专利名称：一种中药有效部位组合物的制作方法
技术领域：
本发明属于制药技术领域，具体涉及一种具有益气养阴、复脉固脱功效的的中药有效部位组合物，其特征在于该组合物包含人参总皂甙、麦冬总皂甙、五味子挥发油和五味子总木脂素，背景技术目前市售的生脉注射液处方及制法如下处方红参100g 麦冬312g 五味子156g制法以上三味，将红参粉碎成细粒，用乙醇回流提取4～5次，每次2小时，用薄层层析法控制提取终点，合并提取液，冷藏，滤过，滤液浓缩至稠膏状，加入注射用水至400ml，搅匀，冷藏，滤过，滤液供配液用；五味子用水蒸气蒸馏法收集馏液150ml，冷藏，供配液用，药渣加水煎煮三次，每次40分钟，合并煎液，滤过，滤液浓缩至稠膏状，加入乙醇进行两次醇沉，第一次使含醇量达80％，第二次使含醇量达85％，滤过，合并滤液，回收乙醇并浓缩至稠膏状，加入注射用水至200ml，搅匀，冷藏，滤过，滤液加适量活性碳煮沸30分钟，稍冷，过滤至澄明，供配液用；麦冬照五味子水液制备方法制成澄明的麦冬水溶液约200ml，供配液用。将上述红参水液、五味子蒸馏液、五味子水液和麦冬水液混合均匀，滤过，滤液加注射用水至1000ml，调节药液pH值至7.5，滤过，灌封，灭菌，即得。
按照该方法制备的提取工艺不完善，有效成分含量低，稳定性很差，如果不加助溶剂，放置一段时间就会出现絮状沉淀，通常的做法是加入一定量的Tween-80。该注射液临床使用中的不良反应主要是因为不合理的制备工艺可能使中成药中的毒性成分增加，有效成分含量减少；制备过程中杂质未除尽，如糖类等均可引起不良反应。
发明内容
本发明公开了一种具有益气养阴、复脉固脱功效的的中药有效部位组合物，其特征在于该组合物包含人参总皂甙、麦冬总皂甙、五味子挥发油和五味子总木脂素，该制剂具有功效成分清楚、质量可控、疗效显著等特点，制成的注射剂中还采用了先进的包合或纳米乳制备技术，稳定性好。
各组分的重量份为人参总皂甙 1-5
麦冬总皂甙 1-10五味子挥发油0.5-5五味子总木脂素 1-30更优选的重量份为人参总皂甙 1-3麦冬总皂甙 3-6五味子挥发油1-3五味子总木脂素 5-15人参总皂苷是红参药材的主要功效成分，具有强心，调整血压，改善循环，促进物质代谢和蛋白质合成等功效。我们采用了大孔树脂富集和吸附树脂对其进行了纯化分离，得到人参总皂苷纯度达80％以上。具体制备工艺如下将红参切碎，加4-12倍量50-85％的乙醇回流提取2-3次，每次1-4小时，乙醇浸提液合并，减压回收至无醇味，加水至药材1-3倍体积，冷藏24小时，调节PH值8-10，通过净化的大孔树脂柱，先用PH值9-12的水冲洗，再用5-50％的乙醇洗脱，最后用70-90％的乙醇洗脱至无皂甙反应，收集70-90％的乙醇洗脱液，乙醇洗脱液减压浓缩，浓缩液通过吸附树脂，干燥即得，人参总皂甙占总提取物的50％以上。
麦冬总皂甙是麦冬药材的主要功效成分，具有改善心肌收缩力，心脏泵功能，保护心肌，抗心律失常，耐缺氧，降血糖和抗菌等功效。其制备方法为将麦冬切碎，加10-20倍量水煎煮2-3次，每次0.5-2小时，水提液合并，减压回收至药材0.5-2倍量，加乙醇使含醇量达80％，冷藏过夜，滤过，滤液减压回收至无醇味，浸膏加纯化水至药材1-4倍，通过净化的大孔树脂柱，先用PH值9-12的水冲洗，再用5-50％的乙醇洗脱，最后用70-90％的乙醇洗脱至无皂甙反应，收集70-90％的乙醇洗脱液，乙醇洗脱液减压浓缩，浓缩液通过吸附树脂，干燥即得，麦冬总皂甙占总提取物的50％以上。
