含有大环内酯类抗菌剂的纳米微粒的水性悬浮剂的制作方法

含有大环内酯类抗菌剂的纳米微粒的水性悬浮剂的制作方法
【专利说明】
[0001 ] 交叉引用
[0002] 本申请基于2013年11月8日在日本提出申请的日本特愿2013-231796号而要求优 先权，该申请中记载的内容全部作为参考而被直接援引在本说明书中。另外，本申请中引用 的全部专利、专利申请及文献中记载的内容全部作为参考而被直接援引在本说明书中。
技术领域
[0003] 本发明涉及含有大环内酯类抗菌剂的纳米微粒的水性悬浮剂及其利用。
【背景技术】
[0004] 红霉素、罗红霉素、克拉霉素及阿奇霉素等大环内酯类抗菌剂主要通过口服给药 而被使用，但正谋求其作为注射剂、滴眼剂、滴耳剂等局部适用制剂的利用。然而，这些药剂 由于是溶解性低的难溶性药物，因此，很难将它们制成液体制剂。这些中，红霉素容易溶解 在甲醇、乙醇、丙酮中，在醚中稍易溶解，但是极难溶解于水。另外，克拉霉素在丙酮、氯仿中 稍易溶解，但是不易溶解于甲醇、乙醇、醚，且基本不溶于水。由此可知，克拉霉素不仅难溶 于水，而且与红霉素相比，难以溶解于生物实验所使用的有机溶剂中，很难制成溶液。因此， 为了将难溶性药物制成注射剂、滴眼剂、滴耳剂等局部制剂而加以利用，已知有制成使药物 悬浮而成的水性悬浮剂的制剂。例如，已报道了包含难溶性药物的纳米微粒(难溶性药物的 微粒的90%以上为粒径小于1000 nm的微粒)和解粒剂的局部给药用的水性悬浮剂(专利文 献1)。另外，据报道，含有难溶性药物、聚乙烯吡咯烷酮及藻酸或其盐的滴眼剂、滴耳剂等水 性悬浮剂的再分散性优异(专利文献2)。
[0005] 另外，已知难溶性药剂在口服摄取时的生物利用率低，而为了对其加以改善，已研 究了各种可溶化、悬浮化。例如，已有通过将克拉霉素与L-抗坏血酸2-葡糖苷一起进行粉碎 可提高溶解性的报道(非专利文献1)。另外，还有如下报道:通过将具有小于2000nm的有效 平均粒径的（难溶性的）活性物质粒子与表面稳定剂及浸透压活性晶体生长抑制剂一起制 成纳米粒子液体给药组合物，可以抑制溶解/再结晶、活性物质的凝聚，从而实现稳定化(专 利文献3);通过将具有小于2000nm的有效平均粒径的克拉霉素与表面稳定剂一起进行配 合，可制成溶解性更高、口服摄取时的生物学利用能力更高的制剂(专利文献4)。
[0006] 进一步，关于克拉霉素等难溶性药物的注射剂等非口服给药形态，迄今为止已报 道了各种研究。例如，克拉霉素等难溶性药物在经注射而给药时，存在会出现注射部位疼痛 的问题。为了解决该问题，已报道了下述方法:制成脂肪乳剂的方法(专利文献5)、将难溶性 药物包埋于脂质体内的方法(专利文献6)、以及在胆汁酸盐的胶束内配合难溶性药物的方 法(专利文献7)。
[0007] 另一方面，据报道，大环内酯类抗菌剂通过局部给药，对于角膜炎、尤其是由LASIK 术后的非结核性抗酸菌引起的角膜炎而言是有效的(非专利文献2)。特别是，克拉霉素在动 物实验中显示出适于由非结核性抗酸菌引起的角膜炎治疗。据报道，关于对非结核性抗酸 菌的作用，相比于阿奇霉素，克拉霉素具有4~8倍的作用。作为这些滴眼剂、滴耳剂等局部 给药制剂化的尝试，阿奇霉素的滴眼剂已通过利用了 DuraSite(注册商标)技术的制剂化而 付诸实用，而克拉霉素的滴眼剂尚未实用化。关于克拉霉素的滴眼给药，已公开了一种将使 克拉霉素粉末溶解于甲醇并用生理盐水进行稀释而成的溶液对兔经滴眼而进行给药的方 法，根据报道，经过该给药，克拉霉素会滞留于角膜(非专利文献3)。另一方面，还有如下报 道:即使同样地将口服给药用克拉霉素颗粒的无菌水悬浮液用生理盐水进行稀释而成的克 拉霉素悬浮液进行给药，在角膜也不会检测到克拉霉素，而是在眼表面引起炎症(非专利文 献4)。在阿奇霉素的滴眼剂的临床试验中，也在1~2 %的患者中确认到这样的刺激作用。
