专利名称：一种舒肝健脾，益气活血的中药组合物的检测方法
技术领域：
本发明涉及一种舒肝健脾，益气活血的中药组合物的检测方法，属于中药技术领域。
背景技术：
肝硬化(包括肝腹水，脾肿大，门静脉高压，食道静脉曲张)是内科常见的疑难性肝脏病，系由一种或多种致病因素长期或反复损害肝脏所致，目前以乙型病毒性肝炎为主要致病因素。国内外对该病的治疗药物的研究十分重视，但至今尚无疗效可靠的药物。中医认为该病是由于长期肝郁，脾虚，血淤，最终导致肾阳肾阴亏虚，脾、肝、肾、 胃、大小肠多脏器虚损引发的一种全身性免疫功能低下的疾病。因此发明一舒肝健脾，益气活血的治疗肝硬化的中药组合物是可行的，同时可以获得较大的经济效益和社会效益。
发明内容
本发明的第一个目的在于提供一种舒肝健脾，益气活血的中药组合物；本发明的目的还在于提供一种舒肝健脾，益气活血的中药组合物及其制备方法；本发明的目的还在于提供一种舒肝健脾，益气活血的中药组合物制的检测方法；本发明的第一个目的是通过以下技术方案实现的一种舒肝健脾，益气活血的中药组合物，该组合物是由下述重量份的原料药制成的蜂皇浆冻干粉40-200重量份、茶花粉100-310重量份、香茶菜10_80重量份、鸡内金10-100重量份；所述蜂皇浆冻干粉为蜂王浆真空冷冻，脱水干燥而成。该组合物优选由下述重量份的原料药制成的蜂皇浆冻干粉80-120重量份、茶花粉180-260重量份、香茶菜20_50重量份、鸡内金20-60重量份。该组合物优选由下述重量份的原料药制成的蜂皇浆冻干粉100重量份、鸡内金40重量份、香茶粉32重量份、茶花粉2 重量份。本发明提供一种该组合物的制备方法为取香茶菜，粉碎成细粉，剩余的香茶菜加水煎煮1-3小时，滤过，滤液浓缩至相对密度为1. 25-1. 30 (600C )的稠膏，加入香茶菜细粉，混勻，60°C烘干，粉碎成细分；鸡内金洗净，60°C烘干，粉碎成细粉；将上述细粉与蜂皇浆冻干粉、茶花粉及淀粉适量混勻，按常规的制剂工艺制成药剂学可接受的任意常规剂型，包括胶囊剂、片剂、颗粒剂、凝胶剂、缓释剂、 口服液。为使上述剂型能够实现，需在制备这些剂型时加入药学可接受的辅料，例如填充剂、崩解剂、润滑剂、助悬剂、粘合剂、甜味剂、矫味剂、防腐剂、基质等。填充剂包括淀粉、预胶化淀粉、乳糖、甘露醇、甲壳素、微晶纤维素、蔗糖等；崩解剂包括淀粉、预胶化淀粉、微晶纤维素、羧甲基淀粉钠、交联聚乙烯吡咯烷酮、低取代羟丙纤维素、交联羧甲基纤维素钠等；润滑剂包括硬脂酸镁、十二烷基硫酸钠、滑石粉、二氧化硅等；助悬剂包括聚乙烯吡咯烷酮、微晶纤维素、蔗糖、琼脂、羟丙基甲基纤维素等；粘合剂包括，淀粉浆、聚乙烯吡咯烷酮、羟丙基甲基纤维素等；甜味剂包括糖精钠、阿斯帕坦、蔗糖、甜蜜素、甘草次酸等；矫味剂包括甜味剂及各种香精；防腐剂包括尼泊金类、苯甲酸、苯甲酸钠、山梨酸及其盐类、 苯扎溴铵、醋酸氯乙定、桉叶油等；基质包括PEG6000，PEG4000，虫蜡等。为使上述剂型能够实现中药药剂学，需在制备这些剂型时加入药学可接受的其它辅料。本发明提供一种该组合物胶囊剂的制备方法为取香茶菜，粉碎成细粉，生育的香茶菜加水煎煮2小时，滤过，滤液浓缩至相对密度为1.25-1. 30 (60°C )的稠膏，加入香茶菜细粉，混勻，60°C烘干，粉碎成细粉；鸡内金洗净，60°C烘干，粉碎成细粉；将上述细粉与蜂皇浆冻干粉、茶花粉及淀粉适量混勻，装入胶
