杭白菊中芹菜素和叶黄素的提取及含量测定方法
【专利摘要】本发明公开一种杭白菊中芹菜素和叶黄素的提取及含量测定方法，其特征在于：将杭白菊烘干，粉碎，以料液比1:150～1:20的料液比将杭白菊放入有机溶剂中提取，重复提取1～5次，将提取液经过过滤减压浓缩至蒸干，得到芹菜素和叶黄素。所述测量方法采用高效液相色谱法。本发明操作简单，可以同时提取并测定杭白菊中芹菜素和叶黄素两种物质含量，减少了分别提取测量的繁琐，并最大限度的减少了有效物质的损失，为杭白菊相关产品的进一步推广和深度加工提供理论依据。
【专利说明】杭白菊中芹菜素和叶黄素的提取及含量测定方法
【技术领域】
[0001]本发明涉及物质含量测定范畴，具体涉及的是同时提取杭白菊中芹菜素和叶黄素，并进行含量测定的方法。
【背景技术】
[0002]杭白菊，又名甘菊、白菊花、茶菊、药菊，是甘菊中的佳品。杭白菊主产于浙江桐乡，为道地药材“浙江八味”之一，亦为卫生部新批的药食两用资源。杭白菊有很高的药用价值，还有延年益寿的功效。《补农书》载“甘菊性甘温，久服最有益”，元代《本草衍义补遗》说“菊花能补阴”，李时珍《本草纲目》道“菊能利五脉，调四肢，治头风热补”，可见杭白菊的功效。经常饮用，能增强毛细血管抵抗力，抑制毛细血管的通性，起到抗炎强身的作用。
[0003]芹菜素和叶黄素分别是杭白菊中的有效成分。芹菜素属于黄酮类，分子式C15HltlO5,该物质具有抑制致癌物质的致癌活性，可以作为治疗HIV和其它病毒感染的抗病毒药物、MAP激酶的抑制剂，治疗各种炎症，做抗氧化剂，有镇静、安神、降压功效。叶黄素是类胡萝卜素之一，属光和色素，分子式为C4(iH5602。叶黄素有保护视力的作用，缺乏该物质时易引起黄斑退化和视力模糊，进而出现视力退化近视等症状。叶黄素有较强的氧化作用，能抑制活性氧自由基的活性，阻止活性氧自由基对正常细胞的破坏，同时其还有降低白内障的发生率延缓动脉硬化及抗癌等作用。
[0004]桐乡当地对于杭白菊的应用主要是制作菊花茶，将菊花只进行整体初加工，而对于杭白菊中有效成分的研究很少，更没有将其中的具有保健功能的有效成分进行提取加工做成产品。杭白菊的价值没有得到更好的利用。
[0005]经对现有的技术文献检索发现，专利02128803.8利用乙醇热回流提取真菊中的芹菜素，专利200510097010.2报道了用柚皮素半合成芹菜素的方法，国家标准(GB/T19427-2003)公布了蜂胶中芹菜素含量的测定方法。专利201310149262.X介绍了万寿菊叶黄素制备工艺，国家标准(GB/T23209-2008)公布了奶粉中叶黄素的测定。尚没有文献报道在同一条件下提取杭白菊中芹菜素和叶黄素两种物质，并进行含量测定的方法。
【发明内容】
[0006]针对现有技术中存在的上述不足，本发明的目的是提供一种可以同时提取杭白菊中芹菜素和叶黄素两种物质并进行含量测定的方法。
[0007]根据本发明的一个方面，提供一种可以同时提取芹菜素和叶黄素两种物质的方法，具体为:将杭白菊烘干，粉碎，以料液比1:150?1:20的料液比将杭白菊放入有机溶剂中提取，重复提取I?5次，将提取液经过过滤减压浓缩至蒸干，用甲醇定容，用于检测含量。
[0008]优选地，所述将杭白菊烘干是指:将杭白菊在20?100°C温箱中烘干。
[0009]优选地，所述有机溶剂为常用溶剂，如甲醇、乙醇、丙酮、乙酸乙酯等。
[0010]优选地，所述提取的时间为15?120分钟。[0011 ] 根据本发明的另一方面，提供一种同时对提取溶液进行芹菜素和叶黄素的含量测定方法，具体为高效液相色谱法:
[0012]色谱条件与系统适用性实验:用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，水-乙腈为流动相，检测波长为芹菜素328nm，叶黄素444nm ;
