扩散室的元件和/或特征可以位于腔室主体的第一表面、第二表面或侧面上(例如，除了第一或第二表面之外的表面)。在一些实施方式中，适于取出生物扩散室的元件和/或特征位于腔室主体的注入端口附近。在一些实施方式中，适于取出生物扩散室的元件和/或特征位于远离注入端口和/或另外与注入端口间隔开的位置。在一些实施方式中，腔室主体是大致环形的，并且适于取出生物扩散室的元件和/或特征置于远离注入端口(例如，与该注入端口成大约90°，180°或270°和/或任何其他合适角度)。在一些实施方式中，腔室主体为大致环形，适于取出生物扩散室的元件和/或特征是和/或限定腔室主体中的孔，该孔从腔室主体的第一表面延伸至第二表面，并且适于取出生物扩散室的元件和/或特征位于注入端口对面(例如，与注入端口成约180°)。在一些实施方式中，腔室主体为大致环形，适于取出生物扩散室的元件和/或特征是凸缘，该凸缘包括和/或限定从凸缘的第一表面至第二表面延伸穿过凸缘的孔。凸缘和适于取出生物扩散室的元件和/或特征位于腔室主体的注入端口对面(例如，与该注入端口成约180°)。在其他实施方式中，腔室主体可以具有任何合适的形状，适于取出生物扩散室的元件和/或特征是凸缘，该凸缘包括和/或限定延伸穿过凸缘从凸缘的第一表面延伸到第二表面的孔，并且适用于取出生物扩散室的元件和/或特征相对于腔室主体的注入端口位于任何合适的角度位置之处或之内。

半渗透膜

本公开的生物扩散室包括和/或包含至少一个连接于腔室主体表面的半渗透膜。在一些实施方式中，本文描述的生物扩散室包括和/或包含连接于腔室主体的第一表面(例如，顶表面)的第一半渗透膜和连接于第二表面(例如，底表面)的第二半渗透膜。在一些实施方式中，腔室主体的中空腔由腔室主体的内表面、第一半渗透膜的表面和第二半渗透膜的表面共同限定和/或容纳于其内。在一些实施方式中，进入和/或离开中空腔可以限制于穿过注入端口、第一半渗透膜或第二半渗透膜。在一些实施方式中，第一半渗透膜和第二半渗透膜包括，包含相同材料和/或由相同材料形成或构成。在其他实施方式中，第一半渗透膜和第二半渗透膜包括，包含不同材料和/或由不同材料形成或构成。在其他实施方式中，生物扩散室包括连接于腔室主体的第一表面或第二表面中的一个的单个半渗透膜。在这样的实施方式中，腔室主体与半渗透膜所连接的表面相对的表面是封闭的或实心的表面(例如，不限定开口)。因此，在这样的实施方式中，输送到生物扩散室中的部分组合物经由单个半渗透膜扩散。

半渗透膜可以包括，包含任何合适的塑料、ptfe(例如，teflontm)、聚酯和/或任何惰性或生物相容性材料和/或由其形成或构成。在一些实施方式中，这种惰性材料可以是坚固的，柔性的，并且能够经受化学处理、灭菌和/或辐射照射。在一些实施方式中，半渗透膜是由milliporesigma制造的膜。

在一些实施方式中，半渗透膜是多孔的，以在一旦植入时允许选择因子(例如，药物和/或生物制品)在腔室和受试者(例如，患者，动物，哺乳动物，人，鼠等)之间的交换、进入、流出、扩散和/或穿过。在一些实施方式中，半渗透膜限定具有允许小分子通过但不允许细胞或其他相对大的分子通过的直径的孔(即，细胞或其他相对大的分子不能离开或进入限定的中空腔)。在一些实施方式中，孔的直径允许核酸和其他化学物质(例如，由细胞产生的细胞因子)扩散出生物扩散室，但不允许细胞在生物扩散室和其中植入生物扩散室的受试者之间穿行。在一些实施方式中，半渗透膜的孔具有约0.25μm或更小的直径。在某些实施方式中，孔具有不大于约0.25μm的直径。在具体实施方式中，该孔具有约0.1μm的直径。在具体实施方式中，孔的直径范围为约0.1μm至约0.25μm。换句话说，半渗透膜可以包括具有范围为约0.1μm至约0.25μm的不同和/或变化的直径的孔。在一些实施方式中，孔的直径大于约0.25μm且小于约25μm。例如，孔的直径可以为约0.5μm，约0.75μm，约1μm，约2μm，约3μm，约4μm，约5μm，约6μm，约7μm，约8μm，约9μm，约10μm，约11μm，约12μm，约13μm，约14μm，约15μm，约16μm，约17μm，约18μm，约19μm，约20μm，约21μm，约22μm，约23μm或约24μm。在一些实施方式中，该孔的直径为约0.25μm至约1μm，约1μm至约10μm或约10μm至约25μm。

制作生物扩散室的方法

在一些情况下，一种制造本公开的生物扩散室的方法包括提供腔室主体和一个或多个半渗透膜。半渗透膜可以切割以匹配腔室主体的第一和/或第二表面的形状和/或尺寸。在一些实施方式中，半渗透膜切割以匹配至少由腔室主体限定的中空腔的形状和/或尺寸。在一些实施方式中，半渗透膜切割为适配于腔室主体的第一和/或第二表面上的或由腔室主体的第一和/或第二表面限定的凹口内。在一些实施方式中，一个或多个半渗透膜具有大于腔室主体的第一表面和/或第二表面的尺寸或面积，并且切割为一旦与之连接，适配第一表面和/或第二表面的尺寸和/或形状。这样的设置可以允许一部分半渗透膜覆盖和/或适应第一表面和/或第二表面上的和/或由第一表面和/或第二表面限定的一个或多个特征(例如，一个或多个凸起、脊、凹痕、凹槽，狭槽等)。

半渗透膜可以以任何合适的方式连接至腔室主体。在一些实施方式中，例如，半渗透膜使用粘合剂(例如，医用级胶水)连接于腔室主体。在一些实施方式中，医用级胶水包括，包含乙烯单体或聚合物，如α-氰基丙烯酸酯、硅酮胶水或pmma，和/或由其构成。在其他实施方式中，半渗透膜使用超声波焊接连接于腔室主体。进行超声焊接的方法和设备对于本领域技术人员是已知的。

