只要多孔膜的材料和结构稳定，不和磁颗粒、缓冲液及用于测试生物试样的其他试剂发生反应。多孔膜的孔径至少要大于磁颗粒的尺寸。多孔膜的孔径与磁颗粒粒径的比被选择为一方面便于磁颗粒借助缓冲液均匀分散多孔膜中，另一方面有利于分散在多孔膜中的干燥磁颗粒在分散液流动的情况下充分地从多孔膜析出并均匀分散中缓冲液中。磁颗粒的粒径的范围为20纳米-5000纳米，多孔膜的孔径的范围为200纳米-50微米，多孔膜的孔径与所述磁颗粒的粒径比为1.5-1000:1。
[0039]实施例1:
[0040]本实施例中,粒径为500纳米的、表面修饰有约I纳米的streptavidin的磁颗粒，分散在碳酸盐缓冲液中，在该实施例中为碳酸氢钠缓冲液，形成浓度为3毫克/毫升的磁颗粒悬浮液。选用-孔径为10微米、厚度为300微米的硝酸纤维膜，该膜孔径与磁颗粒粒径的比例为20:1。
[0041]在硝酸纤维膜上面滴加4微升所配制的浓度为3毫克/毫升的磁颗粒分散溶液，把硝酸纤维膜放入约_30°C的环境速冻，然后抽真空并缓慢升温，直至带有磁颗粒的硝酸纤维膜上除磁颗粒以外的冷冻固体全部升华，硝酸纤维膜全部干燥。得到分散有磁颗粒的干燥的硝酸纤维膜。随后将这样得到的硝酸纤维膜真空密封进真空袋，密封保存。
[0042]将制得的多孔膜置于4_8°C的环境，即可长期保存至少一年。在室温(25°C )也可以保存至少半个月。图1为按所需尺寸切割好的加磁颗粒之前的硝酸纤维膜，图2为带有冻干磁颗粒的硝酸纤维膜。
[0043]在实施例1得到的多孔膜中注入碳酸盐缓冲液，使缓冲液流经分散有磁颗粒的多孔膜，磁颗粒重新分散在碳酸盐缓冲液中。通过观察，有大于约85%的分散在硝酸纤维膜孔内的干燥磁颗粒重新均匀分散到缓冲液中。
[0044]实施例2
[0045]本实施例中，粒径为40纳米的表面修饰有约I纳米的streptavidin的磁颗粒,分散在含有吐温-20的磷酸盐缓冲液溶剂中，浓度为I毫克/毫升。选用孔径为20微米、厚度为500微米的玻璃纤维膜，该膜孔径与磁颗粒粒径的比例为500:1。
[0046]将如图5所示的玻璃纤维膜剪裁成合适的形状及尺寸，均匀摆放在托盘中，用自动分液仪在每个玻璃纤维膜上面滴加I微升所配制的浓度为I毫克/毫升的磁颗粒溶液，把玻璃纤维膜放入约_40°C的环境速冻，然后抽真空并缓慢升温，直至带有磁颗粒的玻璃纤维膜上除磁颗粒以外的冷冻固体全部升华，玻璃纤维膜全部干燥。随后将带有已干燥磁颗粒的玻璃纤维膜组装进测试盒，将测试盒真空密封进真空袋。
[0047]将制得的测试盒放入4_8°C的环境，即可长期保存约I年。在室温(25°C )也可以保存至少半个月。
[0048]本实施例中所用的测试盒具有如图6和7所示的结构。该测试盒在中国专利CN201110188147.4中有所阐述。将冷冻干燥后分散有干燥磁颗粒的玻璃纤维膜放置在流体通道1100，将磷酸盐缓冲液-置于测试盒的1016试剂室中，组装完成测试盒。容纳分散有磁颗粒的玻璃纤维膜的1100位于试剂室1016的缓冲液流出的路径中。当进行化学或生化反应测试时，第二密封层102被刺穿，磷酸盐缓冲液通过试剂室1016的下端开口进入微流体通道并流经与试剂室1016邻近、放置在1100里的玻璃纤维膜。磷酸盐缓冲液流经分散有磁颗粒的玻璃纤维膜，磁颗粒重新分散在磷酸盐缓冲液中得到均匀分散有磁颗粒的缓冲液并进入反应室1049，进入反应室的磁颗粒与从样品室1012进入微通道1048并最终进入反应室1049的待测样品进行生化反应。通过观察重新分散有磁颗粒的缓冲液，大约有95%的分散在玻璃纤维膜孔内的干燥磁颗粒重新均匀分散到缓冲液中并最终参与生化反应。
[0049]实施例3
[0050]本实施例中,粒径为200纳米、表面修饰有streptavidin的磁颗粒,分散在含有吐温-20的磷酸盐缓冲液溶剂中，浓度为5毫克/毫升，选用平均孔径为4微米、厚度为400微米的硝酸纤维膜，该膜孔径与磁颗粒粒径的比例为20:1。