囊，即得。本发明提供上述中药组合物检测方法，包括如下含量测定和/或鉴别方法鉴别方法为取上述中药组合物制剂8g，加醋酸乙酯20ml，超声处理20分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加乙醇Iml溶解，作为供试品溶液。另取茶花粉对照药材3g，同法制成对照药材溶液；照薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各2 μ 1，分别点于同一硅胶G薄层板上，以 6-10 1-3的石油醚(60-90°C)-醋酸乙酯为展开剂，展开，取出，晾干，喷以5%香草醛硫酸溶液；供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。含量测定方法包括如下步骤色谱条件与系统适用性试验，用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；甲醇-0. 磷酸溶液G0-60 60-40)为流动相；检测波长为210nm ；理论板数按10-羟基-反-2-癸烯酸峰计算应不低于2000 ；对照品溶液的制备精密称取五氧化二磷减压干燥M小时的10-羟基-2-癸烯酸对照品适量，加甲醇制成每Iml含0. 06mg的溶液，即得；供试品溶液的制备取上述中药组合物制剂，研勻，取0. lg，精密称定，置索氏提取器中，加二氯甲烷适量，加热回流提取16-22小时，提取液蒸干，残渣用甲醇溶解，并转移至25ml量瓶中，用甲醇至刻度，摇勻，用微孔滤膜(0.45μπι)滤过，取续滤液，即得；测定法分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10μ 1，注入液相色谱仪，测定，即得；相当原药材0. 3-0. 6g的该组合物制剂以10-羟基-2-癸烯酸(C10H18O3)计，不得少于4. Omg。下述实验例和实施例进一步说明但不限于本发明。实验例1药效学试验研究1实验材料
1. 1 药品阳性对照药养肝胶囊，杭州灵丹王药业有限公司生产，批准文号国药准字 B20040002。1. 2动物Wi star大鼠，昆明种小鼠，早$均用。2对肝损伤小鼠血清中ALT含量的影响2. 1分组取75只昆明小鼠随机分为6组，每组15只，A组为正常对照组；B组为模型对照组；C组为阳性对照组；Dl组为据实施例1所述方法制得的药品，D2组为实施例6 药品；2. 2造模方法采用卡介苗和脂多糖联合的方法建立免疫性肝损伤小鼠模型。各组动物适应性喂养3d后，除正常对照组外，每只小鼠1次尾静脉注射卡介苗5 X IO7个活菌， 于注射BCG后第12d静脉注射脂多糖7. 5 μ g/鼠，于16h后处死取材，正常对照组2次都以相同方法注射等量生理盐水。2. 3给药与处理静脉注射卡介苗的第一天起开始灌胃给药，1次/d。正常对照组与模型对照组生理盐水灌胃，灌胃量同药物治疗组的用药容量；阳性对照药物治疗组清肝扶正胶囊，3.9g/kg剂量给药；本发明药物治疗组，3. 9g/kg剂量给药。正常对照组于第 12d注射生理盐水后16h，眼球后静脉丛取血，并处死动物取肝组织送检；其余组于静脉注射脂多糖后16h，眼球后静脉丛取血，并处死动物取肝组织送检。2. 4观察指标及检测方法①检测谷-丙转氨酶(ALT)采用化学比色法测定。② 内源性一氧化氮(NO)测定采用放射免疫法，剖取0. 5g肝脏制成10%肝组织勻浆，在4°C 条件下，3000转/min，离心lOmin，取上清液。③内皮素(ET)检测采用放射免法直接测定血浆ET浓度，结果见表1。表1各组血清ALT、ET、NO的变化情况比较
权利要求
