专利名称：一种马铃薯中α-茄碱提取与检测的方法
技术领域：
本发明涉及一种简单、快捷、准确的基于液质联用技术测定马铃技术薯中α-茄碱含量的前处理方法及检测技术，具体讲涉及用快速超声提取从马铃薯肉中提取α-茄碱，并用液质联用技术(LC-MS)对α-茄碱的含量进行检测的技术，
背景技术：
马铃薯(Solanum tuberosum L.)又名土豆、洋芋,是继水稻、小麦、玉米的第四大粮食作物。由于马铃薯植株和块茎中普遍含有一类留体糖苷生物碱，称为茄碱，又叫龙葵素(目前已知的龙葵素有α、β、Y-爺碱或α、β、Y-卡爺碱)具有一定毒性,在马铃薯食用过程中存在一定安全隐患。马铃薯在放置一段时间后，很容易变绿发芽，绿皮与芽中龙葵素含量会迅速上升，过多摄入(发绿马铃薯30g左右)会引起舌头发麻、恶心呕吐、腹泻、头痛、晕眩等不良反应，甚至导致中毒者抽搐、昏迷、呼吸中枢麻痹而死亡。马铃薯消费量巨大，但其检测方法与技术却存在许多问题，一定程度上阻碍了马铃薯的安全预警和质量监管。
权利要求
1.一种马铃薯中α-茄碱提取与检测的方法，其特征在于，步骤包括 (1)α-茄碱提取 取新鲜马铃薯肉，用组织匀浆机粉碎成匀浆，称取样品置于瓶中，加入提取液，密封后，超声提取，将提取液过膜备用； 所述的提取液为体积比=1 I的质量浓度1%甲酸-水/甲醇、体积比=1 I的质量浓度1%盐酸-水/甲醇、质量浓度O. 5%甲酸-水或质量浓度O. 5%盐酸-水； 所述的超声提取在超声频率35kHz下提取时间为5 15min。
(2)液质联用检测α-爺碱 以α -茄碱m/z [M+H]+=868. 78为目标离子，用选择离子监测模式定量，将标准对照液进样检测，以浓度(X，PPb)为横坐标，以峰面积(Y)为纵坐标，绘制标准曲线，得到回归方程，根据回归方程计算α-茄碱的含量。
2.如权利要求I所述的方法，其特征在于，准确称取马铃薯肉O.5 I. 5g ;提取液用量为 50 150mL。
3.如权利要求I所述的方法，其特征在于，所述的提取液为体积比=1:1的质量浓度1%甲酸-水/甲醇。
4.如权利要求I所述的方法，其特征在于，所述超声提取是控制温度在35 45°C。
5.如权利要求I所述的方法，其特征在于，所述膜的孔径为O.22 μ m。
6.如权利要求I所述的方法，其特征在于，所述的标准对照液逐步稀释配制成7. 125ppb, 14. 25ppb, 28. 5ppb, 57ppb, 114ppb, 228ppb, 456ppb 浓度的溶液进行测试,得到回归方程为 Υ=2664· lx+6505. 5，R2=O. 9991。
7.按照权利要求书I所述方法，其特征在于液质联用检测条件为超高效液相色谱串联单四级杆质谱仪型号为UPLC-SQD MS, Waters ;色谱柱型号为Unitary C18规格为2. ImmX 150mm, 5 μ m ;流动相A为O. 1%甲酸-水，流动相B为乙腈；梯度洗脱时间和洗脱液成份分别为 Omin (95%A, 5%B), 5min (50%A, 50%B),6min (5%A, 95%B);柱温为 35 ° C ;流速为0.2mL/min ;进样量为5μ L ;离子源为电喷雾离子源，ESI正离子模式检测；毛细管电压为2.8kV ;锥孔电压为30V ;离子源温度为120° C ;脱溶剂气温度为350° C ;脱溶剂气流速为600L/hr ;锥孔气流速为50L/hr。
全文摘要
本发明公开了一种马铃薯中α-茄碱提取及检测的方法，其步骤包括(1)α-茄碱提取取新鲜马铃薯肉，用组织匀浆机粉碎成匀浆，称取样品置于瓶中，加入提取液，密封后，超声提取，将提取液过膜备用；所述的提取液为体积比=1:1的质量浓度1%甲酸-水/甲醇、体积比=1:1的质量浓度1%盐酸-水/甲醇、质量浓度0.5%甲酸-水或质量浓度0.5%盐酸-水；所述的超声提取在超声频率35kHz下提取时间为5～15min。(2)液质联用检测α-茄碱以α-茄碱m/z[M+H]+=868.78为目标离子，用选择离子监测模式定量，将标准对照液进样检测，以浓度(X，ppb)为横坐标，以峰面积(Y)为纵坐标，绘制标准曲线，得到回归方程，根据回归方程计算α-茄碱的含量。该方法能简单、快捷、准确地检测出马铃薯中α-茄碱。
文档编号G01N30/78GK102866219SQ201210321390
公开日2013年1月9日 申请日期2012年9月3日 优先权日2012年9月3日
发明者熊兴耀, 曾建国, 胡新喜, 伍慧敏, 曾静, 李美 申请人:湖南农业大学