相关申请的交叉引用
本申请要求2019年1月14日提交的美国临时申请62/791,967的优先权权益，所述美国临时申请的内容通过引用整体并入本文。
本公开内容的特征是调节(例如激动或部分激动)nlrp3的化学实体(例如化合物或其药学上可接受的盐和/或水合物和/或共晶和/或所述化合物的药物组合)，其可用于例如在对象(例如人)中治疗病症、疾病或障碍，其中nlrp3信号传导增加可纠正促成该病症、疾病或障碍的病状和/或症状和/或进展和/或治疗难治性状态的先天免疫活性缺陷(例如具有低t-细胞浸润的癌症)。本公开内容的特征还在于组合物以及使用和制备它们的其它方法。
背景
核苷酸结合寡聚化结构域样受体(“nlrs”)包括检测病原体相关分子模式(“pamps”)和内源分子的细胞内受体家族(参见例如ting,j.p.y.等人,“thenlrgenefamily:astandardnomenclature,”immunity,28(3):285–287,(2008))。
nlrps代表nlrs的亚家族，其包括pyrin结构域，由诸如nlrp1、nlrp3、nlrp4、nlrp6、nlrp7和nlrp12的蛋白质构成。nlrps被认为与称为炎性小体(inflammasomes)的多蛋白复合体的形成有关(参见例如chaput,c.等人,“nod-likereceptorsinlungdiseases,”frontiersinimmunology,4:article393,(2013))。这些复合体典型地包括一种或两种nlr蛋白质，含card结构域的衔接分子凋亡相关斑点样蛋白(asc)和胱天蛋白酶-1f前体(pro-caspas-1f)(参见例如bauernfeind,f和hornung,v.“ofinflammasomesandpathogens–sensingofmicrobesbyinflammasome,”embomolecularmedicine,5(6):814–826,(2013))。
一种这样的炎性小体由nlrp3骨架、asc衔接子和胱天蛋白酶-1形成(参见例如hirota,j.a.,等人,“theairwayepitheliumnucleotid-bindingdomainandleucin-richrepeatprotein3inflammasomeisactivatedbyurbanparticulatematter,”journalofallergyandclinicalimmunology,129(4):1116.e6–1125.e6,(2012))，其表达被认为是由骨髓细胞和人支气管上皮细胞中的炎性细胞因子和tlr激动剂诱导的(同上)。据信nlrp3炎性小体介导il-1β前体和il-18前体向il-1β和il-18的胱天蛋白酶-1依赖性转化。此外，il-1β和il-18在治疗各种类型的癌症中具有潜能(参见例如chen,l-c.等人,embomolmed.,4(12):1276-1293(2012)和tse,b.w-c.等人,plosone,6(9):e24241(2011))。已经证明il-18可以在结肠癌动物肿瘤模型中克服对关卡抑制剂的抗性(参见例如ma,z.等人,clin.cancerres.1月11日.(2016)doi:10.1158/1078-0432.ccr-15-1655)。
概述
本发明涉及式(i)、(ii)或(iii)化合物:
其中全部变量如下文所定义。
本发明范围内还有式(i)或(ii)化合物的药学上可接受的盐、立体异构体、互变异构体和溶剂合物。
本发明还涉及包含一种或多种本发明化合物的药物组合物。本发明还涉及使用一种或多种本发明化合物治疗癌症的方法。
本发明还提供了用于制备式(i)或(ii)化合物或其药学上可接受的盐、立体异构体、互变异构体和溶剂合物的方法和中间体。
本发明的化合物可以用于疗法。
本发明的化合物可以用于制备治疗癌症的药剂。
本发明的化合物可以单独地、与本发明的其它化合物组合或与一种或多种另外的活性剂组合使用。
本发明的其它特征和优点根据如下详细描述和权利要求将显而易见。
详细描述
本发明的化合物
在第一个方面，本发明特别提供了式(i)、(ii)或(iii)化合物：
或其立体异构体、互变异构体或药学上可接受的盐，其中：
w独立地选自：-y-r6、-q-y-r6、-q-r6a和r6b；
q独立地选自：nr5、chr5、o和s；
y独立地选自：c1-10亚烷基、c2-10亚烯基和c2-10亚炔基，其各自被0至4个re取代和/或其各自任选地插入下述之一：
(i)o；
(ii)n(rf)；
(iii)被0至4个rg取代的c3-6亚环烷基；
(iv)被0至4个rd取代的亚苯基；
(v)包括5至10个环原子的亚杂芳基，其中1至4个环原子各自独立地选自n、n(rf)、o和s，并且其被0至4个rd取代；或
(vi)包括3至10个环原子的亚杂环烷基，其中1至3个环原子各自独立地选自n、n(rf)、o和s(o)1-2，并且其被0至4个rg取代；
r1和r3在每次出现时独立地选自：h、卤素、氰基、c1-4烷基、c1-4卤代烷基、c1-4烷氧基和c1-4卤代烷氧基；
r1a独立地选自：卤素、氰基、c1-4烷基、c1-4卤代烷基、c1-4烷氧基和c1-4卤代烷氧基；
r2独立地是包括5个环原子的杂芳基，其中1至4个环原子各自独立地选自n、nh、o和s，其中所述杂芳基被0至3个rd取代；
r4a独立地选自：卤素、氰基、c1-4烷基、c1-4卤代烷基、c1-4烷氧基、c1-4卤代烷氧基、n(c1-4烷基)2和-(c0-3亚烷基)-包括5个环原子的杂芳基，其中1至4个环原子各自独立地选自n、nh、n(c1-4烷基)、o和s，其中所述杂芳基被0至3个rd取代；
r4独立地是h或r4a；
r5独立地是h或c1-4烷基；
r6独立地选自：-ora、c1-4卤代烷氧基、-c(o)ra、-co2ra、-so1-2(rh)、-conrirj、氰基和r6a；
r6a独立地选自：被0至4个rd取代的苯基；包括5至10个环原子的杂芳基，其中1至4个环原子各自独立地选自n、n(rf)、o和s，其中所述杂芳基被0至4个rd取代；被0至4个rg取代的c3-10环烷基；和包括3至10个环原子的杂环基，其中1至3个环原子各自独立地选自n、n(rf)、o和s(o)1-2，其中所述杂环基被0至4个rg取代；
r6b独立地选自：c1-6烷氧基、c1-4卤代烷氧基、-c(o)ra、-co2ra、-so1-2(rh)、-conrirj、被0至4个rd取代的苯基；包括5至10个环原子的杂芳基，其中1至4个环原子各自独立地选自n、n(rf)、o和s，其中所述杂芳基被0至4个rd取代；被0至4个rg取代的c3-10环烷基；和选自
r7独立地是h、卤素、氰基、c1-4烷基、c1-4卤代烷基、c1-4烷氧基、c1-4卤代烷氧基或c3-6环烷基；
r7a独立地是卤素、c1-4烷基或c3-6环烷基；
ra独立地选自：h；被0至2个re取代的c1-8烷基；-(c0-3亚烷基)-c3-10环烷基，其中所述环烷基被0至4个rg取代；-(c0-3亚烷基)-包括3至10个环原子的杂环基，其中1至3个环原子各自独立地选自n(rf)、o和s，其中所述杂环基被0至4个rg取代；-(c0-3亚烷基)-(c6-10芳基)，其中所述芳基被0至4个rd取代；和-(c0-3亚烷基)-包括5至10个环原子的杂芳基，其中1至4个环原子各自独立地选自n、n(rf)、o和s，其中所述杂芳基被0至4个rd取代；
rb和rc在每次出现时独立地是ra或-c(o)ra；
rd独立地选自：卤素，oh，氰基，c1-4烷氧基，c1-4烷氧基，c1-4卤代烷基，c1-4卤代烷氧基，-c(o)o(c1-4烷基)，nh2，n(c1-4烷基)2，-c(o)nh2，-c(o)n(c1-4烷基)2，c2-6烯基，c2-6炔基，和c1-6烷基，其被0至2个re取代；
re独立地选自：f，oh，氰基，c1-4烷氧基，c1-4卤代烷基，c1-4卤代烷氧基，和c1-4烷基，其被0至1个rn取代；
rf独立地选自：h、c1-4烷基、-c(o)(c1-4烷基)和-c(o)o(c1-4烷基)；
rg独立地是氧代基或rd；
rh独立地选自：c1-6烷基、c1-4卤代烷基、-(c0-3亚烷基)-苯基和-(c0-3亚烷基)-包括5至6个环原子的杂芳基，其中1-4个环原子各自独立地选自n、n(rf)、o和s；
ri和rj在每次出现时独立地是h或rh；或者ri和rj连同它们各自连接的氮原子一起形成包括5至6个环原子的环，其中所述环包括：(a)3至5个环碳原子，其各自被1至2个独立地选自h和rm的取代基取代；和(b)0至2个环杂原子(除了与ri和rj连接的氮原子)，其各自独立地选自n(rf)、o和s；
rm独立地是氧代基或re；且
rn独立地选自：oh、conh2和c1-4烷氧基。
在第二方面，在第一方面的范围内，其中：
r1、r3和r7在每次出现时各自独立地选自：h、卤素、氰基、c1-4烷基、c1-4卤代烷基、c1-4烷氧基和c1-4卤代烷氧基；和
r7a独立地是卤素。
在第三方面，在第一方面或第二方面的范围内，其中：
q独立地选自：nh、n(c1-4烷基)、ch2和o；
y独立地选自：c1-10亚烷基、c2-6亚烯基和c2-6亚炔基，其各自被0至4个re取代和/或其各自任选地插入下述之一：
(i)o；
(ii)n(rf)；
(iii)被0至4个rg取代的c3-6亚环烷基；
(iv)被0至4个rd取代的亚苯基；
(v)包括5至6个环原子的亚杂芳基，其中1至4个环原子各自独立地选自n、n(rf)、o和s，并且其被0至4个rd取代；或
(vi)包括3至7个环原子的亚杂环烷基，其中1至3个环原子各自独立地选自n、n(rf)、o和s(o)1-2，并且其被0至4个rg取代；
r2独立地是包括1至2个各自独立地选自n、nh、o和s的环原子的5-元杂芳基；
r4a独立地选自：卤素、氰基、c1-4烷基、c1-4卤代烷基、c1-4烷氧基、c1-4卤代烷氧基、n(c1-4烷基)2和包括1至2个各自独立地选自n、nh、o和s的环原子的5-元杂芳基；
r4独立地是h或r4a；
ra独立地选自：h、被0至2个re取代的c1-6烷基、和苄基；
rh独立地是c1-6烷基或苄基；和
ri和rj在每次出现时独立地是h或rh。
在另一方面，在第一至第三方面任一者的范围内，其中：
r2独立地选自：吡唑基、噻吩基和异噻唑基；
r4a独立地选自：卤素、氰基、c1-4烷基、c1-4卤代烷基、c1-4烷氧基、c1-4卤代烷氧基、n(c1-4烷基)2和选自吡唑基、噻吩基和异噻唑基的杂芳基；和
r4独立地是h或r4a。
在第四方面，在第一至第三方面任一者的范围内，其中：
w独立地选自：r6、-y-r6、-o-r6a、-nh-r6a、-o-y-r6、-nh-y-r6、
y独立地是c1-8亚烷基或c2-6亚炔基，其各自被0至4个re取代；
r1独立地是h或卤素；
r3、r4和r7在每次出现时各自独立地选自：h、卤素和c1-4烷基；
r1a独立地是卤素；
r4a独立地是卤素或c1-4烷基；
r7a独立地是f或cl；
r2在每次出现时独立地选自
r6独立地选自：h、oh、c1-6烷氧基、n(c1-4烷基)2、c1-6卤代烷基、氰基和r6a；
r6a独立地选自：被0至3个rd取代的苯基；包括5至10个环原子的杂芳基，其中1至4个环原子各自独立地选自n、n(rf)、o和s，其中所述杂芳基被0至3个rd取代；被0至3个rg取代的c3-6环烷基；包括3至8个环原子的杂环基，其中1至3个环原子各自独立地选自n、n(rf)、o和s(o)1-2，其中所述杂环基被0至3个rg取代；和
rd独立地选自：卤素，氰基，oh，ch2oh，c1-4烷氧基，c1-4卤代烷基，n(c1-4烷基)2，和c1-4烷基，其被0至2个c1-4烷氧基取代；
re独立地选自：f、oh、-(ch2)1-4oh、-ch2conh2和被1个c1-4烷氧基取代的c1-4烷基；
rf独立地是h或c1-4烷基；和
rg独立地是氧代基或rd。
在第五方面，在第一至第四方面任一者的范围内，其中：
w独立地选自：r6、-y-r6、-nh-r6a和-nh-y-r6；
y独立地是被0至1个re取代的c1-6亚烷基；
r1、r3和r7在每次出现时各自独立地选自：h、f和cl；
r4在每次出现时独立地选自：h、f和ch3；
r1a和r4a在每次出现时各自独立地选自：f、cl和ch3；
r6独立地选自：h、oh、c1-6烷氧基、cn、c1-6卤代烷基和r6a；
r6a独立地选自：被0至1个rg取代的吡唑基、被0至2个rg取代的c3-6环烷基；和
rg独立地选自：卤素，oh，ch2oh，c1-4烷氧基，c1-4卤代烷基，和c1-4烷基，其被0至2个c1-4烷氧基取代；和
re独立地是f或oh。
在第六方面，在第一至第五方面任一者的范围内，其中：
w独立地是-nh-r6a或-nh-y-r6；
y独立地是c1-4亚烷基；
r1独立地是h或f；
r3和r7在每次出现时各自独立地选自：h、f和cl；
r4在每次出现时独立地选自：h、f和ch3；
r1a独立地是f或cl；
r4a独立地选自：f、cl和ch3；
r6独立地选自：oh、och3和r6a；
r6a独立地选自：吡唑基，环戊基，其被oh取代；和
在其它方面，本发明提供了选自所示例的实施例1至16的化合物或其立体异构体、互变异构体或药学上可接受的盐。
在其它方面，本发明提供了在上述任一方面范围内的选自任意化合物亚集合列表或所示例实施例的单个化合物的化合物。
在一些实施方案中，r2独立地是吡唑基、噻吩基或异噻唑基。在其它实施方案中，r2是吡唑基。在其它实施方案中，r2是噻吩基。在其它实施方案中，r2是异噻唑基。
本领域技术人员将认识到，本文所述的一些化学结构可以在纸面上以一种或多种其它共振形式表示；或可以以一种或多种其它互变异构体形式存在，甚至当在动力学上时，本领域技术人员认识到这种互变异构形式仅代表此类化合物样品的很小一部分。尽管在本文中没有明确表示这样的共振形式或互变异构体，但是显然在本公开内容的范围内考虑了此类化合物。
本发明的其它方面和实施方案
在一个方面，用于调节(例如激动、部分激动、拮抗)nlrp3活性的方法的特征在于：包括使nlrp3与本文所述的化学实体(例如本文概括或具体描述的化合物或其药学上可接受的盐或含有其的组合物)接触。在优选的实施方案中，用于调节nlrp3活性的方法为激动和部分激动。在一些实施方案中，用于调节nlrp3活性的方法为激动。在一些实施方案中，用于调节nlrp3活性的方法为部分激动。方法包括体外方法，例如使包括一种或多种含有nlrp3的细胞(例如thp-1细胞)的样品与化学实体接触。方法还可包括体内方法；例如将化学实体施用于患有疾病的对象(例如人)，其中nlrp3信号传导增加可纠正促成该病症的病状和/或症状和/或进展的先天免疫活性缺陷(例如癌症；例如难治性癌症)。
在一些实施方案中，本发明的化合物可用于在对象(例如人)中治疗病症、疾病或障碍，其中nlrp3活性降低促成该病症、疾病或障碍的病状和/或症状和/或进展(例如与抑制或受损的nlrp3信号传导相关的病症、疾病或障碍)(例如癌症)。
当癌症对癌症治疗无反应(或抵抗)时，其被称为是难治性的。难治性癌症也称作抗性癌症。
在另一个方面，治疗癌症的方法特征在于包括向需要这种治疗的对象施用有效量的本文所述的化学实体(例如本文概括或具体描述的化合物或其药学上可接受的盐或含有其的组合物)。在一些实施方案中，癌症可以为难治性癌症。
在另一个方面，治疗疾病的方法，其中nlrp3信号传导增加可纠正促成该疾病的病状和/或症状和/或进展的先天免疫活性缺陷，所述方法的特征在于包括向需要这种治疗的对象施用有效量的本文所述的化学实体(例如本文概括或具体描述的化合物或其药学上可接受的盐或含有其的组合物)。
在另一个方面，治疗方法的特征在于包括向患有疾病的对象施用效量的本文所述的化学实体(例如本文概括或具体描述的化合物或其药学上可接受的盐或含有其的组合物)，其中，nlrp3信号传导增加可纠正促成该疾病的病状和/或症状和/或进展的先天免疫活性缺陷。
在另一个方面，治疗方法的特征在于包括向对象施用本文所述的化学实体(例如本文概括或具体描述的化合物或其药学上可接受的盐或含有其的组合物)，其中所述化学实体以有效治疗疾病的量施用，其中nlrp3信号转导增加可以纠正促成疾病的病状和/或症状和/或进展的先天免疫活性缺陷，从而治疗该疾病。
实施方案可以包括一个或多个如下特征。
化学实体可以与一种或多种另外的癌症疗法组合施用(例如手术、放射疗法、化学疗法、毒素疗法、免疫疗法、冷冻疗法或基因疗法或其组合；例如，包括施用一种或多种(例如两种、三种、四种、五种、六种或更多种)另外的抗癌活性剂的癌症疗法)。另外的抗癌活性剂(化学治疗剂)的非限制性实例选自烷化剂(例如顺铂、卡铂、氮芥、环磷酰胺、苯丁酸氮芥、异环磷酰胺和/或奥沙利铂)；抗代谢物(例如硫唑嘌呤和/或巯嘌呤)；萜类化合物(例如长春花生物碱和/或紫杉烷；例如长春花新碱、长春花碱、长春瑞滨和/或长春地辛、泰素(taxol)、紫杉醇(paclitaxel)和/或多西他赛(docetaxel))；拓扑异构酶(例如i型拓扑异构酶和/或2型拓扑异构酶；例如喜树碱，例如伊立替康和/或托泊替康；安吖啶、依托泊苷、磷酸依托泊苷和/或替尼泊苷)；细胞毒性抗生素(例如放线菌素、蒽环霉素、多柔比星、柔红霉素、戊柔比星、依达比星、表柔比星、博来霉素、普卡霉素和/或丝裂霉素)；激素(例如黄体生成素释放激素激动剂；例如醋酸亮丙瑞林(leuprolidine)、戈舍瑞林、曲普瑞林、组氨瑞林、比卡鲁胺、氟他胺和/或尼鲁米特)；抗体(例如阿昔单抗、阿达木单抗、阿仑单抗、阿替珠单抗(atlizumab)、巴利昔单抗、贝利木单抗、贝伐单抗、brentuximabvedotin、卡那单抗(canakinumab)、西妥昔单抗、certolizumabpegol、达珠单抗、地诺单抗、依库珠单抗、依法珠单抗、吉姆单抗、戈利木单抗、替伊莫单抗、英夫利昔单抗、伊匹木单抗、莫罗单抗-cd3、那他珠单抗、奥法木单抗(ofatumumab)、奥马珠单抗、帕利珠单抗、帕尼单抗(panitumumab)、雷珠单抗、利妥昔单抗、托珠单抗、托西莫单抗和/或曲妥单抗)；抗血管生成剂；细胞因子；血栓形成剂；生长抑制剂；驱虫剂(anti-helminthicagent)；靶向免疫关卡受体的免疫关卡抑制剂，所述免疫关卡受体选自ctla-4、pd-1、pd-l1、pd-1–pd-l1、pd-1–pd-l2、t细胞免疫球蛋白和粘蛋白3(tim3或havcr2)、半乳凝素(galectin)9–tim3、磷脂酰丝氨酸–tim3、淋巴细胞活化基因3蛋白(lag3)、mhcii类–lag3、4-1bb–4-1bb配体、ox40–ox40配体、gitr、gitr配体–gitr、cd27、cd70-cd27、tnfrsf25、tnfrsf25-tl1a、cd40l、cd40–cd40配体、hvem–light–lta、hvem、hvem–btla、hvem–cd160、hvem–light、hvem–btla–cd160、cd80、cd80–pdl-1、pdl2–cd80、cd244、cd48–cd244、cd244、icos、icos–icos配体、b7-h3、b7-h4、vista、tmigd2、hhla2–tmigd2、嗜乳脂蛋白，包括btnl2，siglec家族，tigit和pvr家族成员，kirs，ilts和lirs，nkg2d和nkg2a，mica和micb，cd244，cd28，cd86–cd28，cd86–ctla，cd80–cd28，磷脂酰丝氨酸，tim3，磷脂酰丝氨酸–tim3，sirpa–cd47，vegf，神经毡蛋白，cd160，cd30，和cd155(例如ctla-4或pd1或pd-l1)和其它免疫调节剂，如白细胞介素-2(il-2)、吲哚胺2,3-双加氧酶(ido)、il-10、转化生长因子-β(tgfβ)、cd39、cd73腺苷-cd39-cd73和cxcr4-cxcl12。
所述对象可患有癌症；例如，所述对象已经历和/或正在经历和/或将经历一种或多种癌症疗法。
