用于同步检测NRAS基因的第2、3、4号外显子基因突变的方法与流程

文档序号:21789774发布日期:2020-08-07 20:43阅读:来源:国知局

技术特征:

1.一种用于同步检测nras基因的第2、3、4号外显子基因突变的引物组,其特征在于,所述引物组包含下述三对引物对中的至少两对:第一组引物对的上游引物的核苷酸序列由seqidno.1所示,下游引物的核苷酸序列由seqidno.2所示;第二组引物对的上游引物的核苷酸序列由seqidno.3所示,下游引物的核苷酸序列由seqidno.4所示;第三组引物对的上游引物的核苷酸序列由seqidno.5所示,下游引物的核苷酸序列由seqidno.6所示。

2.根据权利要求1所述的引物组,其特征在于,所述第一组引物对是检测nras基因第2号外显子的引物对;第二组引物对是用于检测nras基因第3号外显子的引物对;第三组引物对是用于检测nras基因第4号外显子的引物对。

3.权利要求1或2所述的引物组在制备用于同步检测nras基因的第2、3、4号外显子基因突变的试剂盒中的应用。

4.一种用于同步检测nras基因的第2、3、4号外显子基因突变的试剂盒,其特征在于,包含权利要求1或2所述的引物组。

5.根据权利要求4所述的试剂盒,其特征在于,还包含dna聚合酶、pcr缓冲液、4种dntp的混合物和超纯水。

6.根据权利要求5所述的试剂盒,其特征在于,所述dna聚合酶的用量为0.5-5u,每种dntp的终浓度均为50-500μm,每条引物的终浓度为20-400nm。

7.根据权利要求4-6任一项所述的试剂盒,其特征在于,还包含待测样品dna提取试剂或dna提取试剂盒。

8.一种用于同步检测nras基因的第2、3、4号外显子基因突变的检测方法,其特征在于,采用权利要求1或2所述的引物组对待测样品进行多重pcr检测。

9.根据权利要求8所述的检测方法,其特征在于,包括步骤:

(1)从待测样品中提取人类dna,作为扩增模板;

(2)配制包含所述引物组和所述扩增模板的多重pcr反应体系;

(3)对所述多重pcr反应体系进行多重pcr扩增反应,得到pcr产物;

(4)根据所述pcr产物,测定nras基因的第2、3、4号外显子基因突变。

10.根据权利要求9所述的检测方法,其特征在于,所述pcr扩增反应的反应条件为:94~98℃:1~10min;94~98℃:5~60s,50~68℃:10~120s,68~72℃:20s~4min,共25~45个循环;68~72℃:0~30min。


技术总结
本发明提供一种同步检测同步检测NRAS基因的第2、3、4号外显子基因突变的引物组及检测方法,有益于检测通量的提高。本发明提供用于同步检测NRAS基因的第2、3、4号外显子基因突变的引物组,包含下述三对引物对中的至少两对:第一组引物对的上游引物的核苷酸序列由SEQ ID NO.1所示,下游引物的核苷酸序列由SEQ ID NO.2所示;第二组引物对的上游引物的核苷酸序列由SEQ ID NO.3所示,下游引物的核苷酸序列由SEQ ID NO.4所示;第三组引物对的上游引物的核苷酸序列由SEQ ID NO.5所示,下游引物的核苷酸序列由SEQ ID NO.6所示。通过一次反应可以对NRAS基因的第2、3、4号外显子基因突变进行检测。如此,可以同时检测90多例样本,不仅提高了检测效率,也很大程度的节约了成本费用。

技术研发人员:冯薇;翟瑞雪;智慧芳;倪君君
受保护的技术使用者:北京和合医学诊断技术股份有限公司
技术研发日:2020.04.30
技术公布日:2020.08.07
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