一种五味子油低邻苯二甲酸酯类化合物的去除及提取方法
【技术领域】
[0001] 本发明涉及植物残留物的去除以及植物有效成分的提取，特别涉及一种五味子油 中五味子油中低邻苯二甲酸酯类化合物去除及提取的新方法。
【背景技术】
[0002] 环境内分泌物质已经成为全球性的环境污染问题，成为各国政府、管理部门、学 术界和公众共同关注的焦点。邻苯二甲酸酯类化合物（PAEs)作为一种环境内分泌物质， 因其特殊性质，在大气、水、土壤（沉积物）等各种环境介质中均有其残留，导致多数食品 甚至保健品原料中均不程度的含有PAEs。近年来，国家对食品、保健品中PAEs含量的规 定越来越严格和明晰化。邻苯二甲酸酯类化合物为塑胶工业中常用的塑化剂，是一种增加 材料的柔软性或使材料液化的添加剂，能增加塑料的弹性。研究显示，邻苯二甲酸酯类化 合物为激素类环境污染物，对人体和动物均有一定的危害，可致癌、致畸及免疫抑制。因此 针对食品、保健品原料中PAEs开展来源追踪、开展低PAEs生产新工艺研究是一项具有重 大现实意义的课题。中国专利申请公开了 "一种分离沙棘籽油中邻苯二甲酸酯类的方法" (CN104178337A)，解决了从沙棘籽油中去除邻苯二甲酸酯类的问题，其是按照酒精：沙棘 籽籽油I : 1?1 : 3的比例，将沙棘籽油与95%酒精混合、萃取及脱溶分离邻苯二甲酸酯 类，沙棘籽油回收率为63?65 %，在沙棘籽油中未检出邻苯二甲酸二丁酯（DBP)，具有溶剂 残留低，并保持了沙棘籽油中生物活性物质的特点。但这种方法不适合五味子油中低邻苯 二甲酸酯类化合物的去除。
【发明内容】
[0003] 本发明提供一种五味子油中低邻苯二甲酸酯类化合物去除及五味子油的提取新 方法，具有对环境污染少，去除效率高等特点。
[0004] 本发明的实施方案为：一种五味子油中低邻苯二甲酸酯类化合物的去除及提取方 法，包括： (1) 取粉碎后五味子原料，用脂肪酶进行酶解，酶解温度50°c -60°c，加酶量为五味子 原料重量的10%。-15%。，料水比1:5-10,酶解时间2h-3 h，酶解过程中不断搅拌，酶解完成 后离心分离水分，固体沉淀在烘箱中KKTC灭酶5-10min，随后在烘箱中60°C烘干水分至 4. 5%-5%，得到去除部分低邻苯二甲酸酯类化合物的五味子烘干产物； (2) 取步骤（1)所得烘干产物样品5g置于具塞磨口锥形中，加水8-12ml，旋涡使样品 充分润湿，加入40ml正已烷，涡旋lmin，超声提取20min，分离出正已烷液；继续加入20ml 正已烷，超声提取lOmin，分离出正已烷液，合并两次正已烷提取液并经无水硫酸钠过滤， 滤液氮吹至近干，得到低邻苯二甲酸酯类化合物。加入正已烷溶解，滤过后供GC-MS分析； (3) 对步聚（1)中所得五味子烘干产物进行超临界二氧化碳提取五味子油，超临界萃取 的条件为：温度40-50°C，萃取压力10_20Mpa，分离压力7Mpa，分离温度50-60°C，萃取时间 2-2. 5小时，CCV流量为10-15KG/h，药材水分为4. 5%-5%，粒度为10-24目； (4)对步骤（3)所得五味子油进行邻苯二甲酸酯类化合物检测：GC-MS测定，条件参数 参照 GB/T21911-2008。
[0005] 所述低邻苯二甲酸酯类化合物包括邻苯二甲酸二异丁酯（DIBP)、邻苯二甲酸二丁 酯（DBP)、邻苯二甲酸二（2-乙基）己酯（DEHP)。
[0006] 作为优化，步骤（1)中，最佳酶解条件为：酶解温度50°C，加酶量为五味子原料重 量的10%。，料水比1:5,酶解时间2h。
[0007] 本发明中的步骤（1)采用酶解的方式除去了五味子原料中的部分邻苯二甲酸酯类 化合物，步骤（2)可以检测到样品中邻苯二甲酸酯类化合物的含量，步骤（3)在提取为五味 子油的同时，可以进一步去除邻苯二甲酸酯类化合物。本发明采用脂肪酶进行酶解去除和 超临界二氧化碳萃取技术进行五味子原料中的邻苯二甲酸酯类化合物去除方法和五味子 油的提取方法，具有对环境污染少，去除效率高的，技术容易推广的优点。
