一种新会陈皮及制品中乐果等农药的测定方法
【技术领域】
[0001] 本发明涉及农药残留检测技术领域，特别涉及一种新会陈皮及制品中乐果等农药 的测定方法。
【背景技术】
[0002] 新会陈皮是不可多得的药食同源、食养倶佳的著名地方特产，为广东十大地道中 药材之一，是"广东三宝"（陈皮、老姜、禾杆草)的第一宝和清庭贡品。但新会陈皮及其制品 面临的食品安全风险十分严峻，近年曾出现新会陈皮农残污染报道，不仅影响人体健康，损 害消费者利益，还会影响新会陈皮及其制品出口竞争力和产品声誉。
[0003] 我国现有的农药检测标准中，在样品前处理中大量使用重蒸丙酮，丙酮对人的肝 肾和胰腺损害极大。而且二氯甲烷和丙酮的重蒸和使用对残留检测操作人员健康有一定的 风险。因此，建立成本低廉、绿色环保、准确快速的新会陈皮及其制品中农药残留量分析方 法是非常重要的。
【发明内容】
[0004] 针对上述技术问题，本发明提供一种新会陈皮及制品中乐果等农药的测定方法。 述农药为敌敌畏、甲胺磷、乙酰甲胺磷、甲拌磷、氧乐果、乐果、毒死蜱、马拉硫磷、对硫磷、喹 硫磷、乙硫磷，所述方法包括以下步骤：
[0005] (1).标准曲线的制作：分别移取上述11种农药标准品溶液1.000ml至25mL棕色容 量瓶中，用色谱纯乙酸乙酯稀释并定容至刻度，配制成质量浓度为4.OOOyg/mL的标准储备 液;吸取标准储备液〇. 〇〇50mL、0.0125mL、0.050mL、0.50mL、5. OmL，分别置于10mL棕色容量 瓶中，用色谱纯乙酸乙酯稀释并定容至刻度，摇匀，制得质量浓度分别为0.0020yg/mL、 0 · 0050yg/mL、0 · 020yg/mL、0 · 20yg/mL、2 · 0yg/mL的标准工作液;分别取lyL标准工作液注入 气相色谱仪中，以质量浓度为横坐标，组分峰面积为纵坐标，绘制标准曲线；
[0006] (2).样品提取:将样品加水浸泡后用有机溶剂提取；
[0007] (3).样品净化:将步骤（2)所得提取液经萃取柱净化后，用氮气吹至近干，加入有 机溶剂溶解残渣，经滤膜过滤；
[0008] (4).样品测定:用气相色谱仪检测样品，以保留时间定性、以峰面积计算待测样品 中所述11种农药的残留量，以外标法计算结果;色谱条件如下：
[0009] 色谱柱：以（14%-氰丙基-苯基)_甲基聚硅氧烷为固定液的毛细管柱;载气：纯度 >99.999%的氦气；流速：1. OmL/min;进样量：1. OyL，不分流进样;柱温：初始100°C，保持 lmin，以20°C/min程序升温至220°C，保持2min，再以5°C/min程序升温至250°C，保持lOmin; 进样口温度：250°C ;检测器温度：250°C ;检测器:火焰光度检测器;磷滤光片：526nm;燃烧 气:纯度>99.999%的氢气，流速:62.5111171^11 ;助燃气:空气，流速:90.〇111171^11。
[0010] 进一步地，所述样品为新会柑、陈皮酱、陈皮花色饼、陈皮梅，所述步骤(2)样品提 取的方法为:称取2.00g样品置于50mL离心管中，加入2mL水，振荡lmin，超声10min，加入5mL 乙酸乙酯，超声lOmin，离心5min，吸取上层清液，再加入3mL乙酸乙酯重复提取，合并上清 液，混匀。
[0011]进一步地，所述样品为新会陈皮、柑普茶，所述步骤(2).样品提取的方法为:称取 2.00g样品置于50mL离心管中，加入4mL水，振荡lmin，超声lOmin，加入5mL乙酸乙酯，超声 lOmin，离心5min，吸取上层清液，再加入5mL乙酸乙酯重复提取，合并上清液，混匀。