癌症的非限制性实例包括急性髓性白血病、肾上腺皮质癌、卡波西肉瘤、淋巴瘤、肛门癌、阑尾癌、畸胎瘤/横纹肌样(rhabdoid)瘤、基底细胞癌、胆管癌、膀胱癌、骨癌、脑癌、乳癌、支气管肿瘤、类癌瘤、心脏肿瘤、宫颈癌、脊索瘤、慢性淋巴细胞白血病、慢性骨髓增生性肿瘤、结肠癌、结直肠癌、颅咽管瘤、子宫内膜癌、室管膜瘤、食道癌、成感觉神经细胞瘤、尤因肉瘤、眼癌、输卵管癌、胆囊癌、胃肠道类癌瘤、胃肠道间质瘤、胚细胞瘤、多毛细胞白血病、头颈癌、心脏癌、肝癌、下咽癌、胰腺癌、肾癌、喉癌、慢性髓性白血病、唇和口腔癌、肺癌、黑素瘤、merkel细胞癌、间皮瘤、口癌(mouthcancer)、口腔癌(oralcancer)、骨肉瘤、卵巢癌、阴茎癌、咽癌、前列腺癌、直肠癌、唾液腺癌、皮肤癌、小肠癌、软组织肉瘤、睾丸癌、咽喉癌(throatcancer)、甲状腺癌、尿道癌、子宫癌、阴道癌和外阴癌。
在其它实施方案中，哺乳动物已被鉴定为患有癌症或感染性疾病。代表性的感染性疾病包括但不限于不动杆菌(acinebacter)感染、放线菌病、非洲昏睡病(africansleepingsickness)、获得性免疫缺陷综合征、阿米巴病、无形体病、炭疽、溶血隐秘杆菌(arcanobacteriumhaemolyticum)感染、阿根廷出血热、蛔虫病、曲霉病、星形病毒感染、巴贝虫病、蜡样芽孢杆菌感染、细菌性肺炎、细菌性阴道病、拟杆菌属感染、小袋纤毛虫病、拜林蛔线虫(baylisascaris)感染、bk病毒感染、黑色发结节病、人芽囊原虫(blastocystichominis)感染、芽生菌病、玻利维亚出血热、肉毒中毒、巴西出血热、布氏菌病、腺鼠疫(bubonicplaque)、伯克霍尔德菌(burkholderi)感染、布鲁里溃疡、嵌杯样病毒属(calicivirus)感染、弯曲杆菌病(camptobacteriosis)、念珠菌病、猫抓病、蜂窝织炎、查加斯病、软下疳、水痘、切昆贡亚热、衣原体、肺炎衣原体感染、霍乱、着色芽生菌病、华支睾吸虫病、艰难梭菌(clostridiumdifficile)感染、球孢子菌病、科洛拉多蜱传热、普通感冒、克-雅病(creutzfeldt-jakobdisease)、克里米亚-刚果出血热、隐球菌病(crytococcosis)、隐孢子虫病、皮肤幼虫移行症(cutaneouslarvamigrans)、环孢子虫病(cyclosporiasis)、猪囊尾蚴病、巨细胞病毒感染、登革热、栅藻(desmodesmus)感染、去鞭毛病(deintamoebiasis)、白喉、裂头绦虫病、龙线虫病、埃博拉出血热、棘球蚴病、埃利希菌病、蛲虫病、肠球菌属(enterococcus)感染、肠道病毒(enterovirus)感染、流行性斑疹伤寒、红斑感染、幼儿急疹、姜片虫病、肝片吸虫病(fasciolosis)、致命性家族性失眠症、丝虫病、梭菌肌坏死(clostridiummyonecrosis)引起的食物中毒、独立生存阿米巴感染(free-livingamebicinfection)、梭杆菌属(fusobacterium)感染、气性坏疽、地丝菌病、
化学实体可以肿瘤内施用。
化学实体可以全身施用(包括但不限于口服、皮下、肌内、静脉内)。
该方法可以进一步包括识别所述对象。
其它实施方案包括在发明详细描述和/或权利要求中描述的那些。
定义
为了便于理解本文所述的公开内容，下面定义了许多附加术语。通常，本文所用的命名法和本文所述的有机化学、药物化学和药理学中的实验室操作是本领域熟知和常用的那些。除非另外定义，否则本文使用的所有技术和科学术语通常具有与本公开内容所属领域的普通技术人员通常理解相同的含义。
除非本文另有明确说明，否则单数形式的称谓也可以包括复数形式。例如，“一个”/“一种”可以指一个/一种或者一个或多个/一种或多种。
除非另有说明，否则任何具有未满足化合价的杂原子被认为具有足以满足化合价的氢原子。
为了清楚起见并根据本领域的标准惯例，在式和表中使用符号
另外，为清楚起见，当取代基具有不在两个字母或符号之间的短线(-)；其用来表示取代基的连接点。例如，-och3是通过氧原子连接的。
如本文所用，术语“nlrp3”意指包括但不限于核酸、多核苷酸、寡核苷酸、有义和反义多核苷酸链、互补序列、肽、多肽、蛋白质、同源和/或直系同源nlrp3分子、同工型、前体、突变体、变体、衍生物、剪接变体、等位基因、不同种属及其活性片段。
nlrp3的“激动剂”包括在蛋白质水平上直接结合或修饰nlrp3以使nlrp3的活性例如通过活化、稳定化、改变分布或其它方式而增加的化合物。
本文所述的一些使nlrp3激动的程度小于nlrp3完全激动剂的化合物可以在测定中起拮抗剂和激动剂的作用。这些化合物拮抗nlrp3完全激动剂对nlrp3的活化，因为它们阻止了nlrp3相互作用的全部作用。然而，这些化合物还可以以自身激活一些nlrp3活性，典型地低于相应量的nlrp3完全激动剂。这样的化合物可以称作“nlrp3的部分激动剂”。
在一些实施方案中，本文所述的化合物为nlrp3的激动剂(例如完全激动剂)。在其它实施方案中，本文所述的化合物为nlrp3的部分激动剂。
通常，受体以活性(ra)和无活性(ri)构象存在。一些影响受体的化合物可以改变ra与ri的比率(ra/ri)。例如，完全激动剂增加ra/ri的比率，并且可以引起“最大的”饱和作用。当与受体结合时，部分激动剂引起的反应比完全激动剂(例如内源性激动剂)引起的反应低。因此，部分激动剂的ra/ri小于完全激动剂的ra/ri。然而，部分激动剂的效力可大于或小于完全激动剂的效力。
如本文所用，关于制剂、组合物或成分的术语“可接受的”指对所治疗的对象的一般健康没有持久的有害影响。
“api”指活性药物成分。
如本文所用，术语“有效量”或“治疗有效量”指足够量的所施用的化学实体(例如显示出线粒体解偶联剂活性的化合物或其药学上可接受的盐和/或水合物和/或共晶；例如诸如氯硝柳胺(niclosamide)或其药学上可接受的盐和/或水合物和/或共晶的化合物；例如诸如氯硝柳胺类似物或其药学上可接受的盐和/或水合物和/或共晶的化合物)，其将在一定程度上缓解所治疗的疾病或病症的一种或多种症状。结果包括减少和/或减轻疾病的体征、症状或原因，或任何其它期望的生物系统改变。例如，用于治疗用途的“有效量”是产生疾病症状的临床显著降低所需的包含本文公开的化合物的组合物的量。任何个体病例中的适当“有效”量采用任何适宜的技术如剂量递增研究来确定。
术语“赋形剂”或“药学上可接受的赋形剂”指药学上可接受的材料、组合物或媒介物，例如液体或固体填充剂、稀释剂、载体、溶剂或包封材料。在一个实施方案中，每种组分在与药物制剂的其它成分相容的意义上都是“药学上可接受的”，并且适合用于与人和动物的组织或器官接触而没有过多的毒性、刺激、过敏反应、免疫原性或其它问题或并发症，与合理的利益/风险比相称。参见例如remington:scienceandpracticeofpharmacy,第22版,pharmaceuticalpress,伦敦,uk(2012)；handbookofpharmaceuticalexcipients,第6版,rowe等人编辑；thepharmaceuticalpressandtheamericanpharmaceuticalassociation:(2009)；handbookofpharmaceuticaladditives,第3版.；ash和ash编辑；gowerpublishingcompany:(2007)；pharmaceuticalpreformulationandformulation,第2版；gibson编辑；crcpressllc:bocaraton,fl,(2009)。
术语“药学上可接受的盐”指化合物的一种形式，其不对其施用的生物体引起显著刺激，并且不消除化合物的生物活性和性质。在一些情况下，药学上可接受的盐是通过使本文所述的化合物与酸如盐酸、氢溴酸、硫酸、硝酸、磷酸、甲磺酸、乙磺酸、对甲苯磺酸、水杨酸等反应而获得。在一些情况下，药学上可接受的盐是通过使本文所述的具有酸性基团的化合物与碱反应以形成盐如铵盐、碱金属盐如钠盐或钾盐、碱土金属盐如钙盐或镁盐、有机碱如二环己胺、n-甲基-d-葡糖胺、三(羟甲基)甲胺的盐、以及与氨基酸如精氨酸、赖氨酸等的盐而获得，或通过之前确定的其它方法获得。药理学上可接受的盐没有特别限制，只要其可以用于药物。本文所述化合物与碱形成的盐的实例包括：其与无机碱如钠、钾、镁、钙和铝的盐；其与有机碱如甲胺、乙胺和乙醇胺的盐；其与碱性氨基酸如赖氨酸和鸟氨酸的盐；和铵盐。盐可以是酸加成盐，其具体实例有与下列酸的酸加成盐：无机酸如盐酸、氢溴酸、氢碘酸、硫酸、硝酸和磷酸；有机酸如甲酸、乙酸、丙酸、草酸、丙二酸、琥珀酸、富马酸、马来酸、乳酸、苹果酸、酒石酸、柠檬酸、甲磺酸和乙磺酸；酸性氨基酸如天冬氨酸和谷氨酸。
术语“药物组合物”指本文所述化合物与其它化学组分(本文统称为“赋形剂”)如载体、稳定剂、稀释剂、分散剂、助悬剂和/或增稠剂的混合物。药物组合物有助于化合物对生物体的施用。本领域存在多种施用化合物的技术，包括但不限于：直肠、口服、静脉内、气溶胶、胃肠外、眼、肺部和局部施用。
术语“对象”指动物，包括但不限于灵长类动物(例如人)、猴子、牛、猪、绵羊、山羊、马、狗、猫、兔、大鼠或小鼠。术语“对象”和“患者”在本文中可互换使用，指例如哺乳动物个体如人。
在治疗疾病或病症的上下文中，术语“治疗”旨在包括减轻或消除障碍、疾病或病症，或与障碍、疾病或病症相关的一种或多种症状；或减缓障碍、疾病或病症或其一种或多种症状的发展、扩散或恶化。“癌症治疗”指以下一种或多种效果：(1)在一定程度上抑制肿瘤生长，包括(i)减慢和(ii)完全生长停滞；(2)肿瘤细胞数量减少；(3)维持肿瘤大小；(4)减小肿瘤大小；(5)抑制，包括(i)减少、(ii)减慢或(iii)完全阻止肿瘤细胞浸润到外周器官中；(6)抑制，包括(i)减少、(ii)减慢或(iii)完全阻止转移；(7)增强抗肿瘤免疫反应，这可导致(i)维持肿瘤大小、(ii)减小肿瘤大小、(iii)减缓肿瘤生长、(iv)减少、减缓或阻止侵袭和/或(8)在一定程度上缓解与该病症相关的一种或多种症状的严重程度或数量。
术语“卤素”或“卤代”指氟(f)、氯(cl)、溴(br)或碘(i)。
术语“烷基”指含有指定数目碳原子的烃链，其可以是直链或支链。例如，c1-10表示该基团在其中可具有1至10个碳原子(含端点)。非限制性实例包括甲基、乙基、异丙基、叔丁基、正己基。
术语“亚烷基”指支链或无支链二价烷基(例如-ch2-)。
术语“卤代烷基”指其中一个或多个氢原子被独立选择的卤素取代的烷基。
术语“烷氧基”指-o-烷基(例如-och3)。
术语“卤代烷氧基”指-o-如上文所定义的卤代烷基，其具有通过氧桥连接的指示的碳原子数。例如，“c1-6卤代烷氧基”意欲包括c1、c2、c3、c4、c5和c6卤代烷氧基。卤代烷氧基的实例包括但不限于三氟甲氧基、2,2,2-三氟乙氧基和五氟乙氧基。
术语“烯基”指具有一条或多条碳-碳双键的烃链，其可以为直链或支链的。烯基部分包含指示数量的碳原子。例如，c2-6表示基团可以在其中具有2-6个碳原子(含端点)。
术语“炔基”指具有一条或多条碳-碳三键的烃链，其可以为直链或支链的。炔基部分包含指示数量的碳原子。例如，c2-6表示基团可以在其中具有2-6个碳原子(含端点)。
术语“芳族”通常指包括共振稳定的4n+2pi电子的环状阵列的环，其中n为整数(例如1或2)。芳族部分包括芳基和杂芳基。术语“非芳族”描述不属于“芳族”定义的任何部分。
术语“芳基”指6-碳单环、10-碳双环或14-碳三环芳族环系统，其中每个环的0、1、2、3或4个原子可被取代基取代，并且其中包含单环基团的环是芳族的，和其中包含双环或三环基团的稠合环中至少有一个是芳族的，例如四氢萘基。芳基的实例还包括苯基、萘基等。
本文所用的术语“环烷基”包括具有3至10个碳、优选3至8个碳、更优选3至6个碳的饱和环烃基，其中环烷基可任选被取代。优选的环烷基包括但不限于环丙基、环丁基、环戊基、环戊烯基、环己基、环己烯基、环庚基和环辛基。本文所用的术语“亚环烷基”指二价环烷基。
术语“杂芳基”指芳族5-8元单环、8-12元双环或11-14元三环系统，并且如果是单环则具有1-3个杂原子，如果是双环则具有1-6个杂原子，或者如果是三环则具有1-9个杂原子，所述杂原子选自o、n或s(例如，如果分别为单环、双环或三环，则分别具有碳原子和1-3、1-6或1-9个n、o或s杂原子)，其中每个环的0、1、2、3或4个原子可以被取代基取代，并且其中包含单环基团的环是芳族的和其中包含双环或三环基团的稠合环中至少有一个是芳族的(但并不必须是含有杂原子的环，例如四氢异喹啉基)。杂芳基的实例还包括吡啶基、呋喃基(furyl或furanyl)、咪唑基、苯并咪唑基、嘧啶基、噻吩基(thiophenyl或thienyl)、喹啉基、吲哚基、噻唑基等。
术语“杂环基”指非芳族5-8元单环、8-12元双环或11-14元三环系统，如果是单环则具有1-3个杂原子，如果是双环则具有1-6个杂原子，或者如果是三环则具有1-9个杂原子，所述杂原子选自o、n或s(例如，如果分别为单环、双环或三环，则分别具有碳原子和1-3、1-6或1-9个n、o或s杂原子)，其中每个环的0、1、2或3个原子可以被取代基取代。杂环基的实例包括哌嗪基、吡咯烷基、二噁烷基、吗啉基、四氢呋喃基等。术语“亚杂环烷基”指二价杂环基。
另外，构成本发明实施方案的化合物的原子旨在包括这些原子的所有同位素形式。如本文所用，同位素包括具有相同原子数但质量数不同的那些原子。作为一般而非限制性实例，氢的同位素包括氚和氘，碳的同位素包括13c和14c。
在附图和以下描述中阐述了本发明的一个或多个实施方案的细节。根据说明书和附图以及权利要求，本发明的其它特征和优点将显而易见。
本公开内容的特征是调节(例如激动或部分激动)nlrp3的化学实体(例如化合物或其药学上可接受的盐和/或水合物和/或共晶和/或所述化合物的药物组合)，其可用于例如在对象(例如人)中治疗病症、疾病或障碍，其中nlrp3信号传导增加可纠正促成该病症、疾病或障碍的病状和/或症状和/或进展的先天免疫活性缺陷(例如癌症)。本公开内容的特征还在于组合物以及使用和制备它们的其它方法。
药物组合物和施用
在一些实施方案中，化学实体(例如调节(例如激动或部分激动)nlrp3的化合物或其药学上可接受的盐和/或水合物和/或共晶和/或药物组合)作为药物组合物施用，所述药物组合物包含化学实体和一种或多种药学上可接受的赋形剂，和任选的一种或多种如本文所述的其它治疗剂。
在一些实施方案中，药物组合物包含本发明的化合物或其盐以及一种或多种药学上可接受的赋形剂。在一些实施方案中，药物组合物包含本发明的化合物或其药学上可接受的盐以及一种或多种药学上可接受的赋形剂。在一些实施方案中，药物组合物包含治疗有效量的本发明的化合物或其药学上可接受的盐以及一种或多种药学上可接受的赋形剂。
在一些实施方案中，化学实体可以与一种或多种常规药物赋形剂组合施用。药学上可接受的赋形剂包括但不限于离子交换剂、氧化铝、硬脂酸铝、卵磷脂、自乳化药物递送系统(sedds)如d-α-生育酚聚乙二醇1000琥珀酸酯、用于药物剂型的表面活性剂如吐温、泊洛沙姆或其它类似的聚合物递送基质、血清蛋白如人血清白蛋白、缓冲物质如磷酸盐、三羟甲基氨基甲烷(tris)、甘氨酸、山梨酸、山梨酸钾、饱和植物脂肪酸的偏甘油酯混合物、水、盐或电解质如硫酸鱼精蛋白、磷酸氢二钠、磷酸氢钾、氯化钠、锌盐、胶体二氧化硅、三硅酸镁、聚乙烯吡咯烷酮、纤维素类物质、聚乙二醇、羧甲基纤维素钠、聚丙烯酸酯、蜡、聚乙烯-聚氧丙烯嵌段聚合物和羊毛脂(woolfat)。环糊精如α-、β-和γ-环糊精或者化学改性的衍生物如羟烷基环糊精、包括2-和3-羟丙基-β-环糊精或者其它增溶的衍生物也可用于增强本文所述化合物的递送。可以制备含有0.005％-100％量的本文所述化学实体且余量由无毒赋形剂组成的剂型或组合物。预期的组合物可含有0.001％-100％的本文提供的化学实体，在一个实施方案中为0.1-95％，在另一个实施方案中为75-85％，在另一个实施方案中为20-80％。制备这类剂型的实际方法对本领域技术人员而言是已知的或者将是显而易见的；例如参见remington:scienceandpracticeofpharmacy,第22版(pharmaceuticalpress,伦敦,uk.2012)。
施用途径和组合物成分
在一些实施方案中，本文所述的化学实体或其药物组合物可通过任何可接受的施用途径施用于需要其的对象。可接受的施用途径包括但不限于颊(buccal)、皮肤、宫颈内、鼻窦内(endosinusial)、气管内、肠内、硬膜外、间质、腹腔内、动脉内、支气管内、囊内(intrabursal)、脑内、脑池内、冠状动脉内、皮内、管内、十二指肠内、硬膜内、表皮内、食管内、胃内、齿龈内(intragingival)、回肠内、淋巴管内、髓内、脑膜内、肌内、卵巢内、腹膜内、前列腺内、肺内、窦内、脊柱内、滑膜内、睾丸内、鞘内、管内(intratubular)、肿瘤内、子宫内、血管内、静脉内、鼻、鼻胃(nasogastric)、口服、胃肠外、经皮、硬膜外、直肠、呼吸(吸入)、皮下、舌下、粘膜下、局部、透皮、经粘膜、经气管、输尿管、尿道和阴道。在一些实施方案中，优选的施用途径是胃肠外(例如肿瘤内)。在一些实施方案中，优选的施用途径是全身性的。
组合物可以配制用于胃肠外施用，例如配制用于通过静脉内、肌内、皮下或甚至腹膜内途径注射。典型地，这种组合物可以制成注射剂，可以是液体溶液或混悬液；也可以制备适合用于在注射前加入液体制备溶液或混悬液的固体形式；并且制剂也可以乳化。根据本公开内容，这些制剂的制备对于本领域技术人员而言是已知的。
适于注射使用的药物形式包括无菌水溶液或分散液；包含芝麻油、花生油或丙二醇水溶液的制剂；用于临时制备无菌可注射溶液或分散液的无菌粉末。在所有情况下，该形式必须是无菌的并且必须是流动的，以至于它可以容易地注射。其还应在生产和储存条件下是稳定的，并且必须被防腐以防止微生物如细菌和真菌的污染作用。
载体也可以是溶剂或分散介质，其含有例如水、乙醇、多元醇(例如甘油、丙二醇和液体聚乙二醇等)、其适宜的混合物和植物油。例如，通过使用包衣如卵磷脂、在分散体的情况下通过保持所需的粒度、以及通过使用表面活性剂，可以保持适当的流动性。可以通过各种抗细菌剂和抗真菌剂如尼泊金酯、氯丁醇、苯酚、山梨酸、硫柳汞等来阻止微生物的作用。在许多情况下，优选包含等渗剂，例如糖或氯化钠。通过在组合物中使用延迟吸收的物质，例如单硬脂酸铝和明胶，可以实现可注射组合物的延长吸收。
通过将所需量的活性化合物与适当的溶剂和上面列举的各种其它成分(如果需要)混合和然后过滤灭菌，制备无菌可注射溶液。通常，通过将各种灭菌的活性成分掺入无菌媒介物中来制备分散体，所述无菌媒介物含有基础分散介质和选自上面列举的那些的所需其它成分。在用于制备无菌可注射溶液的无菌粉末的情况下，优选的制备方法是真空干燥和冷冻干燥技术，其从之前无菌过滤的溶液产生活性成分加上任何其它所需成分的粉末。
在例如lammers等人,“effectofintratumoralinjectiononbiodistributionandthetherapeuticpotentialofhpmacopolymer-baseddrugdeliverysystems”neoplasia.10:788-795(2006)中讨论了肿瘤内注射。
可用于直肠组合物如凝胶、乳膏、灌肠剂或直肠栓剂的药理学上可接受的赋形剂包括但不限于如下成分中的任何一种或多种：可可脂甘油酯、合成聚合物如聚乙烯吡咯烷酮、peg(如peg软膏)、甘油、甘油明胶、氢化植物油、泊洛沙姆、各种分子量的聚乙二醇和聚乙二醇脂肪酸酯的混合物、凡士林、无水羊毛脂、鲨鱼肝油、糖精钠、薄荷醇、甜杏仁油、山梨醇、苯甲酸钠、anoxidsbn、香草精油、气溶胶、苯氧乙醇中的尼泊金酯、对羟基苯甲酸甲酯钠、对羟基苯甲酸丙酯钠、二乙胺、卡波姆(carbomers)、卡波普(carbopol)、羟基苯甲酸甲酯、聚乙二醇十六十八烷基醚、椰油酰基辛酰癸酸酯、异丙醇、丙二醇、液体石蜡、黄原胶、羧基-偏亚硫酸氢盐(carboxy-metabisulfite)、乙二胺四乙酸钠、苯甲酸钠、偏亚硫酸氢钾、葡萄柚籽提取物、甲基磺酰基甲烷(msm)、乳酸、甘氨酸、维生素如维生素a和e以及乙酸钾。
在一些实施方案中，栓剂可以通过将本文所述的化学实体与适宜的无刺激性赋形剂或载体如可可脂、聚乙二醇或栓剂蜡混合来制备，所述赋形剂或载体在环境温度下为固体但在体温下为液体，因此可在直肠内熔化并释放出活性化合物。在其它实施方案中，用于直肠施用的组合物是灌肠剂的形式。