在一些实施方式中，第一半渗透膜连接至生物扩散室的第一表面，且第二半渗透膜连接至生物扩散室的第二表面。在一些实施方式中，第一半渗透膜连接至生物扩散室的第一表面，并至少部分设置于第一凹口、凹槽、狭槽等内，且第二半渗透膜连接至生物扩散室的第二表面，并至少部分设置于第二凹口、凹槽、狭槽等内。在这样的实施方式中，至少一部分半渗透膜可以与第一表面基本上齐平，且至少一部分第二半渗透膜可以与第二表面基本上齐平。

在一些实施方式中，半渗透膜使用机械紧固件、连接器、夹具、定位器、压缩构件等连接至腔室主体。例如，生物扩散室可以包括被紧固、连接和/或固定于腔室主体的第一表面的第一定位器和被紧固、连接和/或固定于腔室主体第二表面的第二定位器。在这样的实施方式中，第一半渗透膜设置于第一表面的至少一部分上和/或放置为与第一表面的至少一部分接触，并随后将第一定位器(例如，通过粘合剂，超声焊接，过盈配合或搭扣配合，螺纹连接等)紧固、连接和/或固定于第一表面上，使得第一半渗透膜设置于第一表面和第一固定器之间。同样，第二半渗透膜设置于第二表面的至少一部分上和/或与第二表面的至少一部分接触，并随后将第二定位器紧固、连接和/或固定于第二表面上，使得第二半渗透膜设置于第二表面和第二定位器之间。因此，第一定位器和第二定位器可以配置为将第一半渗透膜和第二半渗透膜分别保持于分别相对于腔室主体的第一表面和第二表面的固定位置。换句话说，第一定位器和第二定位器可以连接至腔室主体以将第一半渗透膜和第二半渗透膜固定地连接至腔室主体。

在一些实施方式中，半渗透膜使用如机械紧固件或夹持装置和超声焊接的技术和/或方法的组合而连接于腔室主体。在一些实施方式中，第一和第二半渗透膜可以以基本上相同的方式连接于腔室主体。在其他实施方式中，第一半渗透膜可以通过第一方法或第一方法组合连接至腔室主体的第一表面，而第二半渗透膜可以通过第二方法或第二方法组合(例如，不同于第一方法或第一方法组合)连接于腔室主体的第二表面。

生物扩散室的制剂和使用

本公开的生物扩散室适于插入和取出受试者。在一些实施方式中，受试者是动物。在一些实施方式中，受试者是哺乳动物。在一些实施方式中，受试者是人类。在一些实施方式中，受试者是小鼠。

在一些实施方式中，一个或多个生物扩散室植入受试者体内的所关注部位。在一些实施方式中，所关注的部位是患病部位。在一些实施方式中，所关注的部位与患病部位远离、分开和/或间隔开。

在一些实施方式中，一个或多个生物扩散室手术植入受试者体内。在一些实施方式中，一个或多个生物扩散室植入受试者腹部。在某些实施方式中，一个或多个生物扩散室植入受试者的直肌鞘中。在一些情况下，1-50个腔室植入受试者中。例如，1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24，25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49，或50个生物扩散室植入受试者体内。

在一些实施方式中，在治疗有效的时间量之后，一个或多个生物扩散室从受试者体内取出。在某些情况下，治疗有效时间量可以为约3小时至约72小时。在一些情况下，治疗有效时间量为约3小时，约6小时，约12小时，约24小时，约36小时，约48小时，约60小时，约72小时或更多或其间的任何时间或时间分数。在一些实施方式中，治疗有效时间量大于约72小时，大于约96小时，大于约1周，大于约1个月，大于约3个月，大于约6个月，或大于约1年。在一些实施方式中，腔室无限期地植入受试者体内，或直到受试者对腔室产生不良反应为止。通常，腔室植入约15小时至约30小时，或约24小时至约72小时。在一些具体实施方式中，20个腔室植入约40小时至约50小时。

本公开的生物扩散室可以用于许多目的，包括但不限于，全身和局部药物递送、基因疗法、自体细胞疫苗接种等。在植入受试者之前，可以将各种材料组合物插入生物扩散室的中空腔中和/或至少暂时容纳于生物扩散室的中空腔中。这样的组合物可以包括至少一种或多种生物学因子。例如，组合物可以包括和/或可以是细胞、反义分子、缓冲液和/或任何其他合适的生物因子的混合物。在一些实施方式中，此类组合物可以包含细胞、多种不同反义分子、缓冲液、小药物分子和/或任何其他合适的材料、产物、药物或因子的混合物。这种组合物可以通过注入端口(如上)插入生物扩散室的中空腔中。在所有所关注的材料都添加到生物扩散室中之后，而在生物扩散室植入受试者体内之前，可以密封注入端口。在一些实施方式中，注入端口使用pmma、橡胶、蜂蜡或石蜡或其混合物密封。在一些实施方式中，注入端口使用骨蜡密封。

在一些实施方式中，注入端口使用阻塞件、塞子、柱塞、插入物和/或闭塞构件密封。这种阻塞件等可以包括pmma、橡胶、硅树脂和/或配置为弹性变形的任何合适的生物相容性材料，和/或可以由其构成。在一些实施方式中，这种阻塞件等可以配置为与腔室主体至少限定一部分注入端口的至少一个表面一起形成基本不透流体的密封。在一些实施方式中，在所关注的材料添加到生物扩散室中之后，可以将这种阻塞件等固定地和/或不可取出地插入到注入端口中。在其他实施方式中，在所关注的材料已经添加到达到生物扩散室中之后，可以将这种阻塞件等可取出地插入到注入端口中。

