要求8的装置，其中所述衔接物以约1至约10个衔接物分子/100nm2的 表面密度存在于可检测颗粒上。12. 根据权利要求1的装置，其中结合到第一个可检测颗粒群上的一种或多种结合剂 包括一种或多种抗体。13. 根据权利要求12的装置，其中所述抗体是单克隆抗体。14. 根据权利要求1的装置，其中结合到第二个可检测颗粒群上的一种或多种结合剂 包括一种或多种抗体。15. 根据权利要求14的装置，其中所述抗体是多克隆抗体。16. 根据权利要求1的装置，其中所述结合剂选自多克隆抗体、单克隆抗体、其功能性 片段，及其组合。17. 根据权利要求16的装置，其中所述多克隆抗体或单克隆抗体包括一种或多种全类 属抗体。18. 用于检测样品中的细菌的侧向流动装置，该装置包括用于样品的流动通道，并且进 一步包括特异性结合细菌抗原的结合剂，其中所述结合剂固定于两个或更多个可检测颗粒 群上，其中第一个颗粒群包含直径为约20nm至约60nm的颗粒和第二个颗粒群包含直径大 于约60nm至约120nm的颗粒，其中第一个颗粒群结合到一种或多种对第一个分析物群具有 特异性的结合剂上而第二个颗粒群结合到一种或多种对第二个分析物群具有特异性的结 合剂上；和捕获所述一个或多个颗粒群的捕获结合剂，其中所述捕获结合剂固定于所述流 动通道上，并且其中所述可检测颗粒群沿着所述流动通道排列，使得所述样品在与所述捕 获结合剂接触之前与所述可检测颗粒群接触。19. 根据权利要求18的装置，其中所述第一个和第二个分析物群是相同的。20. 根据权利要求18的装置，其中所述第一个和第二个分析物群是彼此不同的。21. 根据权利要求18的装置，其中所述结合剂通过衔接物结合到所述可检测颗粒上。22. 根据权利要求21的装置，其中所述衔接物选自蛋白A、蛋白G、蛋白L和种特异性抗 免疫球蛋白抗体。23. 根据权利要求22的装置，其中所述衔接物是蛋白A。24. 根据权利要求21的装置，其中所述衔接物以约1至约10个蛋白A分子/lOOnm2的 表面密度存在于可检测颗粒上。25. 根据权利要求18的装置，其中所述第一个可检测颗粒群直径为约40nm而第二个可 检测颗粒群直径为约80nm。26. 用于检测样品中的分析物的方法，包括使所述样品与对一种或多种分析物具有特 异性的一种或多种结合剂接触，其中所述一种或多种结合剂固定于两个或更多个可检测颗 粒群上，其中所述第一个可检测颗粒群包含直径为约20nm至约60nm的颗粒而第二个可检 测颗粒群包含直径大于约60nm至约120nm的颗粒，其中所述第一个可检测颗粒群结合到一 群对第一个分析物群具有特异性的一种或多种结合剂上而第二个可检测颗粒群结合到一 群对第二个分析物群具有特异性的一种或多种结合剂上；并且其中使所述样品在允许所述 结合剂和所述分析物之间结合的条件下与所述一种或多种结合剂接触，其中所述结合剂被 所述分析物的结合表示所述样品中分析物的存在。27. 根据权利要求26的方法，其中所述第一个和第二个分析物群是相同的。28. 根据权利要求26的方法，其中所述第一个和第二个分析物群是彼此不同的。29. 根据权利要求26的方法，其中所述一种或多种结合剂包括一种或多种全类属结合 剂。30. 根据权利要求26的方法，进一步包括使固定化捕获结合剂在允许固定化捕获结合 剂和带有结合剂的可检测颗粒之间结合的条件下与可检测颗粒接触，其中所述可检测颗粒 被所述捕获结合剂的结合表示所述样品中分析物的存在。31. 根据权利要求26的方法，其中所述第一个分析物群的分析物以高于所述第二个分 析物群的分析物的浓度存在于所述样品中。32. 根据权利要求26的方法，其中所述可检测颗粒由选自金、银和铂的材料制得。33. 根据权利要求32的方法，其中所述可检测颗粒由金制得。34. 根据权利要求26的方法，其中所述分析物是细菌抗原。35. 根据权利要求26的方法，其中所述结合剂通过衔接物结合到所述可检测颗粒上。36. 