专利名称：一种中药有效部位组合物及其制备方法
技术领域：
本发明属于中药技术领域，具体涉及一种治疗恶性肿瘤、提高免疫功能、 使用安全的中药有效部位组合物，该组合物的特征是含有龙葵总生物碱、人参 总皂苷和黄芪总皂苷，本发明还提供了该药物组合物的制备方法。
背承a术
现代社会癌症(恶性肿瘤)已成为威胁人类生命健康的主要问题之一，世
界卫生组织(WHO)报告表明，根据目前癌症的发病趋势，2020年全世界癌症发病 率将比现在增加50%，全球每年新增癌症患者人数将达到1500万人。医疗界迫 切需求安全有效的癌症治疗药物。
本发明所述的龙葵总生物碱来源于单味药材"~龙葵。龙葵为茄科茄属植 物，有清热解毒、活血散瘀、利水消肿、止咳祛痰的功效。作为传统中药的龙 葵近年来得到了国内外学者的广泛关注，进行了大量的研究，获得了较为客观 的信息，尤其是在抗肿瘤方面，无论是单味药还是其复方制剂在基础和临床医 学方面作了大量的工作。龙葵全草含苷类甾体生物碱、龙葵多糖、矿物质、维 生素、色素、氨基酸等，龙葵浆果中的提取物中还含有酯、羧基化合物、甾醇、 酚性化合物(其主要成分为黄色不饱和酯)，此外还含有皂苷。而对肿瘤治疗起 关键作用的化学成分主要为龙葵总生物碱(包括澳洲茄碱、澳洲茄边碱等)，其 次为多糖。
*本发明所述的人参总皂苷，是从五加科植物人参(Panax ginseng C.A.Mey.) 的干燥根中提取的总皂苷。人参是传统的名贵中药，具有大补元气、复脉固脱、 补脾益肺、生津、安神之功能。现代药理研究表明，人参具有多种药理活性。 医学和药理研究证明，人参总皂苷为人参的主要有效成分之一,它是人参根的主 要生理活性物质，主要含有人參皂苷Rgl和人参皂苷Re等。
本发明所述的黄芪总皂苷，是从豆科植物蒙古黄芪或膜荚黄芪的干燥根中 提取的总皂苷9黄芪具有补气固表，托毒排脓，利尿，生肌的功效；还具有增 强免疫系统，抵御疾病、增强体质，抗氧化延缓衰老，抗病毒，抗癌的作用。
经检索，未见有龙葵总生物碱、人参总皂苷和黄芪总皂苷进行组方制备的 中药制剂。我们结合文献资料，运用现代科学方法，在制备工艺、质量标准、药效、毒理及稳定性等方面进行了研究，以龙葵总生物碱、人参总皂苷和黄芪 总皂苷为原料制成药物制剂用于癌症治疗，具有明显抗癌作用的同时能够起到 提高机体免疫功能，改善生存质量的作用。
发明内容
本发明的目的是提供一种抗恶性肿瘤疗效显著、增强机体免疫功能的中药 有效部位组合物及其制备方法。该药物组合以龙葵总生物碱、人参总皂苷和黄 芪总皂苷为原料。
本发明是通过如F技术方案实现的-
① 龙葵总生物碱的制备
取龙葵全草与/或果实，加入50% 90%乙醇溶液提取2 3次，每次6 8 倍量，回收乙醇，浓縮至相对密度1.25,浓縮液中加入2 4倍量的0. lmo1/1 酸性溶液，充分搅拌，冷藏，过滤，滤渣用盐酸溶液洗涤1 3次，合并滤液和 洗涤液，以弱极性或中等极性树脂吸附。树脂吸附后先用水冲洗树脂柱/床至流 出液近中性；再以0.1mol/，碱性溶液冲洗树脂柱/床至流出液近无色，再以含醇 量10% 40%乙醇液冲洗树脂柱/床至流出液近无色。弃去。再以50 90%乙醇 进行洗脱，至洗脱液显无色，收集洗脱液，冋收乙醇至无醇味，以0.5 1.5mo1/1 的碱性溶液调PH值至8 10，静置，冷藏，收集沉淀。自然晾干，即得龙葵总 生物碱。
