，为了达到 预期良好效果，构建了大量的样本信息，保证了所采样品准确性，防止了非监测乳混入或样 品间的交叉污染情况的发生。本发明对所采乳中雌二醇的检测准确度高，方法标准一 致，同一人检测完成所有样本，以减少系统误差。本发明利用数学分析软件对采集后样品检 测的结果进行统计分析，可对结果曲线进行非线性拟合，需要对拟合出的曲线进行有效的 筛选评估，并进行大量的检测及计算验证，以筛选出最优的曲线拟合方程。
[0028] 本发明有益效果：
[0029] 本发明所述方法只需已知产后奶牛所泌牛初乳中β -雌二醇的初始浓度，即可通 过方程预测此后每个时间点奶牛所产乳中β -雌二醇的浓度，无需对产后奶牛每天进行奶 样的采集、检测，操作简便，准确度高。可以减少因需要对产后奶牛所产乳中雌二醇浓 度的监测而消耗的人力成本，包括奶样的采集、贮存、检测等，物力成本包括收集牛奶样品 所用的耗材成本，检测乳中雌二醇所用的实验方法的试剂、耗材、仪器分析等诸多成 本。同时本发明所述方法是一种极为省时高效的牛初乳雌二醇浓度实时监测方法，预 测准确性高，解决了传统监测方法用时比较长、监测结果滞后性等问题。此外，本发明所述 方法对奶牛所产乳中β-雌二醇浓度消退的预测，为原料乳中β-雌二醇风险因子的监测 提供了有效手段，为乳品安全提供了可靠的保证。
【具体实施方式】
[0030] 下面结合具体实施例对本发明做进一步说明，但本发明不受实施例的限制。
[0031] 实施例1 :样品的采集
[0032] 选取40头未曾用激素处理过的临产荷斯坦奶牛，年龄2~5岁，体重400~500kg， 胎次二胎，健康状况良好。对临产荷斯坦奶牛进行隔离饲喂，饲养管理标准相同，于产房产 犊后立刻榨取牛初乳，连续采样5天，采样时间间隔及每日采集次数如表1所示，严格按照 采样方案采集牛初乳，并做好标注。奶牛产房产犊后立刻采集的乳样记为第1天第〇h，第1 天每4小时采样一次，第2天至第5天每8小时采样一次。
[0033] 使用小型榨乳机进行榨乳，收集牛初乳至榨乳机的奶桶中，然后从奶桶中收集 200mL的牛初乳于离心管中，立即储存于-20°C的条件下待检测。每次榨乳后立即清洗榨乳 机管道以及奶桶，再对下一头奶牛进行采样，以避免交叉污染。
[0034] 表1采样方案
【主权项】
1. 一种产后奶牛泌乳中e -雌二醇含量消退的预测方法，其特征在于：将待产奶牛隔 离饲喂管理，产犊后立刻按照采样方案采集牛初乳，测定所采集的牛初乳样品中雌二 醇含量，对所得0 -雌二醇含量数据进行统计分析获得拟合方程，再对拟合方程进行验证 后获得预测方程，利用所得预测方程预测产后奶牛泌乳中的雌二醇消退水平和时间； 所述预测方程为：Y = 11. 625-0. 759X+0. 0190X2-0. 0001374X3;其中，X为产后时间，Y为牛 初乳中0-雌二醇的质量浓度。
2. 根据权利要求1所述方法，其特征在于，步骤如下： 1) 将待产奶牛隔离饲喂管理，产犊后立刻按照采样方案采集产后奶牛所分泌的牛初 乳； 2) 对所采集的牛初乳进行样品前处理，检测牛初乳中雌二醇的含量； 3) 对检测数据进行统计分析，获得得到拟合方程，对拟合方程进行验证后获得预测方 程； 所述预测方程为：Y = 11. 625-0. 759X+0. 0190X2-0. 0001374X3;其中，X为产后时间，Y 为牛初乳中0-雌二醇的质量浓度； 4) 利用预测方程预测奶牛泌乳中雌二醇消退水平和时间。
3. 根据权利要求2所述的方法，其特征在于，步骤1)所述奶牛品种为荷斯坦奶牛，年龄 2-5岁，体重400-500kg，胎次为二胎。
4. 根据权利要求2所述的方法，其特征在于，步骤1)所述初始浓度不高于12. 725 y g/ kg〇
5. 根据权利要求2所述的方法，其特征在于，步骤2)所述采样方案，奶牛产房产犊后立 刻采集的乳样记为第1天第〇h，第1天每4小时采样一次，第2天至第5天每8小时采样一 次。
6. 根据权利要求2所述的方法，其特征在于，步骤3)所述检测牛初乳中0 -雌二醇的 含量，是采用气相色谱-质谱联用法进行检测。
7. 根据权利要求2所述的方法，其特征在于，步骤4)所述统计分析，是对0 -雌二醇含 量数据进行非线性拟合。
8. 根据权利要求2所述方法，其特征在于，具体步骤为： 1) 将待产奶牛隔离饲喂管理，产犊后立刻按照采样方案采集产后奶牛所分泌的牛初 乳；所述采样方案为：奶牛产房产犊后立刻采集的乳样记为第1天第〇h，第1天每4小时采 样一次，第2天至第5天每8小时采样一次； 2) 对所采集的牛初乳进行样品前处理，采用气相色谱-质谱联用法检测雌二醇的 含量； 3) 对检测数据进行非线性拟合获得拟合方程，再对拟合方程进行验证获得预测方程； 所述预测方程为：Y = 11. 625-0. 759X+0. 0190X2-0. 0001374X3;其中，X为产后时间，Y为牛 初乳中0-雌二醇的质量浓度； 4) 利用步骤3)所得的预测方程预测产后奶牛在泌乳过程中雌二醇浓度的消退水 平和时间。
9. 权利要求1-8所述的方法应用于预测产后奶牛在泌乳过程中0 -雌二醇浓度消退水 平及消退时间。
【专利摘要】本发明公开了一种产后奶牛泌乳中β-雌二醇含量消退的预测方法及应用，属于食品安全技术领域。本发明通过对产后奶牛所分泌的牛初乳进行β-雌二醇含量测定，对所得数据进行统计分析获得拟合方程，再对方程进行验证后获得预测方法，利用所得预测方程来预测产后奶牛泌乳中的β-雌二醇含量消退时间。该方法能够对牛初乳中β-雌二醇浓度和消退时间进行准确预测，适用于预测产后奶牛在泌乳过程中β-雌二醇浓度消退水平及消退至限量浓度以下所需时间，减轻了企业人力、物力的投入，节约成本、减少损失，同时也为乳品的安全提供有力可靠的保证。
【IPC分类】G06F19-00, G01N30-02
【公开号】CN104678022
【申请号】CN201510102826
【发明人】满朝新, 姜毓君, 刘泳麟, 丁木, 田成新, 邓宇, 李琳瑶, 费鹏, 赵玥明, 李婷, 刘少敏
【申请人】黑龙江省乳品工业技术开发中心
【公开日】2015年6月3日
【申请日】2015年3月9日