复合微生物制剂及其在水华爆发水体处理中的应用
【技术领域】
[0001] 本发明属于环境保护和生态修复领域，更具体地设及一种复合微生物制剂及其在 水华爆发水体处理中的应用。
【背景技术】
[0002] 我国的主要支撑产业为农业和工业，污染物质随着雨水径流进入河湖水系，导致 河湖中氮、憐等营养物质增加，水体富营养化。随着工农业的发展W及全球气候变暖导致 的水域污染和富营养化现象的严重，我国的许多水域相继出现了水体污染和水华爆发的现 象，严重影响水体使用功能、危害水生生物及水产养殖，部分地区直接影响居民饮用水安 全。
[0003] 水华爆发的主要时节为夏季，爆发原因为河湖中营养物质充沛W及较高的水溫为 藻类繁殖提供了适宜的条件。市面上主要用于防治水华爆发的产品分为两类，一类是使用 隧藻菌或溶藻菌直接对藻类进行分解，另一类是使用益生菌分解水中营养物质，与藻类产 生竞争关系减少藻类数量。第一类产品直接被投加入水中后，会由于水流冲刷影响无法高 效分解藻类，同时，常见溶藻菌黄单胞杆菌具有一定毒性，投放间隔、剂量难W把握；而另一 类产品主要预防了藻类的增加，但对已产生的藻类去除效果不明显。
【发明内容】
[0004] 针对上述技术中的不足，本发明的主要目的在于提供一种复合微生物制剂，W便 在使水体中藻类明显减少的同时，还能明显改善水质，特别是去除水体中的氮元素。 阳〇化]为实现上述目的，作为本发明的一个方面，本发明提供了一种复合微生物制剂， 其中所述复合微生物制剂的主要成分为溶藻菌、粘性菌和净水菌，其中所述溶藻菌：粘性 菌：净水菌的活性成分比为12-18 : 3-5 : 6-12。
[0006]其中，所述溶藻菌为肠杆菌和/或枯草芽抱杆菌。
[0007] 其中，所述粘性菌为胶质芽抱杆菌。
[0008] 其中，所述净水菌包括光合细菌和/或硝化细菌。
[0009] 其中，所述光合细菌为沼泽红假胞杆菌和/或海生红球菌。
[0010] 作为本发明的另一个方面，本发明还提供了一种复合微生物制剂的制备方法，包 括W下步骤： 阳011] 分别培养制备溶藻菌、粘性菌和净水菌菌液；
[0012] 将所述溶藻菌菌液、粘性菌菌液和净水菌菌液混合即得所述复合微生物制 剂，其中在所述复合微生物制剂中所述溶藻菌：粘性菌：净水菌的活性成分比为 12-18 : 3-5 : 6-12。
[0013] 其中，所述溶藻菌为肠杆菌和/或枯草芽抱杆菌，所述粘性菌为胶质芽抱杆菌，所 述净水菌包括光合细菌和/或硝化细菌。
[0014] 其中，所述分别培养制备溶藻菌、粘性菌和净水菌菌液的步骤进一步包括：
[0015] (1)将所述溶藻菌、粘性菌和净水菌接种到培养基中分别进行实验室培养5-7天；
[0016] (2)将经上述步骤（1)培养后的各菌种，分别在28-32°C条件下进行母液扩大通气 发酵培养5-7天；
[0017] (3)将按上述步骤（2)发酵后的种子进行规模化发酵生产，时间为6-8天。
[0018] 作为本发明的再一个方面，本发明还提供了根据如上任意一项所述的制备方法制 备的复合微生物制剂。
[0019] 作为本发明的还一个方面，本发明还提供了如上任意一项所述的复合微生物制剂 在水华爆发水体处理中的应用。
[0020] 基于上述技术方案可知，本发明的复合微生物制剂及其应用具有W下有益效果： 单独培养可使各菌种最有效的生长，单独培养后的混合施用可使控藻复合微生物制剂将各 菌剂的效果充分发挥；避免了由于水流冲击菌剂导致的溶藻效果下降的问题，复合微生物 制剂中的硝化杆菌和光合杆菌在控藻的同时降低水体污染物浓度，使本发明的复合微生物 制剂除藻的同时达到净化水质的效果，特别是对水体中氮元素的去除。本发明的复合微生 物制剂打破了传统产品仅适用于小面积静水的限制，可应用范围包括河道、湖泊W及再生 水体。
【具体实施方式】
[0021] 为使本发明的目的、技术方案和优点更加清楚明白，W下结合具体实施例，对本发 明作进一步的详细说明。
[0022] 本发明公开了一种控藻复合微生物制剂，可W应用于河道、湖泊等自然水体，特别 应用于再生水受纳水体，该微生物制剂易于培养，适合于控制河湖内水华爆发的现象。