[0013]对照品溶液的制备:精密称取芹菜素和叶黄素对照品适量，置于棕色瓶中，加甲醇制成每ImL含0.0Olmg?0.200mg的溶液，作为对照品溶液；
[0014]供试品溶液的制备:将提取液浓缩蒸干后，用甲醇定容至10?IOOOmL,得到供试品溶液；
[0015]测定法:分别精密吸取不同浓度对照品溶液，得到两种物质标准曲线。精密吸取等量供试品溶液，注入液相色谱仪，测定，所得色谱中，找出与对照品色谱保留时间相同的色谱图，通过峰面积与标准曲线，计算其含量。
[0016]与现有技术相比，本发明具有以下有益效果:
[0017]本发明方法操作简单，可以同时提取并测定杭白菊中芹菜素和叶黄素两种物质含量，减少了分别提取测量的繁琐，并最大限度的减少了有效物质的损失，为杭白菊相关产品的进一步推广和深度加工提供理论依据。
【具体实施方式】
[0018]下面结合具体实施例对本发明进行详细说明。以下实施例将有助于本领域的技术人员进一步理解本发明，但不以任何形式限制本发明。应当指出的是，对本领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明构思的前提下，还可以做出若干变形和改进。这些都属于本发明的保护范围。以下实施例中没有详细说明的部分均可以采用现有技术实现。
[0019]实施例1
[0020]将杭白菊在20°C温箱中烘干，粉碎，取Ig杭白菊在50mL95%酒精中提取120分钟，重复提取3次，将提取液经过过滤减压浓缩至蒸干，用甲醇定容至10mL，使用HPLC检测。
[0021]色谱条件与系统适用性实验:用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，甲醇-水-乙腈为流动相，检测波长为芹菜素328nm，叶黄素444nm ；
[0022]对照品溶液的制备:精密称取芹菜素和叶黄素对照品，置于棕色瓶中，加甲醇制成每ImL含IOug的溶液，作为对照品溶液；
[0023]供试品溶液的制备:将提取液浓缩蒸干后，用甲醇定容至10mL，得到供试品溶液；
[0024]测定法:分别精密吸取不同浓度对照品溶液，得到两种物质标准曲线，精密吸取5ul供试品溶液，注入液相色谱仪，测定，所得色谱中，找出与对照品色谱保留时间相同的色谱图，通过峰面积与标准曲线，计算其含量，得到Ig干菊花中含芹菜素为3.4mg，叶黄素
0.07mgo
[0025]实施例2
[0026]将杭白菊在100°C温箱中烘干，粉碎，取2g杭白菊在50mL丙酮中提取30分钟，重复提取2次，将提取液经过过滤减压浓缩至蒸干，用甲醇定容至IOOmL,使用HPLC检测。
[0027]色谱条件与系统适用性实验:用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，甲醇-水-乙腈为流动相，检测波长为芹菜素328nm，叶黄素444nm ；
[0028]对照品溶液的制备:精密称取芹菜素和叶黄素对照品，置于棕色瓶中，加甲醇制成每ImL含20ug的溶液，作为对照品溶液；
[0029]供试品溶液的制备:将提取液浓缩蒸干后，用甲醇定容至50mL，得到供试品溶液；
[0030]测定法:分别精密吸取不同浓度对照品溶液，得到两种物质标准曲线，精密吸取IOul供试品溶液，注入液相色谱仪，测定，所得色谱中，找出与对照品色谱保留时间相同的色谱图，通过峰面积与标准曲线，计算其含量，得到Ig干菊花中含芹菜素为5.2mg，叶黄素
0.04mgo
[0031]实施例3
[0032]将杭白菊在50°C温箱中烘干，粉碎，取Ig杭白菊在30mL丙酮中提取60分钟，重复提取I次，将提取液经过过滤减压浓缩至蒸干，用甲醇定容至10mL，使用HPLC检测。
[0033]色谱条件与系统适用性实验:用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，甲醇-水-乙腈为流动相，检测波长为芹菜素328nm，叶黄素444nm ；