[0012]具体地，所述步骤⑶中有机溶剂为ImL乙酸乙酯。
[0013] 具体地，所述离心速度为3000r/min。
[0014] 具体地，所述农药标准品溶液浓度为100yg/mL，溶剂为丙酮。
[0015]具体地，所述滤膜的孔径为0·22μπι。
[0016]具体地，所述萃取柱包括柱管、下筛板、下层填料、隔离筛板、上层填料和上筛板； 所述下筛板、下层填料、隔离筛板、上层填料和上筛板依次由下至上分布于所述柱管中；其 中所述下层填料为改性多壁碳纳米管，用量为〇. 5g;所述上层填料为Ν-丙基乙二胺填料，用 量为〇. 5g;所述上筛板的厚度大于所述下筛板。因为上筛板承受更大压力。
[0017]具体地，所述萃取柱的制备方法为:取10mL所述柱管，底部铺设所述下筛板，装入 〇. 5g改性多壁碳纳米管，轻轻敲打使均匀填充，用隔离筛板压平后在隔离筛板上部装入 〇.5g N-丙基乙二胺填料，轻轻敲打，用所述上筛板压平，依次用6mL甲醇、6mL乙酸乙酯活 化，即得。
[0018] 与现有技术相比，本发明采用乙酸乙酯作为提取溶剂，用量少但加标回收率高，该 试剂对人体健康危害低，本发明对环境友好;本发明使用自制固相萃取小柱，检测成本低； 样品含量在0.001~lmg/kg范围内具有良好的线性响应，且在0.001mg/kg、0.005mg/kg和 0.01mg/kg三种添加水平下的加标回收试验均具有较高的回收率。本发明还具有操作简单 快速、灵敏度高、抗基质干扰能力强的优点，适用于新会陈皮及其制品中农药残留的定性和 定量分析。
[0019] 为了更好地理解和实施，下面结合附图详细说明本发明。
【附图说明】
[0020] 图1是本发明11种农药混合标准溶液气相色谱图（2.Oyg/mL)，按出峰顺序从1至11 依次为:敌敌畏、甲胺磷、乙酰甲胺磷、甲拌磷、氧乐果、乐果、毒死蜱、马拉硫磷、对硫磷、喹 硫磷、乙硫磷；
[0021] 图2是新会陈皮空白加混标样品通过SPE小柱(PSA+C18)净化后的色谱图；
[0022]图3是新会陈皮空白加混标样品通过SPE小柱(Cl 8+MWNTs)净化后的色谱图；
[0023]图4是新会陈皮空白加混标样品通过SPE小柱(PSA+MWNTs)净化后的色谱图；
[0024]图5是本发明萃取柱剖面图；
[0025] 图6是新会陈皮加混标的标准曲线定性定量的气相色谱图；
[0026] 图7是柑普茶加混标的标准曲线定性定量的气相色谱图。
【具体实施方式】
[0027] 仪器与试剂:GCMS-QP 2010 Ultar(日本岛津公司）：配FPD检测器、A0C-20si自动 进样系统，SGH-300高纯氢发生器(北京东方精华苑公司），KQ 2200DB型超声振荡器(昆山超 声仪器有限公司），2-16型通用台式高速离心机(德国Sigma公司），IKA涡旋混合器，DN-12W 氮吹仪(上海比郎公司），SPE装置(美国Supelco公司），SPE空柱管(上海德理安公司）。
[0028] 11种农药标准品：规格为lOOyg/mL，安碚瓶密封保存，均购自农业部环境保护科研 检测所。
[0029]甲醇、乙腈、乙酸乙酯为色谱纯、购自德国默克公司，正己烷为分析纯、购自天津富 宇公司，十八烷基键合硅胶（以下简称为C18)固相萃取填料购自苏州赛分公司，N-丙基乙二 胺填料（以下简称PSA)购自山东奥秘公司，多壁碳纳米管（以下简称MWNTs)购自深圳市纳米 港有限公司，实验用水为去离子蒸馏水。改性多壁碳纳米管的制备方法在《改性多壁碳纳米 管固相萃取-高效液相色谱法测定农产品中痕量残留的4种有机氯农药》（《色谱》杂志， V〇1.30，N〇.9,966 ~970)中有所公开。
