却到_20°C，将三氟甲磺酸酐用正己烷稀释，然后滴加到上述反应液中， 控制内温度在_20°C，在_20°C反应2h，反应完全后在10°C下进行柱层析纯化后获得叔丁基 二甲硅氧基三氟甲磺酸乙酯；所述叔丁基二甲基羟乙氧基硅烷、N，N-二异丙基乙胺和三氟 甲磺酸酐的摩尔投料比例依次为1:1.3:1.1;
[0051] 3)在氮气保护下，加入西罗莫司、N，N-二异丙基乙胺和甲苯，升温至65°C，将叔丁 基二甲硅氧基三氟甲磺酸乙酯、N，N-二异丙基乙胺、甲苯混合，混合后快速滴加至上述反应 液中，升温至60°C，反应80min，步骤重复3次，叔丁基二甲硅氧基三氟甲磺酸乙酯每次的添 加量按照与西罗莫司的摩尔比分别为3:1、2:1、1:1进行添加，当HPLC监控产物含量大于 65%时，停止反应，经后处理和纯化获得40-氧-[2-(叔丁基二甲基硅烷基)氧]乙基西罗莫 司；所述西罗莫司、叔丁基二甲基硅氧基三氟甲磺酸乙酯及N，N-二异丙基乙胺的摩尔投料 比例依次为1:6:10;所述减压蒸馏时加入2，6-二甲基吡啶来控制体系酸碱度;所述2，6-二 甲基吡啶与西罗莫司的摩尔比为3:1;
[0052] 4)在氮气保护下，依次加入甲醇，40-氧-[2_(叔丁基二甲基硅烷基)氧]乙基西罗 莫司，冷却至-25±5°C，并控温-25°C滴加 lmol/L的盐酸溶液，滴加完毕后在-15°C下搅拌至 反应完全，初步纯化，获得依维莫司粗品；所述40-氧-[2-(叔丁基二甲基硅烷基)氧]乙基西 罗莫司和稀盐酸的摩尔投料比例为1:2;
[0053] 5)将步骤4)获得的依维莫司粗品采用体积比为16:14的正庚烷和乙酸乙酯混合溶 液作为洗脱剂，采用规格为1〇μπι、12〇Α的硅球作为色谱柱填料，以等度洗脱的方式进行第 一次正相制备液相纯化，浓缩收集符合要求的部分，对不符合要求的部分进行第二次正相 制备液相纯化，浓缩收集后将两次产物合并，重结晶后获得依维莫司。
[0054]以上所述任一方法在制备依维莫司中的应用。
[0055]本发明有益效果：
[0056]现有技术多采用反相制备色谱加正相色谱进行纯化，依维莫司的特点是在反相色 谱中稳定性极差，对少量实验级别样品是比较合适的，对于生产级别来说是不现实的，而本 发明采用纯正相的制备色谱纯化方法进行纯化，避开了反相色谱条件对产品造成不稳定因 素的弊端，适合于生产量较大的情况。本发明对现有的依维莫司合成路线及纯化技术进行 优化，解决了依维莫司制备工艺中存在的技术问题，提供一种成本低、收率高、操作简便、有 利于实现产业化的依维莫司制备工艺。
【附图说明】
[0057]图1为依维莫司反相检测色谱图。
[0058]图2为西罗莫司反相检测色谱图。
[0059]图3为西罗莫司正向检测色谱图。
[0060]图4为依维莫司正向检测色谱图。
[0061 ]图5为西罗莫司和依维莫司正向检测色谱图。
[0062]图6为依维莫司反相制备纯化图谱。
[0063]图7为反相放置0.5h色谱图。
[0064]图8为反相放置1.5h色谱图。
[0065]图9为反相放置2.5h色谱图。
[0066]图10为反相放置4.5h色谱图。
[0067]图11为反相放置5.5h色谱图。
[0068]图12为依维莫司反正相制备纯化图谱。
[0069]图13为正相放置0.5h色谱图。
[0070]图14为正相放置1.5h色谱图。
[0071]图15为正相放置2.5h色谱图。
[0072]图16为正相放置3.5h色谱图。
【具体实施方式】
[0073] 下面结合具体实施例对本发明做进一步说明，但本发明不受实施例的限制。
[0074] 实施例1
[0075] 1)叔丁基二甲基羟乙氧基硅烷的制备
[0076] 氮气保护下，依次向50L反应瓶中加入三乙胺（5640g)，乙二醇（3450g)，正己烷 (9.1L)。体系快速搅拌，并冷却至-5±5°C。将叔丁基二甲基氯硅烷（1400g)溶于正己烷 (4.9L)中，配置后的正己烷溶液平均分为五次，控温-5°C，在0.5~lh内，滴至上述反应液 中；滴加完毕，反应液〇±5°C反应lh，后升至20°C，反应16h。
