1.一种用于鉴别与靶蛋白上的变构位点结合的试剂B的方法,该方法包括:
a.使靶蛋白与试剂A接触,试剂A与靶蛋白的活性位点结合,或者其中试剂A在被分离时与靶蛋白的活性位点天然结合;以及
b.使靶蛋白与试剂B接触,其中用在界面处具有净取向的二次谐波活性部分标记靶蛋白,其中采用表面选择性技术由二次谐波活性部分产生可检测信号,并且其中所述可检测信号指示在试剂B与靶蛋白上的变构位点结合时所产生的靶蛋白结构的构象变化;以及
c.测定靶蛋白与试剂B接触后所述可检测信号的存在或不存在。
2.如权利要求1所述的方法,其中所述二次谐波活性部分选自PyMPO-MALEIMIDETM(1-(2-马来酰亚胺基乙基)-4-(5-(4-甲氧基苯基)噁唑-2-基)吡啶鎓甲磺酸盐)、PyMPO-NHS、PyMPO-琥珀酰亚胺酯、BADANTM(6-溴乙酰基-2-二甲基氨基萘)和ACRYLODANTM(6-丙烯酰基-2-二甲基氨基萘)。
3.如权利要求1所述的方法,其中所述二次谐波活性部分通过靶蛋白表面上的一个或多个巯基基团与靶蛋白结合。
4.如权利要求3所述的方法,其中所述一个或多个巯基基团是天然的巯基基团。
5.如权利要求3所述的方法,其中所述一个或多个巯基基团是工程化的巯基基团。
6.如权利要求5所述的方法,其中所述一个或多个巯基基团位于已知与一个或多个配体接触的靶蛋白氨基酸残基上。
7.如权利要求2所述的方法,其中所述二次谐波活性部分是PyMPO-MALEIMIDETM(1-(2-马来酰亚胺基乙基)-4-(5-(4-甲氧基苯基)噁唑-2-基)吡啶鎓甲磺酸盐)。
8.如权利要求2所述的方法,其中所述二次谐波活性部分通过靶蛋白表面上的一个或多个胺基团与靶蛋白结合。
9.如权利要求8所述的方法,其中所述一个或多个胺基团是天然的胺基团。
10.如权利要求8所述的方法,其中所述一个或多个胺基团是工程化的胺基团。