以上所述的碱性溶液选自氢氧化钠、氢氧化钙、氢氧化钾、氢氧化镁和氨 水溶液所述的酸性溶液选自醋酸、盐酸、硫酸和柠檬酸溶液；所述的洗脱用 有机溶剂为甲醇、乙醇、正丁醇、氯仿、苯的一项或者两项或者三项以任意比 例形成的混合相。
② 人参总皂苷的制备
将人参粉碎成粗粉，在12 24倍重量的沸水中煎煮2 3次，每次1 2小时。
合并各次提取液，浓縮至5ox:4(rc相对密度为i.oo i.20。浓縮液加入乙醇，
使溶液中乙醇含量达到65% 75%，滤过。将滤液减压回收乙醇，并调节溶液的 PH值至7 15放置，滤过，将滤液通过大孔吸附树脂柱，用10%~30%乙醇洗 脱树脂柱，弃去洗脱液，用50%~90%浓度乙醇洗脱，收集洗脱液，洗脱液通过 大孔阳离子交换树脂及大孔阴离子交换树脂，流出液减压回收乙醇，浓缩干燥，得干粉。将千粉用20%~90%乙醇溶液溶解，配制成5%总皂苷溶液，加1%的 药用活性炭，加热回流30min 2h,趁热过滤，再精滤，滤液减压回收乙醇，浓 縮并干燥至干粉，得人参总皂苷。
③ 黄芪总皂苷的制备
以中药材黄芪为原料，包括提取、脱糖、脱色、纯化等步骤。其特征是将
黄芪粉碎，在常压提取装置中，用水热回流提取2次以上；合并部分提取液，
过滤，清液加入大孔吸附树脂柱上，以io倍以上体积的去离子蒸馏水洗脱糖类
部分，再以5倍以上体积的0.05%~0.5%的氢氧化钠、氢氧化钾或氢氧化钙水溶 液进行洗脱，继以5倍以上体积的20% 50的乙醇洗脱进行脱色，再以70% 90% 的乙醇洗脱黄芪皂甙，洗脱液浓縮到小体积，离心得到沉淀，即高纯度的黄芪 甲苷；向母液中加入乙醇至乙醇浓度为70%~卯％,离心，分得上清液，浓縮干 燥后的沉淀，与黄芪甲苷混合后，得到黄芪总皂苷。
④ 将上述龙葵总生物碱、人参总皂苷与黄芪总皂苷以规定比例混合均匀， 即得本发明所述中药有效部位组合物。
本发明所述的中药有效部位组合物特征在于，含龙葵总生物碱2~4重量份、 人参总皂苷1~3重量份、黄芪总皂苷1~2重量份。其中优选比例为龙葵总生物 碱3重量份、人参总皂苷2重量份、黄芪总皂苷l重量份。
按药剂学方法，可以将本发明的龙葵总生物碱、人参总皂苷、黄芪总皂苷 组合物制备成多种临床药物剂型作为抗肿瘤药物，包括口服制剂或非肠道给药 的剂型。所述口服制剂为片剂、胶囊剂、颗粒剂、散剂、丸剂、混悬剂、口服 液体制剂等；所述非肠道给药剂型为注射液、输液剂、冻干注射剂等。
本发明的抗肿瘤药物组合制剂中的辅料是指常规的赋形剂，如溶剂、助 溶剂、崩解剂、矫味剂、粘合剂、着色剂、防腐剂等。
具体实施例方式
实施例l龙葵总生物碱、人参总皂苷与黄芪总皂苷组合物的制备
(1)方法一 (D龙葵总生物碱的制备
取龙葵全草与/或果实加入80%乙醇溶液提取3次，每次8倍量，回收乙醇, 浓縮至相对密度1.25,浓缩液中加入3倍量的0. lmo1/1盐酸溶液，充分搅拌，冷藏，过滤，滤渣用盐酸溶液洗涤2次，合并滤液和洗涤液，以弱极性或中等 极性树脂吸附。树脂吸附后先用水冲洗树脂柱/床至流出液近中性；再以(Umol/I 氨水溶液冲洗树脂柱/床至流出液近无色，再以含醇量20%乙醇液冲洗树脂柱/ 床至流出液近无色。弃去。再以70%乙醇进行洗脱，至洗脱液显无色，收集洗 脱液，回收乙醇至无醇味，以1.0mol/l的氢氧化钠溶液调PH值至9，静置，冷 藏，收集沉淀。自然晾干，即得龙葵总生物碱。