五味子主要成分为挥发油和木脂素，具有增强肝脏解毒功能，促进肝脏蛋白质和糖原的生物合成等功效。本发明的制备方法为五味子挥发油放入超临界二氧化碳萃取装置的萃取釜中，萃取压力7～50Mpa，萃取温度30～80℃。在解析压力1.5～8.0Mpa，解析温度20～80℃下进行收集，即得；药渣用乙醇作加带剂，继续用超临界二氧化碳萃取，萃取压力7～50Mpa，萃取温度30～80℃。在解析压力1.5～8.0Mpa，解析温度20～80℃下收集得乙醇萃取液，萃取液浓缩，加少量水析晶，得总木脂素，总木脂素占总提取物的50％以上。
实施例一制备冻干粉针人参总皂甙1.5g 麦冬总皂甙5.0g 五味子挥发油1g 五味子总木脂素8g
取适量注射用环糊精(β或γ环糊精)，加入到50ml水溶液中，充分溶解，五味子挥发油1g和五味子总木脂素8g溶解于适量乙醇溶液中，将该乙醇溶液缓缓加入环糊精溶液中，快速搅拌至溶液澄明，为溶液①；另取150ml注射用水，加入人参总皂甙1.5g，麦冬总皂甙5.0g，甘露醇3g，使充分溶解为溶液②，溶液①②充分混合，加0.1-0.5％的活性炭除去热源，调节PH至6.0-8.0，除均过滤，罐装于西林瓶中，经冷冻干燥后轧盖，检验合格后，包装即得。
实施例二制备亚微乳注射剂人参总皂甙2.0g 麦冬总皂甙5.5g 五味子挥发油1g 五味子总木脂素5g五味子挥发油1g、五味子总木脂素5g加适量助溶剂加热溶解于100g脂肪酸甘油三酯中(其中脂肪酸碳原子数为5-24)，10g乳化剂(磷脂4g、F686g)，15g甘油及适量抗氧化剂充分分散于PH值10-12的水中，油水两相混合，定溶至500ml，于50-80℃高速搅拌后经过高压均质机均质，过滤罐装灭菌即得溶液①；人参总皂甙2.0g、麦冬总皂甙5.5g溶解于500ml注射用水中，加入氯化钠4.5g，用0.1-0.5％的活性炭除去热源，调节PH至6.0-8.0，除菌过滤，过滤罐装灭菌得溶液②。使用前溶液①②等比例混合。
实施例三制备注射剂人参总皂甙2.0g 麦冬总皂甙5.5g 五味子挥发油1g 五味子总木脂素5g称取五味子挥发油1g、五味子总木脂素5g溶于适量乙醇中，加入适量solutolHS15或吐温80及少量水于20℃-80℃搅拌使混合均匀，加注射用水定容至100ml，于20℃-80℃搅拌制成微乳，用0.1-0.5％的活性炭除去热源，调节PH至6.0-8.0，除菌过滤，过滤罐装灭菌得溶液除菌过滤充氮气灌装，灭菌既得。
实施例四制备软胶囊将峰腊置于大豆油中，加热溶融，放冷至室温，人参总皂甙2.5g、麦冬总皂甙7.5g五味子挥发油1g、五味子总木脂素15g，用胶体磨反复研匀，得内容物，另取明胶、水、甘油至适量容器中，加热后于80℃溶解，加入防腐剂，于60℃保温，制成胶皮，将两者通过软胶囊设备压制成型，干燥后的本发明的软胶囊制剂。
附录一本发明小容量注射剂与市售生脉注射剂的药效学对比实验1实验药品 本发明小容量注射剂，生脉注射液(四川产)；每1ml药物均相当于生药红参0.1g，麦冬0.312g，五味子0.156g。
