一种检测水产养殖水体中弧菌含量的弧菌培养基的制作方法
【专利摘要】本发明公开了一种检测水产养殖水体中弧菌含量的弧菌培养基，其中，具体组成为谷氨酸2.0g，胰蛋白胨15.0g，硫代硫酸钠15.0g，单月桂酸甘油酯5.0g，乳糖20.0g，氯化钠15.0g，柠檬酸铁铵1.5g，麝香草酚兰0.04g，琼脂粉20.0g，蒸馏水1000ml，pH值7.5，将上述组分混合加热煮沸35分钟后倒入22ml/皿的无菌培养皿，凝固后用于弧菌检测。本发明提供的一种检测水产养殖水体中弧菌含量的弧菌培养基，对弧菌的检出率高，能够准确反映养殖水体中的弧菌总量，对弧菌检出率显著优于TCBS培养基，避免了养殖过程中TCBS培养基对弧菌数量检测与实际值严重不符的现象，对预防水产养殖弧菌病的发生具有重要的技术价值。
【专利说明】
一种检测水产养殖水体中弧菌含量的弧菌培养基
技术领域
[0001 ]本发明涉及一种弧菌培养基，具体涉及一种检测水产养殖水体中弧菌含量的弧菌培养基。
【背景技术】
[0002]弧菌属为革兰氏阴性菌，广泛存在于水产养殖水体中，是引起水产养殖鱼、虾、贝类等疾病的重要病原菌。弧菌在残饵粪便增多、水质底质恶化、水温较高时极易大量繁殖，当弧菌数量超过阈值时，容易导致水产养殖动物弧菌病的爆发和迅速蔓延。因此，准确计数水产养殖水体中的弧菌总量对水产健康养殖具有极其重要的意义。目前，在水产养殖中养殖户广泛使用TCBS培养基用于弧菌计数。然而，TCBS培养基虽然能够培养养殖水体中的弧菌，但其他细菌也能在其上良好生长，利用TCBS培养基检测养殖水体弧菌数量的结果值得商榷。据报道，以TCBS培养基分离筛选的菌株中，弧菌属细菌也只占很小比例，只有5%是弧菌，其他细菌大部分为芽孢杆菌属(36.7%)和大洋芽孢杆菌属(43.3%)(韩宁等.TCBS培养基筛选的虾池细菌分析.广东农业科学，2012，7:141-144.)。因而研制一种新的弧菌培养基来替代TCBS培养基用于准确检测养殖水体中的弧菌数量，对水产健康养殖中弧菌病的预防具有重要的理论意义和实践价值。本发明公开了一种检测水产养殖水体中弧菌含量的弧菌培养基，对弧菌的检出率高，能够准确反映养殖水体中的弧菌总量，避免了养殖过程中TCBS培养基对弧菌数量检测与实际值严重不符的现象，对预防水产养殖弧菌病的发生具有重要的技术价值。
【发明内容】
[0003]本发明所要解决的技术问题是提供一种检测水产养殖水体中弧菌含量的弧菌培养基，对弧菌的检出率高，能够准确反映养殖水体中的弧菌总量。
[0004]本发明为解决上述技术问题而采用的技术方案是提供一种检测水产养殖水体中弧菌含量的弧菌培养基，其中，将谷氨酸、胰蛋白胨、硫代硫酸钠、单月桂酸甘油酯、乳糖、氯化钠、柠檬酸铁铵、麝香草酚兰、琼脂粉、蒸馏水混合加热煮沸后倒入无菌培养皿凝固。
[0005]上述的一种检测水产养殖水体中弧菌含量的弧菌培养基，其中，具体组成为谷氨酸2.0g，胰蛋白胨15.0g，硫代硫酸钠15.0g，单月桂酸甘油酯5.0g，乳糖20.0g，氯化钠15.0g,柠檬酸铁铵1.5g，麝香草酚兰0.04g，琼脂粉20.0g，蒸馏水1000ml，pH值7.5，将上述组分混合加热煮沸35分钟后倒入22ml/皿的无菌培养皿，凝固后用于弧菌检测。
[0006]本发明相对于现有技术具有如下有益效果:本发明提供的一种检测水产养殖水体中弧菌含量的弧菌培养基，对弧菌的检出率高，能够准确反映养殖水体中的弧菌总量，对弧菌检出率显著优于TCBS培养基，避免了养殖过程中TCBS培养基对弧菌数量检测与实际值严重不符的现象，对预防水产养殖弧菌病的发生具有重要的技术价值。
