专利名称：一种交联型聚丙烯酰胺型毛细管电泳涂层柱的制备装置的制作方法
技术领域：
本实用新型涉及毛细管电泳的制备装置，特别是一种交联型聚丙烯酰胺型毛细管电泳涂层柱的制备装置。
背景技术：
高效毛细管电泳(capillary electrophoresis，CE)相对于其他分离技术具有分离效率高，分析时间短，样品消耗低等优点，近年来得到了迅速发展。CE对蛋白质、多肽及其他生物大分子样品的高分离效率使该系统在目前蓬勃发展的蛋白组学研究中具有巨大的应用前景。CE分析碱性蛋白主要问题在于未处理的石英毛细管壁残留的硅羟基，与带正电荷的碱性蛋白质形成不可逆吸附，使谱带展宽，峰托尾，分离重现性显著降低。该问题的解决策略主要有动态去活法、壁涂层法和极端PH法。其中，以壁涂层法应用最为普遍。涂层技术可以采用物理吸附或者化学键合两种方式，其中物理吸附技术(如甲基纤维素或者聚乙烯亚胺等)制柱简单，但稳定性以及重现性较差。而化学键合涂层(如线性聚丙烯酰胺，交联聚丙烯酰胺等)在毛细管表面形成一层永久性涂层，能够有效地降低电渗流，减少蛋白的吸附，具有较好的稳定性以及重现性。在传统的交联聚丙烯酰胺涂层柱制备系统中，由于无法有效驱除氧分子或在反应过程中无法确保氧分子的再次溶解而使反应时间冗长，制柱重复性差。
实用新型内容本实用新型的目的在于提供一种既可去除反应聚合液中溶解的氧，又可防止在聚合过程中氧气的再次溶解的交联型聚丙烯酰胺型毛细管电泳涂层柱的制备装置。
本实用新型的目的是通过以下技术方案来实现的本实用新型包括反应容器及容器盖，容器盖密封插在反应容器内，容器盖上设有多个孔。
其中所述容器盖上孔的个数为四个，分别为毛细管孔、放空孔、试剂孔及氦气孔；所述反应容器由特氟龙或玻璃或石英或高分子透明材料加工制成；所述氦气孔与氦气源之间设有调节阀。
本实用新型的优点与积极效果为本实用新型的反应容器为透明材质制成，可对反应过程做动态观察；并可实现去除反应聚合液中溶解的氧，且可防止在聚合过程中氧气的再次溶解，进而减少反应时间，提高制柱的重复性。
图1为本实用新型的整体结构示意图；图2为本实用新型制备的涂层柱用于毛细管电泳分析碱性蛋白；图3为本实用新型制备的涂层柱用于毛细管电泳分析枳实提取物。
具体实施方式
以下结合附图对本实用新型作进一步详述。
如图1所示，本实用新型包括反应容器1及容器盖2，容器盖2密封插在反应容器1内，容器盖2上设有四个孔，分别为安放涂层毛细管的毛细管孔3、排放氧气及氦气的放空孔4、添加试剂的试剂孔5及放置氦气管的氦气孔6，各个孔没有固定的位置要求。反应容器1由特氟龙或玻璃或石英或高分子透明材料加工制成。氦气孔6与氦气源之间设有调节阀8，用于调节注入反应容器1中氦气的压力。
制备过程包括柱内壁预处理和聚合反应两步。柱内壁预处理步骤包括将毛细管7顺序用NaOH水溶液、纯净水、丙酮清洗，处理后再放入气相色谱炉箱内，在140℃氮吹下干燥后，将含体积百分比为66％的丙基甲基丙烯酸酯乙腈溶液注入到该毛细管7中，在水浴中反应2～3小时。然后用丙酮冲洗1小时，在140℃氮吹下干燥后备用。
聚合反应步骤包括打开容器盖2，将丙烯酰胺和甲叉基双丙烯酰胺混合溶液倒入反应容器1中，然后将容器盖2与反应容器1密封好。通过氦气孔6向反应容器1内注入氦气，对丙烯酰胺和甲叉基双丙烯酰胺混合溶液除氧处理半小时，反应容器1内的气体经放空孔4排出反应容器1外。然后将处理好、备用的毛细管7经毛细管孔3插入反应容器1内，由试剂孔5向反应容器1内加入过硫酸铵和N，N，N′，N′-四甲基乙二胺溶液。然后调节调节阀8，加大氦气的压力，迅速将反应容器1内的溶液压入已处理好的毛细管7中，4～10分钟后将毛细管7由反应容器1中取出，用纯净水冲洗，然后氮吹干燥。
如图2所示，制备出的涂层柱用于毛细管电泳分析碱性蛋白时的分析条件为Jasco CE-1575柱上紫外检测器；毛细管40/34cm(总长/有效)；KH2PO4缓冲液0.02mol/L、PH＝4.0；分离电压10KV；分离电流25μA；虹吸进样10cm×15s。图中9为细胞色素C；10为溶菌酶(lysozyme)；11为核糖核酸酶A。
如图3所示，制备的涂层柱用于毛细管电泳分析枳实提取物的电泳分离条件为分离电流26μA，其它条件与分析碱性蛋白时的分析条件相同。图中，12为未知物峰；13为脱氧肾上腺素。
权利要求1.一种交联型聚丙烯酰胺型毛细管电泳涂层柱的制备装置，其特征在于包括反应容器(1)及容器盖(2)，容器盖(2)密封插在反应容器(1)内，容器盖(2)上设有多个孔。
2.按权利要求1所述的一种交联型聚丙烯酰胺型毛细管电泳涂层柱的制备装置，其特征在于所述容器盖(2)上孔的个数为四个，分别为毛细管孔(3)、放空孔(4)、试剂孔(5)及氦气孔(6)。
3.按权利要求1所述的一种交联型聚丙烯酰胺型毛细管电泳涂层柱的制备装置，其特征在于所述反应容器(1)由特氟龙或玻璃或石英或高分子透明材料加工制成。
4.按权利要求1所述的一种交联型聚丙烯酰胺型毛细管电泳涂层柱的制备装置，其特征在于所述氦气孔(6)与氦气源之间设有调节阀(8)。
专利摘要本实用新型涉及毛细管电泳的制备装置，特别是一种交联型聚丙烯酰胺型毛细管电泳涂层柱的制备装置，包括反应容器及容器盖，容器盖密封插在反应容器内，容器盖上设有多个孔。所述容器盖上孔的个数为四个，分别为毛细管孔、放空孔、试剂孔及氦气孔；所述反应容器由特氟龙或玻璃或石英或高分子透明材料加工制成；所述氦气孔与氦气源之间设有调节阀。本实用新型的反应容器为透明材质制成，可对反应过程做动态观察；并可实现去除反应聚合液中溶解的氧，且可防止在聚合过程中氧气的再次溶解，进而减少反应时间，提高制柱的重复性。
文档编号G01N27/453GK2811997SQ200520091720
公开日2006年8月30日 申请日期2005年7月8日 优先权日2005年7月8日
发明者杨丙成, 田红哲, 关亚风 申请人:中国科学院大连化学物理研究所