理试剂片
[0044]130 支撑底材
[0045]131 承载垫
[0046]Γ 侧流式免疫分析试纸
[0047]11' 支撑底材
[0048]12' 薄膜
[0049]13' 结合垫
[0050]14' 样品垫
[0051]15' 吸收垫
[0052]12C' 控制线
[0053] 12T'测试线
【具体实施方式】
[0054] 为了能够更清楚地描述本实用新型所提出的一种免疫检测套组，以下将配合示 图，详尽说明本实用新型的较佳实施例。
[0055] 黄曲毒素（Aflatoxin)是作物（如玉米、花生、米、麦、坚果类）发霉时常见的毒性 污染物质，具有极强烈的肝毒性及致癌性；国际癌症研究中心将黄曲毒素列为第I类的绝 对致癌物质，主要有B1、B2、G1、G2四型，其中又以黄曲毒素B1最常见。当人类或动物误食 受黄曲毒素B1污染的食品或饲料，会在体内代谢成黄曲毒素M1，而对肝脏造成伤害。因此， 若哺乳动物食用了受污染的饲料，乳汁中就会含有黄曲毒素Ml。故美国食品药物管理局及 中国台湾食品药物管理署均规范乳品及乳制品中黄曲毒素Ml的含量不得高于0. 5ppb。
[0056] 本实用新型实施例即提供用以检测黄曲毒素Ml或麸麦的一种免疫检测套组，适 用于对含有黄曲毒素Ml或麸麦的待测样品进行免疫层析检测。在此，所述待测样品可以是 尿液、组织液、肉汁、汤品、液态乳品、使固态检体溶于溶剂后所得的液态检体、或经萃取后 的液态检体；其中，所述溶剂为水或者样品缓冲液，且该样品缓冲液可以是磷酸盐溶液或高 浓度磷酸盐溶液。
[0057] 请参见图2,是本实用新型提供的一种免疫检测套组的第一实施状态示意图。如图 2所示，本实用新型实施例的免疫检测套组1的基础构件包括：释出试剂片11以及反应试 剂片12。其中，释出试剂片11的主体为支撑底材110,且该支撑底材110的一侧前端设置 有结合垫（conjugatedpad) 111。在本实用新型实施例中，结合垫111由微孔材料所制成。
[0058] 继续说明免疫检测套组1的构件。如图2所示，反应试剂片12的主体也为支撑底 材120,且薄膜121设置在该支撑底材120上；其中，薄膜121上设置有对照线12C与测试线 12T。此外，样品垫（samplepad) 122与吸收垫（absorptionpad) 123设置在支撑底材120 上，并分别连接薄膜121的前端侧与后端侧。在本实用新型实施例中，薄膜121可以是硝化 纤维薄膜（Nitrocellulos，NC)、聚偏氟乙稀薄膜（polyvinylidenedifluoride，PVDF)、或 者尼龙薄膜（Nylon);并且，样品垫122的制造材料为聚乙稀（Polyethylene,PE)或玻璃纤 维（glassfiber)。
[0059] 上述说明是为了事先介绍关于图2所示的免疫检测套组1的基础构件。接着，基 于图2所示的免疫检测套组1的基础构件，以下将进一步介绍说明该免疫检测套组1的第 一实施例。
[0060] 第一实施例
[0061] 免疫检测套组1的第一实施例是基于实现竞争型侧流式免疫分析法所设计的。 请参考图2,在免疫检测套组1的第一实施例中，释出试剂片11的结合垫111上设置有结 合着标志物的第一抗体，且第一抗体为兔子的抗黄曲毒素的抗体C(或老鼠的抗黄曲毒素 的抗体）。另外，必须特别说明的是，本实用新型并不特别限制标志物的种类，因此标志物 可以是胶体金（colloidalgold)、胶体硒（colloidalselenium)、乳胶（latex)、奈米银、 或奈米碳（nanocarbon)。相对于结合垫111设有第一抗体，对照线12C由第二抗体所形 成，且第二抗体为山羊抗兔子免疫球蛋白G(ImmunoglobulinG，IgG)、或兔子抗小鼠免疫 球蛋白G、或山羊抗小鼠免疫球蛋白G。此外，该测试线12T由抗原与生物分子的共辄物 所形成；其中，所述抗原为黄曲毒素的抗原，且所述生物分子可以是牛血清白蛋白（Bovine serumalbumin,BSA)、鸡卵清白蛋白（Ovalbumin,OVA)、或胆喊单氧化物酶（Choline monooxygenase,CMO)〇
