一种C反应蛋白唾液检测试纸条及其制备方法与流程

文档序号:15992836发布日期:2018-11-20 18:14阅读:来源:国知局

技术特征:

1.一种C反应蛋白唾液检测试纸条,包括反应膜和金标垫,其特征在于,所述反应膜为硝酸纤维素膜,其具有分别包被C反应蛋白单克隆抗体的检测线和羊抗鼠IgG的质控线;所述金标垫是包被有胶体金标记的C反应蛋白单克隆抗体的聚酯膜;

所述金标垫是将金标复合物喷涂到聚酯膜上制备的,制备金标复合物时,首先将C反应蛋白单克隆抗体用稀释液稀释后加入到胶体金溶液中,并添加溶剂使胶体金粒子和抗体能够结合到一起,将已标记的胶体金溶液离心后取沉淀物,沉淀物再用金标复溶液溶解混匀即得;

所述复溶液是由终浓度为0.01~0.2mol/L Tris,1%~5%BSA或0.01%~0.2%酪蛋白,1%~3%海藻糖,1%~5%蔗糖,0.1%~2%曲拉通X-100,0.1%~0.5%土温-20,0.1%~1%PEG20000,0.1%~2%氯化钠或0.1%~2%氢氧化钠,0.05%~0.1%叠氮钠配制而成,HCl调节pH值为7.0~8.0;

所述C反应蛋白单克隆抗体为鼠抗C反应蛋白单克隆抗体;

所述金标垫中胶体金标记的C反应蛋白的单克隆抗体的pH值为8.0~8.5,胶体金和C反应蛋白单克隆抗体的配比为6~24μg/ml胶体金;

所述C反应蛋白单克隆抗体的包被浓度为0.5~1.2mg/ml,所述羊抗鼠IgG的包被浓度为0.8~1.5mg/ml;

所述包被浓度是由抗体稀释液稀释抗体获得的,稀释液是终浓度为0.01~0.2mol/L Tris,1%~3%海藻糖,1%~3%蔗糖,0.05%~0.1%叠氮钠;HCl调节pH值为7.2~7.8;

所述测试纸条还包括PVC塑料底板、上样垫、吸水垫;所述PVC塑料底板上依次相互搭接粘贴的上样垫、金标垫、反应膜和吸水垫;

所述上样垫含有上样垫处理液,处理液配方为:0.85%氯化钠,1%~2%尿素,0.1%~0.5%土温-20,0.1%~0.5%S9表面活性剂,所述浓度均为配置后的终浓度;HCl调节pH值为8.0~9.0。

2.一种制备权利要求1所述检测试纸条的方法,其包括如下步骤:

步骤一,制备C反应蛋白的单克隆抗体;

步骤二,制备硝酸纤维素膜:用抗体稀释液将C反应蛋白单克隆抗体稀释为浓度为0.5~1.2mg/ml、将羊抗鼠IgG稀释为浓度为0.8~1.5mg/ml,喷于硝酸纤维素膜上,分别形成检测线和质控线,且于37℃中干燥8~24小时,备用;所述抗体稀释液由终浓度为0.01~0.2mol/l Tris,1%~3%海藻糖,1%~3%蔗糖,0.05%~0.1%叠氮钠配制而成,HCl调节pH值为7.2~7.8;

步骤三,制备金标垫:C反应蛋白单克隆抗体标记胶体金的pH值为8.0~8.5,以6~24μg/ml胶体金加入C反应蛋白的单克隆抗体,摇匀后静置,按质量比0.5‰~1‰,加入1%的PEG20000,摇匀、再加入10%的BSA,摇匀静置,离心,取沉淀物,用复溶液按原初始标记时所用胶体金溶液体积的5%~30%复溶,将复溶后的胶体金标记物喷涂于聚酯膜上,37℃,烘干8~24小时,得到金标垫;所述复溶液是由终浓度为0.01~0.2mol/L Tris,1%~5%BSA或0.01%~0.2%络蛋白,1%~3%海藻糖,1%~5%蔗糖,0.1%~2%曲拉通X-100,0.1%~0.5%土温-20,0.1%~1%PEG20000,0.1%~2%氯化钠或0.1%~2%氢氧化钠,0.05%~0.1%叠氮钠配制而成,HCl调节pH值为7.0~8.0;

步骤四,在反应支持物上依次相互搭接粘贴上样垫、金标垫、硝酸纤维素膜和吸水垫。

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