免疫检测套组的制作方法
【技术领域】
[0001] 本实用新型涉及免疫层析的技术领域，尤其是由释出试剂片、反应试剂片与缓冲 稀释液所构成的一种免疫检测套组。
【背景技术】
[0002] 免疫层析检测（immunochromatographictest)是近年来极受重视的一种检测方 式，其检测试纸具有构造简单且成本低廉等优点；更重要的是，免疫层析检测最高灵敏度可 达10-12g/ml(ppm)。目前，免疫层析检测已广泛地应用于下列各方面：
[0003] (1)临床上的应用：如过敏、毒品、传染性疾病、内分泌疾病、肿瘤标志等检测；
[0004] (2)农业上的应用：如食物安全、农作物疾病等检测；
[0005] (3)环境上的应用：如生物污染、环境污染等检测；
[0006] (4)兽医的应用：如动物的各项疾病等检测。
[0007] 侧流式免疫分析法（LateralFlowImmunoassay)是一种常用于液态样品的检测 方法。请参见图1，为现有的一种侧流式免疫分析试纸的结构图。如图1所示，现有的侧流式 免疫分析试纸1'包括：支撑底材11'、薄膜（membrane) 12'、结合垫（conjugatedpad) 13'、 样品垫（samplepad) 14'、以及吸收垫（absorptionpad) 15'。
[0008] 在现有的侧流式免疫分析试纸Γ中，薄膜12'的功能是用以将抗体、抗原、DND或 RNA与待测样品予以键结。并且，根据所选用的侧流式免疫分析法（竞争型或三明治型）的 不同，形成在薄膜12'上的测试线（testline) 12T'与控制线（controlline) 12C'的成分 也有所不同。当选用三明治型的侧流式免疫分析法时，载有标志物的第一抗体设置在结合 垫13'上；同时，薄膜12'上的测试线12T'由第二抗体所形成，且控制线12C'由第一抗体 的二级抗体（secondaryantibody)所形成。
[0009] 进行三明治型的侧流式免疫分析法时，是将待测样品（或称检体）滴入该样品垫 14'上。基于毛细现象的作用，待测样品中的抗原会朝向结合垫13'移动进而与已标志的第 一抗体结合。接着，抗原与结合至抗原一端的第一抗体继续地移动至薄膜12' ；此时，第二 抗体会抓住抗原的另一端，使得测试线12T'显现颜色。进一步地，未与第二抗体结合的抗 原及第一抗体继续地往控制线12C'移动；此时，控制线12C'因为第一抗体与二级抗体的结 合而显现颜色。必须补充说明的是，三明治型检测方法的定性分析是以测试线12T'显色与 否为基准；简单的说，测试线12T'显色表示为阳性反应，反之则为阴性。
[0010] 另一方面，当选用竞争型的侧流式免疫分析法时，载有标志物的抗体设置在结合 垫13'上；同时，竞争抗原（competingantigen)设置在该薄膜12'上以形成测试线12T'， 且该抗体的二级抗体设置在该薄膜12'上以形成控制线12C'。进行竞争型的侧流式免疫分 析法时，是将待测样品滴入样品垫14'上。基于毛细现象的作用，待测样品中的抗原会朝向 结合垫13'移动进而与载有标志物的抗体结合。接着，抗原与抗体继续地移动至薄膜12' ； 此时，由于抗体已经与抗原结合，因此抗体不会与所述的竞争抗原进一步结合。继续地，与 抗原结合的抗体继续地往控制线12C'移动，此时该控制线12C'因为抗体与二级抗体的结 合而显现颜色。必须补充说明的是，竞争型检测方法的定性分析是以测试线12T'显色与否 为基准；简单的说，测试线12T'显色表示为阴性反应，反之则为阳性。
[0011] 常见的标志物有乳胶与胶体金两种。目前，试纸厂商将结合垫13'以微孔材料制 成，使得载有标志物的抗体能够相对容易地自结合垫13'移动至薄膜12'上的测试线12T' 与/或控制线12C'，通过此方式提升侧流式免疫分析试纸的敏感度。
[0012] 即便如此，现有的侧流式免疫分析试纸Γ仍旧在实务使用过程中被发现了如下的 缺陷：
[0013] (1)由微孔材料制成的结合垫13'制造成本较高；此外，微孔材料制成的结合垫 13'需要以4°C的温度进行低温保存，且其保存期限最多只有1年左右。
