度为5?15ml/s。
[0032] 上述的从丹参地上茎叶中制备丹参酚酸类成分的方法中，制得的总丹参酚酸提取 物纯度为80?95%。
[0033] 有益效果：本发明与现有技术相比具有如下优点：
[0034] 本发明利用丹参植物一定生长期或采挖丹参药材时割取的地上部分的丹参茎叶 为原料（现有技术中一般作为废料丢弃），采用优选的光合细菌生物转化技术和色谱技术 相结合工艺，高效制备一种高纯度的总丹参酚酸提取物，该技术可促使茎叶中丹酚酸类成 分升高，尤其是活性成分丹酚酸B含量可为丹参根药材中含量的3?4倍，迷迭香酸则高 于丹参药材数10倍；再经大孔吸附树脂柱分离纯化，可高效获得高含量的丹参酚酸B、丹参 素、迷迭香酸、阿魏酸、咖啡酸等酚酸类成分，本发明可实现丹参地上部分的资源化利用，提 升中药资源生产过程的资源利用效率，增加产业经济效益，减少环境污染，产生良好的生态 效益。
【具体实施方式】
[0035] 根据下述实施例，可以更好地理解本发明。然而，本领域的技术人员容易理解，实 施例所描述的具体的物料配比、工艺条件及其结果仅用于说明本发明，而不应当也不会限 制权利要求书中所详细描述的本发明。凡基于本发明上述内容所实现的技术均属于本发明 的范围。
[0036] 实施例1
[0037] 从丹参地上茎叶中制备丹参酚酸类成分的方法中，它包括以下步骤：
[0038] (1)取50g丹参地上茎叶的干燥粉末，置于IOOOml的锥形瓶中，精密加入500ml 的纯水，精密称定，浸泡16h后在30°C、IOOKHz下超声30min，称量补足失重，过滤，重复提 取三次，合并滤液，将溶液浓缩至干燥粉末。取适量的干燥粉末，用水溶解至一定的体积， 过0. 22 μ m膜，定容至一定体积，无菌条件下，接种1/20体积的球形红细菌菌液后培养3? 5d，得球形红细菌转化丹参培养液。
[0039] (2)将球形红细菌转化丹参培养液3000r/min离心，上清液过DlOl大孔吸附树 脂柱，采用水、10 %、30 %、50 %、70 %、90 %乙醇进行洗脱，收集30 %?70 %乙醇洗脱液，经 减压浓缩，喷雾干燥即得总丹参酚酸提取物粉末，高效液相检测结果表明总丹参酚酸纯度 为90. 5%，其中丹酷酸B重量百分含量为20. 35%，丹参素重量百分含量为4. 93%，迷迭香 酸重量百分含量为45. 75%，阿魏酸重量百分含量为达5. 11 %，咖啡酸重量百分含量为达 12. 56%〇
[0040] 实施例2
[0041] 从丹参地上茎叶中制备丹参酚酸类成分的方法中，它包括以下步骤：
[0042] (1)取IOOg丹参地上茎叶的干燥粉末，置于IOOOml的锥形瓶中，精密加入500ml 的纯水，精密称定，浸泡IOh后在30°C、IOOKHz下超声30min，称量补足失重，过滤，重复提 取三次，合并滤液，将溶液浓缩至干燥粉末。取适量的干燥粉末，用水溶解至一定的体积， 过0. 22 μ m膜，定容至一定体积，无菌条件下，接种1/10体积的球形红细菌菌液后培养3? 5d，得球形红细菌转化丹参培养液。
[0043] (2)将球形红细菌转化丹参培养液2000r/min离心，上清液过DlOl大孔吸附树脂 柱，采用水、10 %、30 %、50 %、70 %、90 %乙醇进行洗脱，收集50 %?70 %乙醇洗脱液，经减 压浓缩，喷雾干燥即得总丹参酚酸提取物粉末，高效液相检测结果表明总丹参酚酸纯度为 91. 23%，其中丹酷酸B重量百分含量为21. 35%，丹参素重量百分含量为4. 56%，迷迭香 酸重量百分含量为44. 68%，阿魏酸重量百分含量为达6. 24%，咖啡酸重量百分含量为达 13. 21%〇
[0044] 实施例3
[0045] 从丹参地上茎叶中制备丹参酚酸类成分的方法中，它包括以下步骤：
[0046] (1)取50g丹参地上茎叶的干燥粉末，置于IOOOml的锥形瓶中，精密加入500ml 的纯水，精密称定，浸泡15h后在30°C、IOOKHz下超声30min，称量补足失重，过滤，重复提 取三次，合并滤液，将溶液浓缩至干燥粉末。取适量的干燥粉末，用水溶解至一定的体积， 过0. 22 μ m膜，定容至一定体积，无菌条件下，接种1/20体积的沼泽红假单胞菌菌液后培养 3?5d，得沼泽红假单胞菌转化丹参培养液。