根据权利要求35的方法，其中所述衔接物选自蛋白A、蛋白G、蛋白L和种特异性抗 免疫球蛋白抗体。37. 根据权利要求36的方法，其中所述衔接物是蛋白A。38. 根据权利要求35的方法，其中所述衔接物以约1至约10个衔接物分子/lOOnm2的 表面密度存在于所述可检测颗粒上。39. 根据权利要求26的方法，其中所述结合剂选自多克隆抗体、单克隆抗体、其功能性 片段，及其组合。40. 根据权利要求39的方法，其中所述多克隆抗体或单克隆抗体包括一种或多种全类 属抗体或其功能性片段。41. 提高结合试验中检测多分析物样品中的多种分析物与结合颗粒的结合剂的结合的 特异性和/或敏感性的方法，包括使所述样品与对一种或多种分析物具有特异性的一种或 多种结合剂接触，其中所述一种或多种结合剂固定于两个或更多个可检测颗粒群上，其中 第一个可检测颗粒群包括直径为约20nm至约60nm的颗粒而第二个可检测颗粒群包括直径 大于约60nm至约120nm的颗粒，其中所述第一个可检测颗粒群结合到对第一个分析物群具 有特异性的一种或多种结合剂上而所述第二个可检测颗粒群结合到对第二个分析物群具 有特异性的一种或多种结合剂上；其中使所述样品在允许所述结合剂和所述分析物之间结 合的条件下与所述一种或多种结合剂接触，并且所述结合剂被所述分析物的结合表明所述 样品中分析物的存在；和其中敏感性和/或特异性的提高是与除了使用具有相同直径的第 一个可检测颗粒群和第二个可检测颗粒群之外相同的方法相比。42. 根据权利要求41的方法，其中所述第一个和第二个分析物群是相同的。43. 根据权利要求41的方法，其中所述第一个和第二个分析物群是彼此不同的。44. 根据权利要求41的方法，其中所述一种或多种结合剂包括一种或多种全类属结合 剂。45. 根据权利要求41的方法，进一步包括使固定化捕获结合剂在允许固定化捕获结合 剂与带有结合剂的可检测颗粒之间结合的条件下与可检测颗粒接触，其中所述可检测颗粒 被所述捕获结合剂的结合表明所述样品中分析物的存在。46. 根据权利要求41的方法，其中所述第一个分析物群的分析物以高于所述第二个分 析物群的分析物的浓度存在于所述样品中。47. 根据权利要求41的方法，其中所述可检测颗粒由选自金、银和铂的材料制得。48. 根据权利要求47的方法，其中所述可检测颗粒由金制得。49. 根据权利要求41的方法，其中所述分析物是细菌抗原。50. 根据权利要求41的方法，其中所述结合剂通过衔接物结合到所述可检测颗粒上。51. 根据权利要求50的方法，其中所述衔接物选自蛋白A、蛋白G、蛋白L和种特异性抗 免疫球蛋白抗体。52. 根据权利要求51的方法，其中所述衔接物是蛋白A。53. 根据权利要求50的方法，其中所述衔接物以约1至约10个衔接物分子/100nm2的 表面密度存在于所述可检测颗粒上。54. 根据权利要求41的方法，其中所述结合剂选自多克隆抗体、单克隆抗体、其功能性 片段，及其组合。55. 根据权利要求54的方法，其中所述多克隆抗体或单克隆抗体包括一种或多种全类 属抗体或其功能性片段。56. 权利要求26或41的方法，进一步包括用酶的混合物处理所述样品以提高所述试验 的敏感性。57. 权利要求56的方法，其中所述酶的混合物包括一种或多种细菌细胞壁特异性内肽 酶和一种或多种细菌细胞壁特异性糖苷水解酶。58. 权利要求57的方法，其中所述细菌细胞壁特异性内肽酶是溶葡萄球菌酶。59. 权利要求57的方法，其中所述细菌细胞壁特异性糖苷水解酶是溶菌酶。60. 权利要求57的方法，其中所述细菌细胞壁特异性内肽酶是溶葡萄球菌酶而所述细 菌细胞壁特异性糖苷水解酶是溶菌酶。61. 权利要求57的方法，其中所述细菌细胞壁特异性内肽酶以约0. 06mg/ml至约 200mg/ml的浓度存在。62. 权利要求57的方法，其中所述细菌细胞壁特异性糖苷水解酶以约0. 0025mg/ml至 约15mg/ml的浓度存在。63. 权利要求58的方法，其中所述溶葡萄球菌酶以约0. 