一种基于离子型铱配合物磷光猝灭检测色氨酸的方法【
技术领域：
】[0001]本发明基于动态猝灭机理，加入的色氨酸与磷光金属铱配合物之间发生光诱导电子转移(PET)导致配合物磷光猝灭，属于光谱分析检测领域。【
背景技术：
】[0002]氨基酸的特异性检测一直以来是分析检测方面的一大难点，因为动植物中富含的十几种氨基酸都具有相同的氨基和羧基，而不同的结构又大多为化学惰性，所以对氨基酸的检测灵敏度普遍偏低。色氨酸是一种非常重要的氨基酸，它被广泛应用于医药和食品行业。它是唯一一个连接在血浆白蛋白的氨基酸。在人脑内羟化酶的作用下，游离的色氨酸会合成5-羟色胺，其浓度的增加很容易引起神经衰弱[1]。同时研究也发现，肝功能衰竭会极大的增大脑细胞中色氨酸含量[2]。因此，临床检测色氨酸的浓度具有非常大的意义。[0003]传统检测色氨酸的方法如色谱法、电位滴定法、荧光分析法、电化学方法等大多需要对氨基酸进行衍生化处理[3]，操作繁琐，检测限普遍偏高，而本发明采用水溶性铱配合物磷光猝灭检测色氨酸，具有非常高的检测灵敏度，检测限达到10—9H1l.L—1。本发明中使用的铱配合物的磷光对色氨酸有很好的响应，为测定复杂体系中的色氨酸提供了参考模型，将来有望广泛使用。[0004]在众多检测方法中，荧光探针被认为是目前最为快捷有效的分子检测工具，它们可以用于活体细胞以及水溶液中目标物质的定量检测[4]。然而，当荧光分析技术应用于实际样品检测时容易被一些杂散光和体系背景发射干扰，这种信号的干扰会降低信噪比，导致检测灵敏度降低[5]。为了减小这些干扰信号的影响，人们发现具有较长发光寿命的磷光(一般在微秒级)检测技术很好的克服了这一困难，因为磷光信号能容易的实现与发光寿命很短的普通荧光和杂散光产生的杂质信号区分开[6]。[0005]近年来，铱配合物因其磷光传感器方面巨大的应用价值得到了国内外科学家的广泛关注。铱配合物的磷光发射受配体影响很大，因此配体如果和目标分子发生作用将会改变整个铱配合物的发光特性，基于这种原理可以检测一些特定的分子[7]。与一般荧光检测相比，铱配合物磷光具有非常好的光稳定性，较大的斯托克斯位移以及较长的发光寿命，可以作为一种优良的磷光传感器信号[8]。所以，铱配合物制作的磷光传感器在生物传感、生物成像、分子离子探针等方面有巨大的潜在应用价值。[0006]使用铱配合物磷光猝灭法检测氨基酸的报道目前还比较少，其中李富友[9]使用了一种新型铱配合物磷光传感器检测高半胱氨酸分子，其检测机理是磷光铱配合物配体上修饰的醛基和体系中的高半胱氨酸分子形成一个稳定的六元环状结构，改变了配合物结构从而使磷光发生改变。YoungminYou[1()]合成了一种含有米基硼配体的铱配合物，它对氟离子的检测灵敏度和选择性都非常高。但是大多数的铱配合物缺点在于水溶性很差，不能在水溶液中检测目标分子。本发明以一种水溶性离子型铱配合物(pq)2Ir(dCbpy)+PF6—[11]作为磷光探针，用pH=7.4的PBS缓冲溶液控制pH，加入不同浓度的色氨酸会对铱配合物磷光猝灭从而定量的检测色氨酸分子，具有很高的灵敏度和选择性。[0007]参考文献[0008][I]DengKQ,ZhouJH，etal.Directelectrochemicalreduct1nofgrapheneoxideanditsapplicat1ntodeterminat1nofL-tryptophanandL-tyrosine[J].ColloidSurfaceB，2013，101，183-188.[0009][2]ZengLJ,WangHjBoXJ,etal.Electrochemicalsensorforaminoacidsbasedongoldnanoparticles/macroporouscarboncompositesmodifiedglassycarbonelectrode[J].ElectroanalChem，201，117-122.[0010][3]LiL,ChenY，etal.Compositesystembasedonb1molecules-funct1nalizedmultiwalledcarbonnanotubeand1nicliquid!Electrochemistryandelectrocatalysisoftryptophane[J].ElectrochimActa,201I,58,105-111.[0011][4]LiaoXQ,LiRY，etal.Fastsynthesisofcoppernanoclustersthroughtheuseofhydrogenperoxideadditiveandtheirapplicat1nforthefluorescencedetect1nofHg2+inwatersamples[J].NewJournalOfChemistry,2015，39,5240-5248.[0012][5]DeAK,GangulyT.Steadystateandtimeresolvedstudiesonphotophysicalpropertiesofcarbazoleand9-phenylcarbazolemoleculesandtheirquenchingreact1nswithsuitableelectronacceptersintheexcitedelectronicstatesbothattheambienttemperatureandat77K[J].JLumin，2001，92,255-270.[0013][6]KeefeMHjBenksteinKD，etal.Luminescentsensormoleculesbasedoncoordinatedmetals:areviewofrecentdevelopments[J].Coord.Chem.Rev,2000,205:201-228.[0014][7]ChouPT,ChiY，etal.PhosphorescentDyesforOrganicLight-EmittingD1des[J].Chem.Eur.J,2007,13:380-395.[0015][8]ChenHLjLiFY，etal.SelectivePhosphorescenceChemosensorforHomocysteineBasedonanIridium(III)Complex[J].1norg.Chemj2007,46(26),11075-11081.[0016][9]刘淑娟.离子型小分子与高分子铱配合物的设计、合成、表征与光电性能研究[D]上海:复旦大学，2当前第1页1 2