[0062] 在此，必须特别说明的是，上述所称抗体并无特别限制必须为单株抗体或多株抗 体。并且，上述关于第一实施例的有关设计是为了使得免疫检测套组1能够快速、有效地检 测出待测样品中的黄曲毒素Ml;然而，不应以此限制本实用新型的免疫检测套组1所适用 的目标检测物。本实用新型的主要技术特征在于：免疫检测套组1包括释出试剂片11以 及反应试剂片12;在这个基础下，相信熟悉免疫层析试片制造技术的工程人员都可以根据 经验而适当地变换、替换抗体与/或抗原的种类，进而使得本实用新型的免疫检测套组1适 用于检测任何的目标检测物，例如：抗原、病毒、蛋白质、DNA、RNA、或小分子物质；其中，所 述小分子物质可以为：毒素、抗生素、毒品、或上述任一种的相关衍生物。更进一步地说明， 所述毒素例如黄曲毒素M1、黄曲毒素B1、或总黄曲霉毒素。并且，抗生素为β-内酰胺类 (β-lactam)抗生素，例如：青霉素、青霉素的衍生物、头孢子菌素、单酰胺环类、碳青霉烯、 或青霉稀类酶抑制剂。
[0063] 当然，本实用新型的免疫检测套组1也同时适用液态状的待测样品或者固态状的 待测样品；其中，液态状的待测样品，例如：生乳、经灭菌处理的全脂乳、低脂乳、保久乳、含 有乳成分的饮料、或乳品的衍生产品；并且，固态状的待测样品，例如：奶粉、调和奶粉、或 饲料。
[0064] 进一步地，为了证实上述所说明的免疫检测套组1的第一实施例的可行性，以下 将提供相关实验结果加以证实。
[0065] 实验一：对液态乳品进行竞争型侧流式免疫分析
[0066] 实验一是以液态乳品为待测样品，其中，所述液态乳品为市售全脂牛乳、市售奶粉 (即，固态状的待测样品）依厂商建议比例冲泡成牛奶、以及市售酸奶。其中，由于市售奶粉 依厂商建议比例冲泡成牛奶必须冷却至室温，且酸奶因属于浓稠液态检体，所以必须先经 由以下步骤完成萃取动作：
[0067] 步骤㈧：将16mL酸奶加入盛有16mL乙酸乙酯的第一试管中，接着上下轻柔翻转 该试管，历时30秒；
[0068] 步骤（B):将第一试管置于离心机上，在室温下对第一试管进行3000rpm的离心程 序，历时10分钟；
[0069] 步骤（C):将试管内的上层液体（10mL)移入第二试管，并使用氮气将该上层液体 吹至干燥；
[0070] 步骤（D):依序加入2mL的正己烧与lmL的样品缓冲液（Phosphate-buffered saline，PBS)到第二试管中，并将第二试管震荡混匀30秒；
[0071] 步骤（E):将第二试管置于离心机上，在室温下对第二试管进行3000rpm的离心程 序，历时10分钟；
[0072] 步骤（F):移除第二试管中的上层液体，即获得经萃取后的液态检体。
[0073] 继续地，确认液态乳品的待测样品（即，液态检体）的温度回复至室温后，便以第 一滴管分别吸取3滴液态检体，加至小试管中，之后用第二滴管吸取3滴缓冲稀释液（此处 为磷酸盐溶液），加至小试管中。接着，将释出试剂片11的前端（即，结合垫111)插入所述 小试管中，小幅度旋转搅拌至少30秒，直到释出试剂片11所承载的结合有标志物的第一抗 体与小试管之中的样品液混合均匀；此时，小试管中的样品液将呈现特定颜色（例如淡粉 红色）。将小试管静置3分钟后，若样品液中含有黄曲毒素Ml时，贝lj黄曲毒素Ml会与结合 有标志物的第一抗体（在此为抗黄曲毒素Ml的抗体）相互结合。
[0074]在取出释出试剂片11后，接着将反应试剂片12前端置入小试管中，使得样品垫 122浸在样品液中，静置10-15分钟。由于反应试剂片12上的测试线12T是固定有黄曲毒素 抗原与生物分子BSA的共辄物，因此该共辄物会与对固定在对照线12C上的第二抗体（IgG) 一起竞争样品液中的黄曲毒素Ml体，通过此方式完成竞争型侧流式免疫分析。
[0075]请参见图3,是反应试剂片的实测影像图。如图3所示的反应试剂片的实测影像 (a)、（b)与（c)所示，若样品液中含有黄曲毒素M1，则测试线12T上的抗原与生物分子的共 辄物（即黄曲毒素M1-CM0)会与样品液中的黄曲毒素Ml相互竞争第一抗体，因此，如果样 品液中含有黄曲毒素M1，则测试线12T上的抗原无法与第一抗体结合，最后只有对照线12C 会有呈色反应。简单的说，当检测结果为阳