，是从毛细管流路10的试样保持槽 11侧的端部5~140mM、10~lOOmM或15~50mM的位置。
[0064] 通过如上地进行分析能够进行血红蛋白的测定，优选为能够分离并测定HbAlc和 其它血红蛋白成分，更优选为能够分离并测定作为糖尿病诊断的指标的稳定型HbAlc和其 它血红蛋白成分。作为其它血红蛋白成分，可以举出不稳定型HbAlc、HbAldl、HbS、HbF、 HbA2、HbC等。并且，能够通过解析所得到的电泳图来测定例如HbAlc的比率HbAlc)或 HbAlc的量。因此，本公开的分析方法能够用于糖尿病的预防、诊断和治疗等的用途。
[0065] 本公开可涉及以下的一个或多个实施方式。
[0066] 〔 1〕一种芯片的制造方法，是包括微型流路的芯片的制造方法，包括：
[0067] 在一对树脂基板的各自的至少一个表面上固定具有季鑰基的阳离子性聚合物；以 及
[0068] 将固定了所述阳离子性聚合物的面作为接合面接合所述树脂基板。
[0069] 〔2〕一种芯片的制造方法，是包括微型流路的芯片的制造方法，包括：
[0070] 在一对树脂基板的各自的至少一个表面上进行气相或液相表面处理；
[0071] 使所述处理面接触具有季鑰基的阳离子性聚合物溶液；以及
[0072] 将所述接触了的面作为接合面接合树脂基板。
[0073] 〔 3〕如〔1〕所述的制造方法，包括：
[0074] 在所述树脂基板的各自的至少一个表面上导入阴离子性官能基；以及
[0075] 在导入了所述阴离子性官能基的面上进行所述阳离子性聚合物的固定。
[0076] 〔4〕如〔3〕所述的制造方法，其中，所述阴离子性官能基的导入通过气相或液相表 面处理来进行。
[0077] 〔5〕如〔2〕或⑷所述的制造方法，其中，所述气相表面处理选自由真空紫外线处 理、等离子处理、电晕放电处理、火焰处理和臭氧处理构成的组。
[0078] 〔6〕如〔1〕至〔5〕中任一项所述的制造方法，其中，所述季鑰基选自由季铵基和季 鱗基构成的组。
[0079] 〔7〕如〔1〕至〔6〕中任一项所述的制造方法，其中，所述阳离子性聚合物选自由聚 季铵盐、二甲胺-表氯醇共聚物及它们的组合构成的组。
[0080] 〔8〕如〔1〕至〔7〕中任一项所述的制造方法，其中，所述阳离子性聚合物包括选自 由聚二烯丙基二甲基铵盐、二甲胺-表氯醇共聚物及它们的组合构成的组中选择的1个。
[0081] 〔9〕如〔1〕至〔7〕中任一项所述的制造方法，其中，所述阳离子性聚合物是聚二烯 丙基二甲基铵盐、二甲胺-表氯醇共聚物或它们的组合。
[0082] 〔10〕如〔1〕至〔9〕中任一项所述的制造方法，其中，所述阳离子性聚合物是氯化物 和/或硫化物。
[0083] 〔11〕如〔1〕至〔10〕中任一项所述的制造方法，其中，通过所述树脂基板的接合来 形成微型流路。
[0084] 〔12〕一种包括微型流路的芯片，其通过〔1〕至〔11〕中的任一项所述的制造方法制 造。
[0085] 〔13〕如〔12〕所述的芯片，其中，在所述流路的内壁固定有具有季鑰基的阳离子性 聚合物。
[0086] 〔14〕一种芯片，其中，是通过树脂基板的接合来形成微型流路的芯片，
[0087] 在所述微型流路的内壁固定有具有季鑰基的阳离子性聚合物。
[0088] 〔15〕如〔13〕或〔14〕所述的芯片，其中，所述阳离子性聚合物选自由聚季铵盐、二 甲胺-表氯醇共聚物及它们的组合构成的组。
[0089] 〔16〕如〔12〕至〔15〕中的任一项所述的芯片，所述芯片用于分析被测体。
[0090] 〔17〕一种试剂盒，是用于分析被测体的试剂盒，包括：
[0091] 如〔12〕至〔16〕中的任一项所述的芯片，以及
[0092] 具备了分析用的溶液的盒。
[0093] 〔18〕一种分析方法，是血红蛋白的分析方法，包括：
[0094] 使用如〔12〕至〔16〕中的任一项所述的芯片来测定试样中的分析对象。
[0095] 〔 19〕如〔18〕所述的分析方法，包括：
[0096] 稀释被测体从而调制试样；
[0097] 将电泳液导入到所述芯片的微型流路的一端，以所述电泳液填充微型流路；
[0098] 将所述试样导入到所述芯片的微型流路的一端；以及
[0099] 向所述微型流路的两端施加电压。
[0100] 〔 20〕如〔18〕所述的分析方法，包括：
[0101] 将电泳液填充到所述芯片的微型流路；
[0102] 将试样导入到所述芯片的微型流路；以及
[0103] 向所述微型流路的整体或一部分施加电压。
[0104] 实施例
[0105] 以下，使用实施例和比较例进一步说明本公开。但是，本公开不限定于以下的实施 例而进行解释。
[0106] (实施例1)
