一种从大田废弃鲜烟叶中提取烟草多糖的方法
【技术领域】
[0001]本发明涉及一种植物多糖的提取方法，具体涉及一种从大田废弃鲜烟叶中提取烟草多糖的方法。
【背景技术】
[0002]烟草为茄科烟草属植物，是一种利用价值很高的天然植物。作为传统中药，烟草始载于《景岳全书》，也被《全国中草药汇编》等现代中草药专著收录，具有消肿、解毒、杀虫等功效。在过去的400多年里，烟草作为一种重要的经济作物被广泛种植。我国的烟草种植面积和产量均居世界首位，烟草种植与产品加工在国民经济发展中发挥着重要的作用。在我国农产品收入中，烟草仅次于稻、麦、棉、大豆、玉米，居第6位。作为烟草生产大国，除用于卷烟生产的烟叶外，每年有大量的低等和等外级烟叶、烟杆、烟梗、烟茎、烟花和烟籽等资源未能得到有效利用，或丢弃于田间地头，或被晒干焚烧，给环境带来污染的同时也造成了自然资源的极大浪费。目前我国面临着严峻的环境形势，环境污染已成为全民高度关注的问题，资源的高效利用和循环利用必将是今后各产业发展的方向，也必将是烟草行业发展的方向。
[0003]植物多糖是由多个相同或不同的单糖基以糖苷键相连接而形成的化合物，普遍存在于自然界植物体中，是构成植物生命活动的四大基本物质之一，同维持植物生命功能密切相关。近年来的大量研宄表明，植物多糖具有改善机体免疫功能、降血糖、降血脂、抗病毒、抗辐射和抗衰老等多种药理作用，且其对机体毒副作用小。因此，从大田废弃鲜烟叶中提取多糖，对于利用废弃资源、减少资源浪费、保护环境和增加烟农收入都具有重要的意义。
【发明内容】
[0004][要解决的技术问题]
[0005]本发明的目的是解决上述现有技术的问题，利用一种新型的提取方法从大田废弃鲜烟叶中提取烟草多糖。
[0006][技术方案]
[0007]为了达到上述的技术效果，本发明采取以下技术方案:
[0008]本发明利用闪式提取技术从大田废弃鲜烟叶中提取烟草多糖。
[0009]一种从大田废弃鲜烟叶中提取烟草多糖的方法，它包括以下步骤:
[0010]A，预处理
[0011]取大田废弃鲜烟叶，去除叶脉和叶梗，清洗、切碎后备用；
[0012]B，脱色脱脂
[0013]将步骤A预处理的大田废弃鲜烟叶置于容器中，加入正己烷或石油醚后浸泡一段时间，然后置于闪式提取器上，设定提取电压、转速、提取次数和每次提取时间；提取完毕后过滤，滤渣低温干燥后备用；滤液回收利用；
[0014]C，烟草多糖的提取
[0015]将步骤B得到的滤渣置于容器中，加入温度为90°C的水，置于闪式提取器上，设定提取电压、转速、提取次数和每次提取时间；提取完毕后过滤，滤液在转速为4000rpm/min的条件下离心lOmin，分取上清液备用；滤渣回收利用；
[0016]D，Sevage 法脱蛋白
[0017]按上清液、氯仿和正丁醇的体积比为100:10:2，向步骤C得到的上清液中加入氯仿和正丁醇，振荡40min，接着在转速为4000rpm/min的条件下离心lOmin，分取上清液；
[0018]E，重复步骤D，分取上清液备用；
[0019]F，后处理
[0020]将步骤E得到的上清液置于容器中，然后加入95 %乙醇至终溶液中醇含量为85 %后，静置过夜；接着在转速为4000rpm/min的条件下离心lOmin，分取沉淀；最后，用95%乙醇洗涤沉淀，再用透析法去除杂质后，冷冻干燥，即得所述的烟草多糖。
[0021]本发明更进一步的技术方案，在步骤B中，所述的正己烷或石油醚浸泡时间为I?2小时，所述闪式提取的提取电压为130?150V，转速为4500?5100rpm/min，提取次数为4?6次，每次提取时间为30?40s。
[0022]根据本发明的一个优选实施方式，在步骤B中，所述的正己烷或石油醚浸泡时间为I小时，所述闪式提取的提取电压为150V，转速为5000rpm/min，提取次数为5次，每次提取时间为30s。
[0023]本发明更进一步的技术方案，在步骤B中，所述低温干燥是指在温度不高于50°C的条件下进行的干燥。
