一种饲用酶制剂特性的测定方法

专利名称：一种饲用酶制剂特性的测定方法
技术领域：
本发明涉及一种生物酶制剂，具体涉及一种采用图表法对饲用酶制剂特性的测定方法。
背景技术：
我国是一个农业大国，养殖业非常发达，因此，生产制造含各种生物酶制剂的复合型饲料应用于畜牧业，对于促进动物生长、节约粮食、减少污染、保护环境具有深远的意义。
现有技术中，生物酶制剂种类一般包括1.内源性酶，与消化道分泌的消化酶相似的酶(淀粉酶，蛋白酶，脂肪酶等)；2.外源性酶，消化道不能分泌的类似酶(如纤维素酶，果胶酶，半乳糖苷酶，β-葡聚糖酶，木聚糖酶和植酸酶等)。其中最重要的酶制剂，目前已得到充分肯定的酶制剂主要是阿拉伯木聚糖酶(戊聚糖酶)，β-葡聚糖酶和植酸酶.这三种酶制剂是通过消除日粮中的某些抗营养因子而改善动物的生产性能.阿拉伯木聚糖酶是研究最充分，并在当前已被广泛地商业性用于饲养系统的酶制剂。饲料原料的非淀粉多糖小麦，燕麦，稻谷，麸皮，米糠，统糠等都含有较多的木聚糖.大麦，黑麦，啤酒糟等含有较多的β-葡聚糖酶.这类多聚糖统称为水溶性非淀粉多糖(NSP).现有技术中，对酶制剂特性的测定往往仅限于对其活性(简称酶活)的测定，而缺乏对其综合特性的复合测定。其中，现有技术公开的采用比色法对阿拉伯木聚糖酶酶活测定方法的步骤如下1、定义1克固体酶粉在40℃和pH值5.0条件下，每分钟水解木聚糖生成相当于1微克木糖还原物质的量为1个酶活力单位，以u/g表示。
2、原理木聚糖酶催化木聚糖水解生成二糖、木糖等还原糖，二糖、木糖等还原糖能将3，5-二硝基水杨酸中的硝基还原成橙黄色的氨基化合物，利用比色法测定其还原物生成量来表示酶的活力。
3、试剂和溶液3.1 1％木聚糖溶液精确称取木聚糖(美国Sigma公司出品)1.0000g，精确至0.0001g，溶于80ml蒸馏水中，水浴加热至溶，冷却后转入100ml容量瓶中，用蒸馏水定容至刻度。此溶液贮存于冰箱内备用(3天内使用有效)。
3.2磷酸氢二钠-柠檬酸缓冲液(同β-葡聚糖酶酶活测定)
3.3 DNS试剂(同β-葡聚糖酶酶活测定)3.4 1％木糖标准溶液称取预先于105℃干燥至恒重的木糖1.000g，精确至0.0001g，用蒸馏水溶解后定容至100ml，即为1％浓度的木糖标准溶液。
4 仪器和设备4.1 恒温水浴锅(40℃±0.2℃)4.2 分光光度计含10mm比色皿，可在550nm处测量吸光度。
5.测定步骤5.1 标准曲线绘制分别吸取1％木糖标准溶液1.0、2.0、3.0、4.0、5.0、6.0ml于50ml容量瓶中，用蒸馏水定容至刻度，制成每ml分别含木糖200、400、600、800、1000、1200mg的稀标准液。各取不同浓度的稀标准液0.5ml于试管中，加入pH5.0磷酸氢二钠-柠檬酸缓冲液1.5ml，再加入DNS试剂3.0ml，于沸水浴中沸腾7min，取出后立即加入蒸馏水10ml，摇匀。以蒸馏水0.5ml代替木糖稀标准液作为对照。冷却后，用10mm比色皿，在波长550nm处用分光光度计分别测定其吸光度。以吸光度为纵坐标，相对应的木糖浓度为横坐标，绘制标准曲线或计算回归方程。
5.2待测酶液的制备称取酶粉2.000g，精确至0.0001g，先加蒸馏水40ml，于40℃水浴中浸提30min(期间搅动2～3次)。然后转入50ml容量瓶中，用水定容至刻度，摇匀。用新华1号滤纸过滤(弃去初滤液)，滤液根据酶活力再经适当稀释，供测试用(稀释至被测试液吸光值在0.2～0.4范围内为宜)。