在一些实施方式中，在植入之前，将包含至少治疗有效量的反义分子的组合物插入和/或输送到生物扩散室中。在一些实施方式中，反义分子的治疗有效量为约1.0微克(μg)至约5.0μg。例如，治疗有效量可以为约1.0μg，约2.0μg，约3.0μg，约4.0μg，约5.0μg，约6.0μg，约7.0μg，约8.0μg，约9.0μg或约10.0μg。在一些实施方式中，反义分子的治疗有效量为约5.0μg至约50.0μg。在一些实施方式中，反义分子的治疗有效量为约50.0μg至约100.0μg。在一些实施方式中，反义分子的治疗有效量为约10.0μg至约500.0μg。在一些实施方式中，反义分子的治疗有效量为约100.0μg至约500.0μg。在一些实施方式中，反义分子的治疗有效量为约500.0μg至约1.0毫克(mg)。在一些实施方式中，反义分子的治疗有效量为约1.0mg至约3.0mg。在一些实施方式中，反义分子的治疗有效量为约3.0mg至约5.0mg。在一些实施方式中，反义分子的治疗有效量为约5.0mg至约10.0mg。在一些实施方式中，反义分子的治疗有效量为约1.0μg至约10.0mg。

在一些实施方式中，反义分子是反义寡脱氧核苷酸(as-odn)。在一些实施方式中，反义分子包含修饰的磷酸酯主链。在一些实施方式中，磷酸酯主链修饰使反义核酸更耐受核酸酶降解。在某些实施方式中，修饰是反义(lockedantisense)。在其他实施方式中，修饰是硫代磷酸酯连接。在某些实施方式中，反义含有一个或多个硫代磷酸酯连接。在某些实施方式中，硫代磷酸酯连接通过赋予核酸酶抗性而稳定化反义分子，从而增加其半衰期。在一些实施方式中，反义可以是部分硫代磷酸酯连接的。例如，反义的最高约1％，至多约3％，至多约5％，至多约10％，至多约20％，至多约30％，至多约40％，至多约50％，至多约60％，至多约70％，至多约80％，至多约90％，至多约95％或至多约99％(或其间的任何百分比或分数)可以是硫代磷酸酯连接的。在一些实施方式中，反义是完全硫代磷酸酯连接的。在其他实施方式中，硫代磷酸酯连接基可以与磷酸二酯连接基交替出现。在某些实施方式中，反义具有至少一个末端硫代磷酸酯单磷酸酯。

在一些实施方式中，反义分子包含一个或多个cpg基序。在其他实施方式中，反义分子不包含cpg基序。在某些方面中，一个或多个cpg基序被甲基化。在其他方面中，一个或多个cpg基序未甲基化。在某些实施方式中，当反义分子给予于受试者时，一个或多个未甲基化的cpg基序会引发先天免疫响应。

在某些实施方式中，反义分子包含至少一个末端修饰或“封端(cap)”。封端可以是5'和/或3'封端结构。如本文所用，术语“封端”或“末端封端”包括寡核苷酸的任一末端处的化学修饰(相对于末端核糖核苷酸)，并且包括5'末端的最后两个核苷酸与3'末端的最后两个核苷酸之间的连接处的修饰。封端结构可以增加反义分子对核酸外切酶的抗性而不损害与靶序列或细胞机制的分子相互作用。此类修饰可以基于其在体外或体内的效力增强选择。封端可以存在于5'端(5'封端)或3'端(3'封端)，或可以存在于两端。在某些实施方式中，5'和/或3'封端独立地选自硫代磷酸酯单磷酸酯、脱碱基残基(部分)、硫代磷酸酯连接基、4'-硫代核苷酸、碳环核苷酸、二硫代磷酸酯连接基、反向核苷酸或反向脱碱基部分(2'-3'或3'-3')、二硫代磷酸酯单磷酸酯和甲基膦酸酯部分。当是封端结构的一部分时，硫代磷酸酯或二硫代磷酸酯连接基通常位于5'端的两个末端核苷酸与3'端的两个末端核苷酸之间。

在一些实施方式中，反义分子还可以包含一个或多个对乙氧基骨架修饰，如2016年10月14日提交的美国专利号9,744,187中公开的，其公开内容通过引证以其全部内容结合于本文中。在一些实施方式中，反义分子的核酸主链包含至少一个对乙氧基主链连接基。例如，反义分子的至多约1％，至多约3％，至多约5％，至多约10％，至多约20％，至多约30％，至多约40％，至多约50％，至多约60％，至多约70％，至多约80％，至多约90％，至多约95％或至多约99％可以是对乙氧基连接的。

在一些实施方式中，反义分子靶向胰岛素样生长因子1受体(igf-1r)的表达。igf-1r是酪氨酸激酶细胞表面受体，与胰岛素受体具有70％的同源性。当被其配体(igf-i，igf-ii和胰岛素)激活时，其调节广泛的细胞功能，包括增殖、转化和细胞存活。igf-1r在恶性组织中可能发生的与锚定无关的病症中的生长期间产生作用。

在某些实施方式中，反义分子针对生长因子或生长因子受体如，例如，igf-1r的dna或rna。

在某些实施方式中，反义是针对igf-1r的脱氧核苷酸(igf-1rasodn)。igf-1r的全长编码序列(seqidno：1)提供于，例如，2016年4月11日提交的wipo专利公开号wo2016/164916中，其公开内容通过引证以其全部内容结合于本文中。

在某些实施方式中，igf-1rasodn包含与igf-1r信号序列互补的核苷酸序列，包含rna或dna。igf-1r的信号序列是30个氨基酸的序列。在其他实施方式中，igf-1rasodn包含与部分igf-1r信号序列互补的核苷酸序列，包含rna或dna。在一些实施方式中，igf-1rasodn包含与igf-1r的密码子1-309互补的核苷酸序列，包含rna或dna。在其他实施方式中，igf-1rasodn包含与igf-1r的密码子1-309中的部分互补的核苷酸序列，其包含rna或dna。

在某些实施方式中，igf-1rasodn是至少约5个核苷酸，至少约10个核苷酸，至少约15个核苷酸，至少约20个核苷酸，至少约25个核苷酸，至少约30个核苷酸，至少约35个核苷酸，至少约40个核苷酸，至少约45个核苷酸或至少约50个核苷酸。在一些实施方式中，igf-1rasodn的长度为约15个核苷酸至约22个核苷酸。在某些实施方式中，igf-1rasodn的长度为约18个核苷酸。

