化妆品中帕地马酯的测定方法
【技术领域】
[0001] 本发明涉及一种化学物质的测定方法，特别是涉及化妆品中帕地马酯的测定方 法。
【背景技术】
[0002] 帕地马酯分为帕地马酯A和帕地马酯0。帕地马酯A，相对分子质量：235. 36,CAS: 14779-78-3,分子式：C14H21N02，结构式如下：
[0003]
[0004] 帕地马酯0,相对分子质量：277. 41，CAS:21245-02-3,分子式：C17H27N02，结构式如 下：
[0005]
[0006] 帕地马酯A由于其对眼睛、呼吸道和皮肤有刺激作用，我国《化妆品卫生规范》中 明确规定化妆品中不得添加帕地马酯A，帕地马酯0作为一种抗紫外线的吸收剂，广泛应用 于化妆品及其它透光防日晒工业品中，限量为8 %。国内外对化妆品中帕地马酯的检测方法 未见报道。
【发明内容】
[0007] 本发明要解决的技术问题是提供一种准确、快速、灵敏度高的化妆品中帕地马酯 的测定方法。
[0008] 化妆品中帕地马酯的测定方法，其包括如下步骤：
[0009] (1)样品的前处理；
[0010] (2)采用高效液相色谱的方法对帕地马酯进行分析，优化了高效液相色谱条件；
[0011] ⑶绘制标准工作曲线，采用外标法定量，计算帕地马酯的含量。
[0012] 本发明所述的化妆品中帕地马酯的测定方法，其中，所述高效液相色谱条件如 下：
[0013] 色谱柱：XTerraC18 (4. 6mmX250mm，5ym);
[0014] 流速：1.OmT,/min；
[0015] 流动相：乙腈-水混合溶液，其中乙腈与水的体积比为9:1，等度洗脱；
[0016] 检测波长：3IOnm;
[0017] 柱温：30°C;
[0018] 进样量：10yL。
[0019] 本发明所述的化妆品中帕地马酯的测定方法，其中，所述样品为膏霜类、唇膏类、 水剂类、散粉类或香波类化妆品样品。
[0020] 本发明所述的化妆品中帕地马酯的测定方法，其中，所述样品为膏霜类化妆品样 品，前处理包括如下步骤：取Ig样品置于IOmL比色管中，加入2g氯化钠破乳后，加入甲醇 至刻度，充分混勾，超声波辅助提取20min，转移至离心管中，以5000r/min转速离心15min 后，取上清液过膜，滤液供高效液相色谱测定。
[0021] 本发明所述的化妆品中帕地马酯的测定方法，其中，所述样品为唇膏类化妆品样 品，前处理包括如下步骤：取Ig样品置于IOmL比色管中，加入2mL四氢呋喃，加入甲醇至刻 度，充分混匀，超声波辅助提取20min，转移至离心管中，以5000r/min转速离心15min后，取 上清液过膜，滤液供高效液相色谱测定。
[0022] 本发明所述的化妆品中帕地马酯的测定方法，其中，所述样品为水剂类、散粉类或 香波类化妆品样品，前处理包括如下步骤：取Ig样品置于IOmL比色管中，加入甲醇至刻度， 充分混匀，超声波辅助提取20min，转移至离心管中，以5000r/min转速离心15min后，取上 清液过膜，滤液供高效液相色谱测定。
[0023] 本发明所述的化妆品中帕地马酯的测定方法，其中，对于采用高效液相色谱法检 出阳性的样品，进一步采用高效液相色谱-质谱/质谱法进行确证，其中：
[0024] 高效液相色谱条件如下：
[0025] 色谱柱：HSST3 色谱柱（100mmX2.lmm,I. 8ym);
[0026] 流动相：体积比为1:9的0. 1 %甲酸水溶液和甲醇；
[0027] 流速：0? 4mL/min；
[0028] 柱温：30cC;
[0029] 进样量：IOyL;
[0030] 质谱条件如下：
[0031] 离子源：电喷雾离子源；
[0032] 离子化模式：正离子模式；
[0033] 毛细管电压：3.5kV;
[0034] 萃取电压：2.9V;
[0035] 离子源温度：150°C;
[0036] 脱溶剂气温度：350°C;
[0037] 数据采集方式：多反应离子监测。
[0038] 本发明所述的化妆品中帕地马酯的测定方法，其中，所述帕地马酯为帕地马酯A 和帕地马酯0。
[0039] 本发明所述的化妆品中帕地马酯的测定方法，其中，所述确证实验包括如下步骤： 将样液适当稀释，按高效液相色谱-质谱/质谱条件测定样液和标准工作溶液，如果所选择 的离子均出现，而且所选择的离子比与标准物质的相对丰度一致，允许偏差不超过表1规 定的范围，则可判断样品中含有帕地马酯。
[0040] 表1帕地马酯质谱分析参数
[0041 ]
[0042] 本发明化妆品中帕地马酯的测定方法与现有技术不同之处在于：目前国内外尚无 化妆品中帕地马酯A和帕地马酯0的测定方法报道，本发明化妆品中帕地马酯的测定方法 采用高效液相色谱法同时测定化妆品中帕地马酯A和帕地马酯0,准确、快速、灵敏度高，对 于化妆品的质量安全风险监测具有重要意义。
[0043] 下面结合附图对本发明的化妆品中帕地马酯的测定方法作进一步说明。
【附图说明】
[0044]图1为本发明中帕地马酯的紫外吸收光谱；
