0028]【具体实施方式】七:本实施方式与【具体实施方式】一不同的是，所述的圆筒体5-1是可拆卸的，其直径为5_?7_，高度为2_?4_，用于放置海绵。其他步骤与参数与【具体实施方式】七相同。
[0029]【具体实施方式】八:本实施方式与【具体实施方式】一不同的是，所述的上盖1的下表面与下托盖2的上表面之间是由密封装置6密封的。其他步骤与参数与【具体实施方式】一相同。
[0030]【具体实施方式】九:本实施方式与【具体实施方式】八不同的是，所述的密封装置6是由两片聚甲基丙烯酸甲酯(PMMA)薄板6-1和4套螺栓6-2组成，其中上面的聚甲基丙烯酸甲酯(PMMA)薄板6-1有四个圆形通孔7。其他步骤与参数与【具体实施方式】一相同。
[0031]【具体实施方式】十:本实施方式与【具体实施方式】九不同的是，所述的两片聚甲基丙稀酸甲酯(PMMA)薄板6-1的厚度为3mm?4_。其他步骤与参数与【具体实施方式】^^一相同。
[0032]【具体实施方式】十一:本实施方式与【具体实施方式】九不同的是，所述的通孔7的直径为3mm?5mm。其他步骤与参数与【具体实施方式】^ 相同。
[0033]用以下试验验证本发明:
[0034]实施例1:
[0035]使用本发明制备的气液界面灌注式生物反应器时将整个PDMS生物反应器浸入体积分数为70%的乙醇水溶液中灭菌lh;:再将整个装置置于无菌的细胞操作台内，打开紫外(UV)灯进行灭菌，灭菌时间为45min ;然后用含有质量分数为1%的青霉素-链霉素(Penicillin-Streptomycin,P-S)的磷酸盐缓冲液(Phosphate Buffer Solut1n，PBS)和培养基依次冲洗整个装置。三次灭菌后将海绵放置于灌注室内下方的圆柱形支架上，确保海绵上平面与下层通道上平面处于同一水平线，主要目的是用于支撑皮肤组织与水凝胶，将种有皮肤细胞的水凝胶放在海绵上；利用两片聚甲基丙烯酸甲酯(PMMA)薄板和4套螺栓将上层PDMS模型与键合好的中层PDMS模型和下层PDMS模型夹紧；用注射器向其中一个灌注入口通入分化培养液、另一个通入C02的体积分数为5%的C0 2和空气，两个出口利用软管连接过滤器，防止外界细菌进入系统中污染系统内环境，过滤器通过软管连接收集器。
[0036]为验证连续灌注组织培养的优势及水凝胶的毒性与粘附性，在生长期灌注培养1天以后取出灌注培养样品及静态培养样品用活-死细胞生存能力及毒性染色试剂进行染色分析，计算生长期细胞活性与生长率。
[0037]结果表明:利用本发明制备的设备培养的人体皮肤细胞的存活率为85%、细胞生长占总生长面积的22%，静态培养的存活率75%、细胞生长占总生长面积的20% ；
[0038]经过分化期养殖14天后，用4%的多聚甲醛水溶液将各时期培养样品固定20min后，浸入15 %的蔗糖(sucrose)水溶液常温浸泡4小时，接着浸入30 %的蔗糖水溶液常温浸泡4小时。取出样品放入长X宽X高为lOmmX 10mmX5mm切片模具盒(CryomoldB1psy)中，倒入浸泡切削液(Optimal Cutting Temperature，OCT) 10分钟以后，将样品连同切片模具盒一起放入装有干冰和100%乙醇混合物上迅速冷却。带0CT完全凝固后，用冰冻切片机(Leica CM3050)将皮肤组织切成5 μ m后的小片，用正电荷防脱载玻片吸附样品后，通过苏木精-伊红染色法染色，可测出传统静态模式培养与灌注模式培养下的皮肤生长情况。
[0039]结果表明:利用本发明制备的设备培养的人体皮肤细胞的人工表皮厚度为24 μ m、人工表皮层数为3层而静态培养的人工表皮厚度为22 μ m、人工表皮层数为2.5层。
[0040]实施例2:
