一种基于原位生成硫化镉检测地塞米松光电化学传感器的制备方法_2

文档序号:9505111阅读:来源:国知局
L的硝酸水溶液中于120~130 °C回流20 h,冷却至室温后,回流产物用超纯水离心洗涤,30 °(:真空干燥10 h ;
(2)硫化祕纳米棒的制备
1.0g的硝酸铋溶解于10 mL乙二醇中,通氮气15 min,得溶液A,0.7g的硫化钠溶解于5 mL乙二醇和10 mL超纯水混合液中,均匀搅拌15 min后,得溶液B,所得溶液B在磁力搅拌下逐滴加入溶液A中,得溶液C,再将1.0 g尿素和5 mL超纯水加入混合液C中搅拌15 min,混合液转入反应釜中160 °C下反应20 h,降至室温后,抽真空过滤收集,然后依次用无水乙醇和超纯水各离心洗涤3次,真空60 °C干燥; (3)光电化学传感器的制备
1)将导电玻璃依次用洗洁精、丙酮、乙醇和超纯水超声清洗,氮气吹干;
2)分别取6μ?、2 mg/mL羧基化氮化碳溶液和6 μ?、2 mg/mL硫化铋溶液依次滴加到ITO导电玻璃的导电面,室温下晾干,马弗炉中300 °C煅烧15 min,冷却至室温;
3)在修饰电极表面滴加质量分数为0.01%的壳聚糖溶液,依次用0.01 mol/L氢氧化钠溶液和超纯水冲洗电极表面,室温下自然晾干成膜;
4)滴加20μ?、质量分数为2.5%的戊二醛,超纯水清洗,室温下自然晾干;
5)滴加6μ?、5 Pg/mL的地塞米松半抗原于修饰电极表面,超纯水冲洗电极表面,4 °C冰箱中晾干;
6)滴加3PL、质量分数为1%的牛血清白蛋白溶液,以此封闭电极表面上非特异性活性位点,超纯水冲洗电极表面,4 °C冰箱中晾干;
7)滴加6μ?、5 pg/mL~50 ng/mL地塞米松抗原和镉离子功能化二氧化钛抗体孵化物的混合溶液,超纯水冲洗电极表面,4 °(:冰箱中自然晾干,制得一种检测地塞米松的光电化学传感器。
[0017]实施例2光电化学传感器的制备
(1)羧基化氮化碳纳米片的制备
在陶瓷坩祸中加入5 g的三聚氰胺于马弗炉中550 °C煅烧4 h,冷却至室温,取1.0 g的氮化碳加入50 mL、5 mol/L的硝酸水溶液中于125 °C回流24 h,冷却至室温后,回流产物用超纯水离心洗涤,35 °(:真空干燥12 h ;
(2)硫化祕纳米棒的制备
2.0 g的硝酸铋溶解于25 mL乙二醇中,通氮气15 min,得溶液A,1.4 g的硫化钠溶解于10 mL乙二醇和20 mL超纯水混合液中,均匀搅拌15 min后,得溶液B,所得溶液B在磁力搅拌下逐滴加入溶液A中,得溶液C,再将2.0 g尿素和10 mL超纯水加入混合液C中搅拌30 min,混合液转入反应釜中180 °C下反应24 h,降至室温后,抽真空过滤收集,然后依次用无水乙醇和超纯水各离心洗涤3次,真空60 °C干燥;
(3)光电化学传感器的制备
1)将导电玻璃依次用洗洁精、丙酮、乙醇和超纯水超声清洗,氮气吹干;
2)分别取6μ?、4 mg/mL羧基化氮化碳溶液和6 μ?、4 mg/mL硫化铋溶液依次滴加到ΙΤ0导电玻璃的导电面,室温下晾干,马弗炉中400 °C煅烧30 min,冷却至室温;
3)在修饰电极表面滴加质量分数为0.05%的壳聚糖溶液,依次用0.01 mol/L氢氧化钠溶液和超纯水冲洗电极表面,室温下自然晾干成膜;
4)滴加20μ?、质量分数为5%的戊二醛,超纯水清洗,室温下自然晾干;
5)滴加6μ?、10 Pg/mL的地塞米松半抗原于修饰电极表面,超纯水冲洗电极表面,4 °C冰箱中晾干;
6)滴加3PL、质量分数为2%的牛血清白蛋白溶液,以此封闭电极表面上非特异性活性位点,超纯水冲洗电极表面,4 °C冰箱中晾干;
7)滴加6μ?、5 pg/mL~50 ng/mL地塞米松抗原和镉离子功能化二氧化钛抗体孵化物的混合溶液,超纯水冲洗电极表面,4 °(:冰箱中自然晾干,制得一种检测地塞米松的光电化学传感器。
[0018]实施例3光电化学传感器的制备
(1)羧基化氮化碳纳米片的制备
在陶瓷坩祸中加入5 g的三聚氰胺马弗炉中600 °C煅烧5 h,冷却至室温,取2.0 g的氮化碳加入200 mL、10 mol/L的硝酸水溶液中于130 °C回流28 h,冷却至室温后,回流产物用超纯水离心洗涤,40 °(:真空干燥14 h ;
