干燥5min，最后用2. 5mL洗脱液洗脱，收集洗脱液于5mL刻度试 管中，用氮气吹干。用流动相再溶解并定容至I.OmL涡动混匀，静置15min，用0. 2μπι针筒 式滤膜过滤,每次取100 μ 1进样分析。
[0072] 色谱条件
[0073] 检测器：紫外检测器
[0074] 色谱柱：C18 反相色谱柱 Inertsil Sam4. 6X250mm
[0075] 紫外检测波长：288nm
[0076] 流动相：115mL乙腈，55mL四氢呋喃，25mL二丁胺磷酸缓冲液，双蒸水定容至 lOOOmL。
[0077] 流速：1. lml/min
[0078] 血药浓度用房室模型拟合，参数计算结果见表1。
[0079] 表1鸡口服泰地罗新组合物可溶性粉后药代动力学参数
[0080]
[0081] 备注：Τ1/2α :分布半i期J1二：消除半衰i目；AUC: '时曲线下面积;CL(s):消除 速率常数；Cmax:血浆药物浓度峰浓度；T(max):达峰时间；Tl/2ka :药物吸收半衰期。
[0082] 从表1可以看出鸡口服泰地罗新组合物可溶性粉后，药物分布广泛，表观分布容 积大，半衰期长，消除缓慢。
[0083] 图1为泰地罗新组合物可溶性粉口服后在鸡体内的血液药物浓度和肺脏药物浓 度曲线图。由图1可知，泰地罗新在肺脏中的药物浓度很高，对禽类由细菌或支原体引起的 呼吸道疾病起到很好的治疗效果。
[0084] 实施例3泰地罗新组合物可溶性粉对鸡副嗜血杆菌病的疗效试验
[0085] 试验药物：
[0086] 实施例1中制备例1制备的5% (W/W)泰地罗新组合物可溶性粉（以泰地罗新计）；
[0087] 对照组泰地罗新可溶性粉的制备：取泰地罗新酒石酸盐65. 33g，蔗糖粉935g，逐 级混合均匀，粉碎，过80目筛，即得泰地罗新组合物可溶性粉。
[0088] 疾病模型：取临床分离耐药鸡副嗜血杆菌GXD0129 (血清型A型）接种于含10%血 清和0. 005%的辅酶I (NAD)的MH琼脂平板上37°C培养24小时，挑取单个菌落接种于含 10%血清和0. 005%的辅酶I (NAD)的MH营养肉汤中，37°C振荡培养24h，采用活菌计数法 计算鸡副嗜血杆菌浓度，用营养肉汤稀释为9. IX 108CFU/mL，鸡眶下接种3周龄罗曼鸡10 只，2mL/羽。模型组在48小时后开始有鸡只出现厌食，闭目似睡，不愿走动，流浆性鼻液，而 后眼脸和面部出现一侧性或双侧性水肿，鼻腔内有脓性分泌物，未出现死亡。剖检症状：鼻 腔和窦发生急性卡他性炎症，粘膜充血肿胀，表面有大量粘液及炎性渗出物凝块。眼结膜充 血发炎。面部和肉髯的皮下组织水肿，说明造模成功。
[0089] 造模与分组：取3周龄罗曼蛋鸡300只，以50只/组随机分为6组，将其中5组按 照上述疾病模型方法进行造模，剩余一组作为健康对照组。根据后期给药情况，各造模组具体 分组如下：按用量为每IL水取0. 5g、lg、2g的5% (W/W)泰地罗新组合物可溶性粉（以泰地罗 新计分别为25mg、50mg、IOOmg)给药分为低剂量组、中剂量组、高剂量组；药物对照组(按用量 为每IL水取Ig的上述对照组泰地罗新可溶性粉给药）；攻毒对照组和健康对照组不给药。
[0090] 给药及观察：攻毒对照组、健康对照组的鸡只给予自来水；对于低剂量组、中剂 量组、高剂量组和药物对照组的鸡只，待80%以上鸡只出现明显的发病症状时，开始混饮给 药，连用3天，给药结束后继续观察至第14天，每天观察鸡只症状并进行计分，实验结束后， 计算各组计分结果，以死亡率、治愈率、有效率、相对增重率等判定指标对试验结果进行统 计并评价，结果见表2。
[0091] 表2泰地罗新组合物可溶性粉对人工感染鸡耐药副嗜血杆菌病疗效试验结果