[0008] 另一方面，关于滴耳剂，已报道了用于持续给药的滴耳用制剂(专利文献8)、用于 使大环内酯类抗菌剂在鼓膜内长期局部存在的制剂(专利文献9)等，但尽管如此，以克拉霉 素、阿奇霉素等大环内酯类抗菌剂为有效成分的滴耳剂尚未实用化。
[0009] 现有技术文献
[0010] 专利文献
[0011] 专利文献1:日本特开2007-119456号公报
[0012] 专利文献2:国际公开W02002/015878号公报
[0013] 专利文献3:国际公开W02004/006959号公报
[0014] 专利文献4:国际公开W02007/008537号公报
[0015] 专利文献5:国际公开W090/14094号公报
[0016] 专利文献6:国际公开W098/33482号公报
[0017] 专利文献7:日本特开平3-169807号公报
[0018] 专利文献8:美国专利公开2013/0216609号公报
[0019] 专利文献9:国际公开W02004/050021号公报
[0020]非专利文献
[0021] 非专利文南犬I: Yutaka Inoue等、International Journal of Pharmaceutics (2007)331:38-45
[0022] 非专利文献2:Joon-Young Hyon等、Arch 0phthalmol(2004)122:1166-1169
[0023] 非专利文献3 :Robert H.Gross等、Invest Ophthalmol Vis Sci (1995)36(5): 965-968
[0024] 非专利文献4:Jonas, J. Kuehne等、Am J 0phthalmol(2004)138:547-553

【发明内容】

[0025] 发明要解决的问题
[0026] 尽管对于这样的含有难溶性药物的水性液剂已进行了各种研究，但仍然难以实现 含有克拉霉素等难溶性药物的注射剂、滴眼剂、滴耳剂等水性悬浮剂的实用化，期待开发出 刺激性更低、灭菌容易、经时稳定性及分散稳定性优异的可适用于广泛的难溶性药物的注 射剂及局部给药用水性悬浮剂、特别是滴眼剂及滴耳剂。
[0027] 因此，本发明的目的在于提供刺激性更低、灭菌容易、经时稳定性及分散稳定性优 异的含有大环内酯类抗菌剂作为有效成分的水性悬浮液。更具体而言，本发明的目的在于 提供含有可实用化的大环内酯类抗菌剂作为有效成分的注射剂、滴眼剂、滴耳剂、滴鼻剂 和/或吸入剂等水性医药组合物。特别是，本发明的目的在于提供澄清性、（长期)分散性、保 存稳定性、角膜滞留性、房水转移性优异、刺激性低的含有大环内酯类抗菌剂作为有效成分 的注射剂、滴眼剂、滴耳剂、滴鼻剂和/或吸入剂。另外，本发明的目的在于提供含有作为大 环内酯类抗菌剂的克拉霉素作为有效成分的上述水性悬浮液、或注射剂、滴眼剂、滴耳剂、 滴鼻剂和/或吸入剂。
[0028] 解决问题的方法
[0029] 本发明人等经过深入研究后发现，含有大环内酯类抗菌剂的纳米微粒及分散稳定 剂、表面活性剂、抗凝聚剂和/或粘度调整剂的水性悬浮剂，澄清性、（长期)分散性、保存稳 定性、角膜滞留性及房水转移性优异，作为水性医药组合物是优异的。特别是，本发明人等 发现，通过使大环内酯类抗菌剂的纳米微粒为平均粒径（以下称为"Dv"）在500nm以下且 90 %粒径（以下称为"D90"）在1500nm以下（优选Dv在300nm以下且D90在400nm以下、或Dv在 200nm以下且D90在300nm以下）的微粒，可以获得非常优异的效果。