以上所述的碱性溶液选自氢氧化钠、氢氧化钙、氢氧化钾、氢氧化镁和氨 水溶液；所述的酸性溶液选自醋酸、盐酸、硫酸和柠檬酸溶液；所述的洗脱用 有机溶剂为甲醇、乙醇、正丁醇、氯仿、苯的一项或者两项或者三项以任意比 例形成的混合相。
② 人参总皂苷的制备
将人参粉碎成粗粉，在15倍重量的沸水中煎煮2次，每次1.5小时u合并 各次提取液，浓缩至80'C相对密度为1.10。浓縮液加入乙醇，使溶液中乙醇含 量达到70%，滤过。将滤液减压回收乙醇，并调节溶液的PH值至10放置，滤 过，将滤液通过大孔吸附树脂柱，用20%乙醇洗脱树脂柱，弃去洗脱液，用70% 浓度乙醇洗脱，收集洗脱液，洗脱液通过大孔阳离子交换树脂及大孔阴离子交 换树脂，流出液减压问收乙醇，浓縮千燥，得千粉。将千粉用70%乙醇溶液溶 解，配制成5%总皂苷溶液，加1%的药用活性炭，加热回流lh,趁热过滤，再 精滤，滤液减压回收乙醇，浓縮并干燥至干粉，得人参总皂苷。
③ 黄芪总皂苷的制备
以中药材黄芪为原料，包括提取、脱糖、脱色、纯化等步骤。其特征是将 黄芪粉碎，在常压提取装置中，用水热回流提取3次；合并部分提取液，过滤， 清液加入大孔吸附树脂柱上，以15倍体积的去离子蒸馏水洗脱糖类部分，再以 10倍体积的0.1 V。的氢氧化钠溶液进行洗脱，继以10倍体积的30%的乙醇洗脱 进行脱色，再以70%的乙醇洗脱黄芪皂甙，洗脱液浓缩到小体积，离心得到沉 淀，即高纯度的黄芪甲苷；向母液中加入乙醇至乙醇浓度为70%，离心，分得 上清液，浓縮千燥后的沉淀，与黄芪甲苷混合后，得到黄芪总皂苷。
④ 将上述龙葵总生物碱、人参总皂苷与黄芪总皂苷以3: 2: l的比例混合均匀, 即得本发明所述中药有效部位组合物(1)。(2)方法二
① 龙然总生物碱的制各
取龙葵全草与/或果实加入70%乙醇溶液提取3次,每次7倍量，回收乙醇， 浓縮至相对密度1.15,浓縮液中加入2. 5倍量的0. lmo1/1盐酸溶液，充分搅拌， 冷藏，过滤，滤渣用盐酸溶液洗涤3次，合并滤液和洗涤液，以弱极性或中等 极性树脂吸附。树脂吸附后先用水冲洗树脂柱/床牵流出液近中性；再以O.lmol/1 氢氧化钠溶液冲洗树脂柱/床至流出液近无色，再以含醇量30%乙醇液冲洗树脂 柱/床至流出液近无色。弃去。再以75%乙醇进行洗脱，至洗脱液显无色，收集 洗脱液，回收乙醇至无醇味，以1.0mol/l的氢氧化钠溶液调PH值至9，静置， 冷藏，收集沉淀。自然晾千，即得龙葵总生物碱。
以上所述的碱性溶液选自氢氧化钠、氢氧化钙、氢氧化钾、氢氧化镁和氨 水溶液；所述的酸性溶液选自醋酸、盐酸、硫酸和柠檬酸溶液；所述的洗脱用 有机溶剂为甲醇、乙醇、正丁醇、氯仿、苯的一项或者两项或者三项以任意比 例形成的混合相。
② 人参总皂苷的制备
