专利名称：从含叶黄素的植物中提取叶黄素的方法
技术领域：
本发明涉及生物制药原料的提取工艺，特别是从植物中提取用于制药的高纯度叶黄素的方法。
背景技术：
目前叶黄素的主要用途是在仪器和饮料工业中利用其着色性作为天然色素；在饮料中作填加剂，增添金黄色色泽，所以目前提纯叶黄素的方法都是运用化学方法以得到未脱脂的叶黄素称为叶黄素树脂。其缺点是不能将其药用功能应用在人体上，发挥更大的社会效益，叶黄素有效功用的根源是它的分子式中含有大量的不饱和键，它可以与光能结合，吸收剩余光能，防止视网膜遭受光氧化的损坏，从而使叶黄素能够达到药用价值。要在制药工业中作为基本原料，必须制备高纯度的叶黄素，并且在制取中保持其有效活性。申请号为97181210，名称为“从玉米麸粉中回收叶黄素的改良方法”记载了一种回收叶黄素的方法，该方法是将较干的玉米麸粉用有机醇进行提取，然后进行皂化反应，将叶黄素酯转换成叶黄素，该发明还描述了通过以下步骤从玉米麸粉中回收叶黄素的方法用含抗氧化剂的第一溶剂对较干的玉米麸粉进行提取，然后可任选地将所得提取物纯化。该发明基本能得到制药业所需结晶与得率的叶黄素，但所述方法仅仅描述的是化学分离方法，叶黄素的结晶和得率难以进一步提高，且叶黄素的功效成分含量不够。
发明内容
本发明需要解决现有技术中叶黄素在应用到制药工业时功效成分含量不够、结晶和得率不高的缺陷，提供一种能大幅度提高叶黄素功效成分，结晶和得率均较高的叶黄素的制备方法。
本发明解决上述技术问题采取的步骤是基本步骤是第一步细胞破壁；第二步超临界萃取；第三步发酵；第四步皂化反应。
具体地，第一步的细胞破壁可采取物理法即主要用磨碎方法进行破壁，也可采用化学法即化学刀破壁，还可采用生物法即生物降解法破壁，另外还有物理法和生物降解的结合的方法，即采摘的含叶黄素的植物用弱碱浸泡(在大池中)10小时后，磨碎。
第二步超临界萃取将第一步所得已破壁的植物进行超临界萃取。超临界萃取的控制在200兆帕。
第三步发酵将第二步所得萃取物装入发酵池中进行避光发酵2-4天，常温、常压下，离心取上清液，加入热的正乙烷搅拌，利用减压蒸馏去正乙烷得到约原植物含量10％的粗品。
上述避光发酵的最佳时间为72小时。
第四步皂化反应细分为碱化、密封搅拌、过滤、冲洗、结晶和冷冻干燥六个细步，即取适量第三步所得粗品在室温条件下加入碱，经搅拌升温至50摄氏度以上，反应一段时间后，慢慢加入适量的热水并均匀搅拌，然后快速过滤，滤饼再用适量的醇化合物冲洗，冲洗完后的滤饼利用重结晶技术，纯化得到晶体，冷冻干燥即为叶黄素产品。
上述碱化可分为两个步骤1、依照萃取量加入10-18％碱，反应15-30分钟，温度25-60摄氏度，压力5-15P；2、加10-15％碱，温度升至50-80摄氏度，反应8-12小时，压力为5-15P。
上述密封搅拌是将碱化过程所得物加入30-50％的水，水温在40-60摄氏度密封搅拌。
上述过滤的速度为2-5升/分钟。
上述冲洗是滤液加5-10％的乙二醇冲洗。
上述结晶是指在温度25-40摄氏度，压力3-10P条件下结晶。
上述冷冻干燥是在-1-4摄氏度，压力5-10P，干燥2-5小时。
本发明与现有技术相比，增加了破壁和发酵步骤，同时皂化反应步骤更细更充分，每一环节紧密相连，组合成提取高纯度叶黄素的有机步骤。因此采用本方法不但保持了有效活性，结晶和得率都得到提高，结晶纯度高于现有美国同类产品20％。
对于已被粉碎的植物，可直接进行步骤二到四。
