一种样品释放垫处理液的制作方法
【专利摘要】本发明公开了一种样品释放垫处理液，解决了现有预处理试剂仅仅只是防止物质非特异地吸附到免疫层析试纸条上时，不能更好地提高检测的灵敏度和准确度的问题。本发明包括缓冲物质、封闭剂、亲水性大分子物质、表面活性剂、金属螯合剂、防腐剂和氯化钠。本发明能更好地提高检测的灵敏度和准确度，效果十分显著。
【专利说明】
一种样品释放垫处理液
技术领域
[0001] 本发明涉及一种处理液，具体涉及一种样品释放垫处理液。
【背景技术】
[0002] 现有技术中，为了能达到更好的检测灵敏度和准确度，常规的方法是使用样品清 洗液、样品垫和结合释放垫处理液等类似的组合物质进行处理，该组合物质用于主动地冲 洗未在免疫层析试纸条上展开而残留的标记抗体，防止物质非特异地吸附到免疫层析试纸 条上。而为了达到该效果，通常该组合物质的组成中包含有封闭试剂、表面活性剂和缓冲液 等。
[0003] 如，对比文件CN201310124432.9公开了一种样品垫和结合释放垫预处理试剂，该 试剂为包含表面活性剂、蛋白、糖类或生物相容性高聚物的缓冲溶液，采用该试剂对样品垫 与结合释放垫进行预处理，该试剂能够有效使纳米粒子抗体标记物复溶，进而达到提高检 测效果的目的。本对比文件中提高检测效果的实现原理也是采用优化试剂组成成份，进而 有效防止样品垫与结合释材料对物质非特异地吸附到免疫层析试纸条上。
【发明内容】
[0004] 本发明所要解决的技术问题是:现有预处理试剂仅仅只是防止物质非特异地吸附 到免疫层析试纸条上时，不能更好地提高检测的灵敏度和准确度，提供解决上述问题的一 种样品释放垫处理液。
[0005] 本发明通过下述技术方案实现： 一种样品释放垫处理液，包括缓冲物质、封闭剂、亲水性大分子物质、表面活性剂、金属 螯合剂、防腐剂和氯化钠。
[0006] 本发明的原理是:通过封闭剂、亲水性大分子物质、表面活性剂有效防止样本物质 非特异地吸附到免疫层析试纸条上；并通过金属螯合剂的使用螯合样本中的多种金属离 子，以消除可抑制抗原抗体反应活性的金属离子，从而提高抗原抗体反应活性，达到提高灵 敏度的目的。即，本发明通过封闭剂、表面活性剂的作用可排除材料吸附方面的非特异性干 扰，金属螯合物可有效排除样本中其他干扰。因而，本发明不仅仅能够对材料的非特异性吸 附起到排除干扰的作用，还能有效排除因抗原抗体的反应活性产生副作用的干扰作用，这 对于提高检测灵敏度有意想不到的效果。
[0007] 进一步，所述处理液中缓冲物质的浓度为5~500mmol/L，封闭剂的浓度为1~50g/ L，亲水性大分子物质的浓度为0.001g/L~100g/L，表面活性剂的浓度为0.001g/L~50g/L， 金属螯合剂的浓度为〇. 〇5g/L~50g/L，防腐剂的浓度为0.1~10mL/L，氯化钠的浓度为0.05 ~1000mmol/L〇
[0008] 通过上述浓度的设置，能使检测灵敏度得到最大化地提高，通过该浓度的优选设 置，通过实施例和对照试验检测出的荧光信号值的对比结果可知:本发明中各组分的过量 或不足均不能达到较好地检测灵敏度的效果。
[0009] 优选地，所述缓冲物质为1.19~119g/L的4-羟乙基哌嗪乙磺酸，或1.82~ 181.20g/L的哌嗪-N，N'_二(2-羟基丙磺酸）。所述封闭剂为酪蛋白。所述亲水性大分子物质 为聚乙烯吡咯烷酮或聚乙烯吡咯烷酮。所述表面活性剂为Pluronic F-68或Brij35或 Tetronic 1307。所述金属螯合剂为乙二胺四乙酸二钠、乙二胺四乙酸二钾、乙二胺四乙酸 二钠镁盐或乙二胺四乙酸铁钠。所述防腐剂为Proc 1 in300。
[0010] 本发明与现有技术相比，具有如下的优点和有益效果： 1、 本发明不仅仅能够对材料的非特异性吸附起到排除干扰的作用，还能有效排除抗原 抗体的反应活性产生副作用的干扰作用，这对于提高检测灵敏度有意想不到的效果； 2、 通过本发明浓度的优选设置，能明显提高检测结果的灵敏度。
【具体实施方式】
[0011] 为使本发明的目的、技术方案和优点更加清楚明白，下面结合实施例，对本发明作 进一步的详细说明，本发明的示意性实施方式及其说明仅用于解释本发明，并不作为对本 发明的限定。 实施例
[0012] 一种样品释放垫处理液，包括缓冲物质、封闭剂、亲水性大分子物质、表面活性剂、 金属螯合剂、防腐剂和氯化钠。
[0013] 所述缓冲物质为HEPES或P0PS0,该HEPES为4-羟乙基哌嗪乙磺酸，该P0PS0为哌 嗪-N，N'_二(2-羟基丙磺酸）。所述封闭剂为酪蛋白。所述亲水性大分子物质为聚乙烯吡咯 烷酮，该聚乙烯吡咯烷酮优选为PVP-30或PVP-90。所述表面活性剂为Pluronic F-68、 Bri j35或Tetronic 1307。所述金属螯合剂为乙二胺四乙酸二钠、乙二胺四乙酸二钾、乙二 胺四乙酸二钠镁盐或乙二胺四乙酸铁钠。所述防腐剂为Proclin300。