[0030] 因此，在一实施方式中，本发明涉及含有大环内酯类抗菌剂的纳米微粒的水性悬 浮剂，优选涉及纳米微粒的Dv为500nm以下且D90为1500nm以下的水性悬浮剂。例如，本发明 的水性悬浮剂含有通过将大环内酯类抗菌剂、生理上可接受的盐和/或生理上可接受的糖、 生理上可接受的多元醇和/或水、以及分散稳定剂混合而制造的大环内酯类抗菌剂的纳米 微粒。
[0031] 进一步，本发明人等发现，在上述水性悬浮剂中，使用作为表面活性剂的聚氧乙烯 氢化蓖麻油、且/或使用作为增稠剂的羟丙基甲基纤维素或甲基纤维素作为分散稳定剂时， 其适于作为水性医药组合物来利用。特别是，本发明人等发现，含有聚氧乙烯氢化蓖麻油 (HC0-60(表面活性剂））、和羟丙基甲基纤维素 (HPMC(高分子的增稠剂））或甲基纤维素 (MC (高分子的增稠剂））作为分散稳定剂的大环内酯类抗菌剂的眼用局部适用制剂，由于HPMC 或MC为高分子，因此可以期待其与角膜/结膜的粘膜之间发生相互作用的效果，而由于在本 制剂中纳米粒子变得稳定，因此可基于HPMC或MC的效果而期待角膜滞留性，进一步，由于滞 留时间变长，因此还可以期待房水转移性。
[0032] 另外，本发明人等发现，通过采用纳米粒子，可期待大环内酯类抗菌剂的溶解性的 提高，由此可以期待给药量的减少。此外，本发明人等惊讶地发现，通过采用本发明的纳米 粒子或纳米粒子制剂，可降低以往成为问题点的大环内酯类抗菌剂的刺激性，进而完成了 本发明。
[0033] 因此，在一实施方式中，本发明涉及含有大环内酯类抗菌剂的纳米微粒(优选纳米 微粒的Dv为500nm以下且D90为1500nm以下）的水性悬浮剂。例如，本发明包括含有大环内酯 类抗菌剂的纳米微粒(优选纳米微粒的Dv为500nm以下且D90为1500nm以下）及分散稳定剂 的水性悬浮剂。另外，本发明涉及上述分散稳定剂为表面活性剂、抗凝聚剂、粘度调整剂的 水性悬浮剂。在本发明的优选实施方式中，上述表面活性剂为聚氧乙烯氢化蓖麻油60、聚山 梨酯80、聚乙二醇单硬脂酸酯和/或聚氧乙烯化聚丙二醇，且/或上述抗凝聚剂为聚乙烯醇、 聚乙二醇和/或聚乙烯吡咯烷酮，且/或上述粘度调整剂为甲基纤维素、羟丙基甲基纤维素 和/或羟乙基纤维素。例如，本发明也可以是含有包含HC0-60(表面活性剂)和HPMC或MC(高 分子的增稠剂)作为分散稳定剂的大环内酯类抗菌剂的纳米微粒的水性悬浮液。
[0034] 另外，在另一实施方式中，本发明涉及含有大环内酯类抗菌剂的纳米微粒、还任选 地含有分散稳定剂的水性医药组合物。在本说明书中，所述水性医药组合物表示水性的液 体状或凝胶状的医药组合物，具体表示在水性的液体中悬浮有大环内酯类抗菌剂的纳米微 粒的状态的医药组合物。由此，在没有特别地相反记载的情况下，在本说明书中，医药组合 物表示水性的医药组合物。水性医药组合物包含注射剂及局部适用制剂。由此，在没有特别 地相反记载的情况下，在本说明书中，局部适用制剂表示用于局部给药的水性的制剂。