在一些方面中，igf-1rasodn包含核苷酸序列5'-tcctccggagccagactt-3'(seqidno：2)或其片段。在某些实施方式中，igf-1rasodn可以具有与seqidno：2至少约70％，至少约75％，至少约80％，至少约85％，至少约90％，至少约95％，至少约96％，至少约98％或100％的同一性。在一些实施方式中，igf-1rasodn包含一个或多个硫代磷酸酯连接。在某些实施方式中，igf-1rasodn由seqidno：2的核苷酸序列构成。

nobel是具有硫代磷酸酯主链和与igf-1r基因中密码子的2至7互补的序列的18聚体寡脱氧核苷酸。因此，nobel是针对igf-1r的反义寡核苷酸(igf-1rasodn)。在5'端衍生为igf-1r基因的互补序列的nobel序列是：5'-tcctccggagccagactt-3'(seqidno：2)。nobel具有稳定的保存期限，并且由于其硫代磷酸酯骨架而具有抗核酸酶降解的能力。

合适的反义核酸也描述于2016年4月11日提交的美国专利公开号2017/0056430中，其公开内容通过引证以其全部内容结合于本文中。在一些实施方式中，输送到生物扩散室中的组合物可以包括多种不同类型、种类和/或形式的反义分子。

在一些实施方式中，细胞可以插入生物扩散室。在一些实施方式中，细胞是癌细胞。在一些实施方式中，细胞分离自或源自实体瘤。在一些实施方式中，癌细胞是神经胶质瘤细胞。在一些实施方式中，癌细胞分离自或源自星形细胞瘤、肝癌、乳腺癌、头颈鳞状细胞癌、肺癌、肾细胞癌、肝细胞癌、胆囊癌，经典霍奇金淋巴瘤、食道癌、子宫癌、直肠癌、甲状腺癌、黑色素瘤、大肠癌、前列腺癌、卵巢癌和胰腺癌。在一些实施方式中，癌细胞分离自或源自生物扩散室植入的受试者。

在一些实施方式中，治疗有效数量的细胞可以插入腔室中。肿瘤细胞的治疗有效数量可以为，例如，约7.5×10⁵至约1.25×10⁶个细胞/个腔室。在一些实施方式中，肿瘤细胞的治疗有效数量为约1.0×10⁶个细胞/个腔室。

在一些实施方式中，药用载体或赋形剂插入生物扩散室。在一些实施方式中，缓冲液插入生物扩散室中。在一些实施方式中，缓冲液是盐水。

在一些实施方式中，包含治疗有效量的反义分子和治疗有效量的细胞(例如，神经胶质瘤细胞)的组合物插入腔室中。在一些实施方式中，包含治疗有效量的反义分子、治疗有效量的细胞(例如，神经胶质瘤细胞)和药用载体的组合物插入腔室中。在一些实施方式中，反义分子具有seqidno：1的序列。

在一些实施方式中，包含至少(i)治疗有效量的一种或多种反义分子、(ii)治疗有效量的细胞(例如，神经胶质瘤细胞)和(iii)一种或多种其他材料如缓冲液、小分子药物、其他生物因子等的组合物插入和/或输送到生物扩散室中。在2018年3月9日提交的wipo专利公开号wo2018/165528中公开了生物扩散室的其他配方和用途，该专利公开内容通过引证整体结合于本文中。

本公开的生物扩散室可以用于预防或治疗对其需要的受试者的疾病或病症。在一些实施方式中，这些腔室用于治疗或预防癌症，包括选自由神经胶质瘤、星形细胞瘤、肝癌、乳腺癌、头颈部鳞状细胞癌、肺癌、肾细胞癌、肝细胞癌、胆囊癌、膀胱癌、经典霍奇金淋巴瘤、食道癌、子宫癌、直肠癌、甲状腺癌、黑素瘤、结肠直肠癌、前列腺癌、卵巢癌和胰腺癌组成的组的那些。在具体实施方式中，癌症是神经胶质瘤。在某些方面中，神经胶质瘤是复发性恶性神经胶质瘤。在一些实施方式中，癌症是星形细胞瘤。在某些实施方式中，候选治疗的受试者患有whoii级、whoiii级或whoiv级肿瘤。在某些方面中，肿瘤是星形细胞瘤。在某些实施方式中，肿瘤选自ii级星形细胞瘤、aiii(idh1r132h突变体iii级星形细胞瘤)、aiii-g(具有成胶质母细胞瘤多形星形细胞瘤特征的idh1野生型iii级星形细胞瘤)或iv级星形细胞瘤。

在一些实施方式中，一种治疗患者癌症的方法包括向患者给予本发明的生物扩散室。在一些实施方式中，患者患有实体瘤。在一些实施方式中，患者患有神经胶质瘤。在一些实施方式中，患者患有选自由星形细胞瘤、肝癌、乳腺癌、头颈鳞状细胞癌、肺癌、肾细胞癌、肝细胞癌、胆囊癌、经典霍奇金淋巴瘤、食道癌、子宫癌、直肠癌、甲状腺癌、黑素瘤、结肠直肠癌、前列腺癌、卵巢癌和胰腺癌组成的组的癌症。在一些实施方式中，生物扩散室包括反义分子、肿瘤细胞、缓冲液和任选的其他试剂。在一些实施方式中，给予包括通过手术植入生物扩散室治疗有效的时间段(例如，约3至约72小时)。

在一些实施方式中，本公开的生物扩散室用于us2017/0056430或us2018/0256625中描述的任何治疗癌症的方法中，其通过引证整体结合于本文中。

图1描绘了根据一个实施方式的生物扩散室100。如其中所见，生物扩散室100包括和/或包含腔室主体102，腔室主体102除了从环形结构的外表面或侧面延伸的部分109之外基本上是环形的(例如，环状的)。腔室主体102具有第一表面103(例如，顶表面)和第二表面104(例如，底表面)。第一表面103与第二表面104之间的距离约为4.0mm。

腔室主体102包括限定圆柱形中空腔105的内表面。腔室主体102在外表面和内表面之间的壁约2.0毫米厚。中空腔105具有约10.0mm的直径、约4.0mm的高度和约315.0μl的容积。