将人参粉碎成粗粉，在20倍重量的沸水中煎煮2次，每次2小时。合并各 次提取液，浓縮至85。C相对密度为1,15。浓缩液加入乙醇，使溶液中乙醇含量 达到75%,滤过。将滤液减压回收乙醇，并调节溶液的PH值至9放置，滤过， 将滤液通过大孔吸附树脂柱，用15%乙醇洗脱树脂柱，弃去洗脱液，用60%浓 度乙醇洗脱，收集洗脱液，洗脱液通过大孔阳离子交换树脂及大孔阴离子交换 树脂，流出液减压回收乙醇，浓縮干燥，得千粉。将干粉用65%乙醇溶液溶解， 配制成5%总皂苷溶液，加1%的药用活性炭，加热回流L5h，趁热过滤，再精 滤，滤液减压回收乙醇，浓縮并干燥至干粉，得人参总皂苷。
③ 黄芪总皂苷的制备
以中药材黄芪为原料，包括提取、脱糖、脱色、纯化等步骤。其特征是将 黄芪粉碎，在常压提取装置中，用水热冋流提取2次；合并部分提取液，过滤, 清液加入大孔吸附树脂柱上，以12倍体积的去离子蒸馏水洗脱糖类部分，再以 6倍体积的0.2 %的氢氧化钠溶液进行洗脱，继以8倍体积的40%的乙醇洗脱进 行脱色，再以80V。的乙醇洗脱黄芪皂甙，洗脱液浓缩到小体积，离心得到沉淀,即高纯度的黄芪甲苷；向母液中加入乙醇至乙醇浓度为80%,离心，分得上清 液，浓縮干燥后的沉淀，与黄芪甲苷混合后，得到黄芪总皂苷。
④将上述龙葵总生物碱、人参总皂苷与黄芪总皂苷以2: 1: 1的比例混合 均匀，即得本发明所述中药有效部位组合物(2)。 (3)方法三
① 龙葵总生物碱的制备
取龙葵全草与/或果实加入75%乙醇溶液提取2次，每次8倍量，回收乙醇， 浓縮至相对密度1.10,浓縮液中加入3倍量的0.15贝oVl盐酸溶液，充分搅拌， 冷藏，过滤，滤渣用盐酸溶液洗涤3次，合并滤液和洗涤液，以弱极性或屮等 极性树脂吸附。树脂吸附后先用水冲洗树脂柱/床至流出液近中性；再以O.lmol/l 氨水溶液冲洗树脂柱/床至流出液近无色，再以含醇量2()%乙醇液冲洗树脂柱/ 床至流出液近无色。弃去。再以70%乙醇进行洗脱，至洗脱液显无色，收集洗 脱液，回收乙醇至无醇味，以1.0mol/l的氢氧化镁溶液调PH值至10,静置， 冷藏，收集沉淀。自然晾千，即得龙葵总生物碱。
以上所述的碱性溶液选自氢氧化钠、氢氧化钙、氢氧化钾、氢氧化镁和氨 水溶液；所述的酸性溶液选自醋酸、盐酸、硫酸和柠檬酸溶液；所述的洗脱用 有机溶剂为甲醇、乙醇、正丁醇、氯仿、苯的一项或者两项或者三项以任意比 例形成的混合相。
② 人参总皂苷的制备
将人参粉碎成粗粉，在20倍重量的沸水中煎煮2次，每次2小时。合并各 次提取液，浓縮至75X:相对密度为1.2。浓縮液加入乙醉，使溶液中乙酚:含量达 到80%，滤过。将滤液减压回收乙醇，并调节溶液的PH值至11放置，滤过， 将滤液通过大孔吸附树脂柱，用25%乙醇洗脱树脂柱，弃去洗脱液，用60%浓 度乙醇洗脱，收集洗脱液，洗脱液通过大孔阳离子交换树脂及大孔阴离子交换 树脂，流出液减压回收乙醇，浓缩干燥，得干粉。将干粉用80%乙醇溶液溶解， 配制成5%总皂苷溶液，加1%的药用活性炭，加热回流lh，趁热过滤，再精滤, 滤液减压回收乙醇，浓縮并T燥至T粉，得人参总皂苷。
③ 黄芪总皂苷的制备