5.3比色测定精确吸取待测稀释酶液0.5ml(每个样品3支平行试管)，加入1.0ml pH5.0磷酸二氢钠-柠檬酸缓冲液，置于40℃水浴预热5min。同时取适量1％木聚糖溶液进行40℃水浴预热。吸取经预热的1％木聚糖溶液0.5ml，加入到经预热的上述酶液试管中，立即开始计时，于40℃水浴精确反应10min，立即加入3.0mlDNS液终止反应，然后在沸水浴中沸腾7min，以后按标准曲线步骤测定样品吸光度。同时进行空白对照测定，其步骤为吸取待测稀释酶液0.5ml。加入1.0ml pH5.0磷酸氢二钠-柠檬酸缓冲液，然后先加入3.0ml DNS液使酶失活，40℃水浴预热，再加入同样经预热的1％木聚糖溶液0.5ml，40℃水浴10min，然后在沸水浴中沸腾7min，以后步骤同于样品测定。
6.计算
X＝cn/(0.5*10)式中X-样品的酶活力，u/g；c-由样品的平均吸光度从标准曲线或回归方程求得的相对应的木糖的量，mg；n-样品的稀释倍数(制备成的酶液ml数/2g酶粉)，0.5-参与反应的酶液量，ml；10-反应时间，min。
在上述资料及其他已经公开的现有技术中，仅公开了对生物单酶酶活的测定方法，而没有公开对该生物酶其他特性的测定方法，特别是现有技术中，均没有公开饲用生物单酶的其他特性的测试方法，因而实践中不能更为全面地了解该单酶的综合特性，因而无法为畜禽、鱼虾等饲料用复合酶制剂的单酶品种的选择、组配及生产加工过程中各环节的合理控制，为获得和保存饲用生物单酶的优良特性，提高含酶饲料效能，提供科学有效的依据。

发明内容
针对现有生物酶技术存在的上述不足，本发明的目的在于，提供一种通过对单酶、混合酶溶液酶活等多项性能测定并绘制相应图表，并通过对所得图表的对比分析，选取最优特性或组配区间，从而为饲料用复合酶制剂的组配及生产加工提供科学有效依据的饲用酶制剂特性的测定方法。
本发明实现上述目的所采用的技术方案是1、一种饲用酶制剂特性的测定方法，其特征在于，其包括如下步骤1)制备一种饲用单酶溶液；2)测试并记录该单酶溶液的热稳定性，根据测试结果绘制图表；3)测试并记录该单酶溶液的PH稳定性，根据测试结果绘制图表；4)测试并记录底物浓度对该单酶活性的影响，根据测试结果绘制图表；5)制备第二种饲用单酶溶液，并重复步骤1)～4)；6)制备第3～第N种饲用单酶溶液，并分别重复步骤5)；7)将前述步骤2)～6)所得图表，对其中任两个或多个图表，采用图表对比法进行对比分析，选取最优特性或组配区间。
所述步骤2)～4)的顺序不分先后。
前述的饲用酶制剂特性的测定方法，其特征在于，所述的步骤4)，还包括测试并记录加工工艺对该单酶活性的影响，并根据测试结果绘制图表。
前述的步骤4)，还可以包括测试并记录其它酶制剂相互混合后对该单酶的影响，并根据测试结果绘制图表。
本发明的优点在于本发明通过各单酶制剂的PH稳定性、热稳定性、底物浓度影响、加工过程影响等酶学性质的测定及对所得图表的对比分析，可以确定饲用单酶制剂是否符合饲料加工、动物日粮以及动物消化生理等方面需求的程度，达到筛选高效饲料转化用单酶、并使其在加工等过程中保存其优良特性的目的，为畜禽、鱼虾等饲料用复合酶制剂的配方及生产提供科学有效的依据。


图1是本发明实施例1中，温度对木聚糖酶活性的影响图。
