0mL已预热的模拟液体中，置于摇床中37±0.5°C以250转/min的速度振荡。每隔一定时间取样4mL，同时用4mL已预热的模拟液体补充。采用紫外分光光度计在265nm波长下测其吸光度，计算释放盐酸青藤碱的量。根据印迹聚合物的载药量，通过公式(2)计算药物累计释放率:
[0092]累计释放率=(累计释放量+载药总量)X100% (2)
[0093](— )吸附试验:对比分子印迹聚合物与非印迹聚合物的吸附量
[0094]将50mL浓度为150mg//L的盐酸青藤碱溶液，加入到已添加50mg由实施例1和对照例I和2得到的产物的锥形瓶中，于37°C恒温水浴中进行吸附。吸附反应结束后，离心，取上清液，在波长265nm处测其吸光度，计算平衡吸附量Q。结果显示:由对照例I得到的非印迹聚合物的吸附容量(11.6mg/g)明显小于由对照例2得到的印迹聚合物(16.8mg/g)，而添加了锂皂石制备的锂皂石/青藤碱分子印迹聚合物(由实施例1制备得到)的吸附容量(57.7mg/g)远高于青藤碱分子印迹聚合物。表明，印迹聚合物的吸附性能比非印迹聚合物的吸附性能好，锂皂石的添加使印迹聚合物的吸附性能得到了提高。
[0095](二)分子印迹聚合物的等温吸附实验
[0096]分别准确称取6份50mg的由实施例1得到的锂皂石/青藤碱分子印迹聚合物、由对照例I得到的非印迹聚合物和由对照例2得到的青藤碱分子印迹聚合物，放置于10mL的平底烧瓶中，编号1、2、3、4、5、6并依次加入50mL浓度分别为50mg/L、100mg/L、150mg/L、200mg/L、250mg/L、300mg/L的盐酸青藤碱溶液。然后放置于摇床中，设定温度为37°C、速度为250转/min、时间为24h。吸附反应结束后，离心，取上清液，在波长265nm处测其吸光度，计算平衡吸附量Q，并绘制出平衡吸附量与平衡浓度的关系曲线，也就是等温吸附曲线，见图4。由图可见，在50?600mg/L范围内，三条曲线的吸附量与溶液浓度成正相关性，当浓度达到一定程度，吸附量不再升高，即达到饱和。锂皂石/青藤碱分子印迹聚合物对盐酸青藤碱的吸附容量明显高于青藤碱分子印迹聚合物和非印迹聚合物，且吸附等温曲线符合Langmuir模型。
[0097](三)药物释放性能评价
[0098]精密称取干燥后吸附盐酸青藤碱的锂皂石/青藤碱分子印迹聚合物(由实施例1得到)10mg，放入处理过的透析袋中。精密封口后，分别悬浮于10mL已预热的模拟液体(模拟肠液pH = 6.86、模拟胃液pH= 1.2和缓冲液pH = 7.4)中，置于摇床中37 ±0.5°C以250转/min的速度振荡。每隔一定时间取样4mL，同时用4mL已预热的模拟液体补充。采用紫外分光光度计在265nm波长下测其吸光度，根据公式(2)计算药物累计释放率。图6所示，在药物释放的初期，药物释放速率迅速，之后进入缓释阶段，释放速率随着时间的推移逐渐减缓，药物释放越来越缓慢，然后慢慢趋于平衡。印迹聚合物在pH= 7.4缓冲溶液中释放36h后，药物累积释放率达到77 % ;在pH= 1.2的模拟胃液中，释放36h后药物累积释放率达到51.48%，结果表明印迹聚合物的药物释放性能受到释放介质pH值的影响。
[0099](四)药物释放性能评价
[0100]分别称取干燥后吸附盐酸青藤碱的锂皂石/青藤碱分子印迹聚合物(由实施例1得至IJ)和青藤碱分子印迹(由对照例2得到)聚合物各lOOmg，放入处理过的透析袋中。精密封口后，分别悬浮于10mL已预热的缓冲液(pH = 7.4)中，置于摇床中37 ±0.5°C以250转/min的速度振荡。每隔一定时间取样4mL，同时用4mL已预热的模拟液体补充。采用紫外分光光度计在265nm波长下测其吸光度，根据公式(2)计算药物累计释放率。结果表明，锂皂石/青藤碱分子印迹聚合物的药物释放速率明显大于青藤碱分子印迹聚合物，前者的药物累积释放量也明显大于后者。由此可知，添加了锂皂石制备的锂皂石/青藤碱分子印迹将聚合物在一定程度上优化了分子印迹聚合物的药物释放性能，其药物缓释性能优于传统青藤碱分子印迹聚合物。