[0035] 具体而言，本发明的注射剂可以是用于全身性或局部的炎症性疾病或感染性疾病 的治疗或预防的注射剂，包含静脉注射用、皮下注射用、肌肉注射用、点滴用等的注射剂。另 外，局部适用制剂包含眼用局部适用制剂、耳用局部适用制剂、鼻用局部适用制剂、或肺用 局部适用制剂，更具体而言，包含用于眼、耳、鼻或肺的炎症性疾病或感染性疾病的治疗或 预防的医药组合物，例如滴眼剂、滴耳剂、滴鼻剂、及吸入剂。本发明的局部适用制剂可优选 为用于眼的炎症性疾病或感染性疾病的治疗或预防的眼用局部适用制剂、用于耳的炎症性 疾病或感染性疾病的治疗或预防的耳用局部适用制剂、用于鼻的炎症性疾病或感染性疾病 的治疗或预防的鼻用局部适用制剂、或者是用于肺的炎症性疾病或感染性疾病的治疗或预 防的肺用局部适用制剂。
[0036] 另外，就本发明的水性医药组合物而言，可以通过向需要该水性医药组合物的患 者的局部进行有效量的给药而将其用于炎症性疾病或感染性疾病的治疗或预防。即，在一 实施方式中，本发明涉及炎症性疾病或感染性疾病的治疗方法或预防方法，其包括:将含有 大环内酯类抗菌剂的纳米微粒还任选地含有分散稳定剂的水性悬浮剂、或包含该水性悬浮 剂的医药组合物向需要该水性悬浮剂或医药组合物的患者进行有效量的给药。例如，本发 明包括炎症性疾病或感染性疾病的治疗方法或预防方法，其包括:将含有大环内酯类抗菌 剂的纳米微粒还任选地含有分散稳定剂的局部适用制剂向需要该制剂的患者的局部进行 有效量的给药。
[0037] 或者，本发明涉及大环内酯类抗菌剂的纳米微粒（以及任选含有的分散稳定剂)在 制造水性医药组合物(例如，注射剂及局部适用制剂）中的用途。另外，本发明包括含有大环 内酯类抗菌剂的纳米微粒(优选纳米微粒的Dv为500nm以下且D90为1500nm以下）（以及任选 含有的分散稳定剂）的水性悬浮剂在制造水性医药组合物(例如，注射剂及局部适用制剂） 中的用途。
[0038] 在本说明书中，所述"大环内酯类抗菌剂"只要是具有大环内酯骨架、且具有抗菌 作用的化合物则没有特殊限制。作为大环内酯骨架，可以是14~16元环大环内酯，优选为14 元环大环内酯。作为大环内酯类抗菌剂，可列举例如红霉素、克拉霉素、罗红霉素、阿奇霉 素、交沙霉素、罗他霉素及吉他霉素，优选为红霉素、克拉霉素、或阿奇霉素，最优选为克拉 霉素。
[0039] 在本说明书中，所述"水性悬浮剂"是指，悬浮有大环内酯类抗菌剂的纳米微粒的 水性液剂，优选为医疗用水性悬浮液制剂。本说明书中的水性悬浮剂及医药组合物在不妨 碍其作为医药品的用途的范围内也可以具有粘性，除了水状制剂以外，还包括凝胶状制剂。 在本说明书中，水性悬浮剂及医药组合物包含注射剂及局部适用制剂。在本说明书中，所述 "局部"是指身体的一部分，例如，是患部、其周边、或存在患部的脏器等，优选为眼、耳、鼻 (上呼吸道）或肺（下呼吸道）。所述"局部适用制剂"是指以局部地给药为目的的医药组合 物。优选局部适用制剂为眼用局部适用制剂(例如，滴眼剂）、耳用局部适用制剂(例如，滴耳 剂）、鼻用局部适用制剂(例如，滴鼻剂）、及肺用局部适用制剂(例如，吸入剂）。在本说明书 中，水性悬浮剂可以构成其自身能够作为医药品而给药的医药组合物，也可以是提供能够 通过适宜地添加其它成分、稀释剂而给药的医药组合物的的悬浮剂(例如，医药组合物的原 料)。
[0040]本说明书中的水性悬浮剂优选具有下述中的任一性质或2种以上性质，即，在通过 搅拌等而分散的24小时后(优选为2天后、3天后、4天后、5天后、6天后或7天后）（室温），（1) 无法通过肉眼而确认到沉淀、（2)澄清性高、（3)无法通过显微镜观察而观察到凝聚物、结 晶。本说明书中的含有大环内酯类抗菌剂的纳米微粒的水性悬浮剂优选为自封入试验管开 始的7天后无法通过肉眼而确认到沉淀物、澄清性高、且无法通过显微镜观察而确认到凝聚 物、结晶的水性悬浮剂。