图2pH对木聚糖酶活性影响图；图3底物浓度对木聚糖酶活性的影响；图4是经不同温度处理后木聚糖酶活性存留情况图；图5是木聚糖酶贮存期间酶活存留情况图；图6是木聚糖酶在不同加工阶段酶活变化情况图；图7是本发明实施例2中，温度对蛋白酶活性的影响图；图8是pH对中性蛋白酶活性的影响图；图9是底物浓度对中性蛋白酶活性的影响图；图10是中性蛋白酶经不同温度处理后酶活变化图；图11是中性蛋白酶贮存期间酶活存留情况图；图12是加工工艺对中性蛋白酶活性的影响图。
具体实施例方式
因饲用酶制剂品种及组配方案数目庞大，本发明实施例无法一一列举，本发明所提供的一般步骤为一种饲用酶制剂特性的测定方法，其包括如下步骤1)制备一种饲用单酶溶液；2)测试并记录该单酶溶液的热稳定性，根据测试结果绘制图表；3)测试并记录该单酶溶液的PH稳定性，根据测试结果绘制图表；4)测试并记录底物浓度对该单酶活性的影响，根据测试结果绘制图表；测试并记录加工工艺对该单酶活性的影响，并根据测试结果绘制图表；测试并记录其它酶制剂相互混合后对该单酶的影响，并根据测试结果绘制图表；5)制备第二种饲用单酶溶液，并重复步骤1)～4)；6)制备第3～第N种饲用单酶溶液，并分别重复步骤5)；7)将前述步骤2)～6)所得图表，对其中任两个或多个图表，采用图表对比法进行对比分析，选取最优特性或组配区间。
实施例1具体的，采用本发明方法，对饲用单酶内切阿拉伯木聚糖酶的特性进行测定与对比分析。
本实施例所使用的内切阿拉伯木聚糖酶(EC 3.2.1.8)和内切中性蛋白酶(EC 3.4.21.62)是分别由Trichoderma longibrachiatum和Bacillussubtilis经液体深层发酵，分离、提纯、浓缩、干燥后制成的饲料专用单酶制品，其具有活性高，抗逆性强，底物专一性等特点。
为了更有效地应用该木聚糖酶，现分别对其pH稳定性、热稳定性、底物浓度等酶学性质进行研究。
首先制备待测内切阿拉伯木聚糖酶溶液，然后进行下列测试并记录测试结果、绘制图表。
首先测试并记录该单酶溶液的热稳定性，根据测试结果绘制图表，所得图表见附图1。经测试，温度对酶反应速度有很大的影响，并且每种酶都有自己的最适温度。因此，在不同温度(20℃、30℃、40℃、50℃、55℃、60℃、70℃、80℃和90℃)其它条件相同的情况下(pH5.3、底物浓度1％)，测定木聚糖酶的活性。
由图1看到木聚糖酶在不同的反应温度下测定的酶活，其活性变化较大，40℃时酶活大于82％，在30℃时酶活仍然大于55％，反应温度在高于60℃后，酶活急剧下降，在60℃到70℃之间酶活从94％下降到60％，这说明，木聚糖酶的活性对反应温度的变化有些敏感。因此，此产品提供的酶活的最适范围温度在40～60℃间，最佳反应温度为55℃，本试验的测定结果基本反应了此产品的的酶活随温度变化的特性。
在实际应用中，由于动物胃肠道内的温度在38～40℃间，从结果来看，此时木聚糖酶活性在80％左右。一方面，虽然动物胃肠道内酶的作用效果可因酶的作用时间较长从而可弥补酶活低的不足，另一方面，可以通过适当提高木聚糖酶在饲料中的添加量来解决这一问题。
再来测试pH对木聚糖酶活性的影响pH也对酶反应速度有很大影响。分别将底物和对应的缓冲稀释液的pH调整到3.0、4.0、5.0、5.3、6.0、6.5、7.0、8.0和9.0，然后在其它条件相同的情况下(温度55℃、底物浓度1％)分别测其酶活，所得图表见附图2。