腔室主体102还包括和/或限定注入端口106，其从腔室主体102的外表面至腔室主体102的内表面延伸穿过腔室主体102的壁。注入端口106的直径为约5.0mm。

第一半渗透膜107连接于腔室主体102的第一表面103，且第二半渗透膜(未示出)连接于腔室主体102的第二表面104。第一半渗透膜107和第二半渗透膜可以通过超声焊接和/或粘合剂如医用胶水分别连接于第一表面103和第二表面104。

生物扩散室101还包括、包含和/或限定用于从受试者中取出生物扩散室101的元件和/或特征。如所示，该元件和/或特征是从环形结构的外表面或侧面延伸的部分109内的孔110。孔110从腔室主体102的第一表面103延伸到腔室主体102的第二表面104。孔110基本上垂直于第一表面103或第二表面104中的至少之一个。缝线(未显示)可以可选地穿入或插入通过孔110。孔110的直径为约5.0mm。孔110位于远离注射端口106(例如，与注射端口106成约90°)。

图2描绘了根据一个实施方式的生物扩散室200。如其中所见，生物扩散室200包括和/或包含腔室主体202，其除了从环形结构的外表面或侧面延伸的凸缘209之外基本上是环形的(例如，环状的)。腔室主体202具有第一表面203(例如，顶表面)和第二表面204(例如，底表面)。第一表面203和第二表面204之间的距离为约4.0mm。

腔室主体202包括限定圆柱形中空腔205的内表面。腔室主体202在外表面和内表面之间的壁约2.0mm厚。中空腔205具有约10.0mm的直径、约4.0mm的高度和约315.0μl的容积。

腔室主体202还包括和/或限定注入端口206，其从腔室主体202的外表面至腔室主体202的内表面延伸穿过腔室主体202的壁。注入端口206的直径为约5.0mm。

第一半渗透膜207连接于腔室主体202的第一表面203，且第二半渗透膜(未示出)连接于腔室主体202的第二表面204。第一半渗透膜207和第二半渗透膜可以通过超声焊接和/或粘合剂如医用胶水分别连接于第一表面203和第二表面204。

凸缘209有助于将生物扩散室201从受试者体内取出。凸缘209具有小于腔室主体202高度的高度(例如，小于约4.0mm)。凸缘209包含和/或限定从凸缘209的第一表面(例如，顶表面)延伸到凸缘209的第二表面(例如，底表面)的孔210。孔210基本垂直于凸缘209的第一表面或凸缘209的第二表面中的至少一个。孔210的直径为约5.0mm。缝线(未显示)可以可选地穿过孔210。凸缘209位于注入端口206的对面(例如，成约180°)和/或与之相对。

图3-15描述了根据一个实施方式的生物扩散室300。如图3和4所示，生物扩散室300包括和/或包含腔室主体302、第一半渗透膜307、第二半渗透膜308、第一定位器314和第二定位器317。生物扩散室300配置为至少暂时包含至少包括生物因子的组合物(例如，包含细胞、反义分子、缓冲液和/或任何其他其它试剂如小分子药物、其它和/或不同的反义分子、其他和/或不同的缓冲液等的混合物的组合物)。此外，生物扩散室300配置为插入受试者(例如，动物，哺乳动物，人和/或鼠)中，并在预定时间(例如，约3小时至约72小时的治疗有效时间，如上所述)之后从受试者体内取出。

如图4-6所示，腔室主体302具有第一表面303(例如，顶表面)和第二表面304(例如，底表面)。在一些实施方式中，第一表面303与第二表面304之间的距离为约4.0mm。在其他实施方式中，第一表面303和第二表面304之间的距离是任何合适的距离(例如，小于4.0mm或大于4.0mm)。腔室主体302除了从腔室主体302的圆柱形周边的外表面或侧壁延伸和/或连接于其上的凸缘309之外具有基本圆柱形的周边。更具体地，腔室主体302基本呈环形(例如，环状的)，具有限定圆柱形中空腔305的内表面。腔室主体302的外表面和内表面之间的壁厚约2.0mm。中空腔305具有约10.0mm的直径、约4.5mm的高度和约350.0μl的容积。在其他实施方式中，中空腔305可以具有任何合适的尺寸、形状和/或构造。

第一表面303限定了凹槽310，该凹槽基本围绕、环绕、包围和/或外接中空腔305(例如，参见图4和5)。类似地，第二表面304限定凹槽311，该凹槽311基本上围绕、环绕，包围和/或外接中空腔305(例如，参见图6)。在一些实施方式中，第一表面303的凹槽310和第二表面304的凹槽311可以辅助一个或多个制造过程、步骤和/或方法。在一些实施方式中，第一表面303的凹槽310和第二表面304的凹槽311可以辅助第一半渗透膜307与第一表面303的连接、固定和/或附接，和/或第二半渗透膜308与第二表面304的连接、固定和/或附接。

如图4-7所示，凸缘309具有小于腔室主体302高度的高度(例如，小于约4.0mm)。凸缘309包括和/或限定从凸缘309的第一表面(例如，顶表面)延伸到凸缘309的第二表面(例如，底表面)的孔310。孔310基本垂直于凸缘309的第一表面或凸缘309的第二表面中的至少一个。孔310的直径为约5.0mm。

如图6-8所示，腔室主体302限定与中空腔305流体连通的注入端口306。注入端口306从腔室主体302的外表面至腔室主体302的内表面延伸穿过腔室主体302的壁(图8)。在一些实施方式中，注入端口306的直径为约5.0mm。在其他实施方式中，注射端口306的直径是基于用于将流体和/或包括至少一种或多种生物学因子的组合物输送到中空腔305中的移液管或移液管尖端的尺寸。

如图9所示，生物扩散室300的第一定位器314基本上呈环形或环状，并且限定开口315。第一定位器314具有与腔室主体302的第一表面303的尺寸和形状基本相似的尺寸和形状(例如，排除可以共面于第一表面303或与第一表面303共面的凸缘309)。第一定位器314的开口315具有与中空腔305的尺寸和形状(外周)基本相似的尺寸和形状(外周)。第一定位器314还包括配置为辅助第一定位器314与腔室主体302的第一表面303的连接的凸起316，如下面参考图11描述的。