2实验方法 ①以戊巴比妥钠建立麻醉犬急性心衰模型，并监测各项指标；②将心衰犬随机分为2组实验组(6只犬)，生脉注射液10ml溶于生理盐水90ml中，静脉滴注，给药速度1.0ml/min(输液泵控制)；对照组(6只犬)，生理盐水100ml，静脉滴注，给药速度为1.0ml/min(输液泵控制)。分别于给药后5、15、30、60、90和120min记录监测指标；本发明小容量注射剂组(6只犬)，直接静脉滴注，给药速度为0.5ml/min(输液泵控制)。分别于给药后5、15、30、60、90和120min记录监测指标；3观察指标 心率(HR)、心律；股动脉收缩压(SBP)、舒张压(DBP)、平均动脉压(MBP)；肺动脉收缩压(SPAP)、舒张压(DPAP)；中心静脉压(CVP)、肺毛细血管嵌压(PCWP)、心排血量(CO)；血液温度；心脏指数(CI)[心排血量(CO)/体表面积(BSA)]；左心室做功指数(LVWI)[CI×1055×(MBP-PCWP)×00136]；总外周血管阻力(TPR)(80×MBP/CO)；总肺血管阻力(TPVR)(80×PAP/C0)；耗氧量(D-P)二项乘积(SBP×HR)。
4统计学处理 用SAS统计软件包对计量资料进行统计学分析，组内不同时间点的比较采用多元统计过程，组间的比较采用t检验。
生脉注射液对心衰犬动脉血压的影响(x±s)(实验组n＝6，对照组n＝4)
与组内用药前相比较P＜005；与组间相比较P＜005结论本发明小容量注射剂和生脉注射液均可以显著降低心衰犬心率，对窦性心律无影响。给药后15min心率即有明显降低，对照组心率无明显变化；在同一时间点上与对照组相比较，实验组和本发明小容量注射液组在用药后90min后各指标均较对照组有明显改善。本发明小容量注射剂和生脉注射液都可以显著地提高心衰犬动脉血压，明显升高动脉血压(P＜001)。
附录二本发明中提取物含量的测定方法1、麦冬总皂苷的含量测定1.1供试品溶液的制备 取麦冬药材以80％乙醇提取，回收乙醇至无醇味。离心，取上清液，用乙醚萃取2次，再以水饱和正丁醇萃取4次，正丁醇萃取液用0.1mol/LNaOH反萃2次，正丁醇液回收至干，用甲醇溶解并加至刻度，即得。
1.2麦冬总皂苷的含量测定 采用紫外分光光度法。取麦冬皂苷D、葡萄糖及麦冬总皂苷的甲醇液适量，置具塞刻度试管中，挥去甲醇，加入10mL高氯酸，混匀，65℃加热10min，冰水终止反应，于紫外分光光度计上扫描，麦冬皂苷D在395nm处有最大吸收峰，麦冬总皂苷在397nm左右有最大吸收峰，二者相近，葡萄糖在附近无干扰，故选395nm为麦冬皂苷的测定波长。线性方程为Y＝0.80677X+0.001725，r＝0.9995。线性范围0.1290～0.7742mg。
2、人参总皂苷的含量测定2.1样品供试液的制备 取2.00g样品，加1ml水，用水饱和的正丁醇提取2次(20ml)，振荡时间10分钟，合并上层提取液，用5ml1％氨水洗1次(当杂质少时可省略该步)，再用正丁醇饱和的水洗2次(5ml)合并上层液，蒸干，用甲醇溶解，定容至1ml。
2.2比色测定 取人参皂甙Re标准液0、30、50μl，样品供试液取20μl(或按人参皂甙含量大小取值)置于10ml比色管中，用微沸水浴挥干溶剂放冷，依次加入1ml5％香草醛冰醋酸液5ml70％H2SO4，摇匀，在60℃恒温水浴中加热10分钟，取出，冰浴冷却15分钟，摇匀于544nm下用0.5cm比色杯比色测定。