由图2看出，木聚糖酶在pH＝4～6之间保持较高的活性，平均90％以上，在之外的范围酶活急剧下降，pH＝4的时候，酶活接近80％，但pH＝3时酶活仪为15％，在pH＝6.5时，酶活为55％，在pH＝7时，酶活为23％左右，当pH＝9时，基本上检不出酶的活性。
此酶的酶活最适的pH范围在4～6之间，最佳反应pH的为5.3，本试验的测定结果反应了此酶的酶活随pH变化的特性，说明此酶在偏酸性的条件下有较好的表现。在实际应用中，由于动物胃肠道内的pH偏酸性，所以此木聚糖酶在动物胃肠道内的条件下能够发挥较好的作用。
第三步测试底物浓度对木聚糖酶活性的影响将木聚糖底物分别配制成0.2％、0.4％、0.6％、0.8％和1.0％五个浓度，在保证底物过饱和其它条件相同的情况下(温度55℃、pH5.3)，加入相应量的酶稀释液测定酶活，所得图表见附图3。
由图3可以看出，木聚糖酶的活性随底物浓度的提高活性逐渐增强，在底物浓度达到0.6％(相当于最高活性时底物浓度的60％)时，木聚糖酶的活性基本稳定，并接近了酶活的最高值。这说明，木聚糖酶实际应用中，底物浓度较低时就有可能发挥出最高的活性。
第四步测试经不同温度加工处理后酶活存留情况将固体木聚糖酶在从55℃～100℃(水分含量≤8％)，每间隔5℃的条件下分别处理5分钟，然后测定(pH5.3、温度55℃、底物浓度1％)其酶活，所得图表见附图4。
由图4可以看到，木聚糖酶在干燥的状态下经过累积温度处理后，在不同温度下的酶活表现是先升高后下降，在70℃以前木聚糖酶的活性基本没有损失，70℃以后酶活开始损失，到85℃时酶活存留大于88％，100℃时酶活存留在75％左右。酶活在60-70℃间有升高的现象待进一步验证。
第五步测试其它酶制剂相互混合后对木聚糖酶的影响将木聚糖酶(X1222)分别与蛋白酶(P1222)和淀粉酶(A1222)按表1体积比混合后，常温下放置一个月后测定(pH5.3、温度55℃、底物浓度1％)其中木聚糖酶活性，结果表明蛋白酶和淀粉酶对木聚糖酶的活性并无影响。测试木聚糖酶在贮存期间酶活存留情况将固体木聚糖酶产品(水分含量≤8％)常温下保存，然后每隔两个月取样测定(pH5.3、温度55℃、底物浓度1％)其酶活，结果如图5。
由图5可看出，木聚糖酶在一年内酶活下降不到15％，尤其在前4个月内，酶活下降缓慢不到7.0％，随着时间的延长，酶活会逐渐下降，但速度较平缓。
表1其它酶制剂与木聚糖酶混合后木聚糖酶活性表

注1、表中X1222为固体木聚糖酶，P1222为固体蛋白酶，A1222为固体淀粉酶。2、水分含量小于8％。
第六步测试加工工艺对木聚糖酶活性的影响按照设计标准将1.0公斤活性为25,000U/g的木聚糖酶按1kg/吨的添加量加入小猪饲料后制粒，制粒的条件及温度(75℃左右)与商业饲料厂一致，在不同生产阶段(混合后、调制后、制粒后及打包口)分别取样并测定(pH5.3、温度55℃、底物浓度1％)木聚糖酶的活性，其测试结果见图6。
