1.一种过表达虫草素的重组蛹虫草,其特征在于:所述过表达虫草素的重组蛹虫草是将目的基因导入蛹虫草细胞中构建而成;所述目的基因为腺苷琥珀酸合酶基因、腺苷琥珀酸裂合酶基因或5’-核苷酸酶基因。
2.一种过表达虫草素的重组蛹虫草,其特征在于所述过表达虫草素的重组蛹虫草按以下方法构建:
(1)将目的基因与线性化双元载体pcambia0380连接,得到重组载体;用所述重组载体转化根癌农杆菌,通过含25μg/ml利福平和50μg/ml卡那霉素的lb固体培养基培养并筛选,获得含重组载体的根癌农杆菌菌株;
(2)将步骤(1)得到的所述含重组载体的根癌农杆菌菌株含200μmol/l乙酰丁香酮的im培养基诱导培养后,与野生型蛹虫草孢子(cordycepsmilitaris)共培养,用含200μg/ml潮霉素、50μg/ml卡那霉素和100μg/ml头孢菌素的im培养基筛选,再在含200μg/ml潮霉素的pda培养基上连续传代五次,得到所述的过表达虫草素的重组蛹虫草。
3.如权利要求1所述的过表达虫草素的重组蛹虫草,其特征在于:所述腺苷琥珀酸合酶基因的基因符号为ccm_06768,核苷酸序列如seqidno.1所示;所述腺苷琥珀酸裂合酶基因的基因符号为ccm_05789,核苷酸序列如seqidno.2所示;所述5’-核苷酸酶基因的基因符号为ccm_02831,核苷酸序列如seqidno.3所示。
4.如权利要求1所述的过表达虫草素的重组蛹虫草,其特征在于:所述目的基因利用pcr扩增从蛹虫草菌丝中得到,所述蛹虫草菌丝为cordycepsmilitariscgmcc3.14242。
5.如权利要求4所述的过表达虫草素的重组蛹虫草,其特征在于:所述目的基因为腺苷琥珀酸合酶基因时,所述pcr扩增中使用的引物对是ccm_06768-fgcagacatcacaatgagtattacagtcattctcggctccc;ccm_06768-rtttcgccacggagctttaccggtaaatcatgtcgtcgcgt;
所述目的基因为腺苷琥珀酸裂合酶基因时,所述pcr扩增中使用的引物对是ccm_05789-fgcagacatcacaatggcaactgacggaaaaaatgctggga;ccm_05789-rtttcgccacggagctttagacattcagctccgtcgttgct;
所述目的基因为5’-核苷酸酶基因时,所述pcr扩增中使用的引物对是ccm_02831-fgcagacatcacaatgaagactgctgctactctcctcgc;ccm_02831-rtttcgccacggagctctaaatcgccaaagccatgacaaca。
6.如权利要求4所述的过表达虫草素的重组蛹虫草,其特征在于:所述线性化双元载体pcambia0380是以pcambia0380为模板,经以下引物pcr扩增得到:
vector-f:agctccgtggcgaaagcctgacgca;
vector-r:cattgtgatgtctgctcaagcggggt。
7.如权利要求4所述的过表达虫草素的重组蛹虫草,其特征在于:所述蛹虫草菌丝是在发酵培养基中培养得到,所述发酵培养基各组分终浓度为:葡萄糖20-25g/l,蛋白胨10-20g/l,kh2po40-1g/l,k2hpo40-1g/l,mgso4·7h2o0-1g/l,l-甘氨酸1g/l,溶剂为蒸馏水,ph自然。
8.如权利要求1~7所述的过表达虫草素的重组蛹虫草,其特征在于:所述过表达虫草素的重组蛹虫草为cordycepsmilitariscctccaf2021007~2021030中的一种,保藏于中国典型培养物保藏中心,保藏日期:2021年01月04日,地址:中国,武汉,武汉大学,430072。
9.如权利要求8所述的过表达虫草素的重组蛹虫草,其特征在于:所述过表达虫草素的重组蛹虫草为cordycepsmilitariscctccaf2021010、cctccaf2021015、cctccaf2021016、cctccaf2021025、cctccaf2021029中的一种。
10.如权利要求9所述的过表达虫草素的重组蛹虫草,其特征在于:所述过表达虫草素的重组蛹虫草为cordycepsmilitariscctccaf2021025。