在其它实施方案中，本文所述的化合物或其药物组合物适于通过口服施用(例如固体或液体剂型)局部递送至消化道或胃肠(gi)道。
用于口服给药的固体剂型包括胶囊、片剂、丸剂、散剂和颗粒剂。在这种固体剂型中，化学实体与一种或多种药学上可接受的赋形剂混合，例如柠檬酸钠或磷酸二钙和/或：a)填充剂或增量剂，例如淀粉、乳糖、蔗糖、葡萄糖、甘露糖醇和硅酸，b)粘合剂，例如羧甲基纤维素、藻酸盐、明胶、聚乙烯吡咯烷酮、蔗糖和阿拉伯胶，c)保湿剂如甘油，d)崩解剂如琼脂-琼脂、碳酸钙、马铃薯或木薯淀粉、海藻酸、一些硅酸盐和碳酸钠，e)溶液延迟剂如石蜡，f)吸收促进剂如季铵化合物，g)润湿剂如鲸蜡醇和甘油单硬脂酸酯，h)吸收剂如高岭土和膨润土，和i)润滑剂，例如滑石、硬脂酸钙、硬脂酸镁、固体聚乙二醇、十二烷基硫酸钠以及它们的混合物。在胶囊、片剂和丸剂的情况下，剂型还可包含缓冲剂。类似类型的固体组合物还可以用作软和硬填充明胶胶囊中的填充剂，使用诸如乳糖(lactose)或奶糖(milksugar)以及高分子量聚乙二醇等赋形剂。
在一个实施方案中，组合物将采取单位剂型如丸剂或片剂的形式，因此组合物可以含有本文提供的化学实体以及稀释剂如乳糖、蔗糖、磷酸二钙等；润滑剂如硬脂酸镁等；和粘合剂如淀粉、阿拉伯树胶、聚乙烯吡咯烷、明胶、纤维素、纤维素衍生物等。在另一种固体剂型中，将粉末、丸(marume)、溶液或混悬液(例如在碳酸亚丙酯、植物油、pegs、泊洛沙姆124或甘油三酯中)包封在胶囊(明胶或纤维素基胶囊)中。还包括其中本文提供的一种或多种化学实体或另外的活性剂在物理上分开的单位剂型；例如含有每种药物的颗粒剂(或胶囊中的片剂)的胶囊；双层片；两室凝胶套(cap)等。也关注肠溶包衣或延迟释放口服剂型。
其它生理学上可接受的化合物包括润湿剂、乳化剂、分散剂或特别适用于防止微生物生长或作用的防腐剂。各种防腐剂是熟知的，包括例如苯酚和抗坏血酸。
在一些实施方案中，赋形剂是无菌的并且通常不含不需要的物质。这些组合物可以通过常规的熟知灭菌技术灭菌。对于各种口服剂型如片剂和胶囊剂的赋形剂，不需要灭菌。usp/nf标准通常是足够的。
在一些实施方案中，固体口服剂型可进一步包括一种或多种在化学上和/或结构上使组合物易于将化学实体递送至胃或下胃肠道例如升结肠和/或横结肠和/或远端结肠和/或小肠的组分。示例性的制剂技术描述于例如filipski,k.j.等人,currenttopicsinmedicinalchemistry,2013,13,776-802中。
实例包括上胃肠道靶向技术，例如accordionpill(intecpharma)、漂浮胶囊和能够粘附于粘膜壁的材料。
其它实例包括下胃肠道靶向技术。为了靶向肠道中的各个区域，可以采用多种肠溶/ph响应性包衣和赋形剂。这些材料典型地是设计用于在特定ph范围内溶解或侵蚀的聚合物，其基于所需药物释放的胃肠区域而选择。这些材料还起到保护酸不稳定性药物免受胃液影响的作用，或在活性成分可能刺激上胃肠道的情况下起到限制暴露的作用(例如羟丙基甲基纤维素邻苯二甲酸酯系列，coateric(聚乙酸乙烯邻苯二甲酸酯)、醋酸纤维素邻苯二甲酸酯、醋酸羟丙基甲基纤维素琥珀酸酯、eudragit系列(甲基丙烯酸-甲基丙烯酸甲酯共聚物)和marcoat)。其它技术包括响应胃肠道中局部菌群的剂型、压力控制的结肠递送胶囊和pulsincap。
眼部组合物可包含但不限于以下任何一种或多种：粘性物质(viscogens)(例如羧甲基纤维素、甘油、聚乙烯吡咯烷酮、聚乙二醇)；稳定剂(例如pluronic(三嵌段共聚物)、环糊精)；防腐剂(例如苯扎氯铵、etda、sofzia(硼酸、丙二醇、山梨醇和氯化锌；alconlaboratories,inc.)、purite(稳定的氧氯络合物；allergan,inc.))。
局部用组合物可包括软膏和乳膏。软膏是半固体制剂，通常基于凡士林或其它石油衍生物。含有所选活性剂的乳膏通常是粘性液体或半固体乳液，通常是水包油或油包水型的。乳膏基质通常是可水洗的，并含有油相、乳化剂和水相。油相，有时也称为“内”相，通常由凡士林和脂肪醇如鲸蜡醇或硬脂醇组成；水相的体积通常(但不一定)超过油相的体积，并且通常含有保湿剂。乳膏制剂中的乳化剂通常是非离子、阴离子、阳离子或两性表面活性剂。与其它载体或溶媒一样，软膏基质应该是惰性的、稳定的、无刺激性的和非致敏性的。
在任何前述实施方案中，本文所述的药物组合物可包括以下的一种或多种：脂质、双层间交联的多层囊泡、基于可生物降解的聚(d,l-乳酸-共-乙醇酸)[plga]-或基于聚酐的纳米颗粒或微粒，以及纳米多孔颗粒支撑的脂质双层。
剂量
剂量可以根据患者的需要、所治疗病症的严重程度和所用的具体化合物而变化。对于特定情况的适当剂量的确定可以由医学领域的技术人员确定。总日剂量可以在一天中分开并分批施用或通过提供连续递送的方式施用。
在一些实施方案中，本文所述的化合物以约0.001mg/kg至约500mg/kg(例如约0.001mg/kg至约200mg/kg；约0.01mg/kg至约200mg/kg；约0.01mg/kg至约150mg/kg；约0.01mg/kg至约100mg/kg；约0.01mg/kg至约50mg/kg；约0.01mg/kg至约10mg/kg；约0.01mg/kg至约5mg/kg；约0.01mg/kg至约1mg/kg；约0.01mg/kg至约0.5mg/kg；约0.01mg/kg至约0.1mg/kg；约0.1mg/kg至约200mg/kg；约0.1mg/kg至约150mg/kg；约0.1mg/kg至约100mg/kg；约0.1mg/kg至约50mg/kg；约0.1mg/kg至约10mg/kg；约0.1mg/kg至约5mg/kg；约0.1mg/kg至约1mg/kg；约0.1mg/kg至约0.5mg/kg)的剂量施用。
方案
上述剂量可以每天施用(例如以单剂量或两个或更多个分剂量的形式)或非每天施用(例如每隔一天、每两天、每三天、每周一次、周两次、每两周一次、每月一次)。
在一些实施方案中，本文所述化合物的施用时间为1天、2天、3天、4天、5天、6天、7天、8天、9天、10天、11天、12天、13天、14天、3周、4周、5周、6周、7周、8周、9周、10周、11周、12周、4个月、5个月、6个月、7个月、8个月、9个月、10个月、11个月、12个月或更长时间。在另一个实施方案中，停止施用的时间段为1天、2天、3天、4天、5天、6天、7天、8天、9天、10天、11天、12天、13天、14天、3周、4周、5周、6周、7周、8周、9周、10周、11周、12周、4个月、5个月、6个月、7个月、8个月、9个月、10个月、11个月、12个月或更长时间。在一个实施方案中，将治疗化合物给予个体一段时间，然后间隔一段时间。在另一个实施方案中，将治疗化合物在第一时期施用，在第一时期后是第二时期并在第二时期停止施用，然后是第三时期并且在该时期开始给予治疗性化合物，在第三时期后是第四时期并在第四时期停止施用。在该实施方案的一个方面，治疗化合物的施用期后是停止施用期，并如此重复确定或不确定的时间段。在进一步的实施方案中，施用期为1天、2天、3天、4天、5天、6天、7天、8天、9天、10天、11天、12天、13天、14天、3周、4周、5周、6周、7周、8周、9周、10周、11周、12周、4个月、5个月、6个月、7个月、8个月、9个月、10个月、11个月、12个月或更长时间。在另一个实施方案中，停止施用的时间段为1天、2天、3天、4天、5天、6天、7天、8天、9天、10天、11天、12天、13天、14天、3周、4周、5周、6周、7周、8周、9周、10周、11周、12周、4个月、5个月、6个月、7个月、8个月、9个月、10个月、11个月、12个月或更长时间。
治疗方法
在一些实施方案中，提供了用于治疗患有病症、疾病或障碍的对象的方法，其中nlrp3信号传导增加可纠正促成该病症、疾病或障碍的病状和/或症状和/或进展的先天免疫活性缺陷(例如与免疫应答不足相关的病症、疾病或障碍)(例如癌症)。
适应症
在本文所述的任何方法中，所述对象可患有癌症。在本文所述任何方法的一些实例中，哺乳动物已被鉴定为患有癌症，或已被诊断为患有癌症。
癌症的非限制性实例包括：急性髓性白血病、肾上腺皮质癌、卡波西肉瘤、淋巴瘤、肛门癌、阑尾癌、畸胎瘤/横纹肌样瘤、基底细胞癌、胆管癌、膀胱癌、骨癌、脑癌、乳癌、支气管肿瘤、类癌瘤、心脏肿瘤、宫颈癌、脊索瘤、慢性淋巴细胞白血病、慢性骨髓增生性肿瘤、结肠癌、结直肠癌、颅咽管瘤、子宫内膜癌、室管膜瘤、食道癌、成感觉神经细胞瘤、尤因肉瘤、眼癌、输卵管癌、胆囊癌、胃肠道类癌瘤、胃肠道间质瘤、胚细胞瘤、多毛细胞白血病、头颈癌、心脏癌、肝癌、下咽癌、胰腺癌、肾癌、喉癌、慢性髓性白血病、唇和口腔癌、肺癌、黑素瘤、merkel细胞癌、间皮瘤、口癌、口腔癌、骨肉瘤、卵巢癌、阴茎癌、咽癌、前列腺癌、直肠癌、唾液腺癌、皮肤癌、小肠癌、软组织肉瘤、睾丸癌、咽喉癌、甲状腺癌、尿道癌、子宫癌、阴道癌和外阴癌。
在一些实施方案中，癌症的非限制性实例包括：乳癌、结肠癌、直肠癌、结直肠癌、胰腺癌和前列腺癌。
用于诊断对象患有癌症或将哺乳动物鉴定为患有癌症的方法是本领域熟知的。例如，医学专业人员(例如医生、助理医师或技术人员)可以通过观察哺乳动物中癌症的一种或多种症状来诊断哺乳动物的癌症。癌症症状的非限制性实例包括：疲劳、皮肤下触及的肿块或增厚区域、体重变化、黄疸、皮肤变黑或发红、不愈合的溃疡、现存痣的变化、肠或膀胱习惯的变化、持续性咳嗽或呼吸困难、吞咽困难、声音嘶哑、持续消化不良或进食后不适、持续性不明原因的肌肉或关节疼痛、持续性不明原因的发烧或盗汗、以及不明原因的出血或瘀斑。诊断个体患有癌症或将个体鉴定为患有癌症的方法可以进一步包括进行一种或多种诊断测试(例如对活组织或血液样本进行一种或多种诊断测试)。
在本文所述任何方法的一些实例中，对象可以是患有癌症的对象、被诊断为患有癌症的对象、或被鉴定为患有对先前施用的癌症治疗无反应的癌症的对象。用于诊断对象患有癌症或将哺乳动物鉴定为患有癌症的诊断测试是本领域已知的。
在一些实施方案中，提供了用于治疗患有病症、疾病或障碍的对象的方法，其中nlrp3信号传导增加可纠正促成该病症、疾病或障碍的病状和/或症状和/或进展的先天免疫活性缺陷(例如与免疫应答不足相关的病症、疾病或障碍)(例如癌症)。
在一些实施方案中，本发明提供了治疗癌症的方法，其中所述癌症可以是任何不引起最佳先天免疫系统应答的癌症。
先天免疫系统指免疫系统的一部分，该系统由细胞组成，这些细胞以非抗原特异性的方式对生物体的威胁(如感染或癌症)做出反应，并刺激适应性抗原特异性免疫系统。通常，完全消除威胁并提供长效保护(＝免疫力)需要适应性抗原特异性免疫系统的活动，而该活动又取决于先天免疫系统的刺激。
在一些实施方案中，本发明提供了治疗病例的方法，所述癌症基于对t-细胞关卡抑制的抗性而选择，其独立于癌症类型并且基于对先前t-细胞关卡抑制剂疗法的反应失败或基于通常对t-细胞关卡抑制剂疗法有抵抗性的癌症类型，例如激素受体阳性乳癌、小随体(microsatellite)稳定结肠或直肠癌、胰腺癌和前列腺癌。
在一些另外的实施方案中，本发明提供了治疗癌症的方法，包括本发明的nlpr3激动剂，以治疗具有低cd8+t-细胞浸润的非炎症性肿瘤，从而增强肿瘤的免疫原性并促进炎症反应。例如，基于显示低cd8+t-细胞浸润或cd8+t-细胞产生的低基因表达的活检结果，组合可以用于治疗实体瘤。
对t-细胞关卡抑制的抗性指，根据相应癌症的共识应答标准(例如大多数实体瘤的recist1.1)，治疗时癌症进展或在治疗6个月内无应答。
t-细胞浸润指，根据肿瘤活检标本的免疫组织化学分析，所有有核细胞中的t-细胞百分比。
cd8+t-细胞浸润指，根据肿瘤活检标本的免疫组织化学分析，所有有核细胞中cd8+细胞的百分比。
除了用于定量活检标本中cd8+t-细胞的免疫组织化学外，还可以通过使用例如下一代测序定量mrna来测量cd8+t-细胞产生的基因的表达(如干扰素-γ)，并告知cd8+t细胞浸润情况。不同研究组正在通过mrna定量免疫组织化学技术来确定低和高cd8+t-细胞浸润的阈值，并且将跨癌症以及特定癌症的cd8+t-细胞浸润的频谱考虑在内。
在本文所述的任何方法中，对象可患有感染性疾病。在本文所述任何方法的一些实例中，对象已被鉴定为患有感染性疾病，或已被诊断为患有感染性疾病。例如，感染性疾病可由细菌、病毒、真菌、寄生虫或分枝杆菌引起。
感染性疾病的非限制性实例包括：不动杆菌感染、放线菌病、非洲昏睡病、获得性免疫缺陷综合征、阿米巴病、无形体病、炭疽、溶血隐秘杆菌感染、阿根廷出血热、蛔虫病、曲霉病、星形病毒感染、巴贝虫病、蜡样芽孢杆菌感染、细菌性肺炎、细菌性阴道病、拟杆菌属感染、小袋纤毛虫病、拜林蛔线虫感染、bk病毒感染、黑色发结节病、人芽囊原虫感染、芽生菌病、玻利维亚出血热、肉毒中毒、巴西出血热、布氏菌病、腺鼠疫、伯克霍尔德菌感染、布鲁里溃疡、嵌杯样病毒属感染、弯曲杆菌病、念珠菌病、猫抓病、蜂窝织炎、查加斯病、软下疳、水痘、切昆贡亚热、衣原体、肺炎衣原体感染、霍乱、着色芽生菌病、华支睾吸虫病、艰难梭菌感染、球孢子菌病、科洛拉多蜱传热、普通感冒、克-雅病、克里米亚-刚果出血热、隐球菌病、隐孢子虫病、皮肤幼虫移行症、环孢子虫病、猪囊尾蚴病、巨细胞病毒感染、登革热、栅藻感染、去鞭毛病、白喉、裂头绦虫病、龙线虫病、埃博拉出血热、棘球蚴病、埃利希菌病、蛲虫病、肠球菌感染、肠道病毒感染、流行性斑疹伤寒、红斑感染、幼儿急疹、姜片虫病、肝片吸虫病、致命性家族性失眠症、丝虫病、梭状芽孢杆菌性肌坏死引起的食物中毒、独立生存阿米巴感染、梭杆菌属感染、气性坏疽、地丝菌病、
用于诊断对象患有感染性疾病或将对象鉴定为患有感染性疾病的方法是本领域熟知的。例如，医学专业人员(例如医师、助理医师或技术人员)可以通过观察对象中感染性疾病的一种或多种症状来诊断对象的感染性疾病。感染性疾病症状的非限制性实例包括：发烧、腹泻、疲劳和肌肉疼痛。诊断哺乳动物患有感染性疾病或将对象鉴定为患有感染性疾病的方法可以进一步包括进行一种或多种诊断测试(例如对活组织或血液样品进行一种或多种诊断测试)。用于诊断对象患有感染性疾病或将对象鉴定为患有感染性疾病的诊断测试是本领域已知的。
组合疗法
本公开内容涉及单一疗法方案以及组合治疗方案。
在一些实施方案中，本文所述的方法可进一步包括将一种或多种另外的疗法(例如一种或多种另外的治疗剂和/或一种或多种治疗方案)与本文所述的化合物组合施用。
在一些实施方案中，本文描述的方法可以进一步包括施用一种或多种另外的癌症疗法。
一种或多种另外的癌症疗法可包括但不限于手术、放射疗法、化学疗法、毒素疗法、免疫疗法、冷冻疗法、癌症疫苗(例如hpv疫苗、乙型肝炎疫苗、oncophage、provenge)和基因疗法以及它们的组合。免疫疗法包括但不限于过继性细胞治疗、干细胞和/或树突细胞的衍生、输血、灌洗和/或其它治疗，包括但不限于冷冻肿瘤。
在一些实施方案中，一种或多种另外的癌症疗法是化学疗法，其可以包括施用一种或多种另外的化学治疗剂。
在一些实施方案中，另外的癌症疗法包括(化学治疗剂)免疫调节部分，例如免疫关卡抑制剂。在这些实施方案的一些方案中，免疫关卡抑制剂靶向选自下列的免疫关卡受体：ctla-4、pd-1、pd-l1、pd-1–pd-l1、pd-1–pd-l2、t细胞免疫球蛋白和粘蛋白3(tim3或havcr2)、半乳凝素9–tim3、磷脂酰丝氨酸–tim3、淋巴细胞活化基因3蛋白(lag3)、mhcii类–lag3、4-1bb–4-1bb配体、ox40–ox40配体、gitr、gitr配体–gitr、cd27、cd70-cd27、tnfrsf25、tnfrsf25–tl1a、cd40l、cd40–cd40配体、hvem–light–lta、hvem、hvem–btla、hvem–cd160、hvem–light、hvem–btla–cd160、cd80、cd80–pdl-1、pdl2–cd80、cd244、cd48–cd244、cd244、icos、icos–icos配体、b7-h3、b7-h4、vista、tmigd2、hhla2–tmigd2、嗜乳脂蛋白包括btnl2、siglec家族、tigit和pvr家族成员、kirs、ilts和lirs、nkg2d和nkg2a、mica和micb、cd244、cd28、cd86–cd28、cd86–ctla、cd80–cd28、磷脂酰丝氨酸、tim3、磷脂酰丝氨酸–tim3、sirpa–cd47、vegf、神经毡蛋白、cd160、cd30和cd155(例如ctla-4或pd1或pd-l1)和其它免疫调节剂如白细胞介素-2(il-2)、吲哚胺2,3-双加氧酶(ido)、il-10、转化生长因子-β(tgfβ)、cd39、cd73腺苷–cd39–cd73和cxcr4–cxcl12。参见例如postow,m.j.clin.oncol.33,1(2015)。
在一些实施方案中，免疫关卡抑制剂靶向免疫关卡受体，其选自ctla-4、pd-1、pd-l1、pd-1–pd-l1和pd-1–pd-l2。
在一些实施方案中，免疫关卡抑制剂选自：纳武单抗(nivolumab)(也称作“opdivo”；以前称作5c4、bms-936558、mdx-1106或ono-4538)、帕博利珠单抗(pembrolizumab)(也称作“keytruda”、lambrolizumab和mk-3475,参见wo2008/156712)、pdr001(novartis；参见wo2015/112900)、medi-0680(astrazeneca；amp-514；参见wo2012/145493)、西米普利单抗(cemiplimab)(regn-2810)(regeneron；参见wo2015/112800)、js001(taizhoujunshipharma；参见si-yangliu等人,j.hematol.oncol.10:136(2017))、bgb-a317(beigene；参见wo2015/35606和us2015/0079109)、incshr1210(shr-1210；jiangsuhengruimedicine；参见wo2015/085847；si-yangliu等人,j.hematol.oncol.10:136(2017))、tsr-042(anb011；tesarobiopharmaceutical；参见wo2014/179664)、gls-010(wbp3055；wuxi/harbingloriapharmaceuticals；参见si-yangliu等人,j.hematol.oncol.10:136(2017))、am-0001(armo)、sti-1110(sorrentotherapeutics；参见wo2014/194302)、agen2034(agenus；参见wo2017/040790)、mgd013(macrogenics)；ibi308(innovent；参见wo2017/024465、wo2017/025016、wo2017/132825、wo2017/133540)；bms-936559(以前的12a4或mdx-1105；参见例如美国专利7,943,743和wo2013/173223)、mpdl3280a(也称作rg7446、阿特朱单抗(atezolizumab)和tecentriq；us8,217,149；另外参见herbst等人(2013)jclinoncol31(增刊):3000)、德瓦鲁单抗(durvalumab)(imfinzi；medi-4736；astrazeneca；参见wo2011/066389)、阿维鲁单抗(avelumab)(pfizer；msb-0010718c；bavencio；参见wo2013/079174)、sti-1014(sorrento；参见wo2013/181634)、cx-072(cytomx；参见wo2016/149201)、kn035(3dmed/alphamab；参见zhang等人,celldiscov.7:3(2017年3月)、ly3300054(elilillyco.；参见例如wo2017/034916)、ck-301(checkpointtherapeutics；参见gorelik等人,aacr:abstract4606(2016年4月))；urelumab、pf-05082566、medi6469、trx518、varlilumab、cp-870893、bms-986016、mga271、lirilumab、iph2201、emactuzumab、incb024360、galunisertib、ulocuplumab、bkt140、巴维昔单抗(bavituximab)、cc-90002、贝伐单抗(bevacizumab)、mnrp1685a、伊匹木单抗(ipilimumab)(yervoy；美国专利6,984,720)、mk-1308(merck)、agen-1884(agenusinc.；wo2016/196237)和替西木单抗(tremelimumab)(以前的替卡单抗、cp-675,206；astrazeneca；参见例如wo2000/037504和ribas,updatecancerther.2(3):133-39(2007))。