该木聚糖酶与饲料原料混合后其活性与设计标准相比有明显的下降，只有45％的活性保留下来，但此时并没有经过高温及压力的处理，说明此木聚糖酶与饲料混合后有55％的活性是在实验室的条件下不能检出的。经过高温(75℃左右)调制后，与设计标准相比，此木聚糖酶在饲料中的活性保留率只有37％左右，下降幅度较大，但与混合后相比，此木聚糖酶的活性保留率为82％(45.2对37.2％)，下降幅度仅为18％左右，说明高温(75℃左右)调制对此木聚糖酶的影响不大。制粒过程是高温及压力的结合，此过程对一般的木聚糖酶的活性影响巨大，但此木聚糖酶经过高温及高压的制粒过程后，与调制后相比，酶活的保留率仅下降了12％左右(37.2对32.8％)，与混合后相比，酶活在饲料中的保留率也只下降了27％左右(45.2对32.8％)。打包口的酶活保留率与制粒后的保留率基本一致(32.8对33.5％)。
采用图表对比法进行对比图1、图6分析，说明本实验饲料加工过程中的高温及高压的制粒过程对该木聚糖酶的影响是有限的，整个调制、制粒过程对此木聚糖酶酶活保留率的影响不大于26％(45.2对33.5％)，但此木聚糖酶与饲料原料混合的过程会影响在实验室用现有的方法测定酶活保留率(100对45.2％)，影响酶活测定的原因有诸多，如金属离子的干扰、酶与底物的作用、测定方法的灵敏度等因素。
最后分别对图1～图6进行两两或多幅对比分析阿拉伯木聚糖酶的综合特性；本发明实施例1所使用的内切阿拉伯木聚糖酶(EC 3.2.1.8)的酶学特性具有以下特点(1)酶活反应的最适温度在40～60℃间，最佳温度为55℃，在实际应用中，由于动物胃肠道内的温度在38～40℃间，从结果来看，此时木聚糖酶活性在80％左右；(2)pH在4～6之间，酶活平均在90％以上，最佳反应pH为5.3，在实际应用中，由于动物胃肠道内的pH偏酸性，所以此酶在动物胃肠道内能够发挥较好的作用；(3)酶的活性在底物浓度达到0.6％时活性已基本稳定，并接近最高值，说明此酶在底物浓度较低时就可能发挥出最高的活性；(4)此酶在干燥的状态下经过累积温度处理后，在70℃以前活性没有损失，到85℃时酶活存留大于88％，100℃时酶活存留在75％左右；(5)此木聚糖酶与蛋白酶和淀粉酶按比例混合后储存，测其样品中的木聚糖酶活性，结果表明蛋白酶和淀粉酶对木聚糖酶的活性没有影响；(6)在室温条件下储存半年，其酶活比较稳定，但随着时间的延长，酶活会逐渐下降，酶活平均月下降率为7.3％；(7)此木聚糖酶与饲料原料混合后其活性有明显的下降(100对45.2％)，但饲料加工过程中的制粒过程对该酶酶活的影响有限(45.2对33.5％)，说明此木聚糖酶具有耐高温抗高压，并能在体温下良好发挥作用等特点。影响酶活测定的原因有诸多，如金属离子的干扰、酶与底物的作用、测定方法的灵敏度等因素。
实施例2采用本发明的方法对对中性蛋白酶酶学性质的进行测试。
首先测试温度对中性蛋白酶活性的影响分别在30℃、35℃、40℃、45℃、50℃、60℃、70℃和80℃，而其它条件相同(pH7.5、底物浓度1％)的情况下测中性蛋白酶的酶活，结果作图如图7所示。
由图7看出，中性蛋白酶的随反应温度的变化其酶活变化较大，反应温度在40℃左右时，酶活表现最好，反应温度在35～45℃之间酶活表现达到了90％左右，反应温度超过50℃后，其酶活呈现直线下降趋势，且下降幅度较大。这说明，此中性蛋白酶的最适反应温度在35～45℃之间，且反应活性对反应温度的变化较为敏感。
其次测试pH对中性蛋白酶活性的影响分别配制pH3.0、4.0、5.0、6.0、7.0、7.5、8.0和9.0的底物及相应的缓冲液，在其它条件相同(温度40℃、底物浓度1％)的情况下分别测定中性蛋白酶的活性，其结果如图8所示。