[0030]以下实施例所用样品均购自本地超市。
[0031] 实施例1:样品测定
[0032] 1.1标准储备液的配制：分别准确吸取敌敌畏、甲胺磷、乙酰甲胺磷、甲拌磷、氧乐 果、乐果、毒死蜱、马拉硫磷、对硫磷、喹硫磷、乙硫磷100.0 yg/mL标准品溶液1. OOOmL至25mL 棕色容量瓶，用色谱纯乙酸乙酯稀释并定容至刻度，分别配制成质量浓度为4.000yg/mL的 标准储备液，4 C保存，备用。
[0033] 1.2标准工作液的配制：分别准确吸取标准储备液0.0050mL、0.0125mL、0.050mL、 0.50mL、5. OmL，分别置于10mL棕色容量瓶中，用色谱纯乙酸乙酯稀释并定容至刻度，摇匀， 制得质量浓度分别为〇 · 0020yg/mL、0 · 0050yg/mL、0 · 020yg/mL、0 · 20yg/mL、2 · 0yg/mL 的标准 工作液，4°C保存，备用。
[0034] 1.3绘制标准曲线:分别取lyL标准工作液注入气相色谱仪中，以质量浓度为横坐 标，组分峰面积为纵坐标，绘制标准曲线。
[0035] 1.4样品的提取:称取2.00g陈皮梅样品置于50mL离心管中，加入2mL7K，振荡lmin， 超声10min，加入5mL乙酸乙酯，超声10min，以3000r/min离心5min，吸取上层清液，再加入 3mL乙酸乙酯重复提取，合并上清液，混匀。
[0036] 1.5样品的净化:取10mL固相萃取空柱管，底部铺下筛板，装入0.5g改性多壁碳纳 米管，轻轻敲打使均匀填充，用隔离筛板压平后再加入0.5g N-丙基乙二胺填料，轻轻敲打， 压好上筛板，即得自制固相萃取小柱。使用前依次用6mL甲醇、6mL乙酸乙酯活化。取样品提 取上清液过自制固相萃取小柱，收集流出液，氮气吹至近干，加lmL色谱纯乙酸乙酯溶解残 渣，振荡lmin，溶液过0.22μηι有机相滤膜上机测定。
[0037] 1.6 GC的检测：采用气相色谱（GC)对试液进行检测。气相色谱条件：色谱柱： Agi lent RTX-1701 (30m X 0 · 32mm X 0 · 25μπι);载气：高纯氦气（体积百分比 >99 · 999 % );流 速:1. OmL/min;进样量:1. OyL;进样方式:程序升温不分流进样;升温程序:初始100 °C，保持 lmin，以20°C/min升温至220°C，保持2min，再以5°C/min升温至250°C，保持lOmin;进样口温 度:250°C ;检测器温度:250°C ;检测器:火焰光度检测器(FH));磷滤光片:526nm;燃烧气:氢 气(体积百分比>99.999 % )，流速:62.5mL/min;助燃气：空气，流速:90.0 mL/min。
[0038] 其中，11种农药残留气相色谱图如图1所示。农药残留结果按下式计算:计算结果 需扣除空白值。
[0040] 式中:X--供试试样中农药的残留量，单位为mg/kg;
[0041 ] c--试样溶液中农药的浓度，单位为yg/mL;
[0042] V 最终样液的定容体积，单位为mL;
[0043] m--供试试样的质量，单位为g;
[0044] 实施例2:提取溶剂的选择
[0045] 本实施例中标准储备液、标准工作液的配制、样品的净化以及色谱条件与实施例1 相同，样品的提取方法如下：称取阴性新会陈皮粉末2.00g样品置于50mL离心管中，添加 0.20yg/mL标准品溶液，加入2mL水，振荡并超声，分别用5mL石油醚、甲醇和乙酸乙酯进行2 次提取。实验结果见表1。
[0046] 〈表1不同有机溶剂提取的加标回收率〉
[0047]
[0048] 从表1不同有机溶剂提