[0041]使用本发明制备的气液界面灌注式生物反应器时将整个PDMS生物反应器浸入体积分数为70%的乙醇水溶液中灭菌lh;:再将整个装置置于无菌的细胞操作台内，打开紫外(UV)灯进行灭菌，灭菌时间为45min ;然后用含有质量分数为1%的青霉素-链霉素(Penicillin-Streptomycin,P-S)的磷酸盐缓冲液(Phosphate Buffer Solut1n，PBS)和培养基依次冲洗整个装置。三次灭菌后将海绵放置于灌注室内下方的圆柱形支架上，确保海绵上平面与下层通道上平面处于同一水平线，主要目的是用于支撑皮肤组织与水凝胶，将种有皮肤细胞的水凝胶放在海绵上；利用两片聚甲基丙烯酸甲酯(PMMA)薄板和4套螺栓将上层PDMS模型与键合好的中层PDMS模型和下层PDMS模型夹紧；用注射器向其中一个灌注入口通入分化培养液、另一个通入C02的体积分数为5%的C0 2和空气，两个出口利用软管连接过滤器，防止外界细菌进入系统中污染系统内环境，过滤器通过软管连接收集器。
[0042]将人体皮肤细胞在生长期灌注培养4天以后，取出灌注培养样品及静态培养样品用活-死细胞生存能力及毒性染色试剂进行染色分析，计算生长期细胞活性与生长率。
[0043]结果表明:利用本发明制备的设备培养的人体皮肤细胞的存活率为90%、细胞生长占总生长面积的74%，而静态培养的存活率76%、细胞生长占总生长面积的67% ；
[0044]经过分化期养殖21天后，用4%的多聚甲醛水溶液将各时期培养样品固定20min后，浸入15 %的蔗糖(sucrose)水溶液常温浸泡4小时，接着浸入30 %的蔗糖水溶液常温浸泡4小时。取出样品放入长X宽X高为lOmmX 10mmX5mm切片模具盒(CryomoldB1psy)中，倒入浸泡切削液(Optimal Cutting Temperature，OCT) 10分钟以后，将样品连同切片模具盒一起放入装有干冰和100%乙醇混合物上迅速冷却。带0CT完全凝固后，用冰冻切片机(Leica CM3050)将皮肤组织切成5 μ m后的小片，用正电荷防脱载玻片吸附样品后，通过苏木精-伊红染色法染色，可测出传统静态模式培养与灌注模式培养下的皮肤生长情况。
[0045]结果表明:利用本发明制备的设备培养的人体皮肤细胞的人工表皮厚度为42 μm、人工表皮层数为5层而静态培养的人工表皮厚度为38 μm、人工表皮层数为4.5层。
[0046]实施例3:
[0047]使用本发明制备的气液界面灌注式生物反应器时将整个PDMS生物反应器浸入体积分数为75%的乙醇水溶液中灭菌1.5h ;:再将整个装置置于无菌的细胞操作台内，打开紫外(UV)灯进行灭菌，灭菌时间为50min ;然后用含有质量分数为1.5%的青霉素-链霉素(Penicillin-Streptomycin,P-S)的磷酸盐缓冲液(Phosphate Buffer Solut1n，PBS)和培养基依次冲洗整个装置。三次灭菌后将海绵放置于灌注室内下方的圆柱形支架上，确保海绵上平面与下层通道上平面处于同一水平线，主要目的是用于支撑皮肤组织与水凝胶，将种有皮肤细胞的水凝胶放在海绵上；利用两片聚甲基丙烯酸甲酯(PMMA)薄板和4套螺栓将上层PDMS模型与键合好的中层PDMS模型和下层PDMS模型夹紧；用注射器向其中一个灌注入口通入分化培养液、另一个通入C02的体积分数为6%的C0 2和空气，两个出口利用软管连接过滤器，防止外界细菌进入系统中污染系统内环境，过滤器通过软管连接收集器。
[0048]将人体皮肤细胞在生长期灌注培养7天以后，取出灌注培养样品及静态培养样品用活-死细胞生存能力及毒性染色试剂进行染色分析，计算生长期细胞活性与生长率。
[0049]结果表明:利用本发明制备的设备培养的人体皮肤细胞的存活率为91 %、细胞生长占总生长面积的96%，而静态培养的存活率80%、细胞生长占总生长面积的67% ；
[0050]经过分化期养殖28天后，用4%的多聚甲醛水溶液将各时期培养样品固定20min后，浸入15 %的蔗糖(sucrose)水溶液常温浸泡4小时，接着浸入30 %的蔗糖水溶液常温浸泡4小时。取