落新妇苷衍生物及其制备方法
【技术领域】
[0001] 本发明属于医药领域，涉及新型的落新妇苷衍生物及其制备方法，尤其涉及一种 落新妇苷的前药，即乙酰化落新妇苷及其制备方法。
【背景技术】
[0002] 落新妇苷1950年由Kozo Hayashi首次从植物落新妇中提取得到，落新妇苷广泛 存在于自然界多种植物中，如巴西芸香、葡萄、土茯苓、菝葜、黄芪叶、贯叶连翘、草珊瑚、马 达加斯加哈伦加那树叶等，其主要为黄酮成分，其化学名为3, 3'，4'，5, 7-五羟基黄酮 烷-3-0-a -L-吡喃鼠李糖苷，化学结构如下式所示：
[0003]
[0004] 研究发现，落新妇苷具有多种生物活性，如抗氧化等活性、降血糖、调节脂肪代谢、 选择性免疫等，落新妇苷能显著改善免疫性肝损伤，诱导ΡΗΑ活化的Jurkat细胞凋亡，还具 有抑制活化T淋巴细胞的功能来抑制迟发型超敏反应和治疗小鼠胶原型关节炎等作用。
[0005] 落新妇苷虽然有较好的药理活性，但是其水溶性差，25°C是溶解度仅为250ug/ ml，根据中国药典属于极微溶解样品，落新妇苷的低溶解度导致其生物利用度低，在一定 程度上限制了其临床应用；此外，落新妇苷这种黄酮类物质羟基易发生解离，Teixeira S 等发现落新妇苷苷元中7-0!1最易解离，？1^为6.68，其次是4'-0!1，？1^为8.89(参见 Structure-property studies on the antioxidant activity of flavonoids present in diet[J]. Free Radical Biology&Medicine，2005, 39:1099-1108)。发明人通过对落新妇苷 的化学结构分析，制备落新妇苷衍生物，作为前药给予动物体内，结果发现落新妇苷生物利 用度得到了显著的提高，产生了意料不到的技术效果。
【发明内容】
[0006] 本发明提供了一组落新妇苷的酰化衍生物，其结构通式为（I):
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[0008] 其中，Rl、R2、R3、R4各自独立代表Η、甲酰基、乙酰基、丙酰基、丁酰基，并且，Rl、 R2、R3、R4不能全部为Η。
[0009] 优选的，乙酰化落新妇苷衍生物具有下列式II或式II的化学结构：
[00101 h
[0011] 本发明采用下述制备方法得到通式化合物（I)，具体步骤为：
[0012] Α)将落新妇苷溶于溶剂I，加入缚酸剂和相转移催化剂；
[0013] Β)将酰化试剂溶于溶剂I，缓慢滴入步骤Α)的溶液中；
[0014] C)抽滤，滤液浓缩，即得粗品。
[0015] 任选的，
[0016] D)粗品加入溶剂II溶解，然后经过水洗，饱和食盐水洗，干燥浓缩后在经过柱层 析分离，即得纯品。
[0017] 其中，步骤Α)或步骤Β)所述的溶剂I各自独立的选自四氢呋喃、二氯甲烷、丙酮、 二氧六环、乙酸乙酯的一种或多种的组合；优选四氢呋喃、二氯甲烷、乙酸乙酯的一种或多 种的组合；最优选四氢呋喃。
[0018] 其中，步骤Α)所述的缚酸剂是指能够吸收反应中产生的酸的弱碱性物质，选自氢 氧化钠、碳酸钾、碳酸钠、二异丙基乙胺、三乙胺、吡啶的一种或多种的组合；优选氢氧化钠、 三乙胺、吡啶的一种或多种的组合；最优选氢氧化钠。
[0019] 其中，步骤Α)所述的相转移催化剂是指能使离子化合物与不溶于水的有机物质 在低极性溶剂中进行反应或加速这些反应的物质，选自四丁基硫酸氢铵（ΤΒΑΒ)、苄基三乙 基氯化铵（ΤΕΒΑ)、四丁基溴化铵、四丁基氯化铵、三辛基甲基氯化铵、十二烷基三甲基氯化 铵、十四烷基三甲基氯化铵的一种或多种的组合；优选TBAB、TEBA、四丁基溴化铵的一种或 多种的组合；最优选TBAB。
[0020] 其中，步骤A)所述的落新妇苷与溶剂I的质量体积比为lg : (5~50)ml ;优选落 新妇苷与溶剂I的质量体积比为lg : (10~40)ml。
