双面染色装置的制作方法

本实用新型涉及免疫组织化学/免疫荧光染色装置领域，尤其是涉及一种双面染色装置。

背景技术：

免疫组化技术在生命科学领域应用十分广泛，但要想获得满意的染色结果实属不易，即使是具有多年分子生物学实验经验的专业人员也往往难以做到，究其原因主要是因为免疫组化染色对抗体特异性和结合力要求很高，而经过固定的组织抗原往往与对应的抗体间的结合力锐减，导致染色结果不理想。传统的免疫组化染色都是在载玻片上采用单面(组织游离面)抗体孵化和染色的方法，这种方法的局限是抗原与抗体结合不够充分，因此，染色结果不尽人意。

技术实现要素：

基于此，有必要针对传统的免疫组化染色过程中抗原与抗体结合不够充分的问题，提供一种能够提高染色效果的双面染色装置。

一种双面染色装置，包括支架、第一透明载体以及第二透明载体；所述支架上设有分别用于供所述第一透明载体与所述第二透明载体插入的第一插槽和第二插槽，所述第一透明载体与所述第二透明载体分别插入所述第一插槽和所述第二插槽后平行且之间具有间隙；所述第一透明载体具有沿其厚度方向贯穿的微孔。

在其中一个实施例中，所述第一透明载体上微孔的数量为多个。

在其中一个实施例中，多个所述微孔呈阵列分布在所述第一透明载体的中部。

在其中一个实施例中，所述微孔的孔径范围为5μm～500μm。

在其中一个实施例中，所述第一透明载体为具有多微孔结构的盖玻片或硬质塑料薄膜。

在其中一个实施例中，所述第一透明载体的厚度小于所述第二透明载体的厚度。

在其中一个实施例中，所述第二透明载体为载玻片。

在其中一个实施例中，所述第一插槽与所述第二插槽之间的距离为0.5mm～5mm。

在其中一个实施例中，所述第一插槽与所述第二插槽之间的距离为1mm～2mm。

在其中一个实施例中，所述支架包括固定部以及连接部，所述固定部有两个，两个所述固定部相对设置，各所述固定部在内侧设有所述第一插槽和第二插槽，两个所述固定部在靠近所述第二插槽的一侧通过所述连接部连接。

上述双面染色装置通过在第一透明载体上设置微孔，当将组织切片等样品固定在该第一透明载体上时，可以在该第一透明载体的表面以及第一透明载体与第二透明载体之间加入抗体、染液等检测试剂，从而位于微孔内的样品可以两面都接触抗体等检测试剂，从而可以双面染色，得到的染色效果及检测信号较之传统的单面染色有显著提高和增强。

附图说明

图1为一实施方式的双面染色装置的组装示意图；

图2为图1中支架的结构示意图；

图3为图1中第一透明载体的结构示意图；

图4为图1中第二透明载体的结构示意图。

具体实施方式

为了便于理解本实用新型，下面将参照相关附图对本实用新型进行更全面的描述。附图中给出了本实用新型的较佳实施例。但是，本实用新型可以以许多不同的形式来实现，并不限于本文所描述的实施例。相反地，提供这些实施例的目的是使对本实用新型的公开内容的理解更加透彻全面。

需要说明的是，当元件被称为“固定于”另一个元件，它可以直接在另一个元件上或者也可以存在居中的元件。当一个元件被认为是“连接”另一个元件，它可以是直接连接到另一个元件或者可能同时存在居中元件。

除非另有定义，本文所使用的所有的技术和科学术语与属于本实用新型的技术领域的技术人员通常理解的含义相同。本文中在本实用新型的说明书中所使用的术语只是为了描述具体的实施例的目的，不是旨在于限制本实用新型。本文所使用的术语“和/或”包括一个或多个相关的所列项目的任意的和所有的组合。

如图1所示，一实施方式的双面染色装置10包括支架100、第一透明载体200以及第二透明载体300。第一透明载体200以及第二透明载体300能够安装在支架100上。

具体地，请结合图1和图2，在本实施方式中，支架100上设有分别用于供第一透明载体200与第二透明载体300插入的第一插槽102和第二插槽104。第一透明载体200与第二透明载体300分别插入第一插槽102和第二插槽104后平行且之间具有间隙。

在一个更具体的实施例中，支架100包括固定部110以及连接部120。固定部110有两个，两个固定部110相对设置。各固定部110在内侧设有上述第一插槽102和第二插槽104。两个固定部110上的第一插槽102相对设置，且两个固定部110上的第二插槽104相对设置。第一插槽102及第二插槽104沿支架100的长度方向延伸。连接部120为平板状结构，两个固定部110在靠近第二插槽104的一侧通过连接部120连接。