如图10所示，生物扩散室300的第二定位器317基本上呈环形或环状，并且限定开口318。第二定位器317具有与腔室主体302的第二表面304的尺寸和形状基本相似的尺寸和形状。第二定位器317的开口318具有与中空腔305的尺寸和形状(外周)基本相似的尺寸和形状(外周)。第二定位器317还包括配置为辅助第二定位器317与腔室主体302的第二表面304的连接的凸起319，如下面参考图11描述的。

第一定位器314和第二定位器317配置为分别连接至第一表面303和第二表面304。另外，第一定位器314与第一表面303的连接和第二定位器317与第二表面304的连接可操作地分别将第一半渗透膜307固定于第一表面303和将第二半渗透膜308固定于第二表面304，如图11中所示。

更具体地，在制造期间，第一半渗透膜307可以放置为与腔室主体302的第一表面303接触和/或以其他方式设置于腔室主体302的第一表面303上。第一半渗透膜307的一部分可以覆盖由第一表面303限定的凹槽311和/或可以其他方式设置于其之上或之中。如图11所示，第一定位器314可以与第一表面303对齐并定位于第一半渗透膜307的一部分上。类似地，第二半渗透膜308可以放置为与腔室主体302的第二表面304接触和/或以其他方式设置于腔室主体302的第二表面304上。第二半渗透膜308的一部分可以覆盖由第二表面304限定的凹槽312和/或以其他方式设置于由第二表面304限定的凹槽312之上或之中。如图11中所示，第二定位器317可以与第二表面304对齐，并定位于第二半渗透膜308的一部分上。

当第一定位器314和/或第二定位器317处于期望的位置时，可以将超声能量施加于第一定位器314或第二定位器317中的至少一个，以将第一定位器314连接至第一表面303和/或将第二定位器317连接于第二表面304。如图11所示，施加和/或传递超声能量可以导致施加于第一定位器314和/或第二定位器317中的至少一个的力f。此外，第一定位器314和第二定位器317可以相对于腔室主体302对齐，使得第一定位器314的凸起316以及由此第一半渗透膜307的一部分推入由第一表面303限定的凹槽311中。力f(即，超声波能量)可以导致至少一部分凸起316在凹槽311内熔融和/或以其他方式变形，从而将第一定位器314固定地连接至第一表面303。此外，第一定位器314和第一表面303夹住一部分设置于其间的第一半渗透膜307而将第一半渗透膜307固定地固定或连接于第一表面303。第二定位器317和第一定位器314的第二半渗透凸起316可以接触第一半渗透膜308的一部分，以基本上相同的方式固定地连接至第二表面304。在一些情况下，第一定位器314和第二定位器317同时，分别，和/或以基本上相同的制造方法连接于第一表面303和第二表面304。在其他情况下，第一定位器314独立于第二定位器317与第二表面304的连接而连接至第一表面303。

如上所述，腔室主体302限定了与中空腔305流体连通并用于输送期望的量的流体和/或期望的量的包括至少一种或多种生物学因子的组合物进入中空腔305中的注入端口306。在一些实施方式中，在将期望的量的流体和/或组合物输送到中空腔305中之后，注入端口306被密封。

例如，如图12-15所示，响应于塞320插入到注入端口306中，注入端口306可以从第一或打开状态转变为第二或闭合状态。在一些实施方式中，塞320可以包括pmma，橡胶，硅和/或配置为弹性变形的任何合适的生物相容性材料，和/或可以由其形成。塞320包括第一密封件321、第二密封件322和第三密封件323，其各自配置为与腔室主体302限定注入端口和/或中空腔305的至少一部分的至少一个表面一起形成基本上液密性的密封。例如，在一些实施方式中，当塞320插入注入端口306中时，第二密封件322可以与腔室主体302的限定注入端口306的内表面一起形成过盈配合或摩擦配合，继而导致其间产生基本液密性的密封，如图15所示。而且，当塞320插入注入端口306中时，第一密封件321可以设置于中空腔305中并与腔室主体302的限定中空腔305的内表面接触，继而导致在它们之间产生基本液密的密封，如图15中所示。此外，在塞320插入注入端口306中时，第一密封件321的布置可以可操地将塞子320固定地连接至腔室主体302。

尽管图3-15中未显示，但在一些实施方式中，可以使用插入工具将塞320插入注射端口306。例如，在一些实施方式中，插入工具可以包括配置为插入由塞320限定的开口324中的杆，并可以还包括肩部，当杆插入开口324中时，该肩部与塞320的外表面接触。在某些情况下，使用者可以将杆插入塞320的开口324中，并可以施加插入工具的力以将塞320插入注入端口306中。一旦塞320设置于注入端口306中，可以取出插入工具，使塞320留在注入端口306中并由此密封注入端口306。

返回参考图11，在一些实施方式中，凸缘309和/或由凸缘309限定的开口310辅助从受试者(例如，动物，哺乳动物和/或人)取出生物扩散室300。例如，在一些实施方式中，缝线330可以穿过孔310和/或插入孔320，并连接至凸缘309。缝线330可以是适于取出生物扩散室300的元件和/或特征。在一些情况下，生物扩散室300可以在缝线330连接至凸缘309的情况下插入到受试者中。在预定时间(例如，在插入到受试者中之后3小时至72小时)之后，缝线330可以被占用并操纵而从受试者中取出生物扩散室300。

尽管图3-15中未显示，但在一些实施方式中，缝线(例如，缝线330)可以插入由任意数量的生物扩散室限定的开口中。在这样的实施方式中，缝线(例如，缝线330)可以至少临时地将多个生物扩散室连接或串在一起。此外，在某些情况下，多个生物扩散室连接和/或串在一起可以有助于整个生物扩散室串的取出。

图16是描绘根据一个实施方式的制造如本文描述的生物扩散室的方法10的流程图。方法10包括在11处形成生物扩散室的腔室主体。如上详细描述的，腔室主体可以由任何合适的生物相容性材料经由注射模制、3d打印和/或任何其他合适的方法形成。腔室主体可以类似于例如以上参考图3-15描述的腔室主体302。因此，腔室主体限定了中空腔和与该中空腔流体连通的注入端口，并具有第一表面、第二表面和限定开口的凸缘。