06mg/ml至约200mg/ml的浓度 存在。64. 权利要求59的方法，其中所述溶菌酶以约0. 0025mg/ml至约15mg/ml的浓度存在。65. 权利要求56的方法，其中所述酶处理进一步包括表面活性剂。66. 权利要求56的方法，其中所述样品的处理在室温下进行。67. 权利要求56的方法，其中所述酶选自溶葡萄球菌酶、溶菌酶、脂酶、溶菌酶、 labiase、无色肽酶、胰蛋白酶、蛋白酶K、自溶素、噬菌体编码的分解酶，及其组合。68. 用于检测样品中来自多个属的细菌的存在的结合试验，包括用酶处理所述样品来 提高所述结合试验的敏感性的步骤。69. 权利要求68的试验，其中所述样品选自：尿、痰、脊髓液、腹水、血液、灌洗液、透析 流体和血液制品。70. 权利要求68的试验，其中所述药物组合物是选自下组的血液制品：全血、白细胞、 造血干细胞、血小板、红细胞、血浆、骨髓和血清。71. 权利要求68的试验，其中所述处理使用两种或更多种酶并且其中至少一种酶是细 菌细胞壁特异性内肽酶和其中至少一种酶是细菌细胞壁特异性糖苷水解酶。72. 权利要求71的试验，其中所述内肽酶选自溶葡萄球菌酶和无色肽酶。73. 权利要求72的试验，其中所述内肽酶是溶葡萄球菌酶。74. 权利要求71的试验，其中所述糖苷水解酶选自：溶菌酶和溶菌酶。75. 权利要求74的试验，其中所述糖苷水解酶是溶菌酶。76. 权利要求71的试验，其中所述两种或更多种酶包括溶葡萄球菌酶和溶菌酶。77. 权利要求71或72的试验，其中所述细菌细胞壁特异性内肽酶以约0. 06mg/ml至约 200mg/ml的浓度存在。78. 权利要求71的试验，其中所述细菌细胞壁特异性糖苷水解酶以约0. 0025mg/ml至 约15mg/ml的浓度存在。79. 权利要求73或76的试验，其中所述溶葡萄球菌酶以约0. 06mg/ml至约200mg/ml 的浓度存在。80. 权利要求75或76的试验，其中所述溶菌酶以约0. 0025mg/ml至约15mg/ml的浓度 存在。81. 权利要求68的试验，其中所述处理进一步包括表面活性剂。82. 权利要求68的试验，其中处理所述样品在室温下进行。83. 权利要求68的试验，其中所述酶选自溶葡萄球菌酶、溶菌酶、溶菌酶、labiase、无 色肽酶、胰蛋白酶、蛋白酶K、自溶素、噬菌体编码的分解酶，及其组合。84. 权利要求68的试验，其中在使样品与结合试剂接触之前使所述样品与所述酶接 触。85. 权利要求68的试验，其中使所述样品与所述酶和结合试剂同时接触。86. 权利要求84或85的试验，其中在检测结合存在或不存在之前用所述酶孵育所述样 品。87. 权利要求29或30的试验，其中在使所述样品与所述结合剂接触后立即检测结合的 存在或不存在。
【专利摘要】本发明涉及使用全类属抗体来检测样品中的细菌的装置和方法。本发明涉及利用固定于颗粒上的多价结合剂的结合试验，尤其是免疫试验。本发明还涉及增大颗粒的大小提高了筛选的敏感性这一令人惊讶的发现。特别是，本发明提供了用于检测样品中的细菌的侧向流动装置，该装置包括用于样品的流动通道，并且进一步包括对于一种或多种细菌抗原特异性的全类属(pan-generic)结合剂，其中所述全类属结合剂通过衔接物固定于一群特定大小的可检测颗粒上；和捕获结合细菌抗原的颗粒群的捕获结合剂，其中捕获结合剂固定于流动通道上，并且其中可检测颗粒群沿着流动通道排列，使得样品在与捕获结合剂接触之前与可检测颗粒群接触。
【IPC分类】C12Q1/04
【公开号】CN105324489
【申请号】CN201480021332
【发明人】G·M·劳伦斯, L·施内菲尔德
【申请人】韦拉克斯生物医学股份有限公司
【公开日】2016年2月10日
【申请日】2014年3月4日
【公告号】EP2964776A2, US20160011185, WO2014138132A2, WO2014138132A3