一种阿维菌素油膏的处理方法
【专利摘要】本发明提供了一种阿维菌素油膏的处理方法，包括以下步骤：a、向阿维菌素油膏中加入卤代烃类溶剂，在30℃~70℃条件下搅拌溶解阿维菌素油膏，得均一溶液；b、将上述溶液降温至5℃~0℃，加入溶析剂，搅拌，出晶后继续搅拌1~2h，得晶浆；所述溶析剂为烷烃类溶析剂；c、在常温下，将所得晶浆抽滤或离心分离，得阿维菌素有效成分粉状物。本发明通过溶析结晶的办法将阿维菌素油膏中的有效成分B1a几乎全部提取出来，收率高达96%，同时使阿维菌素油膏从原来难处理、难存放的油膏状变成粉剂状，解决了阿维菌素油膏难于存放的问题，避免了阿维菌素油膏对环境及农作物造成的或可能造成的危害，也不必再使用甲苯等有毒溶剂配制可售油膏，更加安全和环保。
【专利说明】
一种阿维菌素油膏的处理方法
技术领域
[0001 ]本发明涉及一种抗生素废料中提取残留的有生物活性的抗生素组分的方法，具体 涉及一种阿维菌素油膏的处理方法。
【背景技术】
[0002] 阿维菌素，英文名称Avermectins，为链霉菌的天然发酵组分，是由日本北里大学 大村智等和美国Merck公司首先开发的一类具有杀虫、杀螨、杀线虫活性的十六元大环内酯 化合物，其有8种不同的结构，分别为六1 &、六113^2&^213、81&、8113、82 &和8213，共组成4对同系 物。其中Ala、A2a、Bla和B2a具有更高的活性，其中又以Bla的生物活性最强。
[0003] 阿维菌素的结构式为：
[0005]式中，不同结构的阿维菌素的办基团、X_Y&R2基团分别见下表：
[0007]阿维菌素的生产工艺过程如下：用经过优选的高产斜面菌种制备液体菌种，然后 发酵260小时左右，发酵结束，将发酵液经板框压滤，弃滤液，得到菌丝体滤饼，经干燥后用 甲醇提取，之后脱溶剂并转相脱水溶性和部分醇溶性杂质，然后加入适量的甲醇进行结晶， 即可获得阿维菌素结晶(B1组分)和一次结晶母液。
[0008] 上述工艺方法得到的一次结晶母液中残留有大量阿维菌素 Bla组分，其大约占到 全部有效发酵组分Bla总量的25%。由于一次结晶母液很难再结晶提取出阿维菌素 Bla组 分，目前对其处理方法一般是将其浓缩后加入甲苯制成油膏，再用于生产制剂或者直接作 为废弃物排放。但是，由于阿维菌素油膏所含杂质较多，作为废弃物排放后对环境及农作物 的危害仍是未知的，而用于生产制剂，其所含的有毒溶剂甲苯也是一大不安全因素。另外， 由于国内阿维菌素市场逐渐趋于稳定，精粉价格不高，企业利润减少，因此，如何把膏状物 内有效成分提取出来，增加企业收入，已是迫在眉睫的技术难题。
【发明内容】
[0009] 本发明的目的就是提供一种阿维菌素油膏的处理方法，以解决阿维菌素油膏难以 处理与存放的问题。
[0010] 本发明的目的是这样实现的：
[0011] -种阿维菌素油膏的处理方法，包括以下步骤：
[0012] a、向阿维菌素油膏中加入卤代经类溶剂，在30°c~70°C条件下搅拌溶解阿维菌素 油膏，得均一溶液；
[0013] b、将上述溶液降温至5°C~0°C，并加入溶析剂，搅拌，出晶后继续搅拌1~2h，得晶 浆;所述溶析剂为烷烃类溶析剂；
[0014] c、在常温下，将所得晶浆抽滤或离心分离，得阿维菌素粗粉。
[0015] 所述阿维菌素油膏是将阿维菌素 Bla-次结晶母液浓缩、脱溶剂而得。
[0016] 工艺路线如图5所示。
[0017] 在本发明所述的阿维菌素油膏的处理方法中，所述步骤a中的卤代烃类溶剂为1~ 4个碳原子的卤代直链或支链烷烃类溶剂或为卤代芳香烃类溶剂，优选为二氯甲烷、三氯甲 烷、四氯化碳、二氯乙烷、三氯乙烷、四氯乙烷、氯丙烷、溴丙烷、氯苯、溴苯中的一种或两种 以上任意比例的混合溶剂。
[0018] 在本发明所述的阿维菌素油膏的处理方法中，所述步骤a中的阿维菌素油膏与卤 代烃类溶剂的质量比为1: 〇. 5~2。
[0019] 在本发明所述的阿维菌素油膏的处理方法中，所述步骤b中的溶析剂为5~8个碳 原子的直链或支链烷烃或环烷烃类溶析剂，优选为正戊烷、环戊烷、正己烷、环己烷、庚烷、 正辛烷、异辛烷、石油醚中的一种或两种以上任意比例的混合溶析剂。
[0020] 在本发明所述的阿维菌素油膏的处理方法中，所述步骤b中溶析剂的用量与步骤a 中溶剂的用量的质量比为1~2:1。