进一步，在一个实施例中，两个固定部110的末端之间还连接有挡板。两个固定部110、一个连接部120以及挡板配合构成在一端开口和上部开口的矩形框，端部开口用于供第一透明载体200和第二透明载体300插入，上部开口用于供检测仪器观察检测。

支架100可采用耐高温的塑料制作成型。

请结合图1和图3，在本实施例中，第一透明载体200具有沿其厚度方向贯穿的微孔202。第一透明载体200用于固定组织切片等样品，通过在第一透明载体200上开设微孔202，位于微孔202中的样品可以进行两侧反应和检测，有利于提高检测结果的信号强度，进而提高检测结果的准确性。

在一个实施例中，第一透明载体200上微孔202的数量为多个。优选的，多个微孔202呈阵列分布在第一透明载体200的中部。

在一个实施例中，微孔202的孔径范围为5μm～500μm，如200μm，可以视具体的样品进行调整。微孔202可以采用激光刻蚀的方式形成。

在一个实施例中，第一透明载体202为具有多微孔结构的盖玻片或硬质塑料薄膜，如PEN塑料薄膜。优选的，第一透明载体202具有多微孔结构的盖玻片。

请结合图1、图3和图4，在一个实施例中，第一透明载体200的厚度小于第二透明载体300的厚度。优选的，第二透明载体300可直接选用传统的载玻片。通过激光刻蚀的方式在传统的盖玻片上形成微孔202，并用作新的样品载体，由于盖玻片厚度较薄，较之在厚度较厚的传统载玻片上刻蚀，过程更简单易行，制作成本较低，且更利于进行双面染色检测。

在一个实施例中，第一插槽102与第二插槽104之间的距离为0.5mm～5mm，也即当第一透明载体200与第二透明载体300分别插入第一插槽102和第二插槽104后，第一透明载体200与第二透明载体300之间具有0.5mm～5mm的间隙。优选的，第一插槽102与第二插槽104之间的距离为1mm～2mm。在其他实施例中，第一插槽102与第二插槽104之间的距离还可以视具体的待检测样品来具体调整。

以下提供了一使用上述双面染色装置10进行组织切片染色检测的具体实施例。

实施例1

主要实验步骤类似于传统组织切片的免疫组织化学和免疫荧光染色方法，在此作简要说明，具体步骤如下：

1.脱蜡水化：用上述第一透明载体200捞取组织切片晾干，烤片后放入二甲苯和梯度酒精中脱蜡及水化；

2.抗原修复：将固定有样品的第一透明载体200脱蜡后在清水中冲洗一段时间，加入3％H2O2浸泡10min，从而除去内源性的过氧化氢酶，然后倒掉H2O2，在清水中洗两次，再加入抗原修复缓冲液加热到100℃，维持20分钟，使抗原的位点充分暴露出来；

3.位点封闭：将缓冲液倒掉，加上血清，使一些非特异性的位点封闭起来，37℃半小时；将该第一透明载体200与第二透明载体300插入支架100中；

4.加一抗：在第一透明载体200的表面以及第一透明载体200与第二透明载体300之间滴加目标抗原的特异性抗体，4℃过夜。

5.加荧光二抗：将双面染色装置10从冰箱中取出，放入PBS中洗3次，每次5min，擦干组织周围的PBS后，在第一透明载体200的表面以及第一透明载体200与第二透明载体300之间加上荧光二抗，置于37℃温箱中半小时。

8.细胞核染色：将荧光染色后的片子用清水冲洗一段时间后，浸泡于DAPI中染色，一般动物组织为5～15分钟。

上述双面染色装置10通过在第一透明载体200上设置微孔202，当将组织切片等样品固定在该第一透明载体200上时，位于微孔202内的样品可以两面都接触抗体等检测试剂，大大增加了抗原与抗体结合的机会，能够使免疫组化染色获得理想的效果色，得到的检测信号较之传统的单面染色有显著增强。

以上所述实施例的各技术特征可以进行任意的组合，为使描述简洁，未对上述实施例中的各个技术特征所有可能的组合都进行描述，然而，只要这些技术特征的组合不存在矛盾，都应当认为是本说明书记载的范围。

以上所述实施例仅表达了本实用新型的几种实施方式，其描述较为具体和详细，但并不能因此而理解为对实用新型专利范围的限制。应当指出的是，对于本领域的普通技术人员来说，在不脱离本实用新型构思的前提下，还可以做出若干变形和改进，这些都属于本实用新型的保护范围。因此，本实用新型专利的保护范围应以所附权利要求为准。