技术领域本发明涉及实验室检测领域，特别是一种人参叶中人参皂苷的分析方法。
背景技术：
2015年药典记载：取本品粉末约0.2g，精密称定，置索氏提取器中，加三氯甲烷30ml，加热回流1小时，弃去三氯甲烷液，药渣挥去三氯甲烷，加甲醇30ml，加热回流3小时，提取液低温蒸干，加水10ml使溶解，加石油醚(30～60℃)提取2次，每次10ml，弃去醚液，水液通过D101型大孔吸附树脂柱(内径为1.5cm，柱长为15cm)，以水50ml洗脱，弃去水液。再用20％乙醇50ml洗脱，弃去20％乙醇洗脱液，继用80％乙醇80ml洗脱，收集洗脱液70ml，蒸干，残渣加甲醇溶解，转移至10ml量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，即得。LC测试的条件为：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以乙腈-0.05％磷酸溶液(20：80)为流动相；检测波长为203nm。理论板数按人参皂苷Re峰计算应不低于1500。在大孔吸附树脂柱分离人参皂苷的过程中，分离效率受到大孔吸附树脂柱的活性、洗脱效率等因素的影响，在测试的过程中，测试重复性差。为了改进这一问题，我们开发出了一种采用甲醇作为萃取剂的ASE快速萃取人参皂苷的方法，该方法能快速的提取人参皂苷，且提取精度也较高。但是，在测试过程中，我们发现采用甲醇萃取时萃取精度不稳定。
技术实现要素：
本发明的目的是提供一种人参叶中人参皂苷的分析方法，该方法检测精度高，萃取简单，萃取效果要高于药典的方法。本发明提供的技术方案为：一种人参叶中人参皂苷的分析方法，包括以下步骤：步骤1：将人参叶粉碎后采用ASE萃取法得到萃取液；其中，步骤1具体包括：S11：将0.2重量份人参叶粉碎后与1重量份石英砂混合均匀；S12：将混合物加入到铺设有硅藻土的萃取池中，然后继续加入硅藻土直至达到萃取池池口，盖上萃取池的盖子，采用ASE萃取法进行萃取；萃取条件为：萃取溶剂为体积比为1：1的乙醇和甲醇的混合物，萃取温度100℃；静态萃取时间5min；冲洗体积100％；静态循环次数1次；静态萃取的压力为1500psi；步骤2：将萃取液在石墨碳SPE柱存在的条件下离心，对离心后的液体过滤得到滤液；步骤3：将滤液采用液相色谱法分析；液相色谱分析条件为：a)仪器：双三元液相色谱仪b)色谱柱：50×2.1mm1.7μmc)柱温：40℃d)流速：0.3mL/mine)流动相：乙腈-水；梯度洗脱；其中梯度洗脱具体为在0-1min时流动相为乙腈：水，其体积比为60:40；1-3min时流动相为乙腈：水，其体积比为70:30；3-8min时流动相为乙腈：水，其体积比为80:20；f)检测波长：203nm。在上述的人参叶中人参皂苷的分析方法中，所述的萃取池的体积为10ml。在上述的人参叶中人参皂苷的分析方法中，所述的步骤2具体为将萃取液稀释后加入到离心管中净化，然后过滤后得到滤液，所述的离心管中加有石墨碳SPE柱。在上述的人参叶中人参皂苷的分析方法中，所述的双三元液相色谱仪为ThermoU3000UHPLC液相色谱仪，所述的色谱柱为ThermoSyncronisC18色谱柱，所述的ASE萃取法采用的是ASE350快速溶剂萃取仪。本发明在采用上述技术方案后，其具有的有益效果为：本发明的检测精度高，萃取简单，萃取效果相比于药典要高。具体实施方式下面结合具体实施方式，对本发明的技术方案作进一步的详细说明，但不构成对本发明的任何限制。实施例1：将人参叶样品经粉碎机粉碎，过三号筛，约0.2g，精密称定，与1g石英砂混合均匀，待用，移入到预先放好过滤膜的ASE10ml萃取池中再加入适量硅藻土，轻轻振摇使之与池口在同一水平线上，拧紧萃取池上盖。萃取结束后，把萃取液转移至蒸发皿中蒸干后用甲醇溶解并定容至10mL容量瓶，吸取1ml样品液加入装有100mg石墨碳SPE柱的2ml离心管进行净化，溶液过0.22微米滤膜后进入HPLC测定。萃取条件(见表1)为：表1分析方法为LC液相色谱法，液相色谱分析条件：a)仪器：Thermo双三元液相(U-3000)b)色谱柱：ThermoSyncronisC181.7μm50×2.1mm，即碳18色谱柱的直径2.1mm，长度50mm，粒径1.7μm；c)柱温：40℃d)流速：0.3mL/mine)流动相：乙腈-水梯度洗脱(1min乙腈：水的体积比为60:40；1-3min乙腈：水的体积比为70:30；3-8min乙腈：水的体积比为80:20，在本实施例中的体积比均为20℃的条件下的体积比)f)检测波长：203nm对比例1将人参叶样品经粉碎机粉碎，过三号筛，约0.2g，精密称定，与1g硅藻土混合均匀，待用，移入到预先放好过滤膜的ASE10ml萃取池中再加入适量硅藻土，轻轻振摇使之与池口在同一水平线上，拧紧萃取池上盖。萃取结束后，把萃取液转移至蒸发皿中蒸干后用甲醇溶解并定容至10mL容量瓶，吸取1ml样品液加入装有100mgGCB的2ml离心管进行净化，溶液过0.22微米滤膜后进入HPLC测定。萃取条件(见表2)为：表2分析方法为LC液相色谱法，液相色谱分析条件：a)仪器：Thermo双三元液相(U-3000)b)色谱柱：ThermoSyncronisC18；1.7μm50×2.1mmc)柱温：40℃d)流速：0.3mL/mine)流动相：乙腈-水梯度洗脱(1min乙腈：水的体积比为60:40；1-3min乙腈：水的体积比为70:30；3-8min乙腈：水的体积比为80:20)f)检测波长：203nm1.2实施例1的萃取方法的精确度测试采用实施例1、对比例1的ASE萃取方法和药典的萃取方法对人参叶进行萃取，人参叶为3批，批号分别为15071601，120303，1407221；实施例1的ASE萃取方法对同一批次的人参叶采用相同规格的设备平行测试两次，分别为ASE1和ASE2表示。具体测试结果见下表3；表3以上所述的仅为本发明的较佳实施例，凡在本发明的精神和原则范围内所作的任何修改、等同替换和改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。