[0024]本发明更进一步的技术方案，在步骤C中，所述步骤B得到的滤渣与水的质量比为I:20 ?30。
[0025]本发明更进一步的技术方案，在步骤C中，所述烟草多糖的闪式提取电压为100?150V，转速为5000?10000rpm/min，提取次数为5?10次，每次提取时间为30?60s。
[0026]下面将详细地说明本发明。
[0027]一种从大田废弃鲜烟叶中提取烟草多糖的方法，它包括以下步骤:
[0028]A，预处理
[0029]取大田废弃鲜烟叶，去除叶脉和叶梗，清洗、切碎后备用；
[0030]B，脱色脱脂
[0031]将步骤A预处理的大田废弃鲜烟叶置于容器中，加入正己烷或石油醚后浸泡一段时间，然后置于闪式提取器上，设定提取电压、转速、提取次数和每次提取时间；提取完毕后过滤，滤渣低温干燥后备用；滤液回收利用；
[0032]本发明使用正己烷或石油醚是为了预先除去烟叶中的色素和其他脂溶性成分，以便后一步烟草多糖的提取。并且步骤B中的滤液主要为正己烷或石油醚溶液，可用于烟叶中脂溶性成分的提取。本发明中使用的石油醚沸程为60?90°C。
[0033]C，烟草多糖的提取
[0034]将步骤B得到的滤渣置于容器中，加入温度为90°C的水，置于闪式提取器上，设定提取电压、转速、提取次数和每次提取时间；提取完毕后过滤，滤液在转速为4000rpm/min的条件下离心lOmin，分取上清液备用；滤渣回收利用；
[0035]本发明使用温度为90°C的水主要是因为多糖在热水中的溶解度更高，使用热水可以让滤渣中的多糖更快速充分地溶解于其中。滤渣回收可用于制备动物饲料或肥料。
[0036]D，Sevage 法脱蛋白
[0037]按上清液、氯仿和正丁醇的体积比为100:10:2，向步骤C得到的上清液中加入氯仿和正丁醇，振荡40min，接着在转速为4000rpm/min的条件下离心lOmin，分取上清液；
[0038]本发明使用Sevage法脱蛋白，是因为Sevage法较为温和，对烟草多糖的结构影响不大。
[0039]E，重复步骤D，分取上清液备用；
[0040]重复步骤D是为了更好地脱除蛋白。
[0041]F，后处理
[0042]将步骤E得到的上清液置于容器中，然后加入95 %乙醇至终溶液中醇含量为85 %后，静置过夜；接着在转速为4000rpm/min的条件下离心lOmin，分取沉淀；最后，用95%乙醇洗涤沉淀，再用透析法去除杂质后，冷冻干燥，即得所述的烟草多糖。所述的杂质为无机盐和低聚糖等小分子杂质。
[0043]本发明利用95%的乙醇沉淀得到烟草多糖，并且利用透析法去除无机盐和低聚糖等小分子杂质。由于市售乙醇有95%乙醇和无水乙醇，因为95%乙醇比无水乙醇便宜，考虑到成本问题，所以使用95%乙醇更经济。
[0044]本发明的冷冻干燥还可以用真空干燥的方式代替。
[0045]本发明更进一步的技术方案，在步骤B中，所述的正己烷或石油醚浸泡时间为I?2小时，所述闪式提取的提取电压为130?150V，转速为4500?5100rpm/min，提取次数为4?6次，每次提取时间为30?40s。
[0046]根据本发明的一个优选实施方式，在步骤B中，所述的正己烷或石油醚浸泡时间为I小时，所述闪式提取的提取电压为150V，转速为5000rpm/min，提取次数为5次，每次提取时间为30s。
[0047]本发明在闪式提取电压为150V，转速为5000rpm/min，提取次数为5次，每次提取时间为30s的条件下，脱色脱脂的效果最好，并且不会影响烟草多糖。
[0048]本发明更进一步的技术方案，在步骤B中，所述低温干燥是指在温度不高于50°C的条件下进行的干燥。
[0049]本发明更进一步的技术方案，在步骤C中，所述步骤B得到的滤渣与水的质量比为I:20?30。在滤渣与水的质量比为1:20?30的条件下，提取得到的烟草多糖最多。
[0050]本发明更进一步的技术方案，在步骤C中，所述烟草多糖的闪式提取电压为100?150V，转速为5000?10000rpm/min，提取次数为5?10次，每次提取时间为30?60