以中药材黄芪为原料，包括提取、脱糖、脱色、纯化等歩骤。其特征是将黄芪粉碎，在常压提取装置中，用水热回流提取4次；合并部分提取液，过滤， 清液加入大孔吸附树脂柱上，以20倍体积的去离子蒸馏水洗脱糖类部分，再以 12倍体积的0.1 %的氢氧化钠溶液进行洗脱，继以15倍体积的25%的乙醇洗脱 进行脱色，再以80%的乙醇洗脱黄芪皂甙，洗脱液浓縮到小体积，离心得到沉 淀，即高纯度的黄芪甲苷；向母液中加入乙醇至乙醇浓度为75%，离心，分得 上清液，浓缩干燥后的沉淀，与黄芪甲苷混合后，得到黄芪总皂苷。 ④将上述龙葵总生物碱、人参总皂苷与黄芪总皂苷以4: 2: l的比例混合均匀， 即得本发明所述中药有效部位组合物(3)。 实施例2注射剂的制备
(1) 龙葵总生物碱、人参总皂苷与黄芪总皂苷的中药有效部位组合物的制备方 法同实施例l。
(2) 水针剂的制备称取龙葵总生物碱、人参总皂苷与黄芪总皂苷组合物10g， 用注射用水溶解，调PH值至7，过滤，灭菌，检验，包装，得水针剂1000支。
(3) 输液剂的制备称取龙葵总生物碱、人参总皂苷与黄芪总皂苷组合物10g， 用适量注射用水溶解后，以O.lmol/1的盐酸调节PH值至6 7，搅拌30分钟， 加入一定活性炭，继续搅拌半个小时，过滤，过0.22&m滤膜后，加入适量注 射用水，搅拌灌装，即得输液剂。
(4) 冻千粉针剂的制备称取龙葵总生物碱、人参总皂苷与黄芪总皂苷组合物 10g，加1000ml注射用水，80^C 90'C保温搅拌，完全溶解后，加入100g的甘 露醇，搅拌使溶解；调节pH值至6 7，无菌精滤，定量分装于管制玻璃瓶中， 冷冻干燥，即得。
实施例3固体制剂的制备
(1) 龙葵总生物碱、人参总皂苷与黄芪总皂苷的中药有效部位组合物的制备方 法同实施例l。
(2) 片剂的制备称取龙葵总生物碱、人参总皂苷与黄芪总皂苷组合物10g， 药用辅料淀粉、硬脂酸镁nu)g9混合均匀，粉碎，过筛，制粒，干燥，压片， 检验，包装，得片剂10000片。
(3) 胶囊剂的制备称取龙葵总生物碱、人参总皂苷与黄芪总皂苷组合物lOOg， 药用淀粉1000g，混合均匀，装入2号胶囊，每粒含药物组合物100mg。(4)散剂的制备称取龙葵总生物碱、人参总皂苷与黄芪总皂苷组合物lOOOg, 淀粉1000g,混合均匀，分装，使每袋含药物组合物100mg即得。
权利要求
1、一种具有治疗恶性肿瘤、提高机体免疫功能、使用安全的中药有效部位组合物，其特征在于是由下述重量份的组分组成的龙葵总生物碱2～4重量份人参总皂苷1～3重量份黄芪总皂苷1～2重量份。
2、 根据权利要求l所述的中药有效部位组合物，其中各组分的重量份分别是龙葵总生物碱3重量份 人参总皂苷2重量份 黄芪总皂苷1重量份。
3、 根据权利要求1所述的中药有效部位组合物，其中龙葵总生物碱的其制备方法如下取龙葵全草与/或果实，加入50% 90%乙醇溶液提取2 3次，每次6 8 倍量，回收乙醇，浓縮至相对密度1.25，浓縮液中加入2 4倍量的0. lmo1/1 酸性溶液，充分搅拌，冷藏，过滤，滤渣用盐酸溶液洗涤1 3次，合并滤液和 洗涤液，以弱极性或中等极性树脂吸附。树脂吸附后先用水冲洗树脂柱/床至流 出液近中性；再以(Umol/l碱性溶液冲洗树脂柱/床至流出液近无色，再以含醇 量10% 40%乙醇液冲洗树脂柱/床至流出液近无色。弃去。再以50 90%乙醇 进行洗脱，至洗脱液显无色，收集洗脱液，回收乙醇至无醇味，以0.5 1.5mo1/1 的碱性溶液调PH值至8 10，静置，冷藏，收集沉淀。自然晾千，即得龙葵总 生物碱。以上所述的碱性溶液选自氢氧化钠、氢氧化钙、统氧化钾、氢氧化镁和試 水溶液；所述的酸性溶液选自醋酸、盐酸、硫酸和柠檬酸溶液；所述的洗脱用 有机溶剂为甲醇、乙醇、正丁醇、氯仿、苯的一项或者两项或者三项以任意比 例形成的混合相。