[0014] 因亲水性大分子物质、表面活性剂、金属螯合剂均可以为多种具体物质，且其作用 原理相同，故本实施例仅举例每一类物质中的一种具体物质。具体设置如表1所示。
[0015] 表1
本发明处理液的制备方法如下： 用量筒量取800mL去离子水于适合量程烧杯中，称取上述表1中各实例和对照例的物质 加入到该烧杯中，充分搅拌至完全溶解，调pH至8.0，定容至1L。
[0016]分别量取50mL上述不同配比的处理液，分别对PCT荧光层析检测试纸条的样品释 放垫进行浸泡处理，浸泡后干燥，最后将干燥后的样品释放垫运用到PCT荧光层析检测试纸 条上，并采用该试纸条进行零浓度和低浓度的荧光检测，其中零浓度样本的浓度为O.OOng/ ml，低浓度样本的浓度为0.50ng/ml。零浓度样本用于检测各实施例是否存在假阳性;低浓 度样本用于检测各实施例灵敏度的高低。本实施例的具体检测结果如表2所示。
[0017] 表2
信号值是指:样本在试纸条上反应完成后，通过荧光检测仪对试纸条检测线上累积的 荧光信号进行采集的结果，数值越高说明检测的样本中可能含有被分析物的浓度越高。对 于零浓度样本出现较高的信号值，说明该试纸条检测存在假阳性，可能对分析物浓度产生 误判。对于低浓度样本，信号值越高，说明可以分辨的分析物灵敏度越高，检测结果越准确。
[0018] 通过表2可知:通过对照例3可知，在没有添加金属螯合剂的处理液处理的试纸条， 其检测结果虽无假阳性问题，但检测灵敏度偏低;通过对照例1和对照例2的结果可知，优化 后的本发明的浓度配比能更好地提高检测的灵敏度和准确度，同时避免出现假阳性的现 象，对于无需稀释的高灵敏度检测项目存在明显优势。
[0019] 采用不同种类和浓度的金属螯合剂处理样品释放垫，其它条件均与实例3相同，采 用上述不同种类和浓度的金属螯合剂处理后的释放垫制备试纸条，并用该试纸条检测含低 浓度PCT的血清样本(浓度单位为ng/ml)，检测后采集检测线的信号值数据，具体数据如表3 所示。
[0020] 表 3
通过表3的结果可知:通过上述数据可知，当不添加金属螯合剂时，低浓度下的信号值 只有几十，检测结果的灵敏度和准确度均不能满足需求，本发明加入上述金属螯合剂后能 更好地提高检测的灵敏度和准确度。
[0021]以上所述的【具体实施方式】，对本发明的目的、技术方案和有益效果进行了进一步 详细说明，所应理解的是，以上所述仅为本发明的【具体实施方式】而已，并不用于限定本发明 的保护范围，凡在本发明的精神和原则之内，所做的任何修改、等同替换、改进等，均应包含 在本发明的保护范围之内。
【主权项】
1. 一种样品释放垫处理液，其特征在于，包括缓冲物质、封闭剂、亲水性大分子物质、表 面活性剂、金属螯合剂、防腐剂和氯化钠。2. 根据权利要求1所述的一种样品释放垫处理液，其特征在于， 所述处理液中缓冲物质的浓度为5~500mmol/L，封闭剂的浓度为1~50g/L，亲水性大 分子物质的浓度为〇. 〇〇lg/L~100g/L，表面活性剂的浓度为O. OOlg/L~50g/L，金属螯合剂 的浓度为〇.〇5g/L~50g/L，防腐剂的浓度为0. 1~10mL/L，氯化钠的浓度为0.05~ 1000mmol/L〇3. 根据权利要求1或2所述的一种样品释放垫处理液，其特征在于， 所述缓冲物质为1.19~119g/L的4-羟乙基哌嗪乙磺酸，或1.82~181.20g//L的哌嗪-Ν，Ν'-二(2-羟基丙磺酸）。4. 根据权利要求1或2所述的一种样品释放垫处理液，其特征在于，所述封闭剂为酪蛋 白。5. 根据权利要求1或2所述的一种样品释放垫处理液，其特征在于，所述亲水性大分子 物质为聚乙烯吡咯烷酮。6. 根据权利要求1或2所述的一种样品释放垫处理液，其特征在于，所述表面活性剂为 Pluronic F_68、Brij35或Tetronic 1307。7. 根据权利要求1或2所述的一种样品释放垫处理液，其特征在于，所述金属螯合剂为 乙二胺四乙酸二钠、乙二胺四乙酸二钾、乙二胺四乙酸二钠镁盐或乙二胺四乙酸铁钠。8. 根据权利要求1或2所述的一种样品释放垫处理液，其特征在于，所述防腐剂为 Proclin300〇
【文档编号】G01N33/558GK105891468SQ201610216289
【公开日】2016年8月24日
【申请日】2016年4月8日
【发明人】代敏, 林 源, 谭韬
【申请人】四川新健康成生物股份有限公司