一种利用高效液相色谱仪测定灭螨醌和羟基灭螨醌的方法
【专利摘要】本发明公开了一种利用高效液相色谱仪测定灭螨醌和羟基灭螨醌的方法，包括如下步骤：将样品中可食部分切碎，捣碎，混匀，称取样品于离心管中，加入正己烷和乙酸乙酯，均浆提取，加入无水硫酸钠，再均浆提取，离心处理，取上清液加入到梨形瓶中，在水浴旋转浓缩至微干，加入正己烷和乙酸乙酯，超声溶解得到样品；加样前先用预淋洗萃取柱，然后取提取液转移到净化柱上，再用正己烷和乙酸乙酯混合液洗涤梨形瓶并转移入萃取柱，收集全部流出液；于水浴氮吹干；用流动相溶解并定容到1-2mL，经0.45μm滤膜过滤，滤液作为待测样液；按色谱条件利用高效液相色谱仪进行测定。本发明的方法能准确的检测出灭螨醌和羟基灭螨醌的含量。
【专利说明】一种利用高效液相色谱仪测定灭螨醌和羟基灭螨醌的方法
【技术领域】
[0001]本发明涉及对灭螨醌和羟基灭螨醌的测定方法。
【背景技术】
[0002]灭螨醌(Acequinocyl)学名2-(乙酰氧基)3_十二烷基-1,4_萘醌,纯品为淡黄色粉状固体，分子式C24H32O4, CAS号为57960-19-7，相对分子量384.51，灭螨醌是一种重要的合成杀螨剂农药，是用来控制虱类、螨类和其它无脊椎动物的杀虫剂，灭螨醌的化学结构式如下。
【权利要求】
1.一种利用高效液相色谱仪测定灭螨醌和羟基灭螨醌的方法，其特征在于包括如下步骤:将样品中可食部分切碎，捣碎，然后混匀，准确称取精确到0.01g的样品于IOOmL离心管中，加入体积比为1:1的正己烷和乙酸乙酯，用高速组织捣碎机在11500-12000r/min的转速下，均浆提取l_2min，加入无水硫酸钠，再均浆提取l_2min，在3500_4000r/min的转速下离心5-7mim，取上清液加入到50 mL梨形瓶中，在38_40°C水浴旋转浓缩至微干，加入的体积比为1:1的正己烷和乙酸乙酯，超声30s-35s充分溶解得到样品； 加样前先用体积比为1:1的正己烷和乙酸乙酯预淋洗萃取柱，然后从上述梨形瓶中取提取液转移到净化柱上，再用体积比为1:1的正己烷和乙酸乙酯混合液洗涤梨形瓶并转移入萃取柱，转入流速为1.5-2mL/min，收集全部流出液；于38_40°C水浴氮吹干；用流动相溶解并定容到l_2mL，经0.45 μ m滤膜过滤，滤液作为待测样液；按色谱条件利用高效液相色谱仪进行测定；如溶液色谱图在14.5-16min之间出现波峰，则样品中含有羟基灭螨醌，如溶液色谱图在17.5-19min之间出现波峰，则样品中含有灭螨醌； 其中，色谱条件为: 色谱柱:ZORBAX SB-C18色谱柱(250_X4.6_，10 μ m )，柱温室温25 °C，进样量20 μ L ； 流动相:乙腈:0.1%磷酸=90:10 (体积比),流速1.0mL/min，等度洗脱； 检测器:二极管阵列检测器，检测波长250nm，采用色谱峰的保留时间定性，外标法定量。
2.根据权利要 求1所述的利用高效液相色谱仪测定灭螨醌和羟基灭螨醌的方法，其特征在于:检测波长的确定方法是:取灭螨醌和羟基灭螨醌标准混合溶液，用紫外分光光度计进行波长全扫描分析，扫描波长范围为200nm~400nm，灭螨醌和羟基灭螨醌在扫描波长范围内均有2个较大的吸收峰，其中最大吸收波长为250 nm，确定检测器的检测波长为25Onm为最佳。
3.根据权利要求1所述的利用高效液相色谱仪测定灭螨醌和羟基灭螨醌的方法，其特征在于:高效液相色谱仪选用美国安捷伦公司的1200型且带有二极管阵列检测器的高效液相色谱仪；高速组织捣碎机选用江苏金坛市亿通电子有限公司的BILONJJ-2型高速组织捣碎机；在水浴旋转浓缩过程中使用瑞士步琦有限公司的R-210旋转蒸发仪；在水浴氮吹干过程中使用瑞士步琦公司的21011V001 R200型氮吹仪；称量仪器选用美国丹佛公司的TB215B型电子天平；测定方法中选用美国Millipore公司的Synery UV超纯水系统。
4.根据权利要求1所述的利用高效液相色谱仪测定灭螨醌和羟基灭螨醌的方法，其特征在于:正己烷选自德国MERCK MILLIPORE公司HPLC级正己烷，乙酸乙酯选自德国MERCKMILLIPORE公司HPLC级乙酸乙酯，乙腈选自Mallinckroat Baker公司的HPLC级乙腈。
5.根据权利要求1所述的利用高效液相色谱仪测定灭螨醌和羟基灭螨醌的方法，其特征在于:萃取柱为:Cleanert PestiCarb/NH2, 500mg/6mL。
6.根据权利要求2所述的利用高效液相色谱仪测定灭螨醌和羟基灭螨醌的方法，其特征在于:紫外可见分光光度计选择日本岛津公司的2450型紫外可见分光光度计。
【文档编号】G01N30/88GK103901148SQ201410123413
【公开日】2014年7月2日 申请日期:2014年3月31日 优先权日:2014年3月31日
【发明者】曾铭, 喻零春, 蒋小良, 陈梅 申请人:曾铭