[0045] 图2为本发明中采用ElipesXDBC1S(4. 6mmX250mm，5ym)色谱柱得到的色谱图； 其中，1-帕地马酯A，2-帕地马酯0;
[0046] 图3为本发明中采用XTerraC1S(4. 6mmX250mm，5ym)色谱柱得到的色谱图；其 中，1-帕地马酯A，2-帕地马酯0;
[0047] 图4为本发明中采用PromosilC1S(4. 6mmX250mm，5ym)色谱柱得到的色谱图；其 中，1-帕地马酯A，2-帕地马酯0;
[0048] 图5为本发明中采用SymmetryC18 (4. 6mmX250mm，5ym)色谱柱得到的色谱图；其 中，1-帕地马酯A，2-帕地马酯0;
[0049] 图6为本发明中采用KromasilC18(4.6mmX250mm，5ym)色谱柱得到的色谱图；其 中，1-帕地马酯A，2-帕地马酯0;
[0050] 图7为本发明中帕地马酯的多反应监测色谱图，其中，1-帕地马酯A，2-帕地马酯 0〇
[0051] 本发明附图中出现的所有的英文对应的中文翻译为：
[0052]mAU :毫吸收值；time :时间；Abs :吸收度；nm :纳米；Response :响应值。
【具体实施方式】[0053]实施例1
[0054] -、试剂和材料
[0055] 除非另有说明，所用试剂均为分析纯，水为GB/T6682-2008规定的实验用水。
[0056] 甲醇：色谱纯。
[0057] 四氢呋喃：色谱纯。
[0058] 氯化钠。
[0059] 帕地马酯标准品。
[0060] 帕地马酯混合标准储备液：分别称取适量帕地马酯A和帕地马酯0标准品（精确 至0.OOOlg)，用甲醇配制成含甲醇1000mg/L的单标储备液，再用甲醇配制成100mg/L的混 合标准储备液。
[0061] 帕地马酯混合标准工作溶液：用甲醇将帕地马酯混合标准储备液配制成浓度为 0? 02、0. 05、0. 1、0. 2、0. 5、l、2、5、10mg/L甲醇混合标准工作溶液。
[0062] 二、仪器和设备
[0063] 高效液相色谱仪：配有紫外检测器。
[0064] 分析天平：感量为0?OOOlg和0? 001g。
[0065] 离心机：转速不低于5000r/min。
[0066] 超声波水浴
[0067] 注射器：5mL。
[0068] 微孔滤膜：0? 45ym，有机相。
[0069] 三、分析步骤
[0070] 1、样品处理
[0071] (1)膏霜类化妆品样品前处理
[0072] 取Ig样品置于IOmL比色管中，加入2g氯化钠破乳后，加入甲醇至刻度，充分混 勾，超声波辅助提取20min，转移至离心管中，以5000r/min转速离心15min后，取上清液过 膜，滤液供高效液相色谱测定。
[0073](2)唇膏类化妆品样品前处理。
[0074] 取Ig样品置于IOmL比色管中，加入2mL四氢呋喃，再加入甲醇至刻度，充分混匀， 超声波辅助提取20min，转移至离心管中，以5000r/min转速离心15min后，取上清液过膜， 滤液供高效液相色谱测定。
[0075] (3)水剂类、散粉类及香波类化妆品样品前处理
[0076] 取Ig样品置于IOmL比色管中，加入甲醇至刻度，充分混匀，超声波辅助提取 20min，转移至离心管中，以5000r/min转速离心15min后，取上清液过膜，滤液供高效液相 色谱测定。
[0077] 2、测定条件
[0078] 高效液相色谱参考条件：
[0079] 色谱柱：XTerraC18 (4. 6mmX250mm，5ym);
[0080] 流速：1.OmT,/min；
[0081 ] 流动相：乙腈-水混合溶液，其中乙腈与水的体积比为9:1，等度洗脱；
[0082] 检测波长：3IOnm;
[0083]柱温：30cC;
[0084] 进样量：IOyL。
[0085] 3、标准曲线的绘制
[0086] 将帕地马酯标准工作液按如上测定条件依次由低向高进样测定，以峰面积-浓度 作图，得到标准回归方程，绘制标准工作曲线。
[0087] 4、测定
[0088] 按本发明测定条件对待测样品进行测定，用外标法定量。待测样液中帕地马酯含 量应该标准曲线之内，超出线性范围则应稀释后在进行分析。对于采用高效液相色谱法检 出阳性的样品，进一步采用高效液相色谱-质谱/质谱法进行确证。
[0089] 5、空白试验
[0090] 除不称取样品外，均按上述测定条件和步骤进行。
[0091] 6、结果计算
[0093]式中：
[0094] W---样品中帕地马酯的含量，mg/kg ;
[0095]c---从标准工作曲线上查出的试样溶液中帕地马酯的浓度，mg/L;
[0096] V 样液最终定容体积，mL ;
[0097]m---试样的质量，g。
[0098] 7、检出限和定量限
[0099] 帕地马酯的检出限为0.2mg/kg，定量限为0.5mg/kg。
[0100] 8、回收率
[0101] 在添加浓度0? 5mg/kg~80000mg/kg浓度范围内，，测得