[0041 ]澄清性可基于日本药典收录的澄清性试验法而进行判定。具体而言，可按照以下 程序进行判定:在福尔马肼(Formaz in)标准乳池液5mL中加入水并使其达到IOOmL，得到浑 浊的比较液。以使液层达到深度30mm或40mm的方式分别取被检水性悬浮剂及新配制的浑浊 的比较液置于内径15mm的无色透明的玻璃制平底试验管中，在散射光中使用黑色的背景、 自上方进行观察并加以比较。当被检水性悬浮剂的澄清性与水或所使用的溶剂相同、或其 浑浊程度为浑浊的比较液以下时，可判定为澄清性高。或者，针对被检水性悬浮剂及新配制 的浑浊的比较液，使用层长50_的吸收池，以水或所使用的溶剂作为对照，通过紫外可见吸 光度测定法进行试验，测定660nm处的透过率，当被检水性悬浮剂的透过率为浑浊的比较液 以上时，可判定为澄清性高。
[0042] 在另一实施方式中，本发明的局部适用制剂为角膜滞留性高的眼用局部适用制 剂。被检水性悬浮剂的角膜滞留性可基于例如Jonas，J.Kuehne等、Am J Ophthalmol(2004) 138:547-553中记载的方法进行试验。具体而言，向兔眼给药被检水性悬浮剂，并测定角膜 中的药剂浓度，在角膜中的药剂浓度高于标准液剂(例如，已被报道可作为眼用局部适用制 剂而进行了试验的制剂，例如，对于克拉霉素的情况而言，为口服给药用克拉霉素颗粒的无 菌水悬浮液（参见Jonas,J.Kuehne等、Am J Ophthalmol(2004) 138:547-553)，下同）的情况 下，可判定为角膜滞留性高。
[0043] 在某一实施方式中，本发明的水性悬浮剂为刺激性低的水性悬浮剂。这里，所述刺 激性低是指，在将该水性悬浮剂向对象给药时，与以往被使用的含有相同有效成分的水性 制剂相比，刺激性的反应(例如，发红、肿胀、充血等炎症性反应)程度低。关于被检水性悬浮 剂的刺激性高低与否，例如，可基于Jonas ,J.Kuehne等、Am J Ophthalmo 1(2004) 138:547-553中记载的方法对兔眼给药被检水性悬浮剂并测定眼的炎症的程度，当其炎症的程度低 于标准液剂（同上）的情况下，可判定为刺激性低。更具体而言，对于滴眼剂的情况而言，可 如下地判定刺激性:将大环内酯类抗菌剂的浓度为1.0%的制剂以30分钟~数小时间隔1天 滴眼1~20次，观察给药前、最终给药后1、3、5、24小时的角膜、虹膜及结膜，并按照Draize的 评价基准（参见OECDGUIDELINES FOR TESTING OF CHEMICALS 405(24 Feb. 1987)Acute Eye Irritation/Corrosion)进行评分。
[0044] 在本说明书中，所述"表面活性剂"是即使作为医药品添加物向人给药也不显示毒 性的表面活性剂，只要是不会妨碍大环内酯类抗菌剂的作用的表面活性剂则没有特殊限 制，例如，可列举Poloxamer 407、Poloxamer 235、Poloxamer 188等聚氧乙稀（以下称为 叩(^"）-聚氧丙烯（以下称为叩0?"）嵌段共聚物咖1〇似11^1^等乙二胺聚氧乙烯-聚氧丙烯 嵌段共聚物加成物;P〇E(20)山梨聚糖单月桂酸酯（聚山梨酯20)、P0E(20)山梨聚糖单油酸 酯(聚山梨酯80)、聚山梨酯60等POE山梨聚糖脂肪酸酯类;P0E(60)氢化蓖麻油等POE氢化蓖 麻油;POE (9)月桂基醚等POE烷基醚类;POE (20) POP (4)十六烷基醚等POE-POP烷基醚类;POE (10)壬基苯基醚等