【主权项】
1.一种层状硅酸盐纳米粘土 /中药活性单体分子印迹聚合物的制备方法，其特征在于包括如下步骤: 1)层状硅酸盐纳米粘土的预处理:将层状硅酸盐纳米粘土溶于蒸馏水中，配制浓度为I?4wt.%的层状硅酸盐纳米粘土水溶液/悬浊液，静置待用； 2)层状硅酸盐纳米粘土/中药活性单体分子印迹聚合物的制备:在反应容器中将中药活性单体溶于溶剂中，然后分别加入功能单体、交联剂以及引发剂;再向反应容器中通入惰性气体以排除其中的氧气;然后采用滴加的方式加入步骤I)最终得到的层状硅酸盐纳米粘土水溶液/悬浊液;常温搅拌至均匀，在搅拌条件下升温至60?70°C，恒温继续反应直至反应结束;抽滤，收集固体，将固体用洗脱剂反复洗涤，直至作为模板分子的中药活性单体洗脱;再干燥至恒重，即得所述层状硅酸盐纳米粘土 /中药活性单体分子印迹聚合物； 所述中药活性单体为青藤碱、盐酸青藤碱、双青藤碱、异青藤碱、木兰花碱、尖防己定碱或土藤碱。2.如权利要求1所述制备方法，其特征在于:所述中药活性单体在溶剂中的摩尔浓度为I?8% ;所述的中药活性单体:功能单体:交联剂添加的摩尔比是1:3?12:20;按摩尔量计，所述引发剂的添加量为所述中药活性单体添加量的0.1?0.8倍。3.如权利要求1所述制备方法，其特征在于:所述层状硅酸盐纳米粘土为锂皂石、凹凸棒土、蒙脱土或高岭土;所述溶剂为无水乙醇、N，N-二甲基甲酰胺、N，N-二甲基甲酰胺或者N-甲基-2-吡咯烷酮。4.如权利要求1所述制备方法，其特征在于:所述功能单体为甲基丙烯酸或者甲基丙烯酉交酷O5.如权利要求1所述制备方法，其特征在于:所述交联剂为二甲基丙烯酸乙二醇酯、四亚甲基二甲基丙烯酸酯或者三羟甲基丙烷三甲基丙烯酸酯。6.如权利要求1所述制备方法，其特征在于:所述引发剂为偶氮类引发剂。7.如权利要求1所述制备方法，其特征在于:所述引发剂为偶氮二异丁腈、偶氮二异庚腈或者偶氮二异丁酸二甲酯。8.如权利要求1所述制备方法，其特征在于:所述洗脱剂为无水甲醇或者无水乙醇。9.如权利要求1所述制备方法，其特征在于:步骤2)中添加功能单体、交联剂以及引发剂的同时还需添加十二烷基硫酸钠，按摩尔量计，所述十二烷基硫酸钠的添加量为所述中药活性单体添加量的3?15倍。10.如权利要求1所述制备方法，其特征在于:步骤I)中层状硅酸盐纳米粘土在水中充分溶胀的时间为12?24h;步骤2)中恒温继续反应的时间为12?30h。
【专利摘要】本发明公开了一种层状硅酸盐纳米粘土/中药活性单体分子印迹聚合物的制备方法，包括如下步骤：1)将层状硅酸盐纳米粘土配制成水溶液/悬浊液，静置待用；2)在反应容器中将中药活性单体溶于溶剂中，然后加入功能单体、交联剂以及引发剂；在惰性气体氛围下采用滴加的方式加入步骤1)得到的水溶液/悬浊液；常温搅拌至均匀，升温至60～70℃恒温反应至结束；抽滤，收集固体，将固体用洗脱剂反复洗涤，直至作为模板分子的中药活性单体洗脱；再干燥至恒重，即得所述层状硅酸盐纳米粘土/中药活性单体分子印迹聚合物。该制备方法简单，得到产物能有效改善传统方法模板分子的缺点，有效提高载药量，可作为一种新型药物载体。
【IPC分类】C08K3/34, B01J20/30, B01J20/26, C08F2/44, C08F222/14, C08K9/00, C08J9/26, A61K47/32, C08F220/06
【公开号】CN105601811
【申请号】CN201510810283
【发明人】张华 , 张雯, 付海丽, 张凤, 宋少波, 张喜悦, 刘珺
【申请人】天津工业大学
【公开日】2016年5月25日
【申请日】2015年11月19日