水中，加热至40°C，向其中加入3. 39g(0. 02mol)硝酸银。搅拌1. 5小时后，于冰箱冷 却，滤除析出的氯化银沉淀，并用l〇ml水洗涤，滤液通过含100ml碱性离子交换柱，用150ml 水洗涤。然后滴加到4. 5g(0. 01mol，20%水溶液）的L-乳酸中。室温下搅拌3天后，将反 应混合物浓缩，后溶解于甲醇中并加入活性炭搅拌脱色。再将活性炭滤去，滤液中加入乙 醚，快速浓缩得固体，即为无定型态洛钼。
[0150] 对比样品2:采用专利EP0611303实施例方法制得的洛钼三水合物，具体制备方法 如下：
[0151] 3.8g(0.01mol)顺式-[反式-1，2-环丁基双（甲胺）-N，N']_二氯钼（II)悬浮于 20ml水中，加热至40°C，向其中加入3. 39g(0. 02mol)硝酸银。搅拌1. 5小时后，于冰箱冷 却，滤除析出的氯化银沉淀，并用l〇ml水洗涤，滤液通过含100ml碱性离子交换柱，用150ml 水洗涤。然后滴加到4. 5g(0. 01mol，20%水溶液）的L-乳酸中。室温下搅拌3天后，将反 应混合物浓缩至大约20ml，冰箱中放置过夜。吸滤析出的结晶，滤液浓缩，冰箱放置过夜，又 析出结晶，再滤集，合并结晶后，用20ml水/丙酮（1/1，V/V)重结晶，所得晶体即为洛钼三 水合物。
[0152] 2、形态鉴定
[0153] 对比样品1:得到的洛钼为无定形态；
[0154] 对比样品2:通过X-射线衍射，PXRD图谱在2Θ值约为6. 71、8. 35、12. 89、15. 14、 16. 74、17. 45、19. 01、19. 40、22. 07、22. 76、23. 16、24. 30、25. 21、25. 74、27. 08、30. 26、30. 79 处有衍射峰，其2Θ值误差范围小于〇. 2,专利EP0611303中描述其熔点为210°C(分解）；
[0155] 本发明样品1-8:如前所述，通过X-射线衍射，PXRD图谱在2Θ值约为8. 21、 11. 60、12. 99、15. 24、16. 44、17. 11、17. 55、18. 42、19. 01、19. 20、19. 42、21. 81、22. 17、 22. 42、23. 33、23. 85、24. 18、24. 40、24. 77、25. 46、25. 98、26. 13、27. 89、28. 42、29. 03、 30. 32、3L17、3L94、33· 30、36· 20、37· 62、39· 66 处有衍射峰，其 2Θ值误差范围小于 〇· 2 ; DSC图谱显示在229°C附件有放热峰，结合TGA及文献熔点数据判断，该峰为熔融分解峰，表 明样品1-8为同一晶型，也即为洛钼的新晶型F。
[0156] 3、溶解度考察
[0157]分别配制浓度为 60μg/ml、80μg/ml、200μg/ml、400μg/ml、800μg/ml的 洛钼三水合物对照品溶液，通过HPLC法制造标准曲线，所得标准曲线方程为Y= 4. 8641X+20. 5794,R= 0. 9998。将洛钼新晶型的样品6及对比样品2制成饱和水溶液（悬 浮液），置25°C摇床震荡6h，然后过滤，稀释适当倍数，进行HPLC分析。溶解度结果如下表 8 ：
[0158] 表8溶解度考察结果
[0159]
[0160] 结果表明：本发明制得的洛钼化合物溶解性优于洛钼三水合物。
[0161] 4、洛钼新晶型质量对比研究
[0162] 取样品1-8、对比样品1-2各20mg，以产品水分、杂质含量、活性成分含量、收率等 为指标，考察产品质量和收率。结果见下表9:
[0163] 表9洛钼新晶型质量对比研究
[0164]
[0165] 上述结果表明，与洛钼无水物及洛钼三水合物相比，本发明获得的洛钼新晶型F 具有含量高、杂质低、收率好的特点。
[0166] 注1 :含量测定方法：照高效液相色谱法测定：色谱条件：用十八烷基硅烷键合硅 胶为填充剂，以磷酸二氢钾溶液：乙腈=92:8为流动相，检测波长为210nm，柱温40°C，理论 板数按洛钼峰计算应补低于1000,洛钼峰与杂质峰分离度符合要求；对照品溶液的制备： 取洛钼三水合物对照品10mg，精密称定置50ml量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀即得；供试品 溶液的制备：取样品各20mg，精密称定，分别置100ml量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀即得； 测定及结果：精密量取对照品及样品溶液各10μ1，分别注入液相色谱仪，记录色谱图，按 外标法以峰面积计算，按无水物计算即得，标准范围为97. 0% -102%。
[0167] 注2 :杂质检查方法：用薄层层析测定洛钼、1，2_二氨甲基环丁烷（CBMA)、乳酸等 已知的和未知的杂质含量。展开剂：乙醇：氯仿：25%氨水：水=53 :39 :15 :1. 5(体积比）， 薄层层析板：硅胶60F254 1 0X10薄层板。展开后至碘蒸气中用0. 3%茚三酮试剂和对亚硝基 二甲苯胺试剂显色，检查杂质CBMA以及未知杂质。
[0168] 注3 :水分测定方法：采用KarlFischer方法测定。二水合物含水分理论量为 8. 77 %，三水合物含水分理论量为11. 96 %。