[0021] 其中，步骤B)所述的酰化试剂是指能够发生酰化反应的物质，选自甲酸酐、醋酐、 乙酰氯、丙酸酐、丙酰氯、丁酸酐、丁酰氯。
[0022] 其中，步骤D)所述的溶剂II选自乙酸乙酯、丙酮、甲醇、二氯甲烷、四氢呋喃的一 种或多种的组合。
[0023] 前述的制备方法中，落新妇苷与酰化试剂的摩尔质量比为1: (1~5);优选的落新 妇苷与酰化试剂的摩尔质量比为1: (1. 2~4. 5)。
[0024] 本发明还提供包含通式（I)所述的乙酰化落新妇苷衍生物的药物组合物，前述药 物组合物可以根据制剂的需要，加入适当的辅料，制成注射剂、混悬剂、乳剂、片剂、颗粒剂、 胶囊剂等药学上可接受的剂型，本发明所述的各种剂型均可以采用药学常规方法制备而 成。
[0025] 本发明通式（I)所述的落新妇苷酰化衍生物，作为落新妇苷的前药，在制备治疗 类风湿性关节炎、高血糖症、肝损伤药物中的用途。
【具体实施方式】
[0026] 以下实施例对本发明进行进一步的描述，用于证明本
【发明内容】
及有益效果；但以 下实施例并不限制本发明。
[0027] 实施例1二丙酰化落新妇苷的制备
[0028] 将10g落新妇苷溶于500mL丙酮中，加入8g批陡和130mg四丁基溴化铵，冰浴下 搅拌均匀。然后将15. 5g丙酸酐溶于200mL丙酮，缓慢滴入反应体系中，滴加完毕后抽滤， 滤液浓缩，所得粗品加入四氢呋喃溶解，然后经过水洗、饱和食盐水洗，干燥浓缩后再经柱 层析分离，最后经制备HPLC反复纯化得到化合物1、化合物2。
[0029] MS-ESI:m/e:590. 13(M-Η)。
[0030] 化合物 1 JH NMR(300MHz, DMS0-d6) : δ = 11. 52(1H, s), 7. 32(1H, d，J =8. 4Hz), 7. 23 (1H, d, J = 8. 4Hz), 7. 16 (1H, s), 6. 36 (2H, m), 5. 64 (1H, d, J = 10. 6Hz), 5. 04(1H, d, J = 10. 6Hz), 4. 05(1H, s), 3. 85(lH,m), 3. 75(lH,m), 3. 32(1H ,m), 3. 14(1H, m), 2. 42(2H, q J = 7. 2Hz), 2. 41 (2H, q J = 7. 2Hz), 1. 14 (3H, t J = 7. 4Hz)，1. 13 (3H, t J = 7. 4Hz)，1. 06 (3H, s)。经鉴定为 7, 4' -二丙酰化落新妇苷；
[0031] 化合物 2 :? NMR(300MHz，DMS0-d6) : δ = 11. 51(1H，s)，7. 31(1H，s)，7. 21(1H，d， J = 8. 4Hz), 7. 14 (1H, d, J = 8. 4Hz), 6. 35 (2H, m), 5. 65 (1H, d, J = 10. 6Hz), 5. 03 (1H, d, J =10. 6Hz), 4. 05 (1H, s), 3. 88 (1H, m), 3. 76 (1H, m), 3. 31 (1H, m), 3. 13 (1H, m), 2. 42 (2 H, q J = 7. 2Hz), 2. 41 (2H, q J = 7. 2Hz), 1. 14 (3H, t J = 7. 3Hz), 1. 13 (3H, t J = 7. 3Hz)，1. 05 (3H，s)。经鉴定为7, 3' -二丙酰化落新妇苷。
[0032] 实施例2三乙酰化落新妇苷式（II)的制备
[0033]
[0034] 将lOg落新妇苷溶于400mL四氢呋喃中，加入9g氢氧化钠和125mg四丁基硫酸氢 铵，冰浴下搅拌均匀。然后将18g醋酐溶于500mL四氢呋喃，缓慢滴入反应体系中，滴加完 毕后抽滤，滤液浓缩，