第一半渗透膜放置为在12处与腔室主体的第二表面接触。第二半渗透膜放置为在13处与腔室主体的第二表面接触。第一半渗透膜和第二半渗透膜可以基本上类似于例如以上参考图3-15描述的第一半渗透膜307和第二半渗透膜308。因此，半渗透膜可以对较小的分子如核酸、反义分子、细胞因子和/或其他化学物质是可渗透的，且对较大的分子如细胞是不可渗透的。

第一定位器连接至腔室主体的第一表面，使得第一半渗透膜的一部分在14处固定地设置于第一表面和第一定位器之间。例如，如上文参考生物扩散室300描述的，第一定位器可以通过超声焊接和/或任何其他合适的方法固定地连接于第一表面。在第一半渗透膜的部分设置于第一表面和第一定位器之间的情况下，第一定位器与第一表面的连接由此将第一半渗透膜连接于第一表面。

第二定位器连接至腔室主体的第二表面，使得第二半渗透膜的一部分在15处固定地设置于第二表面和第二定位器之间。例如，如上文参考生物扩散室300描述的，第二定位器可以通过超声焊接和/或任何其他合适的方法固定地连接于第二表面。在第二半渗透膜的部分设置于第二表面和第二定位器之间的情况下，第二定位器与第二表面的连接由此将第二半渗透膜连接于第二表面。

将第一和第二定位器分别连接于第一和第二表面，导致第一和第二半渗透膜分别连接于第一和第二表面。因此，在第一定位器和第二定位器分别连接于第一表面和第二表面之后，一定量的包括至少细胞和反义分子的混合物的组合物经由注入端口在16处输送到由腔室主体限定的中空腔中。注入端口可以基本上类似于例如上面参照生物扩散室300描述的注入端口306。如上所述，半渗透膜的布置可以使第一和第二半渗透膜对反义分子是可渗透的，且对较大分子是不可渗透的。因此，在某些情况下，生物扩散室插入受试者(例如，动物，哺乳动物，人，小鼠等)中可以使一定量的反义分子扩散出生物扩散室并进入该受试者体内。

在输送反义分子之后，在17处注入端口被密封。注入端口可以以如本文的任何合适的方式密封。例如，在一些实施方式中，塞可以插入到注入端口中以密封注入端口和/或以其他方式将注入端口从第一或打开状态转变为第二或密封状态，如上面参照塞320描述的。

如上所述，在第一实施方式中，生物扩散室适于插入和取出人体，其中生物扩散室包括：(a)腔室主体，限定中空腔并包括第一表面和第二表面；(b)第一半渗透膜，连接于第一表面；(c)第二半渗透膜，连接于第二表面；和(d)适于从人体取出生物扩散室的元件；其中第一半渗透膜和第二半渗透膜对流体和可溶性因子是可渗透的，且对细胞是不可渗透的。

在第二实施方式中，生物扩散室适于插入和取出人体，其中生物扩散室包括：(a)限定中空腔室的腔室主体，并包括第一表面和第二表面；(b)第一半渗透膜，连接于第一表面；(c)第二半渗透膜，连接于第二表面；和(d)从腔室主体的第一表面垂直延伸至第二表面并有助于从人体内取出生物扩散室的腔室主体中的孔；其中第一半渗透膜和第二半渗透膜对流体和可溶性因子是可渗透的，且对细胞是不可渗透的。

在第三实施方式中，生物扩散室适于插入和取出人体，其中生物扩散室包括：(a)腔室主体，限定中空腔并包括第一表面和第二表面；(b)第一半渗透膜，连接于第一表面；(c)第二半渗透膜，连接于第二表面；其中腔室主体除了从腔室主体延伸出而限定孔的部分之外基本呈环形，其中孔从腔室主体的第一表面垂直延伸至第二表面并有助于从人体中取出生物扩散室；其中腔室主体是单一模制结构；并且其中第一半渗透膜和第二半渗透膜对流体和可溶性因子是可渗透的，且对细胞是不可渗透的。

在第四实施方式中，生物扩散室适合于插入和取出人体，其中生物扩散室包括：(a)腔室主体，限定中空腔室并包括第一表面和第二表面；(b)第一半渗透膜，连接于第一表面；(c)第二半渗透膜，连接于第二表面；其中腔室主体除了从延伸出腔室主体而包括凸缘的部分之外基本上呈环形，其中凸缘包括从凸缘的第一表面垂直延伸至凸缘的第二表面并有助于从人体中取出生物扩散室的孔；其中腔室主体是单一模制结构；并且其中第一半渗透膜和第二半渗透膜对流体和可溶性因子是可渗透的，且对细胞是不可渗透的。

在一些实施方式中，根据第一实施方式、第二实施方式、第三实施方式和/或第四实施方式中的至少一种的生物扩散室可以在适用的情况下还包括一个或多个以下元件、特征和/或方面：

