筛选或细菌培养等实验室分析研宄和临床诊断检 测。
[0017] 步骤S4中所述的洗脱与转移可以根据本领域常规技术选择任一种方式，只要能 将薄层色谱上的色谱斑点按照薄层色谱中各个色谱斑点与微孔板阵列映射关系洗脱并转 移至微孔板中相应试验孔中即可。作为一种优选方案，所述洗脱转移的具体步骤如下： 541. 将洗脱液加入到微孔板中，然后覆盖网格封口膜；按照薄层色谱斑点与微孔板阵 列映射关系，将薄层色谱板上的斑点尽可能地对应于微孔板的试验孔、并覆盖于网格封口 膜上；加压使薄层色谱板与微孔板形成阵列化的密闭小室复合夹层； 542. 将复合夹层垂直翻转180°、停留10秒后返回，再停留10秒后重复翻转操作，如 此重复操作至薄层色谱斑点洗脱并转移到微孔板的板孔中； 543. 挥发掉微孔板试验孔内的溶剂，得到含有色谱斑点并保留薄层色谱特征的微孔 板样本，根据实验需要平行制备足够数量的微孔板样本。
[0018] 本发明通过建立薄层色谱图上所有色谱斑点与微孔板上二维排列的试验孔阵列 之间的映射关系，将薄层色谱斑点洗脱并转移到微孔板相应的试验孔中，使微孔板上的色 谱斑点阵列最大程度地反映薄层色谱图的特征，这就要求微孔板上试验孔的大小、形状和 排列与色谱斑点的大小、形状和分布区域相匹配。
[0019] 优选地，所述微孔板可以选择常规的96孔板、384孔板或1536孔板，在这三个规格 的微孔板中，与直径通常为1~4 mm薄层色谱斑点更匹配的是384孔微孔板(横24孔X竖 16 孔）。
[0020] 优选地，所述微孔板的孔形为方形。方孔微孔板比圆孔微孔板开孔面积更大，更有 利于薄层色谱斑点的洗脱和转移，使微孔板上的色谱斑阵列最大程度地反映薄层色谱图的 特征。
[0021] 本发明所述网格封口膜上的网格与微孔板的孔形相匹配，网格封口膜叠在微孔板 试验孔边缘与薄层色谱板之间，加压下薄层色谱板与微孔板可形成阵列化的密闭小室。优 选地，所述网格封口膜为硅胶材质。
[0022] 本发明步骤S6所述生物活性实验采用常规方法，具体为取一份或多份平行微孔 板样本进行生物活性实验，评价各个色谱洗脱组分的生物活性，对显示出生物活性的板孔， 按照薄层色谱色谱斑点与微孔板阵列映射关系定位，对另一平行微孔板样本中相应试验孔 内的色谱斑点组分进行化学成分追踪分析。
[0023] 所述平行微孔板样本的生物活性检测包括生物活性检测或自由基清除活性检测 等常规活性检测。
[0024] 所述生物活性检测包括ELISA、MTT检测、DNA筛选或细菌培养等。
[0025] 所述化学成分追踪分析包括液相色谱分析、质谱分析或液相色谱-质谱联用分析 等分析化学检测，测得受试板孔内色谱组分的组成、含量以及分子量、化学结构、紫外光谱 等化学特性。
[0026] 采用本发明提供的方法，将薄层色谱上的色谱斑点整体地洗脱并转移到对应的微 孔板试验孔上进行各种活性实验，既可以保留薄层色谱分离效果，又可避免薄层色谱分离 介质对后续的活性实验干扰或妨碍，如：平面色谱分离介质对细胞贴壁、细胞生长的干扰； 平面色谱分离介质对蛋白、DNA和多糖的活性影响；平面色谱分离介质对培养基组分、参与 反应组分以及污染物的吸附妨碍实验程序的进行，降低反应灵敏度和选择性，增加检测背 景值和噪声等。
[0027] 本发明对复杂样品色谱组分的化学、生物特性以及它们的结构与含量信息的观察 与实验是在同一个研宄平台并列与关联地进行的，可以及时进行相关分析和综合研宄，迅 速聚焦到复杂样品中的活性组分，实现在活性指导下对中药及天然产物等复杂组分中的活 性成分的检测和筛选。
[0028] 与现有技术相比，本发明具有如下有益效果： (1)既保留了平面色谱的特性、又将色谱分离出的组分从平面色谱的分离介质中释放 出来，避免了分离介质对后续的生物活性实验造成干扰或妨碍。