4、 根据权利要求1所述的中药有效部位组合物，其中人参总鬼苷的制备方 法如下将人参粉碎成粗粉，在12 24倍甫量的沸水中煎煮2 3次，每次1 2小时。 合并各次提取液，浓縮至50'C 90'C相对密度为1.0(M.20。浓縮液加入乙醇，使溶液中乙醇含量达到65% 75%，滤过。将滤液减压回收乙醇，并调节溶液的 PH值至7 15放置，滤过，将滤液通过大孔吸附树脂柱，用10%~30%乙醇洗 脱树脂柱，弃去洗脱液，用50%~90%浓度乙醇洗脱，收集洗脱液，洗脱液通过 大孔阳离子交换树脂及大孔阴离子交换树脂，流出液减压回收乙醇，浓縮干燥, 得干粉。将干粉用20%~90%乙醇溶液溶解，配制成5%总皂苷溶液，加1%的 药用活性炭，加热回流30min 2h，趁热过滤，再精滤，滤液减压回收乙醇，浓 縮并干燥至干粉，得人参总^苷。
5、 根据权利要求l所述的中药有效部位组合物,其特征在黄芪总皂苷的制 备方法如下以中药材黄芪为原料，包括提取、脱糖、脱色、纯化等步骤。其特征是将 黄芪粉碎，在常压提取装置中，用水热回流提取2次以上；合并部分提取液， 过滤，清液加入大孔吸附树脂柱上，以IO倍以上体积的去离子蒸馏水洗脱糖类 部分，再以5倍以上体积的0.05%4.5%的氢氧化钠、氢氧化钾或氢氧化钙水溶 液进行洗脱,继以5倍以上体积的20%~50的乙醇洗脱进行脱色，再以70% 90% 的乙醇洗脱黄芪皂甙，洗脱液浓缩到小体积，离心得到沉淀，即高纯度的黄芪 甲苷；向母液中加入乙醇至乙醇浓度为70%~90%，离心，分得上清液，浓缩千 燥后的沉淀，与黄芪甲苷混合后，得到黄芪总皂苷。
6、 一种以权利要求l所述的中药有效部位组合物为有效成分的制剂，其特 征在于该中药有效部位组合物和一种或几种药用赋形剂，或可与该药物组合组 方的其他药物制备成口服药物制剂或非肠道药物制剂。
7、 根据权利要求6所述的制剂，其特征在于所述U服药物制剂为片剂、胶 囊剂、颗粒剂、散剂、丸剂、混悬剂、口服液体制剂等；所述非肠道给药剂型 为注射液、输液剂、冻干注射剂等所述药用赋形剂为溶剂、崩解剂、矫味剂、 粘合剂、着色剂、防腐剂等；所述的其它配伍用的药物，指的是以有效剂量的 权利要求1所述的组合物为一定的药物原料，再配伍其它已允许合用的中药或 化学药品。
全文摘要
本发明公开了一种具有治疗恶性肿瘤、提高免疫功能、使用安全的中药有效部位组合物。该组合物中包含龙葵总生物碱、人参总皂苷、黄芪总皂苷。本发明还公开了该药物组合的制备方法。
文档编号A61K36/185GK101411778SQ20071005616
公开日2009年4月22日 申请日期2007年10月15日 优先权日2007年10月15日
发明者李明慧, 石 杨 申请人:刘 阳