[0051]本实施例中所用的测试盒如图6和7所示，该测试盒在中国专利CN201110188147.4中有所阐述。将硝酸纤维膜裁剪为合适的形状和尺寸放入测试盒的试剂室1100中，该试剂室1100优选具有易于流体流经的形状，然后在硝酸纤维膜上面滴加I微升所配制的浓度为5毫克/毫升的磁颗粒溶液，把载有硝酸纤维膜的测试盒部件放入-40°C的环境速冻，然后抽真空并缓慢升温，直至带有磁颗粒的硝酸纤维膜上除磁颗粒以外的冷冻固体全部升华，硝酸纤维膜全部干燥。然后在试剂室1016内，注入磷酸盐缓冲溶液，组装完成测试盒。容纳分散有磁颗粒的硝酸纤维膜的1100位于试剂室1016缓冲液流出的路径中。当进行化学或生化反应测试时，第二密封层102被刺穿，磷酸盐缓冲液通过试剂室1016的下端开口进入装有分散有干燥磁颗粒的硝酸纤维膜的试剂室1100，磷酸盐缓冲液流经分散有磁颗粒的硝酸纤维膜，磁颗粒重新分散在磷酸盐缓冲液中得到均匀分散有磁颗粒的缓冲液从而进入反应室1049，进入反应室的磁颗粒与从样品室1012进入微通道1048并最终进入反应室1049的待测样品进行生化反应。通过观察重新分散有磁颗粒的缓冲液，大约有90%的分散在硝酸纤维膜孔内的干燥磁颗粒重新均匀分散到缓冲液中而最终参与生化反应。
[0052]显然，本发明的上述实施例仅仅是为清楚地说明本发明所作的举例，而并非是对本发明的实施方式的限定，对于所属领域的普通技术人员来说，在上述说明的基础上还可以做出其它不同形式的变化或变动，这里无法对所有的实施方式予以穷举，凡是属于本发明的技术方案所引伸出的显而易见的变化或变动仍处于本发明的保护范围之列。
【主权项】
1.一种分散有干燥磁颗粒的多孔膜，其特征在于， 所述多孔膜的孔径大于所述磁颗粒的粒径；且 所述多孔膜通过冷冻干燥承载均匀分散有磁颗粒的缓冲液的多孔膜得到。2.如权利要求1所述的多孔膜，其特征在于，所述磁颗粒的粒径的范围为20纳米-5000纳米，所述多孔膜的孔径的范围为200纳米-50微米，所述多孔膜的孔径与所述磁颗粒的粒径比为1.5-1000 =103.如权利要求1所述的多孔膜，其特征在于，所述缓冲溶液选自磷酸盐缓冲液和碳酸盐缓冲液。4.如权利要求1所述的多孔膜，其特征在于，所述多孔膜选自硝酸包括纤维膜、玻璃纤维膜、聚酯膜和无纺布组。5.一种测试盒，其特征在于， 该测试盒容纳有分散有干燥磁颗粒的多孔膜和缓冲液， 该多孔膜的孔径大于所述磁颗粒的粒径；且所述多孔膜通过冷冻干燥承载均匀分散有磁颗粒的缓冲液的多孔膜得到， 所述多孔膜邻近所述缓冲液且位于所述缓冲液流动路径中。6.如权利要求5所述的测试盒，其特征在于，容纳在所述测试盒中的缓冲液与用于形成分散有干燥磁颗粒的多孔膜的缓冲液相同。7.如权利要求5所述的测试盒，其特征在于，所述磁颗粒的粒径的范围为20纳米-5000纳米，所述多孔膜的孔径的范围为200纳米-50微米，所述多孔膜的孔径与所述磁颗粒的粒径比为1.5-1000 =108.如权利要求5所述的测试盒，其特征在于，所述缓冲液选自磷酸盐缓冲液和碳酸盐缓冲液。9.如权利要求5所述的测试盒，其特征在于，所述多孔膜选自包括硝酸纤维膜、玻璃纤维膜、聚酯膜和无纺布的组。10.一种形成分散有干燥磁颗粒的多孔膜的方法，包括: 制备分散有磁颗粒的缓冲液； 将含有磁颗粒的溶液滴加在多孔膜上； 将滴有磁颗粒溶液的膜冷冻干燥，密封保存。11.根据权利要求10所述的方法，其特征在于，所述多孔膜的孔径的范围为200纳米-50微米；所述磁颗粒的粒径的范围为20纳米-5000纳米；且所述多孔膜的孔径大于所述磁颗粒的粒径。12.根据权利要求10所述的方法，其特征在于，所述滴加的量100纳升-10微升。13.根据权利要求10所述的方法，其特征在于，所述干燥优选冷冻干燥，所述冷冻的温度为低于-30摄氏度。
【专利摘要】本发明公开一种分散有干燥磁颗粒的多孔膜，该多孔膜的孔径大于所述磁颗粒的粒径；且该多孔膜通过冷冻干燥承载均匀分散有磁颗粒的缓冲液的多孔膜得到。本发明还公开了含有该膜的测试盒及该膜的制备方法。本发明的多孔膜可使磁颗粒冻干后保存在较长的时间里保持其生物化学性能，也可以避免在液体悬浮液中保存时由于沉淀而引起的团聚或者难以再均匀悬浮分散的问题。
【IPC分类】G01N33/50
【公开号】CN105628909
【申请号】CN201410617435
【发明人】石西增, 宋川
【申请人】东莞博识生物科技有限公司
【公开日】2016年6月1日
【申请日】2014年11月4日
【公告号】WO2016070743A1