在一些实施方案中，免疫关卡抑制剂选自：纳武单抗、帕博利珠单抗、js001、bgb-a317、incshr1210、tsr-042、gls-010、sti-1110、mgd013、ibi308、bms-936559、阿特朱单抗、德瓦鲁单抗、阿维鲁单抗、sti-1014、cx-072、kn035、ly3300054、ck-301、urelumab、pf-05082566、medi6469、trx518、varlilumab、bms-986016、伊匹木单抗、agen-1884和替西木单抗。
在这些实施方案的一些中，免疫关卡抑制剂选自：urelumab、pf-05082566、medi6469、trx518、varlilumab、cp-870893、帕博利珠单抗(pd1)、纳武单抗(pd1)、阿特朱单抗(以前的mpdl3280a)(pdl1)、medi4736(pd-l1)、阿维鲁单抗(pd-l1)、pdr001(pd1)、bms-986016、mga271、lirilumab、iph2201、emactuzumab、incb024360、galunisertib、ulocuplumab、bkt140、巴维昔单抗、cc-90002、贝伐单抗和mnrp1685a。
在一些实施方案中，免疫关卡抑制剂选自：纳武单抗、伊匹木单抗、帕博利珠单抗、阿特朱单抗、德瓦鲁单抗和阿维鲁单抗。
在一些实施方案中，免疫关卡抑制剂选自：纳武单抗和伊匹木单抗。
在一些实施方案中，另外的抗癌剂(化学治疗剂)为sting激动剂。例如，sting激动剂可以包括环状二核苷酸，例如camp、cgmp和cgamp以及包括一个或多个以下修饰特征的经修饰的环状二核苷酸(2’-o/3’-o键、硫代磷酸酯键、腺嘌呤和/或鸟嘌呤类似物、2'-oh修饰(例如-och3或替代物，例如-f或n3)。参见例如wo2014/189805。
在一些实施方案中，另外的化学治疗剂是烷化剂。烷化剂之所以如此命名是因为它们能够在细胞、包括但不限于癌细胞中存在的条件下使许多亲核官能团官能化。在进一步的实施方案中，烷化剂包括但不限于顺铂、卡铂、氮芥、环磷酰胺、苯丁酸氮芥、异环磷酰胺和/或奥沙利铂。在一个实施方案中，烷化剂可通过与生物学上重要的分子中的氨基、羧基、巯基和磷酸基团形成共价键来损害细胞功能，或者它们可通过修饰细胞的dna起作用。在进一步的实施方案中，烷化剂是合成的、半合成的或衍生物。
在一些实施方案中，另外的化学治疗剂是抗代谢物。抗代谢物伪装成作为dna构建块的嘌呤或嘧啶，并且通常阻止这些物质在(细胞周期的)“s”期期间掺入dna，停止正常的发育和分裂。抗代谢物还可以影响rna合成。在一个实施方案中，抗代谢物包括但不限于硫唑嘌呤和/或巯嘌呤。在进一步的实施方案中，抗代谢物是合成的、半合成的或衍生物。
在一些实施方案中，另外的化学治疗剂是植物生物碱和/或萜类化合物。这些生物碱来源于植物并且通常通过阻止微管功能来阻断细胞分裂。在一个实施方案中，植物生物碱和/或萜类化合物是长春花生物碱、鬼臼毒素和/或紫杉烷。长春花生物碱通常与微管蛋白上的特定位点结合，通常在细胞周期的m期期间抑制微管蛋白组装成微管。在一个实施方案中，长春花生物碱来源于长春花(madagascarperiwinkle)(catharanthusroseus)(以前称为玫瑰红长春花(vincarosea))，但不限于此。在一个实施方案中，长春花生物碱包括但不限于长春花新碱、长春花碱、长春瑞滨和/或长春地辛。在一个实施方案中，紫杉烷包括但不限于泰素(taxol)、紫杉醇和/或多西他赛。在另一个实施方案中，植物生物碱或萜类化合物是合成的、半合成的或衍生物。在进一步的实施方案中，鬼臼毒素是但不限于依托泊苷和/或替尼泊苷。在一个实施方案中，紫杉烷是但不限于多西他赛和/或奥他赛(ortataxel)。在一个实施方案中，癌症治疗剂是拓扑异构酶。拓扑异构酶是维持dna拓扑结构的必需酶。i型或ii型拓扑异构酶的抑制通过扰乱正常的dna超螺旋干扰dna的转录和复制。在进一步的实施方案中，拓扑异构酶是但不限于i型拓扑异构酶抑制剂或ii型拓扑异构酶抑制剂。在一个实施方案中，i型拓扑异构酶抑制剂是但不限于喜树碱。在另一个实施方案中，喜树碱是但不限于依沙替康(exatecan)、伊立替康、勒托替康(lurtotecan)、托泊替康、bnp1350、ckd602、db67(ar67)和/或st1481。在一个实施方案中，ii型拓扑异构酶抑制剂是但不限于表鬼臼毒素。在另一个实施方案中，表鬼臼毒素是但不限于安吖啶、依托泊苷、磷酸依托泊苷和/或替尼泊苷。在另一个实施方案中，拓扑异构酶是合成的、半合成的或衍生物，包括在自然界中发现的那些，例如但不限于表鬼臼毒素，它们是天然存在于美洲鬼臼(americanmayapple)(盾叶鬼臼(podophyllumpeltatum))的根中的物质。
在一些实施方案中，另外的化学治疗剂是芪类化合物(stilbenoid)。在进一步的实施方案中，芪类化合物包括但不限于白藜芦醇、白皮杉醇(piceatannol)、赤松素(pinosylvin)、紫檀芪(pterostilbene)、α-葡萄抗毒素(α-viniferin)、双氢杨梅树皮素a(ampelopsina)、双氢杨梅树皮素e、diptoindonesinc、diptoindonesinf、ε-葡萄素(epsilon-vinferin)、flexuosola、gnetinh、hemsleyanold、hopeaphenol、反式-diptoindonesinb、astringin、云杉新苷(piceid)和diptoindonesina。在另一个实施方案中，芪类化合物是合成的、半合成的或衍生物。
在一些实施方案中，另外的化学治疗剂是细胞毒性抗生素。在一个实施方案中，细胞毒性抗生素是但不限于放线菌素、蒽二酮(anthracenedione)、蒽环霉素(anthracycline)、沙利度胺、二氯乙酸、烟酸、2-脱氧葡萄糖和/或氯法齐明(chlofazimine)。在一个实施方案中，放线菌素是但不限于放线菌素d、杆菌肽、粘菌素(多粘菌素e)和/或多粘菌素b。在另一个实施方案中，蒽二酮是但不限于米托蒽醌和/或匹杉琼(pixantrone)。在另一个实施方案中，蒽环霉素是但不限于博来霉素、多柔比星(亚德利亚霉素)、柔红霉素(道诺霉素)、表柔比星、依达比星、丝裂霉素、普卡霉素和/或戊柔比星。在另一个实施方案中，细胞毒性抗生素是合成的、半合成的或衍生物。
在一些实施方案中，另外的化学治疗剂选自内皮抑素(endostatin)、血管生成素、血管抑素(angiostatin)、趋化因子、angioarrestin、血管抑素(纤溶酶原片段)、基底膜胶原衍生的抗血管生成因子(肿瘤抑素(tumstatin)、血管能抑素(canstatin)或抑制蛋白(arrestin))、抗血管生成抗凝血酶iii、信号转导抑制剂、软骨衍生抑制剂(cdi)、cd59补体片段、纤连蛋白片段、gro-β、肝素酶、肝素六糖片段、人绒毛膜促性腺激素(hcg)、干扰素α/β/γ、干扰素诱导蛋白(ip-10)、白细胞介素-12、kringle5(纤溶酶原片段)、金属蛋白酶抑制剂(timps)、2-甲氧基雌二醇、胎盘核糖核酸酶抑制剂、纤溶酶原激活物抑制剂、血小板因子-4(pf4)、催乳素16kd片段、增殖蛋白相关蛋白(prp)、各种类视色素(retinoids)、四氢皮质醇-s、血小板反应蛋白-1(tsp-1)、转化生长因子-β(tgf-β)、血管抑制素(vasculostatin)、血管形成抑制素(vasostatin)(钙网蛋白片段)等。
在一些实施方案中，另外的化学治疗剂选自乙酸阿比特龙(abirateroneacetate)、六甲密胺、脱水长春花碱(anhydrovinblastine)、奥利斯他汀(auristatin)、贝沙罗汀(bexarotene)、比卡鲁胺、bms184476、2,3,4,5,6-五氟-n-(3-氟-4-甲氧基苯基)苯磺酰胺、博来霉素、n,n-二甲基-l-缬氨酰-l-缬氨酰-n-甲基-l-缬氨酰-l-脯氨酰-l-脯氨酸-叔丁基酰胺、恶病质素(cachectin)、西马多丁(cemadotin)、苯丁酸氮芥、环磷酰胺、3',4'-二脱氢-4'-脱氧-8'-去甲-长春花碱(3′,4′-didehydro-4′-deoxy-8′-norvin-caleukoblastine)、多西他赛、多西紫杉醇(doxetaxel)、环磷酰胺、卡铂、卡莫司汀、顺铂、念珠藻环肽、环磷酰胺、阿糖胞苷、达卡巴嗪(dtic)、放线菌素、柔红霉素、地西他滨、多拉司他汀、多柔比星(亚德利亚霉素)、依托泊苷、5-氟尿嘧啶、非那雄胺、氟他胺、羟基脲和羟基脲紫杉烷、异环磷酰胺、利阿唑、氯尼达明、洛莫司汀(ccnu)、mdv3100、二氯甲基二乙胺(氮芥)、美法仑、米伏布林羟乙基磺酸盐(mivobulinisethionate)、根霉素、sertenef、链佐星、丝裂霉素、甲氨蝶呤、紫杉烷、尼鲁米特、奥那司酮、紫杉醇、泼尼莫司汀、丙卡巴肼、rpr109881、雌莫司汀磷酸盐、他莫昔芬、他索纳明(tasonermin)、泰素、维甲酸、长春花碱、长春花新碱、硫酸长春地辛和长春氟宁。
在一些实施方案中，另外的化学治疗剂是铂、顺铂、卡铂、奥沙利铂、氮芥、环磷酰胺、苯丁酸氮芥、硫唑嘌呤、巯嘌呤、长春花新碱、长春花碱、长春瑞滨、长春地辛、依托泊苷和替尼泊苷、紫杉醇、多西他赛、伊立替康、托泊替康、安吖啶、依托泊苷、依托泊苷磷酸盐、替尼泊苷、5-氟尿嘧啶、亚叶酸、甲氨蝶呤、吉西他滨、紫杉烷、亚叶酸、丝裂霉素c、替加氟-尿嘧啶、依达比星、氟达拉滨、米托蒽醌、异环磷酰胺和多柔比星。另外的活性剂包括mtor(雷帕霉素的哺乳动物靶点)抑制剂，包括但不限于雷帕霉素、依维莫司、坦罗莫司和地磷莫司(deforolimus)。
在其它实施方案中，另外的化学治疗剂可选自美国专利7,927,613中描述的那些。
在另一个实施方案中，所述方法可进一步包括施用以下一种或两种：(i)一种或多种抗真菌剂(例如选自联苯苄唑、布康唑、克霉唑、益康唑、酮康唑、卢立康唑(luliconazole)、咪康唑、奥莫拉唑(omoconazole)、奥昔康唑、舍他康唑(sertaconazole)、硫康唑、噻康唑(tioconazole)、阿巴康唑(albaconazole)、艾氟康唑(efinaconazole)、艾坡康唑(epoziconazole)、氟康唑、艾沙康唑(isavuconazole)、伊曲康唑、泊沙康唑、丙环唑、雷司康唑(ravusconazole)、特康唑、伏立康唑、阿巴芬净(abafungin)、阿莫罗芬、布替萘芬、萘夫替芬、特比萘芬、阿尼芬净(anidulafungin)、卡泊芬净(caspofungin)、米卡芬净(micafungin)、苯甲酸、环吡酮(ciclopirox)、氟胞嘧啶、5-氟胞嘧啶、灰黄霉素、卤普罗近(haloprogin)、托萘酯(tolnaflate)、十一碳烯酸和秘鲁香胶(balsamofperu))，和(ii)一种或多种抗生素(例如选自阿米卡星、庆大霉素、卡那霉素、新霉素、奈替米星、妥布霉素、巴龙霉素、链霉素、大观霉素、格尔德霉素、除莠霉素、利福昔明、氯碳头孢、厄他培南、多利培南、亚胺培南、西司他丁、美罗培南、头孢羟氨苄、头孢唑林、头孢噻吩(cefalotin)、头孢金素(cefalothin)、头孢氨苄、头孢克洛、头孢孟多、头孢西丁、头孢丙烯、头孢呋辛、头孢克肟、头孢地尼、头孢托仑、头孢哌酮、头孢噻肟、头孢泊肟(cefpodoxime)、头孢他啶、头孢布坦、头孢唑肟、头孢曲松、头孢吡肟、头孢他洛林酯(ceftarolinefosamil)、头孢吡普(ceftobiprole)、替考拉宁、万古霉素、替拉凡星(telavancin)、达巴凡星(dalbavancin)、奥利万星(oritavancin)、克林霉素、林可霉素、达托霉素、阿奇霉素、克拉霉素、地红霉素、红霉素、罗红霉素、醋竹桃霉素、泰利霉素(telithromycin)、螺旋霉素、氨曲南、呋喃唑酮、呋喃妥因、利奈唑胺(linezolid)、泊西唑利德(posizolid)、雷德唑胺(radezolid)、妥利唑胺(torezolid)、阿莫西林、氨苄西林、阿洛西林、羧苄西林、氯唑西林、双氯西林、氟氯西林、美洛西林、甲氧西林、萘夫西林、苯唑西林、青霉素g、青霉素v、哌拉西林、青霉素g、替莫西林、替卡西林、阿莫西林、克拉维酸(calvulanate)、氨苄西林、舒巴坦(subbactam)、哌拉西林、三唑巴坦、替卡西林、克拉维酸、杆菌肽、粘菌素(colistin)、多粘菌素b、环丙沙星、依诺沙星、加替沙星、吉米沙星、左氧氟沙星、洛美沙星、莫西沙星、萘啶酮酸、诺氟沙星、氧氟沙星、曲伐沙星、格帕沙星、司帕沙星、替马沙星、磺胺米隆、磺胺醋酰、磺胺嘧啶、磺胺嘧啶银、磺胺地索辛、磺胺甲噁唑、磺胺二甲异噁唑(sulfanilimide)、柳氮磺吡啶、磺胺异噁唑、甲氧苄啶-磺胺甲噁唑、磺胺柯衣定(sulfonamideochrysoidine)、地美环素、米诺环素、土霉素(oytetracycline)、四环素、氯法齐明、氨苯砜、dapreomycin、环丝霉素、乙胺丁醇、乙硫异烟胺、异烟肼、吡嗪酰胺、利福平、利福布汀、利福喷汀、链霉素、胂凡纳明、氯霉素、磷霉素(fosfomycin)、夫西地酸、甲硝唑、莫匹罗星、平板霉素(platensimycin)、喹奴普丁、dalopristin、甲砜霉素、替加环素(tigecycyline)、替硝唑、甲氧苄啶和泰斯巴汀(teixobactin))。
在一些实施方案中，在接触或施用化学实体之前(例如约1小时之前，或约6小时之前，或约12小时之前，或约24小时之前，或约48小时前，或约1周前，或约1个月前)将第二治疗剂或方案施用于个体。
在其它实施方案中，第二治疗剂或方案在与接触或施用化学实体大致相同的时间施用于个体。举例来说，第二治疗剂或方案和化学实体以相同的剂型同时提供给个体。作为另一个实例，第二治疗剂或方案和化学实体以分开的剂型同时提供给个体。
在其它实施方案中，在接触或施用化学实体之后(例如约1小时后，或约6小时后，或约12小时后，或约24小时后，或约48小时后，或约1周后，或约1个月后)将第二治疗剂或方案施用于个体。
患者选择
在一些实施方案中，本文所述的方法还包括鉴定需要这种治疗的对象(例如患者)的步骤(例如通过活检、内窥镜检查或本领域已知的其它常规方法)。在一些实施方案中，nlrp3蛋白可以作为一些癌症类型的生物标志物。
在一些实施方案中，可以将本文所述的化学实体、方法和组合物施用于一些对治疗有抵抗的患者群体(例如对关卡抑制剂有抗性的患者)。
在一些实施方案中，本发明的化合物可用于疗法。在一些实施方案中，本发明提供了本发明化合物或其药学上可接受的盐与另外的一种或多种治疗剂的组合制剂，其用于在疗法中同时、分别或依次使用。
在一些实施方案中，本发明的化合物或其药学上可接受的盐或包含它们的药物组合物可以用作药剂。在一些实施方案中，本发明的化合物可用于制备治疗癌症的药剂。在一些实施方案中，本发明的化合物可用于制备调节nlrp3活性的药剂。在一些实施方案中，调节包含激动nlrp3。
制备方法
如本领域技术人员可以理解的，合成本文通式化合物的方法对于本领域普通技术人员将是显而易见的。例如，本文描述的化合物可以例如使用本文描述的一种或多种方法和/或使用例如在us2015/0056224中描述的方法合成。可用于合成本文所述化合物的合成化学转化和保护基方法学(保护和脱保护)是本领域已知的，并且包括例如描述在如下文献中的那些：larock,r.c.,comprehensiveorganictransformations,第2版,wiley-vch,纽约,ny(1999)；wuts,p.g.m.,greene’sprotectivegroupsinorganicsynthesis,第5版,wiley(2014)；l.fieser和m.fieser,fieserandfieser'sreagentsfororganicsynthesis,johnwileyandsons(1994)；和l.paquette编辑,encyclopediaofreagentsfororganicsynthesis,johnwileyandsons(1995)及其后续版本。用于制备本发明化合物的起始原料是已知的、通过已知方法制得或可购买获得。本领域技术人员还将认识到，本文所述的条件和试剂可以与替代的本领域公认的等同物互换。例如，在许多反应中，三乙胺可与其它碱互换，例如非亲核碱(例如二异丙胺、1,8-二氮杂双环十一碳-7-烯、2,6-二叔丁基吡啶或四丁基磷腈(tetrabutylphosphazene))。
本领域技术人员将认识到可用于表征本文描述的化合物的多种分析方法，包括例如1hnmr、异核nmr、质谱、液相色谱和红外光谱。前述列表是技术人员可用的表征方法的子集，并且不意欲是限制性的。
下列缩写具有所示的含义：
acn＝乙腈
acoh＝乙酸
cdcl3＝氯仿-d
cd3od＝甲醇-d4
ch2cl2＝二氯甲烷
ch3reo3＝甲基三氧合铼
cs2co3＝碳酸铯
cui＝碘化亚铜(i)
d＝双峰
dcm＝二氯甲烷
diea＝n,n-二乙基异丙基胺
dmf＝n,n-二甲基甲酰胺
dmso＝二甲亚砜
es＝电喷雾电离
et2o＝乙醚
etoac＝乙酸乙酯
etoh＝乙醇
equiv＝当量
g＝克
h＝小时
hcl＝氯化氢(通常为溶液)
h2o＝水
h2o2＝过氧化氢
hatu＝1-[双(二甲基氨基)亚甲基]-1h-1,2,3-三唑并[4,5-b]吡啶鎓3-氧化物六氟磷酸盐
hplc＝高效液相色谱法
i2＝碘
k2co3＝碳酸钾
k2hpo4＝磷酸氢二钾
ki＝碘化钾
kg＝千克
lc/ms＝液相色谱质谱仪
libh4＝硼氢化锂
m＝多重峰
m/z＝质荷比
m＝摩尔
m-cpba＝间氯过氧苯甲酸
mg＝毫克
meoh＝甲醇
mhz＝兆赫兹
ml＝毫升
mmol＝毫摩尔
min＝分钟
nahco3＝碳酸氢钠
na2co3＝碳酸钠
naoh＝氢氧化钠
na2so4＝硫酸钠
net3和tea＝三乙胺
nh4oh或nh3h2o＝氢氧化铵
nh4hco3＝碳酸氢铵
nm＝纳米
pdcl2(pph3)2＝双(三苯膦)二氯化钯(ii)
pd(dppf)cl2＝[1,1'-双(二苯膦基)二茂铁]二氯钯(ii)
pd(dppf)cl2dcm＝[1,1'-双(二苯膦基)二茂铁]二氯钯(ii)-二氯甲烷复合物
pd(oh)2＝氢氧化钯
pmb＝对甲氧基苄基
pocl3＝磷酰氯
ppm＝百万分数
pt＝铂
pt/c＝披铂碳
s＝单峰
t＝三重峰
tfa＝三氟乙酸
tlc＝薄层色谱法
tscl＝对甲苯磺酰氯
℃＝摄氏度
μmol＝微摩尔
本发明的化合物可以通过有机合成领域的技术人员熟知的多种方法来制备。可以使用以下描述的方法以及合成有机化学领域中已知的合成方法或本领域技术人员所理解的其变化形式来合成本发明的化合物。优选的方法包括但不限于下述方法。
可以使用本节中所述的反应和技术制备本发明的化合物。反应在对所采用的试剂和物质而言适当的和适于所进行的转化的溶剂中进行。而且，在下述合成方法的描述中，可以理解，所有提出的反应条件(包括溶剂、反应气氛、反应温度、实验持续时间和后处理操作的选择)选择为对所述反应而言标准的条件，这应当是本领域技术人员容易认识到的。有机合成领域的技术人员可以理解，分子的各部分上存在的官能团必须与所提出的试剂和反应相容。对与反应条件相容的取代基的这类限制对本领域技术人员而言是显而易见的，然后必须使用替代方法。这有时将要求判断改变合成步骤的顺序或相对于其它方法流程选择出一个特定的方法流程以获得预期的本发明化合物。还可以认识到，在本领域设计任何合成途径中另一个重要的考虑是慎重选择用于保护本发明所述化合物中存在的反应活性官能团的保护基。