(2)硫化祕纳米棒的制备
3.0g的硝酸铋溶解于50 mL乙二醇中,通氮气15 min,得溶液A,2.8 g的硫化钠溶解于20 mL乙二醇和40 mL超纯水混合液中,均匀搅拌15 min后,得溶液B,所得溶液B在磁力搅拌下逐滴加入溶液A中,得溶液C,再将3.0 g尿素和20 mL超纯水加入混合液C中搅拌60 min,混合液转入反应釜中200 °C下反应28 h,降至室温后,抽真空过滤收集,然后依次用无水乙醇和超纯水各离心洗涤3次,真空60 °C干燥;
(3)光电化学传感器的制备
1)将导电玻璃依次用洗洁精、丙酮、乙醇和超纯水超声清洗,氮气吹干;
2)分别取6μ?、8 mg/mL羧基化氮化碳溶液和6 μ?、8 mg/mL硫化铋溶液依次滴加到ΙΤ0导电玻璃的导电面,室温下晾干,马弗炉中500 °C煅烧60 min,冷却至室温;
3)在修饰电极表面滴加质量分数为0.1%的壳聚糖溶液,依次用0.01 mol/L氢氧化钠溶液和超纯水冲洗电极表面,室温下自然晾干成膜;
4)滴加20μ?、质量分数为10%的戊二醛,超纯水清洗,室温下自然晾干;
5)滴加6μ?、20 Pg/mL的地塞米松半抗原于修饰电极表面,超纯水冲洗电极表面,4 °C冰箱中晾干;
6)滴加3PL、质量分数为3%的牛血清白蛋白溶液,以此封闭电极表面上非特异性活性位点,超纯水冲洗电极表面,4 °C冰箱中晾干;
7)滴加6μ?、5 pg/mL~50 ng/mL地塞米松抗原和镉离子功能化二氧化钛抗体孵化物的混合溶液,超纯水冲洗电极表面,4 °(:冰箱中自然晾干,制得一种检测地塞米松的光电化学传感器。
[0019]实施例4 Ti02-Cd2+-ant1-DXM抗体孵化物的制备
(1)0.01mol钛酸四丁酯溶解于15 mL乙醇中,加入5 mL水,磁力搅拌100 min ;
(2)将混合溶液转移至高压反应釜中,100°C温度下反应10 h ;
(3)所得产物用超纯水和乙醇各离心洗涤3次,80°C下真空干燥11 h,制得多孔二氧化钛纳米颗粒;
(4)将制得的10mg 二氧化钛加入至50 mL、5 mmol硝酸镉溶液中,超声2 min, 50 °C水浴振荡1 h,离心水洗;
(5)将7mg镉离子功能化的二氧化钛纳米颗粒分散在7.5 mL、l mg/mL聚丙稀胺盐酸盐溶液中,搅拌1 h ;
(6)加入100PL、质量分数为1%的戊二醛,震荡2 h ;
(7)将所得溶液离心洗涤,用pH7.0的PBS分散,加入100 μ?、50 μ g/mL地塞米松抗体震荡20 h,离心洗去多余抗体,分散在2 mL含质量分数为0.5% BSA的pH 7.0的PBS溶液里,于4 °C冰箱中储存以备用。
[0020]实施例5 Ti02-Cd2+-ant1-DXM抗体孵化物的制备 (1)0.02 mol钛酸四丁酯溶解于30 mL乙醇中,加入10 mL水,磁力搅拌120 min ;
(2)将混合溶液转移至高压反应釜中,200°C温度下反应12 h;
(3)所得产物用超纯水和乙醇各离心洗涤3次,80°C下真空干燥13 h,制得多孔二氧化钛纳米颗粒;
(4)将制得的20mg 二氧化钛加入至50 mL、10 mmol硝酸镉溶液中,超声2 min, 50 °C水浴振荡2 h,离心水洗;
将15 mg镉离子功能化的二氧化钛纳米颗粒分散在7.5 mL、2 mg/mL聚丙稀胺盐酸盐溶液中,搅拌1 h ;
(6)加入200PL、质量分数为2.5%的戊二醛,震荡2 h ;
(7)将所得溶液离心洗涤,用pH7.0的PBS分散,加入100 μ?、100 μ g/mL地塞米松抗体震荡20 h,离心洗去多余抗体,分散在2 mL含质量分数为1% BSA的pH 7.0的PBS溶液里,于4 °C冰箱中储存以备用。
[0021]实施例6 Ti02-Cd2+-ant1-DXM抗体孵化物的制备
(1)0.04 mol钛酸四丁酯溶解于60 mL乙醇中,加入20 mL水,磁力搅拌140
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