具体实施例方式实施例1步骤一选用含叶黄素的万寿菊，采摘万寿菊花瓣在弱碱池内浸泡10小时后，磨碎；步骤二在压力200兆帕条件下对步骤一所得物进行超临界萃取；步骤三将步骤二所得萃取物装入发酵池中进行避光发酵72小时，常温、常压下，离心取上清液，加上4倍的热的正乙烷(50-60摄氏度)搅拌1小时，利用减压蒸馏除去正乙烷得到约花瓣10％的粗品。
步骤四取粗品4Kg，加入15％氢氧化钠0.6Kg及1.2Kg丙烯乙二醇，搅拌15分钟，反应15分钟，又加入0.4Kg碱液，反应8小时，温度70摄氏度，压力5P，反应后加入1.5Kg温水密封搅拌，搅拌后其以每分钟2升/分钟的速度过滤，滤液再加入0.5Kg乙二醇冲洗，用40分钟过滤，结晶，在0摄氏度干燥箱干燥，得0.4Kg产品。
实施例2前三步与实施例1相同，取30Kg粗品，在摄氏20度条件下加入50％NaOH溶液并均匀进行搅拌(加碱时间约为40分钟为宜)，然后将温度升至50度进行搅拌，10小时后，慢慢加入适量的热水并搅拌均匀，然后快速过滤，过滤速度可选择5升/分钟，滤饼再用适量的酒精进行冲洗，冲洗完后的滤饼利用重结晶技术，纯化得到叶黄素50％和90％两种晶体，冷冻干燥即为叶黄素产品。
权利要求
1.一种从含叶黄素的植物中提取叶黄素的方法，其特征在于该方法由四个步骤组成，即第一步细胞破壁；第二步超临界萃取；第三步发酵；第四步皂化反应。
2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于所述的细胞破壁是指将采摘的含叶黄素的植物用弱碱浸泡(在大池中)10小时后，磨碎。
3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于所述的发酵是将第二步所得萃取物装入发酵池中进行避光发酵2-4天，常温、常压下，离心取上清液，加入热的正乙烷搅拌，利用减压蒸馏去正乙烷得到约原植物含量10％的粗品。
4.根据权利要求3所述的方法，其特征在于所述避光发酵的最佳时间为72小时。
5.根据权利要求1所述的方法，其特征在于所述的皂化反应细分为碱化、密封搅拌、过滤、冲洗、结晶和冷冻干燥六个细步，即取适量第三步所得粗品在室温条件下加入碱，经搅拌升温至50摄氏度以上，反应一段时间后，慢慢加入适量的热水并均匀搅拌，然后快速过滤，滤饼再用适量的醇化合物冲洗，冲洗完后的滤饼利用重结晶技术，纯化得到晶体，冷冻干燥即为叶黄素产品。
6.根据权利要求5所述的方法，其特征在于所述碱化可分为两个步骤1、依照萃取量加入10-18％碱，反应15-30分钟，温度25-60摄氏度，压力5-15P；2、加10-15％碱，温度升至50-80摄氏度，反应8-12小时，压力为5-15P。
7.根据权利要求5所述的方法，其特征在于所述密封搅拌是将碱化过程所得物加入30-50％的水，水温在40-60摄氏度密封搅拌。
8.根据权利要求5所述的方法，其特征在于上述过滤的速度为2-5升/分钟；冲洗是滤液加5-10％的乙二醇冲洗；结晶是指在温度25-40摄氏度，压力3-10P条件下结晶；冷冻干燥是在-1--4摄氏度，压力5-10P条件下干燥2-5小时。
全文摘要
从含叶黄素的植物中提取叶黄素的方法，本发明涉及从植物中提取用于制药的高纯度叶黄素的方法。本发明需要解决现有技术中叶黄素在运用到制药工业时功效成分含量不够、结晶和得率不高的缺陷，本发明由四个步骤组成，即第一步细胞破壁；第二步超临界萃取；第三步发酵；第四步皂化反应。本发明方法制得的高纯度叶黄素可广泛应用于治疗眼疾药物的制药工业中。
文档编号C09B61/00GK1394915SQ0112017
公开日2003年2月5日 申请日期2001年7月10日 优先权日2001年7月10日
发明者徐甘明 申请人:徐甘明