1.一种检测生物样本中的蛋白质复合体的方法,所述蛋白质复合体包含目标蛋白和与所述目标蛋白相互作用的结合蛋白,所述方法包括以下步骤:
共价交联:用化学交联剂使所述蛋白质复合体在非蛋白质变性条件下发生共价交联反应,以使所述蛋白质复合体稳定化;
变性处理:将所述蛋白质复合体进行蛋白变性处理,以破坏维持蛋白三维结构的弱相互作用力;
溶液置换:使经变性处理的蛋白质复合体处于适合进行免疫共沉淀的溶液体系中;
免疫共沉淀:使针对所述目标蛋白的特异性抗体与经过溶液置换处理的所述蛋白质复合体进行免疫共沉淀,以捕获所述蛋白质复合体,并通过捕获所述特异性抗体使所述蛋白质复合体与所述生物样本分离,并将所述特异性抗体从所述蛋白质复合体洗脱,得到纯化的所述蛋白质复合体;
质谱分析:将纯化的所述蛋白质复合体进行酶解形成肽段,然后进行质谱分析。
2.根据权利要求1所述的检测方法,其特征在于,所述蛋白质复合体位于细胞内,所述共价交联反应在所述细胞内原位进行;或者,所述蛋白质复合体在细胞提取液中,所述共价交联反应在所述细胞提取液中进行。
3.根据权利要求1或2所述的检测方法,其特征在于,所述化学交联剂为二琥珀酰亚胺亚砜(dsso)或二琥珀酰亚胺二丁酸(dsbu)。
4.根据权利要求1所述的检测方法,其特征在于,所述变性处理采用化学变性方法或者物理变性方法。
5.根据权利要求4所述的检测方法,其特征在于,所述化学变性方法采用尿素蛋白变性方法、丙酮沉淀方法或者改变缓冲液中的渗透质的方法。
6.根据权利要求5所述的检测方法,其特征在于,所述尿素蛋白变性方法为8m尿素蛋白变性方法。
7.根据权利要求4所述的检测方法,其特征在于,所述物理变性方法采用加热变性方法。
8.根据权利要求1所述的检测方法,其特征在于,在所述免疫共沉淀步骤中,所述特异性抗体为针对天然形式的所述目标蛋白的抗体,或者为针对所述目标蛋白中的线性表位的抗体。
9.根据权利要求1所述的检测方法,其特征在于,在所述溶液置换步骤中,所述适合进行免疫共沉淀的溶液体系为非变性蛋白裂解液。
10.根据权利要求1所述的检测方法,其特征在于,所述分离纯化步骤使用蛋白a包被的磁珠或蛋白g包被的磁珠来进行。