式(i)、(ii)或(iii)化合物可以参考下述流程中说明的方法来制备。如其中所示，终产物是具有与式(i)、(ii)或(iii)相同结构式的化合物。可以理解，任何式(i)、(ii)或(iii)化合物可通过适宜地选择具有适当取代的试剂、通过流程来产生。本领域技术人员可以容易地选择溶剂、温度、压力和其它反应条件。起始物质可购买获得或者由本领域技术人员容易地制备。化合物的构成如本文或说明书其它部分中所定义。
式(i,当r7a是卤素时)化合物的合成可以采用流程1和2中概括的方法进行。
流程1
流程1
步骤1：流程1的第一个步骤开始于适宜官能化的喹啉醇(i)。如果期望，基团r8、r9、r10和r11可以是在式(i)化合物中发现的基团r1、r2、r3和r4。或者，一个或多个这些基团可以是可在合成的后面阶段进行改变的基团，例如溴。该喹啉醇可以购买获得或者可以通过本领域技术人员已知的方法合成。在步骤1中，化合物(i)的醇基团可以转化为卤素基团或磺酸酯，例如氯、溴或三氟甲磺酸酯基。如果预期基团z是氯，该转化可以如下进行：用试剂如磷酰氯在溶剂如甲苯中处理化合物(i)。或者，如果预期基团z是溴，该转化可以如下进行：用试剂如三溴化磷在溶剂如dmf中处理化合物(i)。或者，如果预期基团z是三氟甲磺酸酯基，该转化可以如下进行：用试剂如三氟甲烷磺酰氯、试剂如4-二甲基氨基吡啶和碱如hunig’s碱在溶剂如二氯甲烷中处理化合物(i)。
步骤2：在流程1的步骤2中，通过用适当的氧化剂如间氯过氧苯甲酸在溶剂如dcm中进行处理，将化合物(ii)转化为n-氧化物(iii)。
步骤3：在流程1的步骤3中，通过用适当的活化剂如甲苯磺酰氯和氨源如氯化铵和三乙胺在适当的溶剂如dcm中进行处理，将化合物(iii)转化为胺(iv)。
步骤4：在流程1的步骤4中，化合物(iv)的卤素z转化为化合物(v)的基团r12。基团r12可以是在最终化合物中预期的基团w；或者，其可以是可在合成的后面阶段转化为基团w的基团。本领域技术人员将理解，进行该转化的方式将取决于基团r12和z的性质。例如，如果z是氯和预期基团r12是胺，该转化可以如下进行：将化合物(iv)与适当的胺和碱如hunig’s碱在溶剂如dmso或nmp中加热至适宜的温度、例如120℃。或者，如果z是氯和预期基团r12是醚，该转化可以如下进行：将化合物(iv)与适当的醇和碱如叔丁醇钾在溶剂如nmp中加热至适宜的温度、例如100℃。或者，如果z是溴和预期基团r12是炔烃，该转化可以如下进行：将化合物(iv)与适当的炔烃、碘化亚铜(i)、适当的碱如hunig’s碱和适宜的钯源如四(三苯膦)钯(0)在适宜的溶剂如thf中加热至适宜的温度、例如70℃。或者，如果z是三氟甲磺酸酯基和预期基团r12是任选被取代的烷基基团，该步骤可以如下完成：用适当的烷基硼酸或酯、催化剂如pdcl2(dppf)-dcm复合物和碱如碳酸铯在溶剂如二噁烷中处理化合物(iv)。
步骤5：在流程1的步骤5中，如下将化合物(v)转化为胺(vi)：用适当的亲电子卤化试剂如selectfluor进行处理以插入氟取代基，于室温在适宜的溶剂如四氢呋喃和乙腈中搅拌。另外，亲电子卤化试剂如ncs、nbs和nis可用于在室温或升高温度下、在适宜的溶剂如thf、1,4-二噁烷或乙腈中在化合物(vi)上在r7a处插入cl、br或i取代基。
流程1的步骤6至8由一系列任选的官能基团操作组成，以将中间体(v)中的取代基r8、r9、r10、r11和r12转化为式(i)化合物中预期的取代基r1、r2、r3、r4和w。本领域技术人员将理解，一些或所有这些步骤可以不是必需的，这取决于在化合物(v)和(ix)中发现的基团。本领域技术人员还将理解，对于一些底物，这些步骤可以以替代的次序进行。
步骤6：流程1的步骤6是将化合物(vi)中的基团r9转化为在分子(vii)中发现的基团r2的任选步骤或步骤序列。例如，如果r9是溴和预期基团r2是芳族或杂芳族基团，该转化可以如下进行：使化合物(vi)与任选被保护的芳族或杂芳族硼酸或硼酸酯、催化剂如pdcl2(dppf)-dcm复合物和碱如磷酸三钾在溶剂混合物如二噁烷和水中反应。如果安置的基团含有保护基，可以在适当的条件下进行进一步的任选步骤以除去该保护基，如果期望的话。例如，如果安置的基团是具有四氢吡喃保护基的吡唑，可以通过与酸如三氟乙酸在溶剂如二氯甲烷中反应来除去四氢吡喃。或者，如果r9是溴和预期基团r2是芳族或杂芳族基团，该转化可以如下进行：首先使化合物(vi)与化合物如联硼酸频那醇酯(bis(pinacolato)diboron)、试剂如乙酸钾和催化剂如pdcl2(dppf)-dcm复合物在溶剂如二噁烷中反应，然后使所得硼酸酯与适当的芳基或杂芳基卤化物、碱如碳酸钠和催化剂如四(三苯膦)钯(0)在适当的溶剂混合物如二噁烷和水中反应。或者，如果r9是溴和预期基团r2是通过氮原子链接的杂环，该步骤可以如下进行：使化合物(vi)与适当的杂环在铜源如碘化亚铜(i)、碱如碳酸钠和配体如n,n’-二甲基乙烷-1,2-二胺的存在下、在适当的溶剂如dmso中反应。
步骤7：流程1的步骤7是将中间体(vii)中的基团r12转化为在分子(viii)中发现的基团w的任选步骤或步骤序列。例如，如果基团r12含有boc-保护的胺和预期基团w含有酰胺，该转化可以如下完成：首先用酸和溶剂的适宜联合如氯化氢和二噁烷除去boc基团，然后通过与适当的羧酸、偶联剂如t3p和碱如三乙胺在溶剂如dmf中反应来形成预期的酰胺。或者，如果基团r12含有不饱和基团如炔烃和预期基团w是完全饱和的，该转化可以如下进行：与氢和适宜的催化剂如披钯碳反应。
步骤8：流程1的步骤8是将化合物(viii)中的基团r8、r10和r11转化为在式(i)化合物中发现的基团r1、r3和r4的任选步骤或步骤序列。
本领域技术人员将理解，很多这些步骤可以以替代的次序进行，这取决于在式(i)化合物中预期的基团。例如，对于一些分子，步骤6中所述的基团r9至r2的转化可以在步骤4中所述的基团z至基团r12的转化之前进行。
流程2显示了流程1中化合物(vi)的制备的替代合成中。在这种情况中，从用r7a官能化的适宜官能化的喹啉醇(x)开始，进行对流程1所概括的步骤1-4。按照流程1中概括的步骤6-8，可以将化合物(vi)加工为式(i)化合物。
流程2
式(i，当r7a是烷基或环烷基时)、(ii)、(iii)化合物的合成可以采用流程3中概括的方法进行。
流程3
步骤1：流程3的第一个步骤开始于适宜官能化的2-氨基苯甲酸酯(xiii)。如果期望，基团r8、r9、r10和r11可以是终产物中发现的基团r1、r2、r3和r4。或者，一个或多个这些基团可以是可在合成的后面阶段进行改变的基团，例如溴。另外，r13可以是基团r7或r7a(烷基或环烷基)。2-氨基苯甲酸酯可以购买获得或者可以通过本领域技术人员已知的方法合成。在步骤1中，通过在溶剂如thf中例如用锂化物(lithiate)、例如乙腈的锂化物进行置换反应产生作为碱如n-buli的加成的条件，化合物(xiii)的酯基团可以转化为氧代丁腈(xiv)。
步骤2：在流程3的步骤2酯，通过在溶剂如乙醇中、在高至100℃的温度下将(xiv)暴露于碱如乙醇钠，可以经由碱化催化环化将化合物(xiv)转化为喹啉醇(xv)。
或者，通过使步骤1在室温下进行延长的时间，步骤1和2可以以一个步骤进行。
流程3的步骤3至7由一系列官能基团操作组成，其中一些使任选的，以将中间体(xv)中的取代基r8、r9、r10、r11、r13和oh转化为式(ii)化合物中预期的取代基r1a、r2、r3、r4、r7和w或者式(iii)化合物中预期的r1、r2、r3、r4a、r7和w。本领域技术人员将理解，一些或所有这些步骤可以不是必需的，这取决于在化合物(xv)或式(ii)和(iii)化合物中发现的基团。本领域技术人员还将理解，对于一些底物，这些步骤可以以替代的次序进行。
步骤3：流程3的步骤3是将化合物(xv)中的基团r9转化为在分子(xvi)中发现的基团r2的任选步骤或步骤序列。例如，如果r9是溴和预期基团r2是芳族或杂芳族基团，该转化可以如下进行：使化合物(xv)与任选被保护的芳族或杂芳族硼酸或硼酸酯、催化剂如pdcl2(dppf)-dcm复合物和碱如磷酸三钾在溶剂混合物如二噁烷和水中反应。如果安置的基团含有保护基，可以在适当的条件下进行进一步的任选步骤以除去该保护基，如果希望的话。例如，如果安置的基团是具有四氢吡喃保护基的吡唑，可以通过与酸如三氟乙酸在溶剂如二氯甲烷中反应来除去四氢吡喃。或者，如果r9是溴和预期基团r2是芳族或杂芳族基团，该转化可以如下进行：首先使化合物(xv)与化合物如联硼酸频那醇酯、试剂如乙酸钾和催化剂如pdcl2(dppf)-dcm复合物在溶剂如二噁烷中反应，然后使所得硼酸酯与适当的芳基或杂芳基卤化物、碱如碳酸钠和催化剂如四(三苯膦)钯(0)在适当的溶剂混合物如二噁烷和水中反应。或者，如果r9是溴和预期基团r2是通过氮原子链接的杂环，该步骤可以如下进行：使化合物(xv)与适当的杂环在铜源如碘化亚铜(i)、碱如碳酸钠和配体如n,n’-二甲基乙烷-1,2-二胺的存在下在适当的溶剂如dmso中反应。
步骤4：在流程3的步骤4中，化合物(xvi)的醇基团可以转化为卤素基团或磺酸酯，例如氯、溴或三氟甲磺酸酯基。如果预期基团z是氯，该转化可以如下进行：用试剂如磷酰氯在溶剂如甲苯中处理化合物(xvi)。或者，如果预期基团z是溴，该转化可以如下进行：用试剂如三溴化磷在溶剂如dmf中处理化合物(xvi)。或者，如果预期基团z是三氟甲磺酸酯基，该转化可以如下进行：用试剂如三氟甲烷磺酰氯、试剂如4-二甲基氨基吡啶和碱如hunig’s碱在溶剂如二氯甲烷中处理化合物(xvi)。
步骤5：在流程3的步骤5中，化合物(xvii)的卤素z转化为化合物(xviii)的基团r12。基团r12可以是在最终化合物中预期的基团w；或者，其可以是可在合成的后面阶段转化为基团w的基团。本领域技术人员将理解，进行该转化的方式将取决于基团r12和z的性质。例如，如果z是氯和预期基团r12是胺，该转化可以如下进行：将化合物(xvii)与适当的胺和碱如hunig’s碱在溶剂如dmso或nmp中加热至适宜的温度、例如120℃。或者，如果z是氯和预期基团r12是醚，该转化可以如下进行：将化合物(xvii)与适当的醇和碱如叔丁醇钾在溶剂如nmp中加热至适宜的温度、例如100℃。或者，如果z是溴和预期基团r12是炔烃，该转化可以如下进行：将化合物(xvii)与适当的炔烃、碘化亚铜(i)、适当的碱如hunig’s碱和适宜的钯源如四(三苯膦)钯(0)在适宜的溶剂如thf中加热至适宜的温度、例如70℃。或者，如果z是三氟甲磺酸酯基和预期基团r12是任选被取代的烷基基团，该步骤可以如下完成：用适当的烷基硼酸或酯、催化剂如pdcl2(dppf)-dcm复合物和碱如碳酸铯在溶剂如二噁烷中处理化合物(xvii)。
步骤6：流程3的步骤6是将中间体(xviii)中的基团r12转化为在分子(xix)中发现的基团w的任选步骤或步骤序列。例如，如果基团r12含有boc-保护的胺和预期基团w含有酰胺，该转化可以如下完成：首先用酸和溶剂的适宜联合如氯化氢和二噁烷除去boc基团，然后通过与适当的羧酸、偶联剂如t3p和碱如三乙胺在溶剂如dmf中反应来形成预期的酰胺。或者，如果基团r12含有不饱和基团如炔烃和预期基团w是完全饱和的，该转化可以如下进行：与氢和适宜的催化剂如披钯碳反应。
步骤7：流程3的步骤7是将化合物(xix)中的基团r8、r10、r11和r13转化为在式(ii)化合物中发现的基团r1a、r3和r4和r7或在式(iii)化合物中发现的基团r1、r3和r4a和r7的任选步骤或步骤序列。
本领域技术人员将理解，很多这些步骤可以以替代的次序进行，这取决于在式(ii)和(iii)化合物中预期的基团。例如，对于一些分子，步骤3中所述的基团r9至r2的转化可以在步骤5中所述的基团z至基团r12的转化之后进行。
式(ii)和(iii)化合物的合成的替代途径可以采用流程4中概括的方法进行。
流程4
步骤1：流程4的第一个步骤开始于适宜官能化的苯胺(xx)。如果期望，基团r8、r9、r10和r11可以是在式(ii)化合物中发现的基团r1a、r2、r3和r4或在式(iii)化合物中发现的基团r1、r2、r3和r4a。或者，一个或多个这些基团可以是可在合成的后面阶段进行改变的基团，例如溴。苯胺可以购买获得或者可以通过本领域技术人员已知的方法合成。在步骤1中，化合物(xx)的苯胺可以通过当在溶剂如二苯基醚中、在诸如120℃的温度下加热时用可购买获得的5-(甲氧基亚甲基)-2,2-二甲基-1,3-二噁烷-4,6-二酮处理而转化为化合物(xxi)。
步骤2：在流程4的步骤2中，通过在溶剂如二苯基醚中在240℃的温度下加热，可以将化合物(xxiv)转化为喹啉醇(i)。
步骤3：在流程4的步骤3中，化合物(i)的醇基团可以转化为卤素基团或磺酸酯，例如氯、溴或三氟甲磺酸酯基。如果预期基团z是氯，该转化可以如下进行：用试剂如磷酰氯在溶剂如甲苯中处理化合物(ii)。或者，如果预期基团z是溴，该转化可以如下进行：用试剂如三溴化磷在溶剂如dmf中处理化合物(i)。或者，如果预期基团z是三氟甲磺酸酯基，该转化可以如下进行：用试剂如三氟甲磺酰氯、试剂如4-二甲基氨基吡啶和碱如hunig’s碱在溶剂如二氯甲烷中处理化合物(ii)。
步骤4:在流程4的步骤4中，通过用适当的氧化剂如间氯过氧苯甲酸在溶剂如dcm中处理，将化合物(ii)转化为n-氧化物(iii)。
步骤5:在流程4的步骤5中，通过用适当的活化试剂如甲苯磺酰氯和氨源如氯化铵和三乙胺在适当的溶剂如dcm中处理，将化合物(iii)转化为胺(iv)。
步骤6：在流程4的步骤6中，化合物(iv)的卤素z转化为化合物(v)的基团r12。基团r12可以是在最终化合物中预期的基团w；或者，其可以是可在合成的后面阶段转化为基团w的基团。本领域技术人员将理解，进行该转化的方式将取决于基团r12和z的性质。例如，如果z是氯和预期基团r12是胺，该转化可以如下进行：将化合物(iv)与适当的胺和碱如hunig’s碱在溶剂如dmso或nmp中加热至适宜的温度、例如120℃。或者，如果z是氯和预期基团r12是醚，该转化可以如下进行：将化合物(iv)与用适当的醇和碱如叔丁醇钾在溶剂如nmp中加热至适宜的温度、例如100℃。或者，如果z是溴和预期基团r12是炔烃，该转化可以如下进行：将化合物(iv)与适当的炔烃、碘化亚铜(i)、适当的碱如hunig’s碱和适宜的钯源如四(三苯膦)钯(0)在适宜的溶剂如thf中加热至适宜的温度、例如70℃。或者，如果z是三氟甲磺酸酯基和预期基团r12是任选被取代的烷基基团，该步骤可以如下完成：用适当的烷基硼酸或酯、催化剂如pdcl2(dppf)-dcm复合物和碱如碳酸铯在溶剂如二噁烷中处理化合物(iv)。
步骤7：流程4的步骤7是将中间体(v)中的基团r9转化为在分子(xxii)中发现的基团r2的任选步骤或步骤序列。例如，如果r9是溴和预期基团r2是芳族或杂芳族基团，该转化可以如下进行：使化合物(v)与任选被保护的芳族或杂芳族硼酸或硼酸酯、催化剂如pdcl2(dppf)-dcm复合物和碱如磷酸三钾在溶剂混合物如二噁烷和水中反应。如果安置的基团含有保护基，可以进行进一步的任选步骤以在适当的条件下除去该保护基，如果期望的话。例如，如果安置的基团是具有四氢吡喃保护基的吡唑，可以通过与酸如三氟乙酸在溶剂如二氯甲烷中反应来除去四氢吡喃。或者，如果r9是溴和预期基团r2是芳族或杂芳族基团，该转化可以如下进行：首先使化合物(v)与化合物如联硼酸频那醇酯、试剂如乙酸钾和催化剂如pdcl2(dppf)-dcm复合物在溶剂如二噁烷中反应，然后使所得硼酸酯与适当的芳基或杂芳基卤化物、碱如碳酸钠和催化剂如四(三苯膦)钯(0)在适当的溶剂混合物如二噁烷和水中反应。或者，如果r9是溴和预期基团r2是通过氮原子链接的杂环，该步骤可以如下进行：使化合物(v)与适当的杂环在铜源如碘化亚铜(i)、碱如碳酸钠和配体如n,n’-二甲基乙烷-1,2-二胺的存在下、在适当的溶剂如dmso中反应。
步骤8：流程4的步骤8是将化合物(xxii)中的基团r12转化为在式(ii)或(iii)化合物中发现的基团w的任选步骤或步骤序列。例如，如果基团r12含有boc-保护的胺和预期基团w含有酰胺，该转化可以如下完成：首先用酸和溶剂的适宜组合如氯化氢和二噁烷除去boc基团，然后通过与适当的羧酸、偶联剂如t3p和碱如三乙胺在溶剂如dmf中反应而形成预期的酰胺。或者，如果基团r12含有不饱和基团如炔烃和预期基团w是完全饱和的，该转化可以如下进行：与氢和适宜的催化剂如披钯碳反应。另外，可以进行一系列的任选步骤，以将化合物(xxii)中的基团r8、r10和r11转化为在式(ii)化合物中发现的基团r1a、r3和r4或者在式(iii)化合物中发现的基团r1、r3和r4a。
本领域技术人员将理解，很多这些步骤可以以替代的顺序进行，这取决于式(ii)和(iii)化合物中预期的基团。例如，对于一些分子，步骤7中所述的基团r9至r2的转化可以在步骤6中所述的基团z至基团r12的转化之前进行。
式(i，当r7a是烷基或环烷基)化合物的合成的途径可以采用流程5中概括的方法进行。
流程5
步骤1：流程6的步骤1是将化合物(iv)中的基团r9转化为在分子(xxiii)中发现的基团r2的任选步骤或步骤序列。例如，如果r9是溴和预期基团r2是芳族或杂芳族基团，该转化可以如下进行：使化合物(iv)与任选被保护的芳族或杂芳族硼酸或硼酸酯、催化剂如pdcl2(dppf)-dcm复合物和碱如磷酸三钾在溶剂混合物如二噁烷和水中反应。如果安置的基团含有保护基，可以进行进一步的任选步骤以在适当的条件下除去该保护基，如果期望的话。例如，如果安置的基团是具有四氢吡喃保护基的吡唑，可以通过与酸如三氟乙酸在溶剂如二氯甲烷中反应来除去四氢吡喃。或者，如果r9是溴和预期基团r2是芳族或杂芳族基团，该转化可以如下进行：首先使化合物(iv)与化合物如联硼酸频那醇酯、试剂如乙酸钾和催化剂如pdcl2(dppf)-dcm复合物在溶剂如二噁烷中反应，然后使所得硼酸酯与适当的芳基或杂芳基卤化物、碱如碳酸钠和催化剂如四(三苯膦)钯(0)在适当的溶剂混合物如二噁烷和水中反应。或者，如果r9是溴和预期基团r2是通过氮原子连接的杂环，该步骤可以如下进行：使化合物(iv)与适当的杂环在铜源如碘化亚铜(i)、碱如碳酸钠和配体如n,n’-二甲基乙烷-1,2-二胺的存在下、在适当的溶剂如dmso中反应。
步骤2：在流程5的步骤2中，通过用适当的烷基-或环烷基-三氟硼酸盐在乙酸锰(iii)二水合物的存在下、在适宜的溶剂混合物如乙酸-水、在温度如50℃下加热进行处理，将化合物(xxiii)转化为胺(xxiv)。
步骤3：在流程5的步骤3中，化合物(xxiv)的卤素z转化为化合物(xxv)的基团r12。基团r12可以是在最终化合物中预期的基团w；或者，其可以是可在合成的后面阶段转化为基团w的基团。本领域技术人员将理解，进行该转化的方式将取决于基团r12和z的性质。例如，如果z是氯和预期基团r12是胺，该转化可以如下进行：将化合物(xxiv)与适当的胺和碱如hunig’s碱在溶剂如dmso或nmp中加热至适宜的温度、例如120℃。或者，如果z是氯和预期基团r12是醚，该转化可以如下进行：将化合物(xxiv)与适当的醇和碱如叔丁醇钾在溶剂如nmp中加热至适宜的温度、例如100℃。或者，如果z是溴和预期基团r12是炔烃，该转化可以如下进行：将化合物(xxiv)与适当的炔烃、碘化亚铜(i)、适当的碱如hunig’s碱和适宜的钯源如四(三苯膦)钯(0)在适宜的溶剂如thf中加热至适宜的温度、例如70℃。或者，如果z是三氟甲磺酸酯基和预期基团r12是任选被取代的烷基基团，该步骤可以如下完成：用适当的烷基硼酸或酯、催化剂如pdcl2(dppf)-dcm复合物和碱如碳酸铯在溶剂如二噁烷中处理化合物(xxiv)。