[0014] (2)市售的（竞争型）侧流式免疫分析试纸Γ因为无法有效抑制测试线12T'的 显色，因此必须透过比色法判断控制线12C'与测试线12T'的色度；其中，颜色的改变可用 肉眼判定（定性法），也可使用仪器自动侦测其亮度的变化（定量法）；然而，由比色法判断 的敏感度最高只能够达到〇. 5ppb。 【实用新型内容】
[0015] 本实用新型的主要目的，在于提供一种免疫检测套组，其主要是由释出试剂片与 反应试剂片所构成。不同于现有的侧流式免疫分析试纸，使用本实用新型的免疫检测套组 对待测样品进行竞争型或三明治型的侧流式免疫分析时，要先将该释出试剂片置入该样品 液中，使得释出试剂片所承载结合有标志物的抗体被释入样品液中，进而与样品液中的目 标检测物相互结合；最后，再将该反应试剂片置入样品液中，使得样品液与反应试剂片上的 测试线所承载的抗体相互结合，通过测试线的显色与否来判断检测结果为阳性或者阴性。
[0016] 因此，为了达成上述本实用新型的主要目的，本实用新型提供了免疫检测套组的 第一实施例，用以对待测样品中的目标检测物进行竞争型侧流式免疫分析，该免疫检测套 组包括：
[0017] 释出试剂片，其上设置有结合着标志物的第一抗体，或设置有抗生素；其中，该第 一抗体与该抗生素能够与该目标检测物结合；以及
[0018] 反应试剂片，其上设置有薄膜，且该薄膜上还设置有对照线与测试线；其中，该对 照线由第二抗体所形成，且该测试线由特定抗原与生物分子的共辄物所形成；其中，该第一 抗体能够与该目标检测物结合，且所述特定抗原为该目标检测物的抗原；
[0019] 其中，当使用所述免疫检测套组对待测样品进行竞争型侧流式免疫分析时，需先 将该待测样品（如为固体或浓稠液体时）与适量的缓冲稀释液进行混合；接着，再将该释出 试剂片置入该待测样品与该缓冲稀释液的混合液中，使得结合有标志物的第一抗体释入混 合液中；最后，再取出释出试剂片并将反应试剂片置入混合液中。并且，当待测样品含有目 标检测物时，反应试剂片上的对照线会产生呈色反应，而测试线不会产生呈色反应。
[0020] 此外，为了达成上述本实用新型的主要目的，本实用新型还提供了免疫检测套组 的第二实施例，用以对待测样品中的目标检测物进行三明治型侧流式免疫分析，该免疫检 测套组包括：
[0021] 释出试剂片，其上设置有结合着标志物的第一抗体；其中，该第一抗体系能够与目 标检测物结合；以及
[0022] 反应试剂片，其上设置有薄膜，且该薄膜上还设置有对照线与测试线；其中，对照 线由第二抗体所形成，且测试线由第三抗体所形成；其中，第二抗体与第三抗体能够与目标 检测物结合；
[0023] 其中，当使用所述免疫检测套组对待测样品进行所述三明治型侧流式免疫分析 时，需先将待测样品（如为固体或浓稠液体时）与适量的缓冲稀释液进行混合；接着，再将 该释出试剂片置入待测样品与该缓冲稀释液的混合液中，使得结合着标志物的第一抗体释 入混合液中；最后，再取出释出试剂片并将该反应试剂片置入该混合液中。并且，当待测样 品含有目标检测物时，该反应试剂片上的对照线与测试线会同时产生呈色反应。
【附图说明】
[0024] 图1是现有的一种侧流式免疫分析试纸的结构图；
[0025] 图2是本实用新型提供的一种免疫检测套组的第一实施状态示意图；
[0026] 图3是反应试剂片的实测影像图；
[0027] 图4是A厂牌的片式黄曲毒素试纸的实测影像图；
[0028] 图5是B厂牌的片式黄曲毒素试纸的实测影像图；
[0029] 图6是本实用新型提供的一种免疫检测套组的第二实施状态示意图；
[0030] 图7是本实用新型提供的一种免疫检测套组的第三实施状态示意图。
[0031] 附图符号说明：
[0032] 1 免疫检测套组
[0033] 11 释出试剂片
[0034] 12 反应试剂片
[0035] 110 支撑底材
[0036] 111 结合垫
[0037]120 支撑底材
[0038]121 薄膜
[0039] 12C 对照线
[0040]12T 测试线
[0041]122 样品垫
[0042]123 吸收垫
[0043]13 处