3、总木脂素的含量测定称取五味子粉末(40目)1.00g，在索氏提取器中，用75％乙醇50ml回流提取4小时，回收乙醇，再用75％乙醇50ml提取，回收乙醇，得提取物，用乙醇定量转移至10ml容量瓶中，备用。
准确吸取上述乙醇溶液1ml，拌入1g硅胶(120目)中，待乙醇挥发后，将乙醇装入小层析柱中，柱底塞少许脱脂棉，用氯仿洗至10ml)容量瓶中，精确吸收氯仿洗脱液0.5ml于10ml试管中，蒸去氯仿后，加入10％变色酸水溶液0.5ml。浓硫酸3.0ml，蒸馏水1.5ml，摇匀后，在沸水浴上加热30分钟，溶液显紫红色，冷却后在570nm处测吸收度，用五味子乙素的标准曲线计算含量。
权利要求
1.一种具有益气养阴、复脉固脱功效的中药有效部位组合物，其特征在于该组合物是由下述重量份的组份组成的人参总皂甙1-5麦冬总皂甙1-10五味子挥发油 0.5-5五味子总木脂素1-30。
2.根据权利要求1所述中药有效部位组合物，其中各组分的重量份为人参总皂甙1-3麦冬总皂甙3-6五味子挥发油 1-3五味子总木脂素5-15。
3.根据权利要求1所述的中药有效部位组合物，其中人参总皂甙的制备方法为将红参切碎，加4-12倍量50-85％的乙醇回流提取2-3次，每次1-4小时，乙醇浸提液合并，减压回收至无醇味，加水至药材1-3倍体积，冷藏24小时，调节PH值8-10，通过净化的大孔树脂柱，先用PH值9-12的水冲洗，再用5-50％的乙醇洗脱，最后用70-90％的乙醇洗脱至无皂甙反应，收集70-90％的乙醇洗脱液，乙醇洗脱液减压浓缩，浓缩液通过吸附树脂，干燥即得，其中人参总皂甙占提取物的50％以上。
4.根据权利要求1所述中药有效部位组合物，其中麦冬总皂甙的制备方法为将麦冬切碎，加10-20倍量水煎煮2-3次，每次0.5-2小时，水提液合并，减压回收至药材0.5-2倍量，加乙醇使含醇量达80％，冷藏过夜，滤过，滤液减压回收至无醇味，浸膏加纯化水至药材1-4倍，通过净化的大孔树脂柱，先用PH值9-12的水冲洗，再用5-50％的乙醇洗脱，最后用70-90％的乙醇洗脱至无皂甙反应，收集70-90％的乙醇洗脱液，乙醇洗脱液减压浓缩，浓缩液通过吸附树脂，干燥即得，其中麦冬总皂甙占提取物的50％以上。
5.根据权利要求1所述中药有效部位组合物，其中五味子挥发油的提取方法是将五味子放入超临界二氧化碳萃取装置的萃取釜中，萃取压力7～50Mpa，萃取温度30～80℃。在解析压力1.5～8.0Mpa，解析温度20～80℃下进行收集，即得；药渣用乙醇作加带剂，继续用超临界二氧化碳萃取，萃取压力7～50Mpa，萃取温度30～80℃。在解析压力1.5～8.0Mpa，解析温度20～80℃下收集得乙醇萃取液，萃取液浓缩，加少量水析晶，得总木脂素，其中总木脂素占提取物的50％以上。
6.根据权利要求4或5所述的有效部位组合物，其中吸附树脂，是指苯乙烯系阴离子交换树脂、丙烯酸系阴离子交换树脂、聚酰胺树脂以及硅胶中的一种。
7.一种含权利要求1所述的中药有效部位组合物为有效成分的制剂，其特征在于加入相应的辅料制成固体或液体制剂。
全文摘要
本发明公开了一种具有益气养阴、复脉固脱功效的中药有效部位组合物，其特征在于该组合物包含人参总皂甙、麦冬总皂甙、五味子挥发油和五味子总木脂素。
文档编号A61K36/258GK1739735SQ20051010329
公开日2006年3月1日 申请日期2005年9月23日 优先权日2005年9月23日
发明者张文芳 申请人:张文芳