[0021] 本发明的有益效果为：
[0022] 1、本发明方法可将阿维菌素油膏中的有效成分几乎全部提取出来，并且可去除部 分杂质，同时使阿维菌素油膏从原来难处理、难存放的油膏状变成粉剂状，解决了阿维菌素 油膏难于存放的问题，避免了阿维菌素油膏对环境及农作物造成的或可能造成的危害，而 且，也不必再使用甲苯等有毒溶剂配制可售油膏，减少了不安全因素，无论从环保方面还是 安全方面都是一个质的改变。
[0023] 2、本发明通过溶析结晶的方法将阿维菌素油膏中的有效成分Bla几乎全部提取出 来，同时除去近20%的杂质，几乎全部的阿维菌素 Bla有效成分都留在滤饼中，收率高达 96%，解决了残留在阿维菌素油膏中的生物活性组分Bla难以提取的技术难题。将所得粉状 物合并到阿维菌素生产过程中，与粗粉一起进行精制，可大大提高终产品中阿维菌素主要 有效成分Bla的含量，从而提高生产企业的效益。
[0024] 3、本发明的分离提取工艺非常简单、成本也很低廉，所用溶剂和溶析剂均为常见 试剂，且均可以回收循环利用，符合工业生产的要求，大大提高了企业的经济效益。
【附图说明】
[0025] 图1是实施例1制备的粉状物的液相色谱图。
[0026]图2是阿维菌素 Bla标样的液相色谱图。
[0027] 图3是实施例2制备的粉状物的液相色谱图。
[0028] 图4是实施例3制备的粉状物的液相色谱图。
[0029]图5是本发明方法的工艺流程图。
【具体实施方式】
[0030] 下面结合具体实施例进一步阐述本发明，在以下各实施例中，未详细描述的各种 过程和方法是本领域中公知的常规方法，所用试剂为市售分析纯或化学纯。
[0031] a、将阿维菌素 Bla-次结晶母液浓缩、脱溶剂，得到阿维菌素油膏，向阿维菌素油 膏中加入卤代烃类溶剂，升温至30°C~70°C，搅拌，使阿维菌素油膏完全溶解，形成均一溶 液。其中，阿维菌素油膏与卤代烃类溶剂的质量比为1:0.5~2,卤代烃类溶剂是二氯甲烷、 三氯甲烷、四氯化碳、二氯乙烷、三氯乙烷、四氯乙烷、氯丙烷、溴丙烷、氯苯、溴苯中的一种 或两种以上任意比例的混合溶剂。
[0032] b、将步骤a中所得的均一溶液降温至5°C~0°C，并加入烷烃类溶析剂，不停搅拌， 有晶体析出后继续搅拌1~2h，得晶浆。其中，溶析剂与溶剂的质量比为1~2:1，溶析剂为正 戊烷、环戊烷、正己烷、环己烷、庚烷、正辛烷、异辛烷、石油醚中的一种或两种以上任意比例 的混合溶析剂。
[0033] c、在常温下，将步骤b中所得晶浆抽滤，得阿维菌素有效成分粉状物;滤液中可去 除近20%的杂质，几乎全部的阿维菌素 Bla有效成分都留在粉状物中。
[0034] 实施例1
[0035]取110g阿维菌素油膏，检测其所含Bla成分为5.06%;向阿维菌素油膏中加入200g 二氯甲烷，升温至50°C，搅拌，使阿维菌素油膏完全溶解，得到均一溶液;将所得溶液降温至 5°C，并加入300g石油醚，搅拌，待开始出晶后，继续搅拌lh，得晶浆;常温下抽滤所得晶浆， 得93g粉状物。用HPLC对粉状物和滤液进行检测分析，色谱检测条件为:流动相（甲醇：乙腈： 水= 38:38:24)，波长(UV = 245nm)，色谱柱（Zorbax C-18 4.6*150mm)，压力为64bar，检测 结果见表1和附图1。
[0036]表1:
[0038] 阿维菌素标样图谱如图2和表2所示。
[0039] 表2: 隸淬 : m 嫌毅^子： ： κ mm} 稀释岡r: ： i.omxi 涔稼铰褂鑛教锻子賴稀释子 辍夸? : _H &波彀綠妨咖
[0040] 錄深窗財何类赞蝝宽 _截 鲦竊 轉:親积 努 iKiiiij Isfiiij ?Μ：· % 一核 j % .. .v J ......... . .. .v j J I .... .v I 1 23. orr ^ (乂 ？你 s 2骆.ii糾邸 〇{H〇v :〇?邸 2 &U>U 洲 1.0<νη 029Η. 00375 Κ>δ. 52-105 总敬： ?^-107813
[0041 ]利用阿维菌素 Bla标样通过HPLC外标法计算粉状物中Bla的绝对含量见表3。
[0042]表3:
[0044] 粉状物中Bla的收率为96%。
[0045] 实施例2