[0092]
[0093]
[0094] 从表2可以看出：泰地罗新组合物可溶性粉各剂量组、药物对照组与攻毒对照组 相比，鸡只的死亡率明显降低且相对增重率较高，说明泰地罗新可溶性粉能降低人工感染 鸡副嗜血杆菌鸡的死亡率，具有较好的治疗鸡副嗜血杆菌病的作用；泰地罗新组合物可溶 性粉各剂量组及药物对照组均能够明显提高患病鸡只的治愈率及有效率，但泰地罗新组合 物可溶性粉高剂量组的死亡率及有效率与药物对照组有明显差异（(P <0.05)，说明本发 明泰地罗新组合物可溶性粉对鸡副嗜血杆菌病具有更好的治疗作用。
[0095] 实施例4泰地罗新组合物颗粒剂对鸡白痢的疗效试验
[0096] 试验药物：
[0097] 实施例1中制备例3制备的2% (W/W)泰地罗新组合物颗粒剂（以泰地罗新计)，白 色或类白色颗粒，规格l〇〇g: 2g ;
[0098] 乳酸环丙沙星可溶性粉：山东庆丰堂生物制药有限公司，规格100g:5g。
[0099] 疾病模型制备方法：取耐药沙门氏菌GXS0025(临床分离，肺型）接种于MH琼脂 平板上37°C培养24小时，挑取单个菌落接种于MH营养肉汤中，37°C振荡培养24h，采用活 菌计数法计数。
[0100] 沙门氏菌浓度，用营养肉汤稀释为4. 6X IO8CFUAiL胸肌注射1周龄罗曼蛋鸡10 只，0. 2mL/只。模型组在6小时后开始有鸡只出现精神不振、食欲、饮水减少、呼吸困难而急 促、后腹部快速一收一缩等主要症状，部分病雏肛门粘有白色稀粪，粪便分离出沙门杆菌。 病理剖检可见肝脏肿大，心肌或肝脏上有针尖大灰白色坏死点或小结节，说明造模成功。
[0101] 造模与分组：取1周龄海兰蛋鸡300只，以50只/组随机分为6组，将其中5组 按照上述疾病模型方法进行造模，剩余一组作为健康对照组。根据后期给药情况，各造模 组具体分组如下：按用量为每IL水取0. 5g、lg、2g的2% (W/W)泰地罗新组合物颗粒剂（以 泰地罗新计分别为10mg、20mg、40mg)给药分为低剂量组、中剂量组、高剂量组；药物对照组 (按用量为每IL水取0. 5g乳酸环丙沙星可溶性粉给药）；攻毒对照组(不给药)。
[0102] 给药及观察：攻毒对照组、健康对照组的鸡只给予自来水；对于低剂量组、中剂 量组、高剂量组和药物对照组的鸡只，待80%以上鸡只出现明显的发病症状时，开始混饮给 药，其中低剂量组、中剂量组、高剂量组给药量为每IL水取0. 5g、lg、2g的2% (W/W)泰地罗 新组合物颗粒剂（以泰地罗新计分别为10mg、20mg、40mg)，乳酸环丙沙星可溶性粉的给药量 为每IL水取0. 5g，连用3天，给药结束后继续观察至第14天，每天观察鸡只症状并进行计 分，实验结束后，计算各组计分结果，以死亡率、治愈率、有效率、相对增重率等判定指标对 试验结果进行统计并评价，结果见表3。
[0103] 表3泰地罗新组合物颗粒剂对人工感染鸡耐药沙门氏菌疗效试验结果
[0104]
[0105] 从表3可以看出泰地罗新组合物颗粒剂各剂量组、药物对照组的死亡率与攻毒对 照组相比明显降低，说明泰地罗新组合物颗粒剂能降低人工感染沙门氏菌鸡的死亡率；泰 地罗新组合物颗粒剂各剂量组及药物对照组均能够明显提高患病鸡只的治愈率及有效率， 同时泰地罗新组合物颗粒剂各剂量组以及药物对照组的相对增重率高于攻毒对照组，说明 本发明泰地罗新组合物颗粒剂对鸡白痢具有较好的治疗作用。
[0106] 实施例5泰地罗新组合物口服液的药物稳定性试验
[0107] 药物：实施例1中制备例9制备的5%(W/V)泰地罗新组合物口服液（以泰地罗新计)。
[0108] 试验仪器：SPX-250IC人工气候箱。
[010