一种食道癌易感基因位点高效分子分型的检测试剂盒的制作方法
【技术领域】
[0001] 本发明属于基因检测技术领域，具体为一种食管癌易感基因位点高效分子分型的 检测试剂盒。
【背景技术】
[0002] 食管癌是世界第八大最常见的肿瘤，分布呈现明显的区域性；中国有六大食管癌 高发区，其中河南林州市和潮汕南澳岛发病率最高，严重危害当地人群的生命健康安全， 如何筛查易感个体进行早期预防干预已成为当地亟待解决的社会公共卫生问题。
[0003] 随着高通量SNP检测芯片的飞速发展，食管癌大规模关联研究近年大量涌现，报 道了一批散发食管癌易感基因和位点；本课题组致力于家族性食管癌易感基因定位研究十 余年，已发现多个家族性食管癌易感基因位点；为家族性和散发性食管癌易感个体筛查奠 定了坚实的基础。
[0004]SequenomMassArray系统是一个高性能的DNA分析平台，具有通量、准确性、灵敏 度、可重复性和成本效益的综合优势，特别适用于检测几十个DNA位点的人群筛查项目。
【发明内容】
[0005] 基于18个食管癌易感基因上的18个位点可用来评估个体对食管癌易感性的基 础上，本发明提供一种食管癌易感基因位点高效分子分型的检测试剂盒。
[0006] -种食管癌易感基因位点高效分子分型的检测试剂盒，包括： PCR扩增引物； PCR延伸引物； PCR混合缓冲液（PCRBufferMix); PCR酶（PCREnzyme); SAP酶（SAPEnzyme); 延伸酶（ExtendEnzyme); 延伸混合缓冲液（ExtendBufferMix); 其特征在于：所述的PCR扩增引物和PCR延伸引物针对18个食管癌易感基因位点而设 计，基于SequenomMassArray系统，能对这18个位点高效精确分型。具体如表1所示： 表1食管癌易感基因Sequenom质谱飞行平台分子分型PCR引物和延伸引物
【主权项】
1. 一种食管癌易感基因位点高效分子分型的检测试剂盒，包括： PCR扩增引物； PCR延伸引物； PCR 混合缓冲液（PCR Buffer Mix); PCR 酶（PCR Enzyme); SAP 酶（SAP Enzyme); 延伸酶（Extend Enzyme); 延伸混合缓冲液（Extend Buffer Mix); 其特征在于；所述的PCR扩增引物和PCR延伸引物针对18个食管癌易感基因位点而设 计，基于Sequenom MassArray系统，能对该18个位点高效精确分型，具体如表1所示： 表1食管癌易感基因Sequenom质谱飞行平台分子分型PCR引物和延伸引物
o
2.根据权利要求1所述的一种食管癌易感基因位点高效分子分型的检测试剂盒，其 特征在于；所述的引物混合物PCR产物一般在80-120bp ;延伸引物3'端设计在SNP位点她
邻处，引物大小一般15-3化口，分子量4500 - 8000 03，而45°(：-60°(：。
3.根据权利要求1所述的一种食管癌易感基因位点高效分子分型的检测试剂盒，其特 征在于；所述的PCR扩增引物和PCR延伸引物在同一孔内与样品DNA发生反应，一次性检测 18个位点判断易感性。
【专利摘要】本发明公开了一种食管癌易感基因位点高效分子分型的检测试剂盒。该试剂盒PCR扩增引物和PCR延伸引物是针对18个食管癌易感基因位点而设计，基于Sequenom MassArray系统，能对这18个位点高效精确分型。本发明的试剂盒通过监测分析个体的18个食管癌易感基因上的 18个位点基因携带型来评估个体对食管癌易感性。
【IPC分类】C12Q1-68
【公开号】CN104593499
【申请号】CN201510027447
【发明人】苏敏, 黄博
【申请人】汕头大学医学院
【公开日】2015年5月6日
【申请日】2015年1月20日