步骤4：流程5的步骤4是将中间体(xxv)中的基团r12转化为在分子(xxvi)中发现的基团w的任选步骤或步骤序列。例如，如果基团r12含有boc-保护的胺和预期基团w含有酰胺，该转化可以如下完成：首先用酸和溶剂的适宜组合如氯化氢和二噁烷除去boc基团，然后通过与适当的羧酸、偶联剂如t3p和碱如三乙胺在溶剂如dmf中反应而形成预期的酰胺。或者，如果基团r12含有不饱和基团如炔烃和预期基团w是完全饱和的，该转化可以如下进行：与氢和适宜的催化剂如披钯碳反应。
步骤5：流程5的步骤5是将化合物(xxvi)中的基团r8、r10和r11转化为在式(i)化合物中发现的基团r1、r3和r4的任选步骤或步骤序列。
本领域技术人员将理解，很多这些步骤可以以替代的顺序进行，这取决于式(i)化合物中预期的基团。例如，对于一些分子，步骤1中所述的基团r9至r2的转化可以在步骤4中所述的基团z至基团r12的转化之后进行。
生物活性评价
pma-分化的thp-1细胞中il-1β产生的测定
thp-1细胞购自美国典型培养物保藏中心，并根据供应商的说明进行传代培养。在实验之前，将细胞在含有10％热灭活fbs、青霉素(100个单位/ml)和链霉素(100μg/ml)的rpmi1640中培养，并在实验设置之前保持对数期。在实验之前，将thp-1用pma(佛波醇12-肉豆蔻酸酯13-乙酸酯)(10μg/ml)处理24小时。实验当天除去培养基并用胰蛋白酶处理附着细胞2分钟，然后收集细胞，用pbs(磷酸盐缓冲盐水)洗涤，离心，以1×106个细胞/ml的浓度重混悬于含有2％热灭活fbs的rpmi中，并将100μl接种在96孔板中。将化合物溶解在二甲亚砜(dmso)中并加入培养基中以达到所需浓度(例如100、30、10、3、1、0.3或0.1μm)。将细胞与化合物一起温育4小时。收集无细胞上清液，通过elisa评估il-1β的产生。每个实验同时进行仅含媒介物的对照实验。最终的dmso浓度为1％。化合物在pma分化的thp-1细胞中表现出剂量相关的il-1β产生增加。
pma-分化的thp-1细胞中il-1β产生的测定(替代操作)
thp-1细胞购自美国典型培养物保藏中心，并根据供应商的说明进行传代培养。在实验之前，将细胞在含有10％热灭活fbs、青霉素(100个单位/ml)、链霉素(100μg/ml)、hepes(10mm)和丙酮酸钠(1mm)的rpmi1640中培养，并在实验设置之前保持对数期。在实验之前，将thp-1细胞用pma(佛波醇12-肉豆蔻酸酯13-乙酸酯)(20μg/ml)处理过夜。实验当天除去培养基并用胰蛋白酶处理附着细胞2分钟，然后收集细胞，用pbs(磷酸盐缓冲盐水)洗涤，通过离心沉淀，在384孔板中以50,000个细胞/孔的浓度重混悬于含有2％热灭活fbs的rpmi中。收集无细胞上清液，通过elisa评估il-1β的产生。将化合物溶解在二甲亚砜(dmso)中并加入培养基中以达到所需浓度(例如100、30、10、3、1、0.3或0.1μm)。将细胞与化合物一起温育2小时。每个实验同时进行仅含媒介物的对照实验。最终的dmso浓度为1％。化合物在pma分化的thp-1细胞中表现出剂量相关的il-1β产生增加。
il-1β产生的测定—htrf方案(第二替代操作)
使用echo550声波分配器(labcyte)、以100nl/孔将化合物在dmso中的系列稀释液添加到小体积384-孔板中，以使测定的最终起始浓度达到10μm。
在37℃、5％co2下，用终浓度50ng/ml的佛波醇12-肉豆蔻酸酯13-乙酸酯(pma)(sigma,p1585)处理t175烧瓶中处于含有10％fbs的rpmi(gibco,11875)培养基中的密度为1x106个细胞/ml的thp-1细胞过夜以进行分化。第二天，在用0.5％胰蛋白酶用dpbs充分冲洗孔后，收获细胞。在含2％fbs的rpmi培养基中，对于50,000个细胞以50μl/孔制备1x106个细胞/ml的细胞溶液。使用多通道移液器将细胞铺板在greiner384孔黑色透明底组织培养物处理的板(781090)中的化合物稀释液上。将板在37℃培养箱中于5％co2中温育2小时。
温育2小时后，将细胞板在离心机中以1200rpm离心5分钟。使用felix(cybio)，将8μl上清液转移至384孔小体积白色代用板(proxyplate)。(perkinelmer,6008230)。使用人il1βhtrf试剂盒分析上清液(cisbio,62hil1bpeg)。按照试剂盒说明制备il1β标准曲线，然后将来自试剂盒中的抗体以1:40稀释，而不是试剂盒说明的1:20的比例稀释。一旦合并，将抗体以5μl/孔的量添加到整个板中。将板密封并在4℃温育过夜。然后使用htrf激光在perkinelmerenvision上于665/615nm读板。化合物显示出与剂量相关的il-1β产生增加。
il-1β产生的测定—人体全血试验
使用echo550声波分配器(labcyte)、以100nl/孔的浓度将化合物在dmso中的系列稀释液添加至小体积384孔板中，以使测定中的最终起始浓度达到10μm。
将得自健康供体的人静脉全血在37℃、在加湿95％空气/5％co2温育箱中用1ng/ml的lps(invivogen、cat#tlrl-eblps)预处理4小时。将已预处理的血液添加到化合物板中，并在37℃再温育4小时。根据制造商的说明，使用alphlisa试剂盒(目录号al220)测量上清液中的il-1β。化合物显示出与剂量相关的il-1β产生增加。使用已预处理、但未经处理的血液作为基线测定了ec50。
il-1β产生的测定—小鼠htrf方案
衍生自c57bl/6小鼠的无限增殖化小鼠巨噬细胞得自erickelatz,universityofbonn/universityofmassachusettsworch酯,ma。用0.05％胰蛋白酶收获细胞并用pbs洗涤。将细胞以30,000个细胞/孔的密度接种在补充有2％fbs的dmem(gibco,11965)中的25μl中，在37℃、在5％co2温育10分钟。以5ul/孔加入lps-eb(invivogen，tlr-eblps)至终浓度为200ng/ml，并将细胞在5％co2下于37℃温育2小时。
使用echo550声波分配器(labcyte)以60nl/孔将化合物在dmso中的系列稀释液添加到小体积384孔板的细胞中，以使测定中的最终起始浓度达到50μm，并在37℃在5％co2下与化合物再温育2小时。
温育2小时后，将细胞板在离心机中以1200rpm离心5分钟。使用felix(cybio)，将8μl上清液转移至384孔小体积白色代用板中。(perkinelmer,6008230)。使用人il1βhtrf试剂盒分析上清液(cisbio，62mil1bpeh)。根据试剂盒说明以制备il1β标准曲线(将试剂盒中的抗体以1:40稀释，而不是按照试剂盒的说明以1:20稀释)。一旦合并，将抗体以5μl/孔的量添加到整个板中。将板密封并在4℃温育过夜。使用htrf激光在perkinelmerenvision上于665/615nm读板。然后将数据转换为pg/ml的il1β。化合物显示出与剂量相关的il-1β产生增加。
体外人tlr7和tlr8结合报道基因测定
将共表达tlr7或tlr8基因和nf-kb/ap1诱导型seap(分泌型胚胎碱性磷酸酶；invivogen、sandiego,ca)报道基因的对数生长的人hek-blue细胞添加到384-孔板的各孔中(每孔20μl中15,000个细胞)，并在37℃、5％co2下维持24小时。第二天使用声波液体处理技术将测试化合物或dmso分配到各个孔中(每孔100nl)，然后将细胞在37℃、5％co2下温育18小时。在向hek-bluetlrnf-kb-seap细胞反应中添加新鲜制备的quanti-blue试剂(按照制造商的说明制备；invivogen、sandiego,ca)后30分钟，使用envision读板仪测量细胞seap的产生。使用专利数据分析软件测定所有ec50值(半数最大有效浓度)。标准化ec50值＝绝对值，该绝对值通过使用来自用50μm参比标准品处理的细胞的参比标准品rlu(相对光单位)值设置100％ymax而测定。
实施例
为了进一步示例上述内容，包括以下非限制性的示例性合成方案。这些实施例在权利要求书范围内的变通在本领域技术人员的范围内，并且被认为落入本文描述和要求保护的本发明的范围内。读者将认识到，本领域技术人员基于本公开内容和本领域的技术能够制备和使用本发明，而无需穷举性实施例。
采用一种或多种上述操作分析化合物的生物学数据。除非另有指出，否则以下化合物的tlr7激动剂ec50和tlr8激动剂ec50测定>100μm的值。
在实施例的表征或纯化中采用的hplc/ms和制备型/分析型hplc方法
采用如下方法进行分析型hplc/ms：
方法a:柱:acquityuplcbehc18,1.7μm粒子；流动相a:99.95:0.05水:tfa；流动相b:99.95:0.05乙腈:tfa；温度:50℃；梯度:历经1.00分钟2％b至98％b,然后0.50分钟保持在98％b；流速:0.8ml/min；检测:ms和uv(254nm)。
方法b:柱:watersxbridgec18,2.1mmx50mm,1.7μm粒子；流动相a:5:95乙腈:水(含10mm乙酸铵)；流动相b:95:5乙腈:水(含10mm乙酸铵)；温度:50℃；梯度:历经3分钟0％b至100％b,然后0.50分钟保持在100％b；流速:1ml/min；检测:ms和uv(220nm)。
方法c:柱:watersxbridgec18,2.1mmx50mm,1.7μm粒子；流动相a:5:95乙腈:水(含0.1％三氟乙酸)；流动相b:95:5乙腈:水(含0.1％三氟乙酸)；温度:50℃；梯度:历经3分钟0％b至100％b,然后0.50分钟保持在100％b；流速:1ml/min；检测:ms和uv(220nm)。
核磁共振(nmr)光谱法
化学位移报道为通过氘代nmr溶剂推出的从内标四甲基甲硅烷(tms)或从tms位置的百万分数(ppm)。显示的峰裂数报道为：单峰-s,双峰-d,三重峰-t,四重峰-q,或多重峰-m。呈现出变宽的峰进一步指示为br。积分是近似的。应当注意，积分强度、峰形状、化学位移和偶联常数可依赖于溶剂、浓度、温度、ph和其它因素。而且，在nmr谱中与水或溶剂峰重叠或交换的峰可能不提供可靠的积分强度。在一些情况中，nmr谱采用水峰抑制获得，其可导致重叠的峰不被看见或具有改变的形状和/或积分。
实施例1.3-((2-氨基-3-氟-7-(1h-吡唑-3-基)喹啉-4-基)氨基)丙烷-1-醇
1a.7-溴-4-氯喹啉
向7-溴喹啉-4-醇(2.5g,11.16mmol)在甲苯(20ml)中混悬液中加入pocl3(2.080ml,22.32mmol)。反应物加热至100℃。1.5小时后，将反应物冷却，然后加入冰。将反应物剧烈搅拌约30分钟，然后加入水。反应物用dcm萃取两次。有机层用饱和nahco3水溶液和盐水洗涤，经硫酸钠干燥，浓缩。在搅拌下向水层缓慢加入饱和nahco3水溶液。通过真空过滤收集沉淀物，用水洗涤，干燥。从有机层分离出固体，将所过滤的固体合并，在减压下干燥，得到7-溴-4-氯喹啉(2.46g,10.14mmol,91％产率)。1h-nmr(400mhz,氯仿-d)δ8.80(d,j＝4.7hz,1h),8.33(d,j＝1.9hz,1h),8.12(d,j＝9.0hz,1h),7.75(dd,j＝9.0,2.0hz,1h)和7.52(d,j＝4.8hz,1h)。
1b.7-溴-4-氯喹啉1-氧化物
向7-溴-4-氯喹啉(2.0g,8.25mmol)在dcm(55.0ml)中的溶液中加入mcpba(6.10g,24.74mmol)。反应物搅拌过夜，然后用饱和硫代硫酸钠溶液淬灭。反应物搅拌0.5小时，加入饱和碳酸氢钠水溶液。反应物用dcm萃取两次，有机层用盐水洗涤,经硫酸钠干燥，浓缩，得到7-溴-4-氯喹啉1-氧化物(2.16g,8.36mmol,定量产率)。1h-nmr(400mhz,氯仿-d)δ8.99(d,j＝1.9hz,1h),8.43(d,j＝6.6hz,1h),8.10(d,j＝9.0hz,1h),7.86(dd,j＝9.0,2.0hz,1h)和7.40(d,j＝6.6hz,1h)。
1c.7-溴-4-氯喹啉-2-胺
在一个圆底烧瓶中，将7-溴-4-氯喹啉1-氧化物(9400mg,36.4mmol)混悬于dcm(150ml)中。加入ts-cl(7626mg,40.0mmol)。将该混合物搅拌1小时。在第二个圆底烧瓶中，将氯化铵(9725mg,182mmol)(在烘箱中于110℃干燥过夜)混悬于dcm(150ml)中。加入三乙胺(25.3ml,182mmol)，混合物搅拌0.5小时。将第一个烧瓶的内容物加入第二个烧瓶中，将反应物搅拌过夜，过滤，浓缩。残余物溶于100ml热dcm中。溶液冷却至室温，通过真空过滤收集固体。滤饼用100mldcm(-20℃)洗涤。将滤饼混悬于水中(50ml)并过滤。将dcm滤液蒸发，残余物混悬于水中(100ml)并过滤。滤饼用100mldcm(-20℃)洗涤，得到另外的产物。将合并的固体在减压下干燥，得到7-溴-4-氯喹啉-2-胺(6.52g,70％产率)。1hnmr(400mhz,dmso-d6)δ7.79(d,j＝8.7hz,1h),7.65(d,j＝1.9hz,1h),7.39(dd,j＝8.8,2.0hz,1h),6.98(s,1h)和6.88(s,2h)。
1d.3-((2-氨基-7-溴喹啉-4-基)氨基)丙烷-1-醇
在2dram螺旋帽小瓶中将7-溴-4-氯喹啉-2-胺(0.200g,0.777mmol)、3-氨基丙烷-1-醇(0.594ml,7.77mmol)、hunig's碱(0.678ml,3.88mmol)和dmso(0.8ml)的混合物在120℃油浴中加热过夜。反应混合物用二氯甲烷稀释，用10％氯化锂水溶液洗涤(2x)，用盐水洗涤，经无水硫酸钠干燥。在减压下浓缩，然后经isco硅胶色谱法纯化(12g；甲醇在二氯甲烷中的0-30％溶液)，得到3-((2-氨基-7-溴喹啉-4-基)氨基)丙烷-1-醇(0.161g,0.538mmol,69％产率)，为白色固体。lc/ms[m+h]+＝296.2和298.2。
1e.3-((2-氨基-7-溴-3-氟喹啉-4-基)氨基)丙烷-1-醇
将3-((2-氨基-7-溴喹啉-4-基)氨基)丙烷-1-醇(0.108g,0.365mmol)和selectfluor(0.142g,0.401mmol)在四氢呋喃(0.5ml)和乙腈(2.5ml)的混合物中的混合物于室温搅拌4小时。将反应混合物在减压下浓缩，残余物用二氯甲烷稀释，用1n氢氧化钠水溶液洗涤(2x)。收集有机层，将水层的ph用氢氧化钠水溶液调节至～9。混合物用乙酸乙酯(3x)萃取。有机层用盐水洗涤，经无水硫酸钠干燥。在减压下浓缩，得到3-((2-氨基-7-溴-3-氟喹啉-4-基)氨基)丙烷-1-醇(11mg,0.035mmol,10％产率)，为白色固体。lc/ms[m+h]+＝314.0和216.0。
实施例1
将3-((2-氨基-7-溴-3-氟喹啉-4-基)氨基)丙烷-1-醇(0.011g,0.035mmol)、3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-1h-吡唑(0.014g,0.070mmol)和磷酸三钾(2m在水中)(0.053ml,0.105mmol)在二噁烷(1.0ml)中的混合物脱气(3x；真空/氮)。向混合物中加入1,1'-双(二叔丁基膦基)二茂铁二氯化钯(2.86mg,3.50μmol)，将混合物脱气(3x；真空/氮)。将反应物浸入85℃油浴中，搅拌过夜。反应混合物用乙酸乙酯稀释，用水洗涤，用盐水洗涤。收集有机层，水层依次用乙酸乙酯萃取(3x)。合并的有机层经无水硫酸钠干燥，在减压下浓缩，残余物经反相制备型hplc纯化。将预期级分浓缩至干，残余物溶于乙酸乙酯中，用饱和碳酸氢钠水溶液、然后用盐水洗涤。收集有机层，水层依次用乙酸乙酯萃取(2x)。将合并的有机层浓缩，得到3-((2-氨基-3-氟-7-(1h-吡唑-3-基)喹啉-4-基)氨基)丙烷-1-醇(3.2mg,10.51μmol,30％产率)，为白色固体。
实施例2.(1s,3s)-3-((2-氨基-3-氟-7-(1h-吡唑-3-基)喹啉-4-基)氨基)环戊烷-1-醇
2a.(1s,3s)-3-((2-氨基-7-溴喹啉-4-基)氨基)环戊烷-1-醇
在2dram螺旋帽小瓶中，将7-溴-4-氯喹啉-2-胺(0.215g,0.835mmol)、(1s,3s)-3-氨基环戊烷-1-醇,hcl(0.300g,2.179mmol)、hunig's碱(0.729ml,4.17mmol)和dmso(0.9ml)的混合物在120℃油浴中加热过夜。反应混合物用二氯甲烷稀释，用10％氯化锂水溶液洗涤(2x)，用盐水洗涤，经无水硫酸钠干燥。在减压下浓缩，然后经isco硅胶色谱法纯化(12g；甲醇在二氯甲烷中的0-30％溶液)，得到(1s,3s)-3-((2-氨基-7-溴喹啉-4-基)氨基)环戊烷-1-醇(0.208g,0.626mmol,75％产率)，为浅黄色固体。lc/ms[m+h]+＝322.3和324.3。1h-nmr(400mhz,dmso-d6)δ7.97-7.88(m,1h),7.44-7.37(m,1h),7.14-7.07(m,1h),6.49-6.38(m,1h),6.11-5.98(m,2h),5.79-5.72(m,1h),4.61-4.52(m,1h),4.31-4.22(m,1h),4.04-3.89(m,1h),2.26-2.13(m,1h),2.04-1.86(m,2h),1.85-1.78(m,1h)和1.63-1.47(m,2h)。
2b.(1s,3s)-3-((2-氨基-7-溴-3-氟喹啉-4-基)氨基)环戊烷-1-醇
将(1s,3s)-3-((2-氨基-7-溴喹啉-4-基)氨基)环戊烷-1-醇(0.104g,0.323mmol)和selectfluor(0.137g,0.387mmol)在四氢呋喃(1ml)和乙腈(5ml)的混合物中的均匀混合物于室温搅拌过夜。在减压下除去溶剂，残余物在二氯甲烷中超声，于室温搅拌过夜。倾析出二氯甲烷层，残余物用二氯甲烷洗涤并倾析。经分析，合并的有机层未显示含有预期产物，但是残余物为产物和起始物质的1:1混合物。残余物经isco硅胶色谱法纯化(12g；甲醇在二氯甲烷中的0-20％溶液)，得到(1s,3s)-3-((2-氨基-7-溴-3-氟喹啉-4-基)氨基)环戊烷-1-醇(11mg,0.032mmol,10％产率)，为白色固体。lc/ms[m+h]+＝340.3和342.3。1h-nmr(400mhz,甲醇-d4)δ7.90-7.80(m,1h),7.60(s,1h),7.33-7.24(m,1h),4.69-4.58(m,1h),4.48-4.36(m,1h),2.37-2.23(m,1h),2.18-2.06(m,2h),2.01-1.88(m,1h)和1.78-1.58(m,2h)。
实施例2
将(1s,3s)-3-((2-氨基-7-溴-3-氟喹啉-4-基)氨基)环戊烷-1-醇(0.011g,0.032mmol)、3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-1h-吡唑(0.013g,0.065mmol)和磷酸三钾(2m在水中,0.049ml,0.097mmol)在二噁烷(1.0ml)中的混合物脱气(3x；真空/氮)。向混合物中加入1,1'-双(二叔丁基膦基)二茂铁二氯化钯(2.64mg,3.23μmol)，混合物脱气(3x；真空/氮)。反应物浸入85℃油浴中，搅拌过夜。反应混合物用乙酸乙酯稀释，用水洗涤，用盐水洗涤。收集有机层，水层依次用乙酸乙酯萃取(3x)。合并的有机层经无水硫酸钠干燥，在减压下浓缩，残余物经制备型反相hplc纯化。将预期级分浓缩至干，残余物溶于乙酸乙酯中，用1.5m磷酸氢钾水溶液、然后用盐水洗涤。收集有机层，水层依次用乙酸乙酯萃取((2x)。合并的有机层浓缩，得到(1s,3s)-3-((2-氨基-3-氟-7-(1h-吡唑-3-基)喹啉-4-基)氨基)环戊烷-1-醇(6.4mg,0.019mmol,58.6％产率)，为灰白色固体。
实施例3.3-((2-氨基-3-氯-7-(1h-吡唑-3-基)喹啉-4-基)氨基)丙烷-1-醇