[0077] 反应液降温至-5± 5°C，加入纯化水（10L)，搅拌5~lOmin，静置5~lOmin，分液。有 机相冷却至〇 ± 5 °C，加入10 %乙酸水溶液（10L)，搅拌5~1 Omin，静置5~1 Omin，分液，有机 相重复以上操作两次。有机相冷却至〇±5°C，加入0~10°C的饱和NaHC03溶液（10L)，搅拌5 ~lOmin，静置5~lOmin，分液，有机相重复以上操作两次。有机相冷却至0 ± 5°C，加入0~10 °C的饱和NaCl溶液(10L)，搅拌5~1 Omin，静置5~lOmin，分液。向有机相中加入无水硫酸钠 (2.5kg)，搅拌干燥1.5h，抽滤。滤液在30 ± 5 °C减压浓缩至干的粗品（1.5 ± 0.15kg)。
[0078]粗品经刺型分馏柱，在约35°C，真空度< _0.090MPa，减压蒸馏除去正己烷。撤去刺 型分馏柱缓慢升温至60°C，在真空度<-0.090MPa下，收集37~41°C馏分(真空度不同，馏分 接收温度略有差异），得叔丁基二甲基羟乙氧基硅烷（1.4±0.14kg)，质量收率为90.0~ 110.0%〇
[0079] 2)叔丁基二甲硅氧基三氟甲磺酸乙酯的合成
[0080]氮气保护下，依次向10L反应釜中加入叔丁基二甲基羟乙氧基硅烷（1.4kg，leq)、 正己烷（2.5L)、DIPEA(133g，1.3eq)，将体系冷却到-20±5°C。三氟甲磺酸酐（246.4g， 1.1 eq)用正己烷(280mL，2eq)稀释，滴加到上述反应液，控内温-20 ± 5 °C (白色固体析出）。 2.5h内滴加完毕，在-20 °C反应2h。TLC检测，反应完全。
[0081] 将体系升温到约〇°c，用玻璃砂芯漏斗抽滤(漏斗垫滤纸和适量硅藻土），滤饼用正 己烷(约1LX3)洗涤至点滤液中无明显依维莫司中间体2为止。滤液在25±5°C进行浓缩，浓 缩液利用湿法进行柱层析纯化，洗脱剂选择正己烷：二氯甲烷= 10: l(v/v)对产品进行洗 脱，柱层析过程始终保持柱温在l〇°C。将收集的含有产品的洗脱液在25±5°C减压浓缩至 干，得叔丁基二甲硅氧基三氟甲磺酸乙酯（1.750±0.175g)。
[0082] 3)40-氧-[2_(叔丁基二甲基硅烷基)氧]乙基西罗莫司的合成
[0083] 氮气保护下，依次向10L反应釜中加入西罗莫司（700g)、DIPEA(396g)，甲苯 (2.59L)，升温至65°C，搅拌5min。将依维莫司中间体2(710g)、DIPEA(297g)、甲苯（1.12L)进 行混合，混合后快速滴加至上述反应液(3min内），升温至60°C，并在此温度下反应80min。将 依维莫司叔丁基二甲硅氧基三氟甲磺酸乙酯(472.5g)、DIPEA(198g)、甲苯(770ml)进行混 合，混合后快速滴加至上述反应液中（3min内），升温至60°C，并在此温度下反应80min。将叔 丁基二甲硅氧基三氟甲磺酸乙酯（237.5g)、DIPEA(99g)、甲苯(420ml)进行混合，混合后快 速滴加至上述反应液(3min内），升温至60°C，并在此温度下反应至HPLC监控产物含量大于 65% (约1.5h)，停止反应。
[0084] 将反应液快速冷却至30 °C以下，向反应液加入2，6-二甲基吡啶(492g )，过滤，用乙 酸乙酯(约1L)洗涤至滤饼中无明显产物。滤液在25±5°C，真空度< _0.080MPa下，减压浓缩 至干。浓缩液用正己烷：乙酸乙酯=5:1 (v/v，约500ml)稀释，洗脱剂选择正己烷：乙酸乙酯 = 10:1，7:1，5:1，3:1，2: l(v/v)，对混合液进行梯度洗脱，柱层析过程始终保持柱温在10土 5°C。将收集的含有洗脱液的产品在25±5°C减压浓缩至干(纯度不够产品重复以上过程重 新进行纯化），得40-氧-[2-(叔丁基二甲基硅烷基)氧]乙基西罗莫司（420±42g)，质量收率 54.0 ~66.0%〇
[0085] 4)依维莫司粗品的合成