由图8看出，中性蛋白酶的活性在pH＝5～8间较好，pH＝6～7.5间最好。pH≤4时，中性蛋白酶活下降较快，pH≤3时已检测不出酶的活性。因此，此中性蛋白酶的最适pH为6～7.5。
第三步测试底物浓度对蛋白酶活性的影响将底物酪素分别配制成0.2％、0.4％、0.6％、0.8％和1.0％五个浓度，在保证底物过饱和并且其它条件相同的情况下(pH7.5、温度40℃)，加入酶稀释液测定酶活；测试结果如图9所示。
由图9看出，蛋白酶的活性随着底物浓度的升高逐渐增强，在底物浓度为0.4％时活性就已达到了最高活性的80％，0.6％时就基本接近了最高活性，这说明蛋白酶对底物的浓度比较敏感，在较低的浓度下就可以表现现较高的活性。
第四步测试经不同温度处理后中性蛋白酶活存留情况将固体蛋白酶(水分含量≤8％)从55℃～100℃，每间隔5℃的条件下分别处理5分钟后，测定(pH7.5、温度40℃、底物浓度1％)其酶活，结果如图10所示。
由图10可以看到，中性蛋白酶分别经过55℃到90℃处理后，酶活均处于较稳定状态，平均酶活在90％以上，90℃以后才急剧下降，酶活降到20％左右。
第五步测试中性蛋白酶在贮存期间酶活存留情况将固体中性蛋白酶产品(水分含量≤8％)常温下保存，然后每隔两个月取样测定(pH7.5、温度40℃、底物浓度1％)其酶活，结果如图11所示，中性蛋白酶产品在贮存的前6个月内酶活下降非常少，不到5％；随着时间延长酶活会逐渐降低，一年左右酶活下降约10％。说明此中性蛋白酶在常温下非常稳定。
第六步测试加工工艺对中性蛋白酶活性的影响按照设计标准，将2.5千克活性为40,000U/g的中性蛋白酶按2.5kg/吨的添加量加入小猪饲料后制粒，制粒的条件及温度(75℃左右)与商业饲料厂一致，在不同生产阶段(混合后、调制后、制粒后及打包口)分别取样并测定(pH7.5、温度40℃、底物浓度1％)中性蛋白酶的活性，其结果见图12。
与实施例1中木聚糖酶有相似的结果，采用图表对比法对比图1与图12，此中性蛋白酶与饲料原料混合后其活性与设计标准相比有明显的下降(100对65％)，在实验室的条件下，此中性蛋白酶只有65％的活性能测定，即在没有经过高温及压力处理的情况下，45％的酶活已测不到，说明混合过程会影响酶活的测定，影响酶活测定的原因有很多，未来应注重这方面的研究。经过高温调制后，与设计标准相比，此中性蛋白酶在饲料中的活性保留率只有47％左右，下降幅度较大，但与混合后相比，此中性蛋白酶的活性保留率为68％(65对47％)，下降幅度为30％左右，说明高温调制对此中性蛋白酶的一定的影响，但不大。此中性蛋白酶经过高温及高压的制粒过程后，与调制后相比，酶活的保留率仅下降了19％左右(47对38％)，与混合后相比，酶活在饲料中的保留率也只下降了41％左右(65对38％)。打包口的酶活保留率与制粒后的保留率都为38％。
本实验说明饲料加工过程中的高温及高压的制粒过程对该中性蛋白酶的影响是有限的，整个调制、制粒过程对此中性蛋白酶活保留率的影响在40％左右，但此中性蛋白酶与饲料原料混合的过程会影响酶活保留率。
最后分别对图7～图12进行两两或多幅对比分析中性蛋白酶酶学特性，可以得到如下总结本实施例使用的内切中性蛋白酶(EC 3.4.21.62)的酶学特性具有以下特点
