一种基于稳定同位素指纹的三七块根产地鉴别方法
【技术领域】
[0001] 本发明属于道地中药材产地溯源领域，具体地说，涉及一种基于稳定同位素指纹 的三七块根产地鉴别方法。
【背景技术】
[0002] 三七[Panax notoginseng(Burk)F. H. Chen]为五加科多年生草本植物，生药称 三七，味甘、微苦，性温。三七具有止血、活血化瘀、抗疲劳、抗衰老、耐缺氧、降血糖和提高 机体免疫力等功效，对三七功用的认识也从〃活血化瘀、消肿定痛〃延伸到整个心脑血管系 统、中枢神经系统、代谢系统等领域。三七起源于2500万年前的第三纪古热带中国西南山 区，其分布主要局限在23° 30' N附近的中高海拔地区，分布范围极其狭小。云南文山为 三七的主要产区，其种植面积和产量均占全国70%以上。除云南文山主产区外，现云南文山 的周边红河、玉溪、曲靖、昆明、大理、保山、普洱，以及广西百色的靖西、那坡等州（县）也有 一定面积的种植，以文山三七品质最佳。三七以块根、卢头入药。卢头呈不规则皱缩块状或 条状，表面有数个明显的茎痕及环纹，在三七地下部分中所占比例小，皂苷含量高，主要用 于制药企业提取皂苷组分的原料。三七一般生长3年采收，分为春七和冬七，春七是采收当 年不留籽的三七块根，冬七为采收当年留籽、次年1~2月采收的三七。冬七面积和产量很 小，均分布在文山州1400m~1900m的区域。目前市场上的三七药材基本是春三七块根或 其粉末。冬七体积小、重量轻、表面皱缩、密度小、断面有空隙；春七则相反，其体积大、密度 大、表面光滑、断面致密、菊花心明显。通常认为春七皂苷含量高于冬七。卢头、春三七块根 和冬三七块根仅凭外表和断面就可以准确分开。因此，春三七块根产地鉴别就成为三七产 地溯源的关键。近年来，随着三七连作障碍的加重和三七价格的上涨，三七种植区域已由 云南文山扩展到云南的红河、玉溪、昆明、曲靖、铺、普洱、大理、保山等区域。2008年7月，文 山三七获地理标志产品保护。
[0003] 目前中药材溯源主要采用条形码技术，仅从产地、加工、储藏、运输等环节进行记 录溯源，未能从中药材本身进行溯源。这种溯源体系是表象的，如果不法商贩受经济利益驱 使，采用虚假标签、以次充好、假冒优质产品，在发生贸易纠纷时，无科学的证据。因此，迫切 需要建立鉴别中药材原产地的简便、准确、可操作性强的方法，以提高政府对中药材贸易的 监管能力，保护中药材生产企业的合法权益，同时帮助消费者辨别真假，避免销售欺诈。
[0004] 在自然界中，生物体不断与外界环境进行物质交换，其体内同位素组成受气候、环 境、生物代谢类型等因素的影响而发生自然分馏效应，从而使不同来源的物质中同位素自 然丰度存在差异。这种差异拥有环境因子的信息，反映生物体所处的环境条件。生物体中稳 定性同位素组成是物质的自然属性，可作为物质的一种"自然指纹"，区分不同来源的物质。 换言之，生物体中同位素指纹是外部环境在生物体中打下的"烙印"，因此，同位素指纹是所 有生物（包括食品产品）的一个自然标签，它与生物的生长环境密切相关，且不随化学添加 剂的改变而改变。它能为食品（中药材）溯源提供一种科学的、独立的、不可改变的，以及 随整个食品链流动的身份鉴定信息。利用同位素指纹信息，可以鉴别食品（中药材）成分 掺假、污染物来源、追溯产品原产地等。国内外利用稳定同位素技术进行植源性食品和肉类 产地溯源的研究较多，且部分成果已应用于相关产品鉴别的标准中。但在中药材产地溯源 中，目前仍然采用二维码和网络数据库溯源系统。缺乏中药材产地稳定同位素指纹鉴别技 术的研究和应用。
【发明内容】
[0005] 为了克服现有技术的不足，本发明提供了一种基于稳定同位素指纹的三七块根产 地鉴别方法，仅用4种稳定同位素指纹建立判别模型，检测指标少、检测精度高、重现性好、 方法简便、可操作性强，减少了基于标签和主观判断的不确定性，对三年春七块根产地来源 的整体判别率能达到84%以上。
[0006] 为了达到上述目的，本发明提出如下技术方案：
[0007] -种基于稳定同位素指纹的三七块根产地鉴别方法，包括如下步骤：
[0008] 1)从三七产区的广西百色、云南文山、云南新拓展区域任一地域随机均匀采集三 年春七块根样品，也包括为鉴别三七产地来源，采集在市场上销售的三七块根和粉末；
[0009] 2)将采集的样品烘干、粉碎；
[0010] 3)检测三七块根粉末稳定同位素δ 2Η、δ 18〇、δ 13C、δ 15N比率，单位为％。，按照判 另1J丰旲型⑴~⑶即可得到Y广西百色片区、Y云南文山片区、Y云it新拓展片区，则所述二年春七块根样品来 源于Y广西百色片区、Ys南文山片区、Y新拓展片区中数值最大的地域；
[0011] Yr西百色片区=-557. 00-0· 96 δ 2Η+7· 60 δ 18〇-31· 46 δ 13C+4. 70 δ 15N ; (1)
[0012] Y云南文山片区=-529. 57-1. 14 δ 2Η+7· 88 δ 18〇-29· 90 δ 13C+3. 51 δ 15N ; (2)
[0013] Y云南新拓展片区=-501. 06-1. 25 δ 2Η+8· 65 δ 18〇-27· 90 δ 13C+2. 94 δ 15N ; (3)
[0014] 作为优选，步骤1)中，在广西百色、云南文山和文山州外新拓展区域的东、南、西、 北、中布点进行采样，每个采样点在该种植田块或区域东、南、西、北、中随机均匀采集15~ 20株三七组成一个样本。
[0015] 作为优选，步骤2)中，用自来水+洗洁精洗去三七块根泥土、再自来水冲洗干净、 最后用蒸馏水反复冲洗，l〇5°C杀青30min，60°C~70°C烘干至恒重。
[0016] 作为优选，步骤2)中所述的三七样品粉碎至粒度为100~200目。
[0017] 作为优选，步骤3)中的检测仪器为同位素比率质谱仪（IRMS)。
[0018] 本发明的有益效果：本发明从三七本身具有的稳定同位素指纹差异入手，仅利用 C、H、0、N四个元素稳定同位素指纹特征建立产地判别模型，检测指标少、检测精度高、重现 性好、方法简便、可操作性强，减少了基于标签和主观判断的不确定性，对三年春七块根产 地来源的整体判别率能达到84%以上。
【具体实施方式】
[0019] 下面将结合本发明实施例对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述， 显然，所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的 实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都 属于本发明保护的范围。
[0020] 实施例
[0021] 1)样品采集
[0022] 2011年10月~11月分别在广西靖西、云南文山州三七