[0047] (2)将沼泽红假单胞菌转化丹参培养液2000r/min离心，上清液过DlOl大孔吸附 树脂柱，采用水、10 %、30 %、50 %、70 %、90 %乙醇进行洗脱，收集50 %?70 %乙醇洗脱液， 经减压浓缩，喷雾干燥即得总丹参酚酸提取物粉末，高效液相检测结果表明总丹参酚酸纯 度为95. 78%，其中丹酷酸B重量百分含量为23. 98%，丹参素重量百分含量为6. 16%，迷迭 香酸重量百分含量为47. 45%，阿魏酸重量百分含量为达5. 34%，咖啡酸重量百分含量为 达 13. 17%〇
[0048] 实施例4
[0049] 从丹参地上茎叶中制备丹参酚酸类成分的方法中，它包括以下步骤：
[0050] (1)取IOOg丹参地上茎叶的干燥粉末，置于IOOOml的锥形瓶中，精密加入500ml 的纯水，精密称定，浸泡IOh后在30°C、IOOKHz下超声30min，称量补足失重，过滤，重复提 取三次，合并滤液，将溶液浓缩至干燥粉末。取适量的干燥粉末，用水溶解至一定的体积， 过0. 22 μ m膜，定容至一定体积，无菌条件下，接种1/15体积的绿硫红假单胞菌菌液后培养 3?5d，得绿硫红假单胞菌转化丹参培养液。
[0051] (2)将绿硫红假单胞菌转化丹参培养液2000r/min离心，上清液过DlOl大孔吸附 树脂柱，采用水、10 %、30 %、50 %、70 %、90 %乙醇进行洗脱，收集30 %?70 %乙醇洗脱液， 经减压浓缩，喷雾干燥即得总丹参酚酸提取物粉末，高效液相检测结果表明总丹参酚酸纯 度为90. 67%，其中丹酷酸B重量百分含量为20. 12%，丹参素重量百分含量为5. 32%，迷迭 香酸重量百分含量为43. 09%，阿魏酸重量百分含量为达6. 08%，咖啡酸重量百分含量为 达 12. 19%〇
[0052] 实施例5
[0053] 从丹参地上茎叶中制备丹参酚酸类成分的方法中，它包括以下步骤：
[0054] (1)取50g丹参地上茎叶的干燥粉末，置于IOOOml的锥形瓶中，精密加入500ml 的纯水，精密称定，浸泡IOh后在30°C、IOOKHz下超声30min，称量补足失重，过滤，重复提 取三次，合并滤液，将溶液浓缩至干燥粉末。取适量的干燥粉末，用水溶解至一定的体积， 过0. 22 μ m膜，定容至一定体积，无菌条件下，接种1/15体积的沼泽红假单胞菌菌液后培养 3?5d，得沼泽红假单胞菌转化丹参培养液。
[0055] (2)将沼泽红假单胞菌转化丹参培养液3000r/min离心，上清液过AB-8大孔吸附 树脂柱，采用水、10 %、30 %、50 %、70 %、90 %乙醇进行洗脱，收集30 %?70 %乙醇洗脱液， 经减压浓缩，喷雾干燥即得总丹参酚酸提取物粉末，高效液相检测结果表明总丹参酚酸纯 度为86. 78%，其中丹酷酸B重量百分含量为20. 21%，丹参素重量百分含量为3. 21%，迷迭 香酸重量百分含量为42. 40%，阿魏酸重量百分含量为达5. 37%，咖啡酸重量百分含量为 达12. 78%。实施例6
[0056] 从丹参地上茎叶中制备丹参酚酸类成分的方法中，它包括以下步骤：
[0057] (1)取50g丹参地上茎叶的干燥粉末，置于IOOOml的锥形瓶中，精密加入500ml 的纯水，精密称定，浸泡12h后在35°C、200KHz下超声60min，称量补足失重，过滤，重复提 取三次，合并滤液，将溶液浓缩至干燥粉末。取适量的干燥粉末，用水溶解至一定的体积，过 0. 22 μ m膜，定容至一定体积，无菌条件下，接种1/10体积的荚膜红细菌菌液后培养5d，得 荚膜红细菌转化丹参培养液。
[0058] (2)将荚膜红细菌转化丹参培养液3000r/min离心，上清液过AB-8大孔吸附树脂 柱，采用水、10 %、30 %、50 %、70 %、90 %乙醇进行洗脱，收集30 %?70 %乙醇洗脱液，经减 压浓缩，喷雾干燥即得总丹参酚酸提取物粉末，高效液相检测结果表明总丹参酚酸纯度为 90. 21%，其中丹酷酸B重量百分含量为21. 11%，丹参素重量百分含量为3. 35%，迷迭香 酸重量百分含量为43. 26%，阿魏酸重量百分含量为达5. 65%，咖啡酸重量百分含量为达 12. 78%〇
[0059] 实施例7抗氧化效应研宄
[0060] 1实验试剂
[0061] FeS04 · 7H20、水杨酸、H2O2购买