3a.7-溴-3,4-二氯喹啉1-氧化物
向7-溴-3,4-二氯喹啉(0.4g,1.444mmol)在dcm(9.63ml)中的溶液中加入甲基三氧合铼(vii)(0.036g,0.144mmol)。将反应物置于冰浴中，加入过氧化氢(35％在水中)(0.379ml,4.33mmol)。将混合物搅拌过夜。加入另外的18mg甲基三氧合铼和过氧化氢(35％在水中)(0.379ml,4.33mmol)。反应物用水稀释，加入饱和硫代硫酸钠溶液，导致产生剧烈发泡。将反应物与之前的反应混合物合并，用dcm(3x)萃取。有机层用碳酸氢钠溶液洗涤，用盐水洗涤，用硫酸钠干燥，浓缩，得到7-溴-3,4-二氯喹啉1-氧化物(442mg,1.509mmol,87％产率)。lc/ms[m+h]+＝293.8。1h-nmr(400mhz,氯仿-d)δ8.93(d,j＝2.0hz,1h),8.57(s,1h),8.11(d,j＝8.9hz,1h)和7.88(dd,j＝8.9,2.0hz,1h)。
3b.7-溴-3,4-二氯喹啉-2-胺
向7-溴-3,4-二氯喹啉1-氧化物(220mg,0.751mmol)在dcm(3129μl)中的溶液中加入ts-cl(157mg,0.826mmol)。同时，向烘箱干燥的氯化铵(201mg,3.76mmol)在dcm(6258μl)中的单独混悬液中加入三乙胺(523μl,3.76mmol)。向氨溶液中滴加甲苯磺酸酯溶液。向混合物中加入80mgts-cl，将反应物搅拌过夜。加入另外100mgts-cl。约45分钟后，加入由100mg氯化铵和260μl三乙胺在3mldcm中制备的已经搅拌了约45分钟的混悬液，将反应混合物搅拌过夜。加入另外100mgts-cl，将混合物搅拌过夜，然后过滤。使滤液静置，然后第二次过滤。将合并的固体用水洗涤，在减压下干燥，得到7-溴-3,4-二氯喹啉-2-胺(91mg,0.312mmol,42％产率)。[m+h]+＝292.8和294.6。1h-nmr(400mhz,甲醇-d4)δ7.89(d,j＝8.9hz,1h),7.77(d,j＝1.8hz,1h)和7.51-7.42(m,1h)。
3c.3,4-二氯-7-(1-(四氢-2h-吡喃-2-基)-1h-吡唑-5-基)喹啉-2-胺
将1-(四氢-2h-吡喃-2-基)-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-1h-吡唑(108mg,0.390mmol)、7-溴-3,4-二氯喹啉-2-胺(91mg,0.312mmol)和pdcl2(dppf)-ch2cl2加合物(25.5mg,0.031mmol)的混合物放置在压力小瓶中。将小瓶放置在真空下，用氮回充三次。加入二噁烷(1.6ml)和磷酸三钾(2m水溶液,468μl,0.935mmol)，向溶液中充入氮气，反应物加热至100℃。将反应物冷却，用水稀释，用etoac萃取三次。有机层经硫酸钠干燥和浓缩。残余物经isco硅胶色谱法纯化(24g柱；ch2cl2/meoh；0-8％梯度)，得到3,4-二氯-7-(1-(四氢-2h-吡喃-2-基)-1h-吡唑-5-基)喹啉-2-胺(60mg,0.165mmol,53％产率)。lc/ms[m+h]+＝363.0和365.0。1h-nmr(400mhz,甲醇-d4)δ8.11(d,j＝8.6hz,1h),7.77(d,j＝1.4hz,1h),7.63(d,j＝1.7hz,1h),7.52(dd,j＝8.5,1.7hz,1h),6.53(d,j＝1.9hz,1h),5.33(dd,j＝10.2,2.2hz,1h),4.15-4.08(m,1h),3.71-3.63(m,1h),2.54-2.41(m,1h),2.07-1.99(m,1h),1.87-1.79(m,1h)和1.75-1.49(m,3h)。
实施例3
向3-氨基丙烷-1-醇(38.8mg,0.516mmol)和3,4-二氯-7-(1-(四氢-2h-吡喃-2-基)-1h-吡唑-5-基)喹啉-2-胺(25mg,0.069mmol)在dmso(0.5ml)中的溶液中加入hunig's碱(0.036ml,0.206mmol)。反应物加热至120℃。将反应物冷却，用水稀释，用etoac萃取三次。将有机层浓缩。残余物溶于0.4mldcm和0.2mltfa中。约1小时后，将反应物浓缩，与dcm共沸。将物质溶于meoh中，加入k2co3。约2小时后，将反应物过滤，用acoh淬灭，经反相制备型lc/ms以如下条件纯化：柱:xbridgec18,200mmx19mm,5-μm粒子；流动相a:5:95乙腈:水(含10-mm乙酸铵)；流动相b:95:5乙腈:水(含10-mm乙酸铵)；梯度:0-分钟维持在1％b,历经20分钟1-41％b，然后4-分钟维持在100％b；流速:20ml/min；柱温:25c。合并含预期产物的级分，经离心蒸发干燥，得到3-((2-氨基-3-氯-7-(1h-吡唑-3-基)喹啉-4-基)氨基)丙烷-1-醇(10.2mg)。
实施例4.3-((2-氨基-8-氟-7-(1h-吡唑-3-基)喹啉-4-基)氨基)丙烷-1-醇
4a.5-(((3-溴-2-氟苯基)氨基)亚甲基)-2,2-二甲基-1,3-二噁烷-4,6-二酮
将3-溴-2-氟苯胺(1.15g,6.05mmol)和5-(甲氧基亚甲基)-2,2-二甲基-1,3-二噁烷-4,6-二酮(1.352g,7.26mmol)在二噁烷(5ml)中的混合物于120℃加热30分钟。然后将反应混合物冷却至室温，用50ml二乙醚稀释。将固体过滤和干燥，得到5-(((3-溴-2-氟苯基)氨基)亚甲基)-2,2-二甲基-1,3-二噁烷-4,6-二酮(1.76g,5.1mmol,85％产率)。1h-nmr(400mhz,dmso-d6)δ11.33(brd,j＝13.4hz,1h),8.67(d,j＝13.8hz,1h),7.91-7.81(m,1h),7.59(ddd,j＝8.0,6.6,1.4hz,1h),7.25(td,j＝8.2,1.4hz,1h)和1.70(s,6h)。
4b.7-溴-8-氟喹啉-4-醇
将5-(((3-溴-2-氟苯基)氨基)亚甲基)-2,2-二甲基-1,3-二噁烷-4,6-二酮(1050mg,3.05mmol)在二苯基醚(7ml)中的溶液于240℃加热5分钟。将反应混合物冷却至室温，用50ml二乙醚稀释。通过真空过滤收集固体并干燥，得到7-溴-8-氟喹啉-4-醇(0.598g,2.5mmol,81％产率)。1h-nmr(400mhz,dmso-d6)δ11.98(brs,1h),7.87(dd,j＝7.2,6.1hz,1h),7.82(dd,j＝8.7,1.1hz,1h),7.54(dd,j＝8.7,6.3hz,1h)和6.12(d,j＝7.4hz,1h)。
4c.7-溴-4-氯-8-氟喹啉
向7-溴-8-氟喹啉-4-醇(800mg,3.31mmol)在甲苯(7ml)中的混悬液中加入pocl3(0.616ml,6.61mmol)。将反应混合物于100℃加热1小时。将冷却的反应混合物倒在冰上，然后在dcm和饱和碳酸钠之间分配。有机层经硫酸钠干燥，在减压下浓缩,残余物经isco硅胶色谱法纯化(40g柱；己烷/乙酸乙酯；0-100％梯度)，得到7-溴-4-氯-8-氟喹啉(821mg,3.10mmol,95％产率)。1h-nmr(400mhz,dmso-d6)δ11.98(brs,1h),7.87(dd,j＝7.2,6.1hz,1h),7.82(dd,j＝8.7,1.1hz,1h),7.54(dd,j＝8.7,6.3hz,1h)和6.12(d,j＝7.4hz,1h)。
4d.7-溴-4-氯-8-氟喹啉-1-氧化物
向7-溴-4-氯-8-氟喹啉(0.470g,1.804mmol)在dcm(40.0ml)中的溶液中加入mcpba(1.78g,7.22mmol)。将反应物搅拌过夜，然后用饱和硫代硫酸钠溶液淬灭。将反应物搅拌0.5小时，然后加入饱和碳酸氢钠水溶液。将反应物用dcm萃取两次，有机层用盐水洗涤，经硫酸钠干燥，浓缩，得到7-溴-4-氯-8-氟喹啉-1-氧化物(0.215g,0.779mmol,定量产率)，其未经任何另外纯化用于下一步骤。4e.7-溴-4-氯-8-氟喹啉-2-胺
在圆底烧瓶中，将7-溴-4-氯-8-氟喹啉-1-氧化物(215mg,0.779mmol)混悬于dcm(20ml)中。加入ts-cl(378mg,1.99mmol)，将混合物搅拌1小时。在第二个圆底烧瓶中，将氯化铵(483mg,9.02mmol)(在烘箱中于110℃干燥过夜)混悬于dcm(20ml)中。加入三乙胺(1.26ml,9.02mmol)，混合物搅拌1小时。将第一个烧瓶的内容物加入第二个烧瓶中，将反应物搅拌过夜，过滤，浓缩。残余物经isco硅胶色谱法纯化(40g柱；dcm/meoh0-30％梯度)，得到7-溴-4-氯-8-氟喹啉-2-胺(220mg,0.79mmol,44％产率)。
4f.4-氯-8-氟-7-(1-(四氢-2h-吡喃-2-基)-1h-吡唑-5-基)喹啉-2-胺
在压力小瓶中加入(1-(四氢-2h-吡喃-2-基)-1h-吡唑-5-基)硼酸(0.222g,0.799mmol)、7-溴-4-氯-8-氟喹啉-2-胺(0.220g,0.799mmol)和pdcl2(dppf)-dcm加合物(0.065g,0.080mmol)。将小瓶放置在真空下，回充氮气三次。加入二噁烷(10ml)和磷酸三钾(2m水溶液,1.2ml,2.4mmol)，向溶液中充入氮气。将反应物加热至100℃达2小时。将反应物冷却至室温，用50mldcm稀释，经硫酸钠干燥，浓缩。残余物经isco硅胶色谱法纯化(24g柱；己烷/乙酸乙酯0-100％梯度)，得到4-氯-8-氟-7-(1-(四氢-2h-吡喃-2-基)-1h-吡唑-5-基)喹啉-2-胺(0.154g,0.22mmol,56％产率)。
实施例4
向4-氯-8-氟-7-(1-(四氢-2h-吡喃-2-基)-1h-吡唑-5-基)喹啉-2-胺(100mg,0.288mmol)和3-氨基丙烷-1-醇(65mg,0.865mmol)在dmso(0.5ml)中的溶液中加入hunig's碱(0.5ml,2.88mmol)。反应物于120℃加热过夜。将反应物冷却至室温，加入hcl在二噁烷中的4n溶液(2ml,8mmol)。20分钟后，将反应物浓缩，残余物用dmf(1ml)稀释，通过注射器过滤器过滤，粗物质经反相制备型lc/ms以如下条件纯化：柱:xbridgec18,200mmx19mm,5-μm粒子；流动相a:5:95乙腈:水(含10-mm乙酸铵)；流动相b:95:5乙腈:水(含10-mm乙酸铵)；梯度:0-分钟维持在0％b,历经20分钟0-40％b，然后4-分钟维持在100％b；流速:20ml/min；柱温:25c。合并含预期产物的级分，经离心蒸发干燥。将物质经制备型lc/ms以如下条件进一步纯化：柱:xbridgec18,200mmx19mm,5-μm粒子；流动相a:5:95乙腈:水(含10mm乙酸铵)；流动相b:95:5乙腈:水(含10mm乙酸铵)；梯度:0-分钟维持在0％b,历经20分钟0-40％b，然后4-分钟维持在100％b；流速:20ml/min；柱温:25c。合并含预期产物的级分，经离心蒸发干燥，得到3-((2-氨基-8-氟-7-(1h-吡唑-5-基)喹啉-4-基)氨基)丙烷-1-醇(3.7mg,7.1％)。
实施例5.(1s,3s)-3-((2-氨基-5-甲基-7-(1h-吡唑-3-基)喹啉-4-基)氨基)环戊烷-1-醇
5a.7-溴-5-甲基喹啉-4-醇
将3-溴-5-甲基苯胺(2.0g,10.75mmol)和5-(甲氧基亚甲基)-2,2-二甲基-1,3-二噁烷-4,6-二酮(2.00g,10.8mmol)在二苯基醚(7.2ml)中的溶液于120℃搅拌30分钟，然后于240℃搅拌30分钟(具有排气针)。将反应混合物冷却至室温，加至己烷以沉淀预期产物，过滤，用己烷冲洗。将固体干燥，得到7-溴-5-甲基喹啉-4-醇(2.3g,90％产率)及其区域异构体5-溴-4-氯-7-甲基喹啉-2-胺，为褐色固体。lc/ms[m+h]+＝237.9。
5b.7-溴-4-氯-5-甲基喹啉
向7-溴-5-甲基喹啉-4-醇(2.3g,9.66mmol)在甲苯(10.9ml)中的溶液中加入pocl3(1.80ml,19.3mmol)。反应物于100℃搅拌1小时，冷却至室温，转移至冰水的烧杯中。当冰融化时，将混合物用dcm稀释。将冷的双相混合物用1.5m磷酸氢二钾处理直至水相达到ph7。将混合物萃取入dcm(3x)中，合并的有机层用盐水洗涤，经mgso4干燥。在减压下浓缩，得到7-溴-4-氯-5-甲基喹啉(2.4g,98％)及其区域异构体，为深棕色油。lc/ms[m+h]+＝255.9。1h-nmr(400mhz,氯仿-d)δ8.72-8.64(m,1h),8.22-8.14(m,1h),7.06-6.96(m,2h)和3.04-3.01(m,3h)。
5c.7-溴-4-氯-5-甲基喹啉-2-胺
向7-溴-4-氯-5-甲基喹啉(2.42g,9.43mmol)在dcm(63ml)中的溶液中加入mcpba(4.88g,28.3mmol)，将反应混合物搅拌过夜，然后用饱和硫代硫酸钠水溶液(18.9ml,47.2mmol)淬灭，同时搅拌1小时。反应混合物用乙酸乙酯稀释，用1.5m磷酸氢二钾洗涤，用水洗涤，用盐水洗涤，经mgso4干燥。在减压下浓缩，得到深琥铂色油。于室温在氮气下，向在dcm(94ml)中的n-氧化物(2.57g,9.43mmol)中加入ts-cl(1.978g,10.37mmol)。所得均匀混合物搅拌1小时。经由注射器将该溶液加至烧瓶中，所述烧瓶在加入烘箱干燥的氯化铵(2.52g,47.2mmol)、dcm(94ml)和三乙胺(6.57ml,47.2mmol)后已经搅拌了30分钟。然后将反应混合物搅拌过夜，过滤，将滤液浓缩和纯化，使预期产物与其区域异构体分离开。通过反相制备型isco(150gc18柱)以15-100％b(水/meoh)梯度进行纯化，得到7-溴-4-氯-5-甲基喹啉-2-胺(0.17g,15％产率)，为灰白色固体。lc/ms[m+h]+＝271.1。1h-nmr(500mhz,dmso-d6)δ7.65(s,1h),7.42(brs,1h),7.10-6.99(m,1h)和2.87-2.83(m,3h)。
5d.(1s,3s)-3-(2-氨基-7-溴-5-甲基喹啉-4-基氨基)环戊醇
向7-溴-4-氯-5-甲基喹啉-2-胺(0.030g,0.110mmol)在nmp(0.55ml)中的溶液中加入hunig's碱(0.193ml,1.105mmol)和(1s,3s)-3-氨基环戊烷-1-醇(0.034g,0.331mmol)。将反应混合物于170℃搅拌过夜，然后用乙酸乙酯稀释和用水洗涤。水相用乙酸乙酯萃取(3x)，合并的有机层用饱和氯化铵水溶液洗涤，用水洗涤，用盐水洗涤，经mgso4干燥。在减压下浓缩，得到(1s,3s)-3-(2-氨基-7-溴-5-甲基喹啉-4-基氨基)环戊醇(17mg,27％产率)，为琥珀色油。lc/ms[m+h]+＝336.2。
实施例5
将(1s,3s)-3-((2-氨基-7-溴-5-甲基喹啉-4-基)氨基)环戊烷-1-醇(0.0173g,0.051mmol)、3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-1h-吡唑(0.013g,0.067mmol)和磷酸三钾(0.077ml,0.154mmol)在二噁烷(0.322ml)中的混合物脱气(3x)。向混合物中加入1,1'-双(二叔丁基膦基)二茂铁二氯化钯(3.35mg,5.15μmol)，将混合物再次脱气(3x)，然后于80℃搅拌过夜。在减压下除去二噁烷，将粗品溶于dmf中，过滤，经反相制备型lc/ms以如下条件纯化：柱:xbridgec18,200mmx19mm,5-μm粒子；流动相a:5:95乙腈:水(含10-mm乙酸铵)；流动相b:95:5乙腈:水(含10-mm乙酸铵)；梯度:0-分钟维持在2％b,历经25分钟2-42％b，然后4-分钟维持在100％b；流速:20ml/min.，得到(1s,3s)-3-(2-氨基-5-甲基-7-(1h-吡唑-3-基)喹啉-4-基氨基)环戊醇(1.0mg,6％产率)。
实施例6.n4-((1h-吡唑-3-基)甲基)-5-甲基-7-(1h-吡唑-3-基)喹啉-2,4-二胺
将n4-((1h-吡唑-3-基)甲基)-7-溴-5-甲基喹啉-2,4-二胺(0.0125g,0.038mmol,如实施例5的制备中所概括的那样制得)、3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-1h-吡唑(9.49mg,0.049mmol)和磷酸三钾(0.056ml,0.113mmol)在二噁烷(0.24ml)中的混合物脱气(3x)。向混合物中加入1,1'-双(二叔丁基膦基)二茂铁二氯化钯(2.45mg,3.76μmol)，混合物再次脱气(3x)，于80℃搅拌过夜。在减压下除去二噁烷，将粗物质溶于dmf中，过滤，经制备型lc/ms以如下条件纯化：柱:xbridgec18,200mmx19mm,5-μm粒子；流动相a:5:95乙腈:水(含10-mm乙酸铵)；流动相b:95:5乙腈:水(含10-mm乙酸铵)；梯度:0-分钟维持在0％b,历经25分钟0-30％b，然后4-分钟维持在100％b；流速:20ml/min，得到n4-((1h-吡唑-3-基)甲基-7-(1h-吡唑-3-基)喹啉-2,4-二胺(2.2mg,18％产率)。
实施例7.3-((2-氨基-5-氟-7-(1h-吡唑-3-基)喹啉-4-基)氨基)丙烷-1-醇
7a.5-(((3-溴-5-氟苯基)氨基)亚甲基)-2,2-二甲基-1,3-二噁烷-4,6-二酮
将5-(甲氧基亚甲基)-2,2-二甲基-1,3-二噁烷-4,6-二酮(1.959g,10.53mmol)、5-(((3-溴-5-氟苯基)氨基)亚甲基)-2,2-二甲基-1,3-二噁烷-4,6-二酮和二苯基醚(7.02ml)的非均匀混合物浸入120℃油浴中，搅拌20分钟(反应物变得均匀)。将反应混合物未经进一步的后处理或纯化用于下一步骤。
7b.7-溴-5-氟喹啉-4-醇
将来自步骤a的反应混合物(40ml螺旋帽小瓶)于240℃加热15分钟。将混合物加3x类似反应物快速冷却，与3x一起在搅拌下加入二乙醚(300ml)中。将来自所有四份反应物的所得沉淀物通过真空过滤收集，得到3.53g的7-溴-5-氟喹啉-4-醇和5-溴-7-氟喹啉-4-醇的1:1混合物，为褐色固体，其未经任何进一步纯化进行使用。lc/ms[m+h]+＝242.0和244.0。
7c.7-溴-4-氯-5-氟喹啉
将7-溴-5-氟喹啉-4-醇(3.53g,14.58mmol)(两种区域异构体的混合物)和pocl3(0.832ml,8.93mmol)在甲苯(16.20ml)中的混合物在100℃油浴中加热60分钟。将反应混合物在减压下浓缩，残余物用二氯甲烷稀释，用饱和碳酸氢钠水溶液洗涤，经无水硫酸钠干燥。在减压下浓缩，然后经isco快速硅胶色谱法纯化(220g柱；0-50％乙酸乙酯在己烷中)，得到7-溴-4-氯-5-氟喹啉和5-溴-4-氯-7-氟喹啉的混合物(2.16g)，为浅黄色固体。lc/ms[m+h]+＝260.0和262.0。
7d.7-溴-4-氯-5-氟喹啉1-氧化物
于室温向7-溴-4-氯-5-氟喹啉(2.16g,8.29mmol)(两种区域异构体的混合物)在二氯甲烷(55ml)中的溶液中加入mcpba(4.3g,24.9mmol)。反应混合物于室温搅拌过夜。反应物用缓慢加入的饱和硫代硫酸钠水溶液淬灭，搅拌30分钟。将混合物用二氯甲烷稀释，用饱和碳酸氢钠水溶液洗涤(2x)。收集有机层，水层用二氯甲烷(2x)萃取。合并的有机层经无水硫酸钠干燥和浓缩，得到7-溴-4-氯-5-氟喹啉1-氧化物和5-溴-4-氯-7-氟喹啉1-氧化物的混合物(2.00g,87％产率)，为浅黄色固体。lc/ms[m+h]+＝276.0和278.0(在lc上两个接近的峰)。
7e.7-溴-4-氯-5-氟喹啉-2-胺