(1)此酶酶活随反应温度的变化而变化，在40℃时，酶活表现最好，在35-45℃间酶活表现可达90％左右，说明此酶在动物胃肠道内的温度下能表现良好；(2)中性蛋白酶的活性在pH＝5～8间较好，pH＝6～7.5间最好。pH≤4时，中性蛋白酶活下降较快，此酶在偏酸性由于动物胃肠道内能够发挥较好的作用；(3)此酶在底物浓度为0.4％时即可达到最高活性的80％，0.6％时接近最高活性，说明此酶对底物的浓度比较敏感，在较低的浓度下可以表现较高的活性；(4)中性蛋白酶在干燥的状态下分别经过55℃到90℃处理后，平均酶活在90％以上，90℃以后急剧下降，90℃时酶活降底到20％左右；(5)中性蛋白酶在常温下贮存非常稳定，前3个月酶活下降不到5％；半年后酶活的保存率仍大于65％；(6)与木聚糖酶的结果相似，此酶与饲料混合后其活性有明显的下降(100对65％)，即在没有经过高温及压力处理的情况下，35％的酶活已测不到，说明混合过程会影响酶活的测定。经过高温调制后，与混合后相比，此酶的活性保留率为72％(65对47％)，经过高温高压制粒后，酶活在饲料中的保留率在60％左右(65对38％)。高温高压的制粒加工过程对该酶酶活的影响有限，说明此酶具有耐高温抗高压，并能在体温下良好发挥作用等特点。
综上所述，内切阿拉伯木聚糖酶和内切中性蛋白酶具有活性高，抗逆性强，底物专一性等特点，是符合饲料专用单酶要求的制品。
如本发明上述实施例所述的相同或近似的其他饲用酶制剂特性的测定方法，及采用本发明相同或近似方法的直接启示所得到其他饲用酶制剂特性的测定方法，均在本发明保护范围之内。
权利要求
1.一种饲用酶制剂特性的测定方法，其特征在于，其包括如下步骤1)制备一种饲用单酶溶液；2)测试并记录该单酶溶液的热稳定性，根据测试结果绘制图表；3)测试并记录该单酶溶液的PH稳定性，根据测试结果绘制图表；4)测试并记录底物浓度对该单酶活性的影响，根据测试结果绘制图表；5)制备第二种饲用单酶溶液，并重复步骤1)～4)；6)制备第3～第N种饲用单酶溶液，并分别重复步骤5)；7)将前述步骤2)～6)所得图表，对其中任两个或多个图表，采用图表对比法进行对比分析，选取最优特性或组配区间；所述步骤2)～4)的顺序不分先后。
2.如权利要求1所述的饲用酶制剂特性的测定方法，其特征在于，所述的步骤4)，还包括测试并记录加工工艺对该单酶活性的影响，并根据测试结果绘制图表。
3.如权利要求1或2所述的饲用酶制剂特性的测定方法，其特征在于，所述的步骤4)，还包括测试并记录其它酶制剂相互混合后对该单酶的影响，并根据测试结果绘制图表。
全文摘要
本发明公开了一种饲用酶制剂特性的测定方法，其包括如下步骤1)制备一种饲用单酶溶液；2)测试并记录该单酶溶液的热稳定性，根据测试结果绘制图表；3)测试并记录该单酶溶液的pH稳定性，根据测试结果绘制图表；4)测试并记录底物浓度对该单酶活性的影响，根据测试结果绘制图表；5)制备第二种饲用单酶溶液，并重复步骤1)～4)；6)制备第3～第N种饲用单酶溶液，并分别重复步骤5)；7)将前述步骤2)～6)所得图表，对其中任两个或多个图表，采用图表对比法进行对比分析，选取最优特性或组配区间；所述步骤2)～4)的顺序不分先后。本发明可达到筛选高效饲料转化用单酶、并使其在加工等过程中保存其优良特性的目的。
文档编号G01N33/00GK1975433SQ20061012388
公开日2007年6月6日 申请日期2006年12月1日 优先权日2006年12月1日
发明者于锋, 林春宁 申请人:东莞泛亚太生物科技有限公司