[0029] (2)将色谱分离、活性反应和化合物追踪检测关联起来，使色谱分离、活性反应 和分析检测既可独立操作又可作为一个整体进行观察、研宄和关联分析，寻找活性组分的 量-效和构-效等内在关系，评价各色谱组分性能，筛选其中的活性成分，实现在活性指导 下对中药及天然产物等复杂组分中的活性成分的快速筛选、以及复杂组分生物活性的现场 检验，尤其适用于中药多组分、多靶点、多通道协同作用的研宄。
[0030] (3)本发明对中药及天然产物复杂组分中活性组分的检测和筛选具有微量、快速、 简捷、直观和经济的特点，并极大地减少了有机溶剂使用。
【附图说明】
[0031] 图1为实验流程示意图。
[0032] 图2为一维薄层色谱结果，其中a为一维薄层色谱图，b为一维薄层色谱图色谱斑 点与MTT实验微孔板阵列对应关系图，c为一维薄层色谱斑点与细胞培养板孔OD值的对应 关系图。
[0033] 图3为一维薄层色谱条带对应洗脱组分的细胞生存率结果图。
[0034] 图4为二维薄层色谱结果，其中a为二维薄层色谱图，b为二维薄层色谱图色谱斑 点与MTT实验微孔板阵列对应关系图，c为二维薄层色谱斑点与细胞培养板孔OD值的对应 关系图。
[0035] 图5为二维薄层色谱条带对应洗脱组分的细胞生存率结果图。
[0036] 图6为MTT实验微孔板118和L16板孔对应二维薄层色谱位置关系图。
【具体实施方式】
[0037] 下面结合具体实施例对本发明作进一步的解释说明，但具体实施例并不对本发明 作任何限定。除非特别说明，实施例中所涉及的试剂、方法均为本领域常用的试剂和方法。
[0038] 实施例1 本实施例采用薄层色谱对高良姜提取物进行色谱分离，建立色谱斑点与384孔方口微 孔板试验孔之间的阵列映射关系，将色谱斑点洗脱并转移至384孔微孔板的对应的试验孔 里，以MTT法评价色谱斑点组分对PC12细胞损伤的保护作用，再以Post LC-MS (流动注 射-液相色谱-质谱联用）对显示出活性的试验孔中的色谱成分进行分析检测。本实施例 将TLC薄层色谱分离、MTT细胞生存率试验和Post LC-MS通过阵列关联的方法结合起来， 实现了活性指导下高良姜提取物中活性组分的快速筛选。
[0039] 实验流程示意图如图1所示，具体实验步骤及检测步骤如下： (1)配置样品（高良姜提取物）溶液 高良姜生药材采集于广东徐闻龙塘镇八角村，人工种植3年以上。高良姜干燥根茎粉 碎后，采用98%食用级乙醇提取3次，合并提取液，制备浓缩浸膏。浓缩浸膏制成5 mg/ml 的高良姜提取物甲醇溶液。
[0040] (2)薄层色谱分析 一维薄层色谱分析（ID-TLC):取高良姜提取物甲醇溶液进行薄层层析，在硅胶板上 (Merck GF254)进行条带点板（7. 5cmX2mm)，点样量16μ1 ;以乙酸乙酯：石油醚II :乙酸 =3 : 7 : 0.2 展开，展距 8. 2 cm。
[0041] 二维薄层色谱分析（2D-TLC):取相同高良姜提取物甲醇溶液和硅胶板，点样量为 2μ1，控制斑点直径小于2mm，以展开剂A (氯仿：甲醇：石油醚II =7.76 : 0.24 : 2)和展 开剂B (乙酸乙酯：石油醚II :乙酸=3 :7 :0. 2)先后展开，得到8. 2 cmX8. 2 cm的2D薄 层色谱。根据实验需要平行制备多块薄层色谱板。
[0042] (3)薄层色谱显色 将薄层板用1%香草醛-10%硫酸乙醇溶液喷雾，在105°C下加热约7min显色，即时于 可见光下拍摄成像。采用Qscan Demo软件采集色谱参数、确定各斑点在色谱图上的相对位 置，测定色谱斑点的Rf值和峰面积，用作半定量分析。
[0043] 平行制备的其它薄层板置于紫外分析仪在254nm波长紫外光下检视和拍照、并与 硫酸-香草醛试剂显色的薄层