[0086]氮气保护下，依次向20L反应釜中加入甲醇(8.4L)、依维莫司40-氧-[2-(叔丁基二 甲基硅烷基)氧]乙基西罗莫司（420g)。将体系冷却至-25±5°C，并控温_25°C滴加 lmol/L的 盐酸溶液(783ml)，滴加完毕(约0.5h)，反应液在-15°C，搅拌至反应完全(约lh)，停止反应。 [0087]将碳酸氢钠(66g)溶解于纯化水中（3.2L)，将上述液体缓慢加入反应液中，控温5 ±5°C，搅拌5min。向体系中加入加乙酸乙酯(9.7L)、饱和碳酸氢钠溶液(6.5L)，搅拌5min， 静置分液，水层用乙酸乙酯（6.5L)萃取一遍，合并有机层，有机层用饱和碳酸氢钠溶液 (9.7L)、纯化水(9.7L)、饱和氯化钠溶液(9.7L)洗涤一次，无水硫酸钠(2kg)搅拌干燥lh。过 滤，滤液在25 ± 5°C、真空度< -0.080MPa下，减压浓缩至干，得到依维莫司粗品（390 ± 39g)， 质量收率81.4~99.5%。
[0088] 5)依维莫司粗品的纯化
[0089]将依维莫司粗品（10g)溶解于乙酸乙酯（50ml)中，将溶液注入正相制备液相系统 中（ΙΟμπι娃球填料），使用液相监控，采用体积比为16:14的正庚烷和乙酸乙酯混合溶液作为 洗脱剂，采用规格为1〇μπκ j 20Α的硅球作为色谱柱填料，以等度洗脱的方式进行第一次正 相制备液相纯化，收集符合要求的混合液，将符合要求的溶液在25 ± 5 °C、真空度< - O.OSOMPa下，减压浓缩至干，得白色无定型粉末依维莫司（5.13g)。将剩余50%不合格产品 再次进行浓缩，依照以上纯化方法进行二次纯化，经浓缩得白色无定型粉末依维莫司 (2.57g)，将两次纯化样品混合，得依维莫司制备品（7.7g)，两次制备液相纯化质量收率 77%。
[0090] 依次向反应瓶中加入乙醇（30ml)、BHT(0.01 g)，控温0~15°C至溶液澄清。将依维 莫司制备品（5g)加入至体系中，保持上述温度继续搅拌至澄清。将混合液滴加至0~5°C的 水(50ml，30min内加入）中，控温0~5 °C搅拌析晶30min。过滤，滤饼用纯化水(约10ml)进行 洗涤。将滤饼均匀铺在托盘中，在25 ± 5 °C、真空度< 0.090MPa下，减压干燥48h，得依维莫司 (4.4g)，质量收率88%。实施例2
[0091] 1)叔丁基二甲基羟乙氧基硅烷的制备
[0092]氮气保护下，依次向50L反应瓶中加入三乙胺（5640g)，乙二醇（3450g)，正庚烷 (9.1L)。体系快速搅拌，并冷却至-5± 5°C。将TBSC1 (1400g)溶于正庚烷(4.9L)中，配置后的 正庚烷溶液平均分为五次，控温0 °C，在0.5~lh内，滴至上述反应液中；滴加完毕，反应液0 ±5°C反应lh，后升至25°C，反应16h。
[0093] 反应液降温至-5± 5°C，加入纯化水（10L)，搅拌5~10min，静置5~10min，分液。有 机相冷却至〇 ± 5 °C，加入10 %乙酸水溶液（10L)，搅拌5~1 Omin，静置5~1 Omin，分液，有机 相重复以上操作两次。有机相冷却至〇±5°C，加入0~10°C的饱和NaHC03溶液（10L)，搅拌5 ~10min，静置5~10min，分液，有机相重复以上操作两次。有机相冷却至0 ± 5°C，加入0~10 °C的饱和NaCl溶液(10L)，搅拌5~1 Omin，静置5~10min，分液。向有机相中加入无水硫酸钠 (2.5kg)，搅拌干燥1.5h，抽滤。滤液在30 ± 5 °C减压浓缩至干的粗品（1.5 ± 0.15kg)。
[0094] 反应液降温至-5± 5°C，加入纯化水（10L)，搅拌5~lOmin，静置5~lOmin，分液。有 机相冷却至〇 ± 5 °C，加入10 %乙酸水溶液（10L)，搅拌5~1 Omin，静置5~1 Omin，分液，有机 相重复以上操作两次。有机相冷却至〇±5°C，加入0~10°C的饱和NaHC03溶液（10L)，搅拌5 ~lO