[0034]对照品溶液的制备:精密称取芹菜素和叶黄素对照品，置于棕色瓶中，加甲醇制成每ImL含50ug的溶液，作为对照品溶液；
[0035]供试品溶液的制备:将提取液浓缩蒸干后，用甲醇定容至25mL，得到供试品溶液；
[0036]测定法:分别精密吸取不同浓度对照品溶液，得到两种物质标准曲线，精密吸取5ul供试品溶液，注入液相色谱仪，测定，所得色谱中，找出与对照品色谱保留时间相同的色谱图，通过峰面积与标准曲线，计算其含量，得到Ig干菊花中含芹菜素为3.9mg，叶黄素
0.05mgo
[0037]实施例4
[0038]将杭白菊在100°C温箱中烘干，粉碎，取5g杭白菊在150mL甲醇中提取15分钟，重复提取3次，将提取液经过过滤减压浓缩至蒸干，用甲醇定容至10mL，使用HPLC检测。
[0039]色谱条件与系统适用性实验:用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，甲醇-水-乙腈为流动相，检测波长为芹菜素328nm，叶黄素444nm ；
[0040]对照品溶液的制备:精密称取芹菜素和叶黄素对照品，置于棕色瓶中，加甲醇制成每ImL含50ug的溶液，作为对照品溶液；
[0041]供试品溶液的制备:将提取液浓缩蒸干后，用甲醇定容至IOOmL,得到供试品溶液；
[0042]测定法:分别精密吸取不同浓度对照品溶液，得到两种物质标准曲线，精密吸取20ul供试品溶液，注入液相色谱仪，测定，所得色谱中，找出与对照品色谱保留时间相同的色谱图，通过峰面积与标准曲线，计算其含量，得到Ig干菊花中含芹菜素为6.7mg，叶黄素
0.06mgo
[0043]以上对本发明的具体实施例进行了描述。需要理解的是，本发明并不局限于上述特定实施方式，本领域技术人员可以在权利要求的范围内做出各种变形或修改，这并不影响本发明的实质内容。
【权利要求】
1.一种杭白菊中芹菜素和叶黄素的提取方法，其特征在于:将杭白菊烘干，粉碎，以1:150?1:20的料液比将杭白菊放入有机溶剂中提取，重复提取I?5次，将提取液经过过滤减压浓缩至蒸干，得到芹菜素和叶黄素。
2.根据权利要求1所述的杭白菊中芹菜素和叶黄素的提取方法，其特征在于，所述将杭白菊烘干是指:将杭白菊在20?100°C温箱中烘干。
3.根据权利要求1所述的杭白菊中芹菜素和叶黄素的提取方法，其特征在于，所述有机溶剂为甲醇、乙醇、丙酮、乙酸乙酯中一种。
4.根据权利要求1-3任一项所述的杭白菊中芹菜素和叶黄素的提取方法，其特征在于，所述提取的时间为15?120分钟。
5.—种权利要求1-4任一项所述方法提取得到的杭白菊中芹菜素和叶黄素的测量方法，其特征在于，所述测量方法采用高效液相色谱法，具体为: 色谱条件与系统适用性实验:用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，甲醇-水-乙腈为流动相，检测波长为:芹菜素328nm，叶黄素444nm ； 对照品溶液的制备:精密称取芹菜素和叶黄素对照品，置于棕色瓶中，加甲醇制成每ImL含0.0Olmg?0.200mg的溶液,作为对照品溶液； 供试品溶液的制备:将提取液浓缩蒸干后，用甲醇定容至10?IOOOmL,得到供试品溶液； 测定法:分别精密吸取不同浓度对照品溶液，得到两种物质标准曲线，精密吸取等量供试品溶液，注入液相色谱仪，测定，所得色谱中，找出与对照品色谱保留时间相同的色谱图，通过峰面积与标准曲线，计算其含量。
【文档编号】G01N30/06GK103940927SQ201410175271
【公开日】2014年7月23日 申请日期:2014年4月28日 优先权日:2014年4月28日
【发明者】代光辉, 王艳艳, 桂娟, 王新华, 陈义娟, 庞倩茹, 郭松, 朱慧郅, 姚琳琳, 周洁 申请人:上海交通大学