向7-溴-4-氯-5-氟喹啉1-氧化物(2.00g,7.23mmol)(两种区域异构体的混合物)在二氯甲烷(20ml)中的溶液中(100ml圆底烧瓶)加入甲苯磺酰基-cl(1.52g,7.96mmol)。将所得均匀混合物于室温搅拌30分钟。在含有三乙胺(5.04ml,36.2mmol)和二氯甲烷(50ml)的溶液的第二个烧瓶(100ml圆底)中加入氯化铵(1.94g,36.2mmol)(烘箱干燥)。将第一个反应混合物加至第二个中，将所得反应混合物于室温搅拌过夜。将反应混合物过滤和浓缩，所得残余物(～2.0g)如下纯化：1.)反相isco色谱法(1.43g)；和2.)isco快速硅胶色谱法(80g柱；甲醇在二氯甲烷中的0-20％溶液)，得到7-溴-4-氯-5-氟喹啉-2-胺和5-溴-4-氯-7-氟喹啉-2-胺的混合物(1.05g,53％)，为灰白色固体。lc/ms[m+h]+＝275.0和277.0(在lc上两个接近的峰)。
7f.3-((2-氨基-7-溴-5-氟喹啉-4-基)氨基)丙烷-1-醇
在2dram螺旋帽小瓶中将7-溴-4-氯-5-氟喹啉-2-胺/5-溴-4-氯-7-氟喹啉-2-胺(0.120g,0.436mmol)、3-氨基丙烷-1-醇(0.067ml,0.871mmol)、hunig's碱(0.38ml,2.18mmol)和dmso(0.5ml)的混合物在120℃油浴中加热过夜。反应混合物用乙酸乙酯稀释，用10％氯化锂水溶液(2x)洗涤，用盐水洗涤。收集有机层，水层依次用乙酸乙酯萃取(2x)。合并的有机层经无水硫酸钠干燥。在减压下浓缩，然后经isco硅胶色谱法纯化(12g柱；甲醇在二氯甲烷中的0-30％溶液)，得到3-((2-氨基-7-溴-5-氟喹啉-4-基)氨基)丙烷-1-醇(0.012mg,0.036μmol,0.083％产率)，为浅黄色固体(两个重叠峰中的第一个峰)。显著混合的级分和非预期的产物保留用于进一步纯化。lc/ms[m+h]+＝314.0和316.0。1h-nmr(400mhz,甲醇-d4)δ7.46(s,1h),7.24(m,1h),5.85(s,1h),3.77(t,j＝5.8hz,2h),3.48-3.42(m,2h)和1.99-1.94(m,2h)。
实施例7
将3-((2-氨基-7-溴-5-氟喹啉-4-基)氨基)丙烷-1-醇(0.0195g,0.062mmol)、3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-1h-吡唑(0.024g,0.124mmol)和磷酸三钾(2m在水中)(0.093ml,0.186mmol)在二噁烷(1.2ml)中的混合物脱气(3x；真空/氮)。向混合物中加入1,1'-双(二叔丁基膦基)二茂铁二氯化钯(5.07mg,6.21μmol)，将混合物脱气(3x；真空/氮)。反应物浸入85℃油浴中，搅拌过夜。反应混合物用乙酸乙酯稀释，用洗涤水，用盐水洗涤。收集有机层，水层依次用乙酸乙酯萃取(3x)。合并的有机层经无水硫酸钠干燥，在减压下浓缩。残余物经isco硅胶色谱法纯化(4g柱；甲醇在二氯甲烷中的0-20％溶液)，得到3-((2-氨基-5-氟-7-(1h-吡唑-3-基)喹啉-4-基)氨基)丙烷-1-醇(8.0mg,0.026mmol,42％产率)，为褐色固体。当柱子运行至甲醇在二氯甲烷中的30％溶液时，分离出另外的产物，但是那些级分未包括在内。
实施例8.(1s,3s)-3-((2-氨基-5-氟-7-(1h-吡唑-3-基)喹啉-4-基)氨基)环戊烷-1-醇
8a.(1s,3s)-3-((2-氨基-7-溴-5-氟喹啉-4-基)氨基)环戊烷-1-醇
在2dram螺旋帽小瓶中将7-溴-4-氯-5-氟喹啉-2-胺/5-溴-4-氯-7-氟喹啉-2-胺(7e,0.180g,0.653mmol)、(1s,3s)-3-氨基环戊烷-1-醇,hcl(0.180g,1.31mmol)、hunig's碱(0.571ml,3.27mmol)和dmso(0.8ml)的混合物在120℃油浴中加热过夜。反应混合物用乙酸乙酯稀释，用10％氯化锂水溶液(2x)洗涤，用盐水洗涤。收集有机层，水层依次用乙酸乙酯萃取(2x)。合并的有机层经无水硫酸钠干燥。在减压下浓缩，然后经isco硅胶色谱法纯化(12g；甲醇在二氯甲烷中的0-30％溶液)，得到(1s,3s)-3-((2-氨基-7-溴-5-氟喹啉-4-基)氨基)环戊烷-1-醇，为浅黄色固体(两个重叠峰中的第一个)。将显著混合的级分和非预期的产物进行浓缩，保留用于进一步纯化。lc/ms[m+h]+＝340.2和342.2。
实施例8
将(1s,3s)-3-((2-氨基-7-溴-5-氟喹啉-4-基)氨基)环戊烷-1-醇(0.019g,0.056mmol)、3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-1h-吡唑(0.022g,0.112mmol)和碳酸钾(2m在水中)(0.084ml,0.168mmol)在二噁烷(1.2ml)中的混合物脱气(3x；真空/氮)。向混合物中加入1,1'-双(二叔丁基膦基)二茂铁二氯化钯(4.6mg,5.59μmol)，将混合物脱气(3x；真空/氮)。将反应物浸入85℃油浴中，搅拌过夜。反应混合物用乙酸乙酯稀释，用水洗涤和用盐水洗涤。收集有机层，水层依次用乙酸乙酯萃取(3x)。合并的有机层经无水硫酸钠干燥和在减压下浓缩。残余物经isco硅胶色谱法纯化(4g柱；甲醇在二氯甲烷中的0-20％溶液)，得到(1s,3s)-3-((2-氨基-5-氟-7-(1h-吡唑-3-基)喹啉-4-基)氨基)环戊烷-1-醇(6.0mg,0.017mmol,31.2％产率)，为褐色固体。当柱子运行至甲醇在二氯甲烷中的30％溶液时，分离出另外的产物，但是那些级分未包括在内。
实施例9.n4-((1h-吡唑-3-基)甲基)-5-氟-7-(1h-吡唑-3-基)喹啉-2,4-二胺
9a.n4-((1h-吡唑-3-基)甲基)-7-溴-5-氟喹啉-2,4-二胺
在2dram螺旋帽小瓶中将7-溴-4-氯-5-氟喹啉-2-胺/5-溴-4-氯-7-氟喹啉-2-胺(7e,0.150g,0.544mmol)、(1h-吡唑-3-基)甲烷胺(0.106g,1.089mmol)和其它区域异构体、hunig's碱(0.48ml,2.72mmol)和dmso(0.6ml)的混合物在120℃油浴中加热过夜。反应混合物用乙酸乙酯稀释，用10％氯化锂水溶液(2x)洗涤，用盐水洗涤。收集有机层，水层依次用乙酸乙酯萃取(2x)。合并的有机层经无水硫酸钠干燥。在减压下浓缩，然后经isco硅胶色谱法纯化(化合物预吸附在硅胶上)(12g柱；甲醇在二氯甲烷中的0-30％溶液)，得到n4-((1h-吡唑-3-基)甲基)-7-溴-5-氟喹啉-2,4-二胺和n4-((1h-吡唑-3-基)甲基)-5-溴-7-氟喹啉-2,4-二胺的混合物，为浅黄色固体(33mg,18％产率)。lc/ms[m+h]+＝314.0和316.0。
实施例9
将n4-((1h-吡唑-3-基)甲基)-7-溴-5-氟喹啉-2,4-二胺(加其它区域异构体)(0.033g,0.098mmol)、3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-1h-吡唑(0.038g,0.196mmol)和碳酸钾(2.0m在水中)(0.147ml,0.294mmol)在二噁烷(1.5ml)中的混合物脱气(3x；真空/氮)。向混合物中加入1,1'-双(二叔丁基膦基)二茂铁二氯化钯(8.02mg,9.82μmol)，将混合物脱气(3x；真空/氮)。反应物浸入85℃油浴中，搅拌过夜。对反应混合物进行的分析表明，仅预期的区域异构体已经反应，非预期的区域异构体未改变。将反应混合物用乙酸乙酯稀释，用水洗涤和用盐水洗涤。收集有机层，水层依次用乙酸乙酯萃取(3x)。合并的有机层经无水硫酸钠干燥，在减压下浓缩，经反相制备型lc/ms以如下条件纯化：柱:xbridgec18,200mmx19mm,5-μm粒子；流动相a:5:95乙腈:水(含10-mm乙酸铵)；流动相b:95:5乙腈:水(含10-mm乙酸铵)；梯度:0-分钟维持在0％b,历经23分钟0-30％b，然后4-分钟维持在100％b；流速:20ml/min；柱温:25c。合并含预期产物的级分，经离心蒸发干燥，得到n4-((1h-吡唑-3-基)甲基)-5-氟-7-(1h-吡唑-3-基)喹啉-2,4-二胺(3.6mg)。
实施例10.(s)-5-氟-7-(1h-吡唑-3-基)-n4-(四氢呋喃-3-基)喹啉-2,4-二胺
10a.(s)-7-溴-5-氟-n4-(四氢呋喃-3-基)喹啉-2,4-二胺
在2dram螺旋帽小瓶中将7-溴-4-氯-5-氟喹啉-2-胺(两种区域异构体的混合物)(0.050g,0.181mmol)、(s)-四氢呋喃-3-胺(0.024g,0.272mmol)、hunig's碱(0.158ml,0.907mmol)和dmso(0.2ml)的混合物在120℃油浴中加热过夜。反应混合物用乙酸乙酯稀释，用10％氯化锂水溶液洗涤(2x)，用盐水洗涤。收集有机层，水层依次用乙酸乙酯萃取(2x)。合并的有机层经无水硫酸钠干燥。在减压下浓缩，然后经isco硅胶色谱法纯化(12g柱；甲醇在二氯甲烷中的0-30％溶液)，得到(s)-7-溴-5-氟-n4-(四氢呋喃-3-基)喹啉-2,4-二胺和(s)-5-溴-7-氟-n4-(四氢呋喃-3-基)喹啉-2,4-二胺的混合物(12mg)，为浅黄色固体。lc/ms[m+h]+＝326.1和328.1。
实施例10
将(s)-7-溴-5-氟-n4-(四氢呋喃-3-基)喹啉-2,4-二胺和(s)-5-溴-7-氟-n4-(四氢呋喃-3-基)喹啉-2,4-二胺(0.012g,0.037mmol)、3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-1h-吡唑(0.014g,0.074mmol)和碳酸钾(2m在水中,0.055ml,0.110mmol)在二噁烷(1.0ml)中的混合物脱气(3x；真空/氮)。向混合物中加入1,1'-双(二叔丁基膦基)二茂铁二氯化钯(3.00mg,3.68μmol)，混合物脱气(3x；真空/氮)。将反应物浸入100℃油浴中，搅拌过夜。对反应混合物进行的分析表明，均匀反应物是完全的，形成了来自两种区域异构体的产物。反应混合物用乙酸乙酯稀释，用水洗涤，用盐水洗涤。收集有机层，水层依次用乙酸乙酯萃取(3x)。合并的有机层经无水硫酸钠干燥和在减压下浓缩。残余物经isco硅胶色谱法纯化(4g柱；甲醇在二氯甲烷中的0-30％溶液)，得到((s)-5-氟-7-(1h-吡唑-3-基)-n4-(四氢呋喃-3-基)喹啉-2,4-二胺(1.5mg,4.55μmol,12％产率)，为褐色固体。两个重叠峰的洗脱物的第一个峰对应于预期产物。
实施例11:n4-((1h-吡唑-5-基)甲基)-8-氟-7-(1h-吡唑-5-基)喹啉-2,4-二胺
11a.2-氨基-4-溴-3-氟苯甲酸甲基酯
向2-氨基-4-溴-3-氟苯甲酸(500mg,2.14mmol)在二氯甲烷(5ml)和甲醇(5ml)中的溶液中加入tms-重氮甲烷(2.14ml,4.27mmol,2.0m在己烷中)。所得混合物于室温搅拌5小时。将反应物浓缩，得到产物，为灰色固体(510mg,96％产率)。lc/ms[m+h]+＝248.0。1h-nmr(400mhz,甲醇-d4)δ7.59-7.48(m,1h),6.82-6.76(m,1h)和3.95-3.85(m,3h)。
11b.2-氨基-7-溴-8-氟喹啉-4-醇
于-78℃向乙腈(0.948ml,18.14mmol)在四氢呋喃(15ml)中的搅拌溶液中加入正丁基锂(0.825ml,9.07mmol,11.0m在己烷中)。所得混合物于-78℃搅拌1小时。历经15分钟滴加在30ml四氢呋喃中的2-氨基-4-溴-3-氟苯甲酸甲基酯(450mg,1.81mmol)，于-78℃继续反应30分钟。温热至室温后，将反应混合物于室温搅拌另外24小时。加入氯化铵的饱和水溶液，通过真空过滤收集沉淀物，得到产物，为白色固体(300mg,1.17mmol,64％产率)。lc/ms[m+h]+＝258.9。
11c.2-氨基-8-氟-7-(1h-吡唑-5-基)喹啉-4-醇
向用氮气惰性气氛净化并维持的10ml反应小瓶中加入2-氨基-7-溴-8-氟喹啉-4-醇(50mg,0.195mmol)在二噁烷(2ml)中的溶液。向溶液中加入磷酸三钾(0.292ml,0.584mmol,2m在水中)、5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-1h-吡唑(45.3mg,0.233mmol)和pdcl2(dppf)(7.12mg,9.73μmol)。所得溶液于100℃搅拌13小时。将反应混合物经反相制备型hplc纯化，得到2-氨基-8-氟-7-(1h-吡唑-5-基)喹啉-4-醇(35mg,0.137mmol,70％产率)，为白色固体。lc/ms[m+h]+＝245.1。1h-nmr(400mhz,甲醇-d4)δ8.05-8.01(m,1h),7.99-7.96(m,1h),7.87-7.81(m,1h),6.98-6.88(m,1h)和6.40-6.34(m,1h)。
11d.4-氯-8-氟-7-(1h-吡唑-5-基)喹啉-2-胺
将2-氨基-8-氟-7-(1h-吡唑-5-基)喹啉-4-醇(50mg,0.205mmol)在pocl3(954μl,10.24mmol)中的溶液加热至100℃达12小时。将反应混合物在减压下蒸发。经反相制备型hplc纯化，得到4-氯-8-氟-7-(1h-吡唑-5-基)喹啉-2-胺(35mg,0.133mmol,65％产率)。lc/ms[m+h]+＝263.1。1h-nmr(400mhz,甲醇-d4)δ8.07-8.03(m,1h),7.96-7.91(m,1h),7.88-7.83(m,1h),7.33-7.28(m,1h)和7.00-6.93(m,1h)。
实施例11
向4-氯-8-氟-7-(1h-吡唑-5-基)喹啉-2-胺(10mg,0.038mmol)在nmp(1ml)中的溶液中加入hunig’s碱(0.033ml,0.190mmol)和(1h-吡唑-5-基)甲烷胺(7.39mg,0.076mmol)。所得混合物加热至150℃达12小时。将反应混合物经反相制备型hplc纯化，得到n4-((1h-吡唑-5-基)甲基)-8-氟-7-(1h-吡唑-5-基)喹啉-2,4-二胺(5mg,0.015mmol,39％产率)。
实施例12.3-((2-氨基-3-甲基-7-(1h-吡唑-5-基)喹啉-4-基)氨基)丙烷-1-醇
12a.2-氨基-7-溴-3-甲基喹啉-4-醇
于-78℃向丙腈(1.551ml,21.73mmol)在四氢呋喃(18ml)中的搅拌溶液中加入正丁基锂(0.988ml,10.87mmol,11.0m在己烷中)。所得混合物于-78℃搅拌1小时。然后历经15分钟滴加在3ml四氢呋喃中的2-氨基-4-溴苯甲酸甲基酯(500mg,2.173mmol)。反应物于78℃搅拌-30分钟，温热至室温，于室温搅拌48小时。加入饱和氯化铵水溶液，通过真空过滤收集所得沉淀物并干燥，得到2-氨基-7-溴-3-甲基喹啉-4-醇(300mg,1.19mmol,55％产率)，为白色固体。lc/ms[m+h]+＝254.9。1h-nmr(400mhz,甲醇-d4)δ8.07-7.95(m,1h),7.81-7.71(m,1h),7.62-7.49(m,1h)和2.23-2.12(m,3h)。
12b.2-氨基-3-甲基-7-(1h-吡唑-5-基)喹啉-4-醇
向用氮气惰性气氛净化并维持的10ml反应小瓶中加入2-氨基-7-溴-3-甲基喹啉-4-醇(100mg,0.395mmol)在二噁烷(3ml)中的溶液。向溶液中加入在水中的2m磷酸三钾(0.593ml,1.19mmol)、5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-1h-吡唑(92mg,0.474mmol)和pdcl2(dppf)(14.5mg,0.020mmol)。所得溶液于100℃搅拌13小时。将反应混合物经反相制备型hplc纯化，得到2-氨基-3-甲基-7-(1h-吡唑-5-基)喹啉-4-醇(35mg,0.146mmol,37％产率)，为白色固体。lc/ms[m+h]+＝241.1。
12c.4-氯-3-甲基-7-(1h-吡唑-5-基)喹啉-2-胺
将2-氨基-3-甲基-7-(1h-吡唑-5-基)喹啉-4-醇(30mg,0.125mmol)在pocl3(349μl,3.75mmol)中的溶液加热至100℃达12小时。将反应混合物在减压下浓缩，干燥，得到4-氯-3-甲基-7-(1h-吡唑-5-基)喹啉-2-胺(30mg,0.116mmol,93％产率)。lc/ms[m+h]+＝259.0。
实施例12
向4-氯-3-甲基-7-(1h-吡唑-5-基)喹啉-2-胺(15mg,0.058mmol)在nmp(1ml)中的溶液中加入hunig’s碱(0.051ml,0.290mmol)和3-氨基丙烷-1-醇(8.71mg,0.116mmol)。所得混合物加热至150℃达12小时，然后经反相制备型hplc纯化，得到3-((2-氨基-3-甲基-7-(1h-吡唑-5-基)喹啉-4-基)氨基)丙烷-1-醇(12mg,0.040mmol,69.6％产率)。
实施例13.n4-((1h-吡唑-5-基)甲基)-3-甲基-7-(1h-吡唑-5-基)喹啉-2,4-二胺
以与实施例12的制备中所用相似的方式制得预期化合物。
实施例14.2-((2-氨基-3-环戊基-7-(1h-吡唑-5-基)喹啉-4-基)氨基)乙烷-1-醇
在反应小瓶中在乙酸-水(1:1,5ml)中加入4-氯-7-(1-(四氢-2h-吡喃-2-基)-1h-吡唑-5-基)喹啉-2-胺(150mg,0.456mmol))和环戊基-三氟硼酸钾(80mg,0.456mmol)。加入tfa(35.1μl,0.456mmol)，将反应物搅拌直至均匀。然后加入乙酸锰(iii)二水合物(306mg,1.141mmol)。将反应物密封，温热至50℃过夜。将冷却的反应物过滤，得到111mg粗品4-氯-3-环戊基-7-(1h-吡唑-5-基)喹啉-2-胺。在反应小瓶中将一部分该物质(30mg,0.096mmol)溶于nmp(0.25ml)中。加入乙醇胺(29ul,0.480mmol)。将小瓶充入氮气，密封，加热至160℃。反应过夜后，将冷却的反应物用甲醇稀释，过滤。将粗物质经制备型lc/ms以如下条件纯化：柱:xbridgec18,200mmx19mm,5-μm粒子；流动相a:5:95乙腈:水(含乙酸铵)；流动相b:95:5乙腈:水(含乙酸铵)；梯度:0-分钟维持在5％b,历经20分钟5-45％b，然后0-分钟维持在100％b；流速:20ml/min；柱温:25c。通过ms和uv信号触发级分收集。合并含预期产物的级分，经离心蒸发干燥，得到2-((2-氨基-3-环戊基-7-(1h-吡唑-5-基)喹啉-4-基)氨基)乙烷-1-醇(8.8mg,0.026mmol).
实施例15.3-环戊基-7-(1h-吡唑-5-基)-n4-(吡啶-2-基甲基)喹啉-2,4-二胺
以与实施例14中所述类似的方式制得实施例15。
实施例16.3-((2-氨基-3-环戊基-7-(1h-吡唑-5-基)喹啉-4-基)氨基)丙烷-1-醇
在反应小瓶中在nmp(250ul)中加入4-氯-3-环戊基-7-(1h-吡唑-5-基)喹啉-2-胺(50mg,0.160mmol)。加入3-氨基-1-丙醇(61.1μl,0.799mmol)。将小瓶充入氮气，密封，加热至160℃。搅拌过夜后，将冷却的反应物用甲醇稀释，过滤，经rp-hplc纯化(甲醇-水梯度+0.1％tfa)。用碳酸氢钠溶液处理含产物的级分。蒸发溶剂直至样品大部分是水。分离产物，为粘稠的油。将样品进行超声，倾析出液体。加入水并重复操作。将残余物溶于乙醇中并蒸发。将样品泵吸，得到3-((2-氨基-3-环戊基-7-(1h-吡唑-5-基)喹啉-4-基)氨基)丙烷-1-醇(18.5mg,0.051mmol,32.2％产率)。
已经描述了本发明的多个实施方案。然而，可以理解，可以在不脱离本发明的宗旨和范围的情况下进行各种变通。因此，其它实施方案在随后权利要求的范围内。