[0107] [芯片的制作]
[0108] 使用如图1所示的部件，制作芯片。
[0109] 〈树脂部件的准备〉
[0110] 作为材料使用PMMA(聚甲基丙烯酸甲酯），通过成型来准备树脂部件A(图la)和 树脂部件B(图lb)二个树脂部件。流路10为0. 04mMX0. 04mMX30mM，试样保持槽11和电 泳液保持槽12的容量为10 y L。另外，检测部13设为其中心是从试样保持槽11和电泳液 保持槽12分别为20mM和10mM的位置。
[0111] 〈阳离子性聚合物的固定〉
[0112] 向树脂部件A和B的接合面通过准分子灯在大气压下照射紫外线，导入阴离子性 官能基。然后，在下述处理液1中室温浸渍树脂部件A和B24小时。
[0113] (处理液1)
[0114] 聚二烯丙基二甲基氯化铵（PDADMAC，聚季铵盐-6,西格玛奥德里奇公司制、分子 量100000以下）1% w/v、氢氧化钠100mM、水溶液
[0115] 浸渍后，以水充分地洗净，喷射压缩空气而风干树脂部件A和B。通过该一系列的 工序，阳离子性聚合物与树脂部件的接合面上的阴离子性官能基结合，被固定到接合面上。
[0116]〈微型流路芯片的形成〉
[0117] 使在接合面上固定了阳离子性聚合物的树脂部件A和B的接合面接触进行加热压 力接合（温度80°C、压力16kgf/cm 2 (1. 57MPa)、1分钟），得到图lc所示的微型流路芯片。 由此，树脂部件A和B被接合，且得到流路内壁固定有阳离子性聚合物的芯片。几乎没有发 现所得到的芯片在微型流路上变形。
[0118][芯片的接合面的评价]
[0119] 对所得到的芯片评价了树脂部件A和树脂部件B的接合。评价以接合强度和有无 从接合面泄露液体来进行。接合强度通过将所得到的芯片在接合面强制地剥离，测定残留 在接合面的剥离痕的深度来确认。液体的泄漏的有无通过向毛细管通入染料溶液，以显微 镜观察来进行。其结果是，所得到的芯片接合深度是2 y m以上，具有充分的接合强度，另外 没有发现从接合面泄露液体。也就是说，确认了树脂部件A和树脂部件B被充分地接合。
[0120] [血红蛋白的分析]
[0121] 使用所得到的芯片进行由毛细管电泳进行的血红蛋白的分析。电泳溶液通过向蒸 馏水添加下述物质以成为下述浓度来调制。
[0122] (电泳溶液1)
[0123] 40mM柠檬酸
[0124] 1% w/v硫酸软骨素C钠
[0125] 500mM NDSB_2〇l (品名：3_(1_ 吡啶基）_1_ 丙横酸内盐、Anatrave Products LLC 制）
[0126] 0. 1% w/v EMULGEN LS-110 (商品名：聚氧乙烯烷基醚、花王制）
[0127] 0.1%叠氮化钠
[0128] 二甲氨基乙醇（pH调制用）
[0129] pH6. 0
[0130](电泳溶液2)
[0131] 40mM柠檬酸
[0132]1. 25%w/v硫酸软骨素C钠
[0133] 0. 1% w/v EMULGEN LS-110
[0134] 0.1%叠氮化钠
[0135] 二甲氨基乙醇（pH调制用）
[0136] pH5. 0
[0137] 毛细管电泳以以下的步骤进行。
[0138]1.将微型流路芯片设置到爱科来制的电泳装置上。
[0139] 2.添加9yL电泳溶液2到微型流路芯片的电泳液保持中，通过毛细管现象用电泳 溶液2充满微型流路。
[0140] 3.将人类全血用电泳溶液1稀释至41倍作为试样。
[0141] 4.添加9yL上述试样至微型流路芯片的试样保持槽中。
[0142]5.使试样保持槽与正电极、电泳液保持槽与负电极接触，施加1600V的电压来开 始电泳。
[0143] 6.在检测部测定415nm的吸光度，得到电泳图。电泳进行了 60秒。
[0144] 所得到的分析结果示于图2。如图2所示，血红蛋白的各成分在30秒以内被检测， 且各成分被充分地分离。具体地，如图2所示，能够明确地确认不稳定型HbAlc (图2的〇）、 稳定型HbAlc(图2的A)和HbAldl(图2的□)各自的峰。也就是说，确认了实施例1的 芯片能够以短时间高精度地分离血红蛋白的各成分。
[0145](实施例2)
[0146] 除了作为树脂部件A和B的材料使用聚苯乙烯且加热压力接合的温度变更为90°C 以外，与实施例1同样地进行从而得到了微型流路芯片。使用所得到的芯片，与实施例1同 样地进行接合面的评价和血红蛋白的分析。所得到的芯片具有充分的接合强度，没有发现 接合面的液体的泄漏。另外，几乎没有发现所得到的芯片的微型流路变形。
[0147] 所得到的分析结果示于图3。如图3所示，血红蛋白的各成分在30秒以内被检测， 且能够明确地确认不稳定型Hb