·适于从人体中取出生物扩散室的元件包括连接至腔室主体的缝线；

·适于从人体中取出生物扩散室的元件包括腔室主体中的孔；

·缝线穿过腔室主体中的孔；

·适于从人体中取出生物扩散室的元件包含连接于腔室主体并从腔室主体延伸的凸缘。

·凸缘包括从凸缘的第一表面延伸至第二表面的孔；

·凸缘的第一表面至第二表面的距离小于腔室主体的第一表面至第二表面的距离；

·缝线穿过凸缘中的孔；

·腔室主体是单一的聚合物模制的结构；

·腔室主体基本呈环形；

·中空腔的直径为5.0-20.0mm；

·中空腔的直径为10.0mm；

·腔室主体的第一表面与第二表面之间的距离为3.0-10.0mm；

·腔室主体的第一表面至第二表面之间的距离为4.0mm；

·腔室主体中的孔的直径为3.0-8.0mm；

·腔室主体中的孔的直径为5.0mm；

·缝线穿过腔室主体中的孔；

·腔室主体包含聚(甲基丙烯酸甲酯)；

·腔室主体包含纯的聚(甲基丙烯酸甲酯)；

·腔室主体基本不含抗氧化剂、着色剂、固化剂和增塑剂；

·腔室主体包含少于0.1％的杂质或添加剂；

·腔室主体包含遮光剂；

·腔室主体包含小于1％的遮光剂；

·遮光剂是二氧化钛；

·使用超声焊接将第一半渗透膜连接于第一表面且将第二半渗透膜连接于第二表面。

·使用医用胶水将第一半渗透膜连接于第一表面且将第二半渗透膜连接于第二表面；

·医用胶水包含聚(甲基丙烯酸甲酯)(pmma)；

·腔室主体还包括第一表面上的第一凹口和第二表面上的第二凹口；

·第一半渗透膜在第一凹口内连接于第一表面，且第二半渗透膜在第二凹口内连接于第二表面，第一半渗透膜与第一表面基本齐平，且第二半渗透膜与第二表面基本齐平。

·腔室主体还包括注入端口；

·注入端口是直径为3.0mm-8.0mm的孔；

·注入端口是直径为5.0mm的孔；

·注入端口被密封；

·注入端口用骨蜡密封；

·注入端口远离适于从人体中取出生物扩散室的元件定位；

·注入端口远离腔室主体内的孔定位；

·腔室主体基本呈环形，并且其中注入端口与适于从人体中取出生物扩散室的元件成约180°定位；

·腔室主体基本呈环形，并且其中注入端口与腔室主体中的孔成约180°定位；

·中空腔具有100.0μl至1.0ml的容积；

·中空腔具有310.0μl至320.0μl的容积；

·生物扩散室还包含治疗有效量的反义分子；

·反义分子是反义寡脱氧核苷酸；

·反义分子包含至少一个硫代磷酸酯连接基；

·反义分子具有5'-tcctccggagccagactt-3'(seqidno：2)的序列；

·治疗有效量为1.0μg至5.0μg；

·治疗有效量为1.0μg至10.0mg；和

·治疗有效量为2.0μg。

在一些实施方式中，一种制造根据第一实施方式、第二实施方式、第三实施方式和/或第四实施方式中的至少一种的生物扩散室的方法可以包括和/或可以包含一个或多个以下步骤、要素、特征和/或方面：

·使用注射模制形成腔室主体；

·使用3d打印形成腔室主体；

·使用超声波焊接，将第一半渗透膜连接于第一表面，将第二半渗透膜连接于第二表面；

·使用医用级胶水，将第一半渗透膜连接于第一表面，将第二半渗透膜连接于第二表面；和

·使用包含聚甲基丙烯酸甲酯(pmma)的医用级胶水，将第一半渗透膜连接于第一表面，将第二半渗透膜连接于第二表面。

尽管上面已经描述了各个实施方式，但应该理解的是，它们仅以举例说明，而非限制性的方式呈现。在上述示意图和/或实施方式指示以某些取向或位置排布设置的某些组件的情况下，组件的布置可以修改。尽管已经具体显示和描述了这些实施方式，但应该理解的是，可以进行形式和细节上的各种改变。例如，尽管生物扩散室300在上面被显示和描述为包括第一半渗透膜307和第二半渗透膜308，但在其他实施方式中，生物扩散室可以包括单个半渗透膜。在这样的实施方式中，半渗透膜可以连接至腔室主体的第一表面，而与第一表面相对的腔室主体的第二表面是封闭的，密封的，实心的，和/或另外缺少开口、孔、端口等。

尽管已经将各实施方式描述为具有特定特征和/或组件的组合，但其它实施方式有可能具有来自本文描述的任何实施方式的任何特征和/或组件组合。例如，尽管在图2中显示了腔室主体202的凸缘209，并在以上描述为限定基本上圆柱形的孔210(例如，圆形横截面形状)，但在其他实施方式中，腔室主体202的凸缘209可以限定具有与由凸缘309限定的孔或开口310(例如，参见图5)相似的形状的孔或开口，反之亦然。

达到各组件的具体构造结构也可以变化。例如，各组件的尺寸和特定形状可以不同于所示的实施方式，而同时仍然提供如本文的功能。更具体而言，针对所需或预期用途可以专门选择各部件的尺寸和形状。因此，应当理解的是，除非上下文另外明确指出，否则实施方式和/或其组件的尺寸、形状和/或排布设置可以适于给定的用途。

在上述方法和/或事件指示以特定顺序发生的某些事件和/或过程的情况下，某些事件和/或过程的顺序可以进行修改。另外，正如上，某些事件和/或过程可以在并行过程中可能之时进行同时实施，以及如上按顺序实施。

根据本公开，在不进行额外实验的情况下就可以制造和执行本文公开和/或要求保护的所有产品、组合物和/或方法。尽管已经根据优选实施方式描述了本公开的产品、组合物和/或方法，但对于本领域技术人员显而易见的是，在不背离本公开的概念、精神和范围的情况下，改变和修改可以应用于产品、组合物和/或方法以及本文所描述的方法的步骤或步骤顺序中。对于本领域技术人员显而易见的是，所有这些类似的变化和修改都被认为属于由所附权利要求限定的本公开的精神、范围和概念之内。

序列表

<110>托马斯杰弗逊大学

伊姆瓦克斯股份有限公司

布伦丹劳伦齐

<120>生物扩散室

<130>imvx-006/01wo327398-2034

<140>tba

<141>2019-01-24

<150>us62/621,295

<151>2018-01-24

<160>2

<170>patentinversion3.5

<210>1

<211>4104

<212>dna

<213>智人

<400>1

atgaagtctggctccggaggagggtccccgacctcgctgtgggggctcctgtttctctcc60

gccgcgctctcgctctggccgacgagtggagaaatctgcgggccaggcatcgacatccgc120

aacgactatcagcagctgaagcgcctggagaactgcacggtgatcgagggctacctccac180

atcctgctcatctccaaggccgaggactaccgcagctaccgcttccccaagctcacggtc240

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<210>2

<211>18

<212>dna

<213>人工序列

<220>

<223>胰岛素样生长因子受体(igf-1r)反义寡脱氧核苷酸(as-odn)

<400>2

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