1.一种舒肝健脾，益气活血的中药组合物的检测方法，其特征在于该方法包括如下鉴别和/或含量测定鉴别方法为取中药组合物制剂8g，加醋酸乙酯20ml，超声处理20分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加乙醇Iml溶解，作为供试品溶液。另取茶花粉对照药材3g，同法制成对照药材溶液；照薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各2 μ 1，分别点于同一硅胶G薄层板上，以6-10 1-3的 60-900C的石油醚-醋酸乙酯为展开剂，展开，取出，晾干，喷以5%香草醛硫酸溶液；供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；含量测定方法包括如下步骤色谱条件与系统适用性试验，用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；40-60 60-40的甲醇-0. 磷酸溶液为流动相；检测波长为210nm;理论板数按10-羟基-反-2-癸烯酸峰计算应不低于2000 ；对照品溶液的制备精密称取五氧化二磷减压干燥M小时的10-羟基-2-癸烯酸对照品适量，加甲醇制成每Iml含0. 06mg的溶液，即得；供试品溶液的制备取上述中药组合物制剂，研勻，取0. lg，精密称定，置索氏提取器中，加二氯甲烷适量，加热回流提取16-22小时，提取液蒸干，残渣用甲醇溶解，并转移至 25ml量瓶中，用甲醇至刻度，摇勻，用0. 45 μ m微孔滤膜滤过，取续滤液，即得；测定法分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10 μ 1，注入液相色谱仪，测定，即得；相当原药材0. 3-0. 6g的该组合物制剂以10-羟基-2-癸烯酸计，不得少于4. Omg ；其中，所述中药组合物的原料药组成为蜂皇浆冻干粉40-200重量份、茶花粉100-310 重量份、香茶菜10-80重量份、鸡内金10-100重量份。
2.如权利要求1所述的检测方法，其特征在于所述中药组合物的原料药组成为蜂皇浆冻干粉80-120重量份、茶花粉180-260重量份、香茶菜20-50重量份、鸡内金20-60重量份。
3.如权利要求2所述的检测方法，其特征在于所述中药组合物的原料药组成为蜂皇浆冻干粉100重量份、鸡内金40重量份、香茶粉32重量份、茶花粉2 重量份。
4.如权利要求1-3任一所述的检测方法，其特征在于所述蜂皇浆冻干粉为蜂王浆真空冷冻，脱水干燥而成。
5.如权利要求1-4任一所述的检测方法，其特征在于所述中药组合物由如下方法制备而成取香茶菜，粉碎成细粉，剩余的香茶菜加水煎煮1-3小时，滤过，滤液浓缩至60°C时相对密度为1.25-1. 30的稠膏，加入香茶菜细粉，混勻，60°C烘干，粉碎成细分；鸡内金洗净， 60°C烘干，粉碎成细粉；将上述细粉与蜂皇浆冻干粉、茶花粉及淀粉适量混勻，按常规的制剂工艺制成药剂学可接受的任意常规剂型，包括胶囊剂、片剂、颗粒剂、凝胶剂、缓释剂、口服液。
6.如权利要求5所述的检测方法，其特征在于所述中药组合物由如下方法制备而成 取香茶菜，粉碎成细粉，生育的香茶菜加水煎煮2小时，滤过，滤液浓缩至60°C时相对密度为1.25-1. 30的稠膏，加入香茶菜细粉，混勻，60°C烘干，粉碎成细粉；鸡内金洗净，60°C烘干，粉碎成细粉；将上述细粉与蜂皇浆冻干粉、茶花粉及淀粉适量混勻，装入胶囊，即得。
全文摘要
本发明公开了一种舒肝健脾，益气活血的中药组合物的检测方法，该组合物是由如下原料药组成蜂皇浆冻干粉、茶花粉、香茶菜、鸡内金。本发明检测方法专属性好、稳定性高、重现性好、精密度高，可以有效的对产品进行质量控制。
文档编号G01N30/02GK102539614SQ20121002757
公开日2012年7月4日 申请日期2009年5月22日 优先权日2009年5月22日
发明者付建家, 付立家 申请人:北京亚东生物制药有限公司