[0023] 本发明公开的一种复合微生物制剂，主要成分为（活性成分比）溶藻菌：粘性 菌：净水菌二 12-18 : 3-5 : 6-12。
[0024] 所述溶藻菌例如可W为肠杆菌、枯草芽抱杆菌度acillussubtilis)。
[002引所述粘性菌例如可W为胶质芽抱杆菌度acillusmucilaginosus)。
[00%] 所述净水菌例如可W由多种复合微生物组成，包括光合细菌（沼泽红假胞杆菌 (Rhodopseudomonaspalustris)和 / 或海生红球菌（Rhodococcusmarinonascens)、石肖化 杆菌（Nitrobacteriaceae)。
[0027] 本发明还公开了一种控藻复合微生物制剂的制备方法，包括W下步骤：将肠杆菌、 枯草芽抱杆菌、胶质芽抱杆菌、光合细菌和/或硝化杆菌接种到培养基中分别进行实验室 培养，菌种培养约5-7天后即可生长好。
[0028] 经培养后的各菌种，按照其功能分为溶藻菌、粘性菌和净水菌分别进行母液扩大 发酵培养。在28-32°C条件下通气发酵培养。一般5-7天后发酵完成，可W作为规模化生产 的种子。
[0029] 对发酵后种子，进行规模化发酵生产，一般进行6-8天即可。
[0030] 最后将规模化发酵生产的菌液按照溶藻菌菌液、粘性菌菌液和净水菌菌液W 3. 5 : 1.8-2. 2 : 4. 3-4. 7的体积比混合即可。
[0031] 更具体地，本发明的控藻复合微生物制剂制备方法，使用下述培养基对各种菌种 进行实验室培养：
[0032] (a)肠杆菌、枯草芽抱杆菌培养基：牛肉膏Ig，蛋白腺15g，氯化钢5g，葡萄糖20g， 琼脂20g，蒸馈水比，抑值为7. 4-7.6。
[0033] 化）胶质芽抱杆菌培养基：牛肉膏3g，蛋白腺5g，氯化钢3g，葡萄糖lOg，憐酸氨二 钟Ig，硫酸儀Ig，蒸馈水比，抑值为7. 2-7. 4。
[0034] (C)硝化杆菌培养基：葡萄糖6.Og、硫酸锭2. 5g、氯化钢1.Og、憐酸氨二钟0.8邑、 硫酸儀1. 5g，蒸馈水比，抑值为7. 2-7. 5。 阳0巧](d)光合细菌培养基：氯化氨1克，憐酸氨二钟0. 5克，氯化儀0. 2克，氯化钢2克， 酵母膏0. 1克，蒸馈水比，抑值为7. 4-7.6。
[0036] 实验室培养方法如下：
[0037] ①菌种试管斜面培养
[0038] 无菌室消毒：接种应在无菌室内的超净工作台上进行，接种前将无菌室内和超净 工作台内的紫外灯同时打开，灭菌比。
[0039] 接种：试管、平板和立角瓶接种应在超净工作台内进行。
[0040] 培养：菌种接种后应放在培养架上或生物培养箱内培养，溫度控制在25°C-29°C。
[0041] ②菌种=角瓶液体培养：
[0042] 无菌室消毒：接种应在无菌室内的超净工作台上进行，接种前将无菌室内和超净 工作台内的紫外灯同时打开，灭菌比。
[0043] 接种：试管、平板和=角瓶接种应在超净工作台内进行，操作人员必须穿戴消毒过 的工作服和工作帽，接种前手先用体积分数75%的酒精消毒后再开始操作，接种针或环必 须在酒精灯上烧红3次，才能进行接种，将试管斜面培养好的菌种，用接种针和接种环，将 菌种转接到=角瓶液体中，操作时接种物在酒精灯的火焰边进行，接种完毕后立即用棉塞 将试管封口或立即盖上=角瓶。
[0044]培养：菌种接种后应放在恒溫摇床上振动培养，溫度控制在25°C-29°C，如果没有 恒溫摇床可W在培养架或生物培养箱内培养，每天应摇动2-3次为宜。
[0045] 菌种培养约5-7天后即可生长好，即可进行母液扩大培养。
[0046] 将菌种按照其功能分为溶藻菌、粘性菌和净水菌分别使用下述培养基进行母液扩 大发酵培养：
[0047] (a)溶藻菌培养基配制：先用40-60°C的溫水将牛肉膏、蛋白腺分别溶化，加蒸馈 水，然后加入氯化钢，其中按牛肉膏60g、葡萄糖20g、氯化钢20g、硫酸锭lOg、硫酸儀lOg 的比例在混合器中揽拌均匀，再分别装入10L的清洗干净的塑料壶中。 W