【附图说明】
[0007]图1为本发明提供的一种检测水产养殖水体中弧菌含量的弧菌培养基与TCBS培养基平板对弧菌数量检测效果的比较表格。
【具体实施方式】
[0008]下面结合附图和实施例对本发明作进一步的描述。
[0009]一、实验材料
[0010]谷氨酸、胰蛋白胨、硫代硫酸钠、单月桂酸甘油酯、乳糖、氯化钠、柠檬酸铁铵、麝香草酚兰、琼脂粉、蒸馏水、南美白对虾养殖水、鲫鱼养殖水、泥鳅养殖水、无菌培养皿、无菌水、TCBS培养基平板。
[0011]二、实验方法
[0012]1、弧菌培养基的组分。
[0013]将谷氨酸、胰蛋白胨、硫代硫酸钠、单月桂酸甘油酯、乳糖、氯化钠、柠檬酸铁铵、麝香草酚兰、琼脂粉、蒸馏水混合加热煮沸后倒入无菌培养皿凝固。
[0014]具体比例为:谷氨酸2.0g，胰蛋白胨15.0g，硫代硫酸钠15.0g，单月桂酸甘油酯5.0g,乳糖20.0g，氯化钠15.0g，柠檬酸铁铵1.5g，麝香草酚兰0.04g，琼脂粉20.0g，蒸馏水1000ml，pH值7.5。将上述组分按规定量混合加热煮沸35分钟后倒入无菌培养皿(22ml/皿)，凝固后即可用于弧菌检测。
[0015]2、弧菌培养基与TCBS培养基平板对弧菌含量检测效果的比较。
[0016]各取南美白对虾养殖水、鲫鱼养殖水、泥鳅养殖水0.18mL分别直接涂布于弧菌培养基与TCBS培养基平板，然后于33°C条件下放置33h，然后计数各平板上的平均菌落数目，并挑取所有的菌落至无菌水中，送生工生物工程(上海)股份有限公司进行分子鉴定，根据分子鉴定弧菌的数量，计算弧菌检出率(100 % X弧菌数量/菌落总数)。
[0017]三、实验结果
[0018]实验结果见附图1中的表格。实验结果表明，弧菌培养基对弧菌数量的检测效果要明显优于TCBS培养基平板。弧菌培养基对南美白对虾养殖水、鲫鱼养殖水、泥鳅养殖水中的弧菌检出率达到了 92.11 %?95.31%； TCBS培养基对南美白对虾养殖水、鲫鱼养殖水、泥鳅养殖水中的弧菌检出率仅有26.60%?34.13%，而且其平板上有大量其他杂菌生长。
[0019]虽然本发明已以较佳实施例揭示如上，然其并非用以限定本发明，任何本领域技术人员，在不脱离本发明的精神和范围内，当可作些许的修改和完善，因此本发明的保护范围当以权利要求书所界定的为准。
【主权项】
1.一种检测水产养殖水体中弧菌含量的弧菌培养基，其特征在于: 将谷氨酸、胰蛋白胨、硫代硫酸钠、单月桂酸甘油酯、乳糖、氯化钠、柠檬酸铁铵、麝香草酚兰、琼脂粉、蒸馏水混合加热煮沸后倒入无菌培养皿凝固。2.如权利要求1所述的一种检测水产养殖水体中弧菌含量的弧菌培养基，其特征在于: 具体组成为谷氨酸2.0g，胰蛋白胨15.0g，硫代硫酸钠15.0g，单月桂酸甘油酯5.0g，乳糖20.0g，氯化钠15.0g，柠檬酸铁铵1.5g，麝香草酚兰0.04g，琼脂粉20.0g，蒸馏水100ml，pH值7.5，将上述组分混合加热煮沸35分钟后倒入22ml/皿的无菌培养皿，凝固后用于弧菌检测。
【文档编号】C12Q1/06GK106065413SQ201510184089
【公开日】2016年11月2日
【申请日】2015年4月20日 公开号201510184089.6, CN 106065413 A, CN 106065413A, CN 201510184089, CN-A-106065413, CN106065413 A, CN106065413A, CN201510184089, CN201510184089.6
【发明人】曹海鹏, 李家胜
【申请人】上海绿奥生物科技有限公司, 曹海鹏