【具体实施方式】
[0008] 实施例1: 以塑化剂单标：邻苯二甲酸二（2-乙基）己酯（DEHP)为研究对象： 分别使用脂肪酶和单宁酶进行酶解五味子原料： (1) 五味子药材原料市购。取粉碎后五味子原料I. OOKg ;按料水质量比1:5加入水； 加入五味子原料重量10%。的脂肪酶或单宁酶，在温度50°C下过程搅拌酶解2h，酶解完成 后离心分离水分，固体沉淀在烘箱中KKTC灭酶5-10min，随后在烘箱中60°C烘干水分至 4. 5%-5%。得到五味子原料脂肪酶酶解烘干产物； (2) 脂肪酶酶解烘干产物5g置150ml具塞磨口锥形中，加水10ml，旋涡使试样充分润 湿，继加入40ml正已烷，涡旋lmin，超声提取20min，分离出正已烷液；继加入20ml正已 烷，超声提取l〇min，分离出正已烷液，合并两次正已烷提取液并经无水硫酸钠过滤，滤液 氮吹至近干，精密加入正已烷2ml溶解，滤过后供GC-MS分析。检测结果见表1。
[0009] 表1脂肪酶和单宁酶f解五味子原料产物中的DEHP含量
【主权项】
1. 一种五味子油中低邻苯二甲酸酯类化合物的去除及提取方法，其特征在于，包括： (1) 取粉碎后五味子原料，用脂肪酶进行酶解，酶解温度50°c -60°c，加酶量为五味子 原料重量的10%。-15%。，料水比1:5-10,酶解时间2h-3 h，酶解过程中不断搅拌，酶解完成 后离心分离水分，固体沉淀在烘箱中KKTC灭酶5-10min，随后在烘箱中60°C烘干水分至 4. 5%-5%，得到去除部分低邻苯二甲酸酯类化合物的五味子烘干产物； (2) 取步骤（1)所得烘干产物样品5g置于具塞磨口锥形中，加水8-12ml，旋涡使样品 充分润湿，加入40ml正已烷，涡旋lmin，超声提取20min，分离出正已烷液；继续加入20ml 正已烷，超声提取lOmin，分离出正已烷液，合并两次正已烷提取液并经无水硫酸钠过滤， 滤液氮吹至近干，得到低邻苯二甲酸酯类化合物； (3) 对步聚（1)中所得五味子烘干产物进行超临界二氧化碳提取五味子油，超临界萃取 的条件为：温度40-50°C，萃取压力10_20Mpa，分离压力7Mpa，分离温度50-60°C，萃取时间 2-2. 5小时，CCV流量为10-15KG/h，药材水分为4. 5%-5%，粒度为10-24目； 对步骤（3)所得五味子油进行邻苯二甲酸酯类化合物检测。
2. 根据权利要求1所述的五味子油中低邻苯二甲酸酯类化合物的去除及提取方法，其 特征在于，所述低邻苯二甲酸酯类化合物包括邻苯二甲酸二异丁酯、邻苯二甲酸二丁酯、邻 苯二甲酸二（2-乙基）己酯。
3. 根据权利要求1所述的五味子油中低邻苯二甲酸酯类化合物的去除及提取方法，其 特征在于，步骤（1)中，最佳酶解条件为：酶解温度50°C，加酶量为五味子原料重量的10%。， 料水比1:5,酶解时间2h。
【专利摘要】一种五味子油中低邻苯二甲酸酯类化合物的去除及提取方法，包括：（1）取粉碎后五味子原料用脂肪酶进行酶解，酶解温度50℃-60℃，加酶量10‰-15‰，料水比1:5-10，酶解时间2h-3？h，酶解完成后离心分离水分，固体沉淀灭酶后烘干，得酶解烘干产物；（2）取酶解烘干产物样品加水润湿，加正已烷超声提取两次，分离出正已烷液，合并两次提取液并经无水硫酸钠过滤，滤液氮吹至近干，得到低邻苯二甲酸酯类化合物；（3）对酶解烘干产物进行超临界二氧化碳提取五味子油。本发明采用脂肪酶进行酶解去除和超临界二氧化碳萃取技术进行五味子原料中的邻苯二甲酸酯类化合物去除方法和提取方法，具有对环境污染少、去除效率高、技术容易推广的优点。
【IPC分类】C11B1-00, C11B1-10, C11B1-04
【公开号】CN104560358
【申请号】CN201410824852
【发明人】曹庸, 陈雪香, 苗建银
【申请人】华南农业大学
【公开日】2015年4月29日
【申请日】2014年12月27日