[0169] 5、稳定性考察
[0170] 将本发明实施例制得的样品6、对比样品2分别置于60°C烘箱内、相对湿度约为 95%的环境下、照度约为45001UX的光稳定试验箱（带光照功能的常规的恒温箱）内，分别 于5天、10天后将样品取出进行PXRD测试及HPLC分析，以考察样品在高温条件下的稳定 性。结果见下表10:
[0171 ] 表10稳定性评价结果
[0172]
[0173] 上述试验结果表明，本发明的洛钼为新晶型，溶解度高于洛钼三水合物，收率和 纯度非常理想，从高温、高湿、光照考察结果来看，洛钼新晶型稳定性好，无转晶现象发生， HPLC结果表明有效成分含量优于洛钼三水合物，且未发生明显变化，说明本发明洛钼新晶 型稳定性好。
【主权项】
1. 一种洛钼化合物晶体，其特征在于，其晶型为F，PXRD图谱在2Θ角值约为8. 21、 11. 60、12. 99、15. 24、16. 44、17. 11、17. 55、18. 42、19. 01、19. 20、19. 42、21. 81、22. 17、 22. 42、23. 33、23. 85、24. 18、24. 40、24. 77、25. 46、25. 98、26. 13、27. 89、28. 42、29. 03、 30. 32、31· 17、31· 94、33· 30、36· 20、37· 62、39· 66 处有衍射峰，其中 2Θ值误差范围为 〇· 2。2. 如权利要求1所述的洛钼晶体，其特征在于，熔点Ip.. = 229±5°C。3. 制备权利要求1或2所述洛钼晶体的方法，其特征在于，包括如下步骤b): 在洛钼二水合物中，加入甲醇或乙醇，于室温下搅拌至固体溶解，滤去不溶物，再缓慢 加入有机溶剂，待结晶析出后，分离出该结晶，干燥后得白色粉末，即为洛钼的晶型F。4. 如权利要求3所述的方法，其中，所述的洛钼二水合物的制备方法包括如下步骤 a)： 在洛钼三水合物中加入悬浮结晶溶剂，悬浮搅拌，析出结晶，去除溶剂后，用乙醚洗涤， 真空干燥得到该洛钼二水合物结晶。5. 如权利要求4所述的方法，其中，步骤a)中，所述的结晶溶剂选自甲基叔丁基醚、甲 苯、乙醚、乙酸丁酯、1，4-二氧六环或正庚烷，所述洛钼三水合物与结晶溶剂的质量体积比 为洛钼三水合物：结晶溶剂=1:15-30。6. 如权利要求3-5任一项所述的方法，其中，步骤b)中，分离出结晶后，在干燥之前用 乙醚洗涤，所述干燥为真空干燥。7. 如权利要求3-6任一项所述的方法，其中，所述步骤b)中有机溶剂选自乙二醇二甲 醚、正己烷、乙酸乙酯、丙酮、硝基甲烷、乙腈、四氢呋喃或二氯甲烷。8. 如权利要求3-7任一项所述的方法，其中，所述步骤b)中洛钼二水合物和有机溶剂 的质量体积比为洛钼二水合物：有机溶剂=1:120-200。9. 如权利要求3-8任一项所述的方法，其中，所述步骤b)中洛钼二水合物与甲醇质量 体积比为洛钼二水合物：甲醇=1:40-50,洛钼二水合物与乙醇质量体积比为洛钼二水合 物：乙醇=1:80-90。10. -种药物组合物，其特征在于，以权利要求1或2所述的洛钼晶体作为活性成分。11. 如权利要求10所述的药物组合物，其特征在于，所述药物组合物最小单元中含有 洛钼晶体的量为5mg、10mg或50mg。12. 如权利要求10或11所述的药物组合物，其特征在于，所述药物组合物是任何临床 上可接受的药物剂型。13. 如权利要求10-12任一项所述的药物组合物，其特征在于，所述剂型为注射用冻干 制剂。14. 权利要求1或2所述的洛钼晶体，或者权利要求10-13任一项所述的药物组合物在 制备抗癌药中的应用。15. 权利要求1或2所述的洛钼晶体或者权利要求10-13任一项所述的药物组合物，其 用于治疗乳腺癌、小细胞肺癌或慢性粒细胞性白血病。
【专利摘要】本发明涉及一种洛铂晶体、制备方法及药物应用，该洛铂晶型为F，熔点Tm.p..＝229±5℃，其X-射线粉末衍射PXRD图谱中在2θ角值为8.21、11.60、12.99、15.24、16.44、17.11、17.55、18.42、19.01、19.20、19.42、21.81、22.17、22.42、23.33、23.85、24.18、24.40、24.77、25.46、25.98、26.13、27.89、28.42、29.03、30.32、31.17、31.94、33.30、36.20、37.62、39.66处有衍射峰，其中2θ值误差范围为0.2。该晶型F是通过在洛铂二水合物中，加入甲醇或乙醇，于室温下搅拌至固体溶解，滤去不溶物，再缓慢加入有机溶剂，待结晶析出后，分离出该结晶，干燥后得到。与现有洛铂及洛铂三水合物相比，该晶型F的洛铂晶体具有更好的稳定性、溶解性，更适于制备各种形式的药物制剂及贮存、使用，能够更好地用于治疗癌症如治疗乳腺癌、小细胞肺癌或慢性粒细胞白血病。
【IPC分类】A61K31/282, A61P35/02, A61P35/00, C07F15/00
【公开号】CN105440082
【申请号】CN201410279331
【发明人】窦啟玲, 隋东虎, 张圣贵
【申请人】贵州益佰制药股份有限公司
【公开日】2016年3月30日
【申请日】2014年6月20日