[0046]取lkg阿维菌素油膏，检测其所含Bla有效成分为5.06%;向阿维菌素油膏中加入 lkg溴乙烷，升温至40°C，搅拌，使阿维菌素油膏完全溶解，得到均一溶液;将所得溶液降温 至5°C，并加入2kg正戊烷和正己烷(任意比混溶），搅拌，待开始出晶后，继续搅拌lh，得晶 浆;抽滤所得晶浆，得〇.91kg粉状物。用HPLC对粉状物进行检测分析，检测结果见表4和图3。
[0049]利用阿维菌素 Bla标样通过外标法计算粉状物中Bla的绝对含量见表5。
[0050]表5:
[0052]结晶粉状物中阿维菌素 Bla的收率为96.6%。
[0053] 实施例3
[0054]取113.2g阿维菌素油膏，检测其所含Bla成分为5.06%;向阿维菌素油膏中加入 8〇g二氯丙烷，升温至50°C，搅拌，使阿维菌素油膏完全溶解，得到均一溶液;将所得溶液降 温至5°C，并加入80g正己烷，搅拌，待开始出晶后，继续搅拌lh，得晶浆;常温下抽滤所得晶 浆，得90g粉状物。用HPLC对粉状物进行检测分析，色谱检测条件为:流动相（乙腈:水= 80: 20)，波长(UV = 245nm)，色谱柱（Zorbax C-18 4.6*150mm)，压力为53bar，FL0W=l .Oml/min 检测结果见表6和图5:
[0055]表 6 餐費 .箱转读 序号時海 縫名赘 馬度 頭黎 辭 数靈輿爱 ?^ΛΤψ Wiin KiAU 分费 % 1 妨 :W" Ι.24δ i).S5 ??,??. BMB 2 K.a、 i J4i. ?).7:Π ??；4§ ?.λ. BMB S 5.43 iia. 1.22? (Uti GJ3 反 3. δΜΒ 4 m 1.??^3 0.2?：? 0.2? ?!,?!. ΒΜΒ 5 7.05 i-.a. iS9C- 0.5S2 (?.4〇 is.a. ΒΜΒ 6 :S 您 ??.3. Μδ2 0.5?9 0,35 ??.3, ΒΜΒ
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[0057] 利用阿维菌素 Bla标样通过外标法计算粉状物中Bla的绝对含量见表7。
[0058] 表7:
[0060]结晶粉状物中阿维菌素 Bla的收率为96%。
[0061 ] 实施例4
[0062]取200g阿维菌素油膏，检测其所含Bla成分为5.06%;向阿维菌素油膏中加入100g 二氯甲烷，升温至50°C，搅拌，使阿维菌素油膏完全溶解，得到均一溶液;将所得溶液降温至 5°C，并加入200g石油醚，搅拌，待开始出晶后，继续搅拌lh，得晶浆;常温下抽滤所得晶浆， 得165g粉状物。经测定，粉状物中Bla含量为5.9%，收率为96.2%。
[0063] 实施例5
[0064] 取100g阿维菌素油膏，检测其所含Bla成分为5.06%;向阿维菌素油膏中加入200g 二氯甲烷，升温至50°C，搅拌，使阿维菌素油膏完全溶解，得到均一溶液;将所得溶液降温至 5°C，并加入200g石油醚，搅拌，待开始出晶后，继续搅拌lh，得晶浆;常温下抽滤所得晶浆， 得86g粉状物。经测定，粉状物中Bla含量为5.7%，收率为96.8%。
【主权项】
1. 一种阿维菌素油膏的处理方法，其特征在于，包括以下步骤： a、 向阿维菌素油膏中加入卤代烃类溶剂，在30°070°(：条件下搅拌溶解阿维菌素油膏， 得均一溶液； b、 将上述溶液降温至5TMTC，加入溶析剂，搅拌，出晶后继续搅拌1~2h，得晶浆;所述 溶析剂为烷烃类溶析剂； c、 在常温下，将所得晶浆抽滤或离心分离，得阿维菌素粗粉。2. 根据权利要求1所述的阿维菌素油膏的处理方法，其特征在于，所述步骤a中的卤代 烃类溶剂为1~4个碳原子的卤代直链或支链烷烃类溶剂或为卤代芳香烃类溶剂。3. 根据权利要求2所述的阿维菌素油膏的处理方法，其特征在于，所述步骤a中的卤代 烃类溶剂是二氯甲烷、三氯甲烷、四氯化碳、二氯乙烷、三氯乙烷、四氯乙烷、氯丙烷、溴丙 烷、氯苯、溴苯中的一种或两种以上任意比例的混合溶剂。4. 根据权利要求1或2所述的阿维菌素油膏的处理方法，其特征在于，所述步骤a中的阿 维菌素油膏与卤代烃类溶剂的质量比为1:0.5~2。5. 根据权利要求1所述的阿维菌素油膏的处理方法，其特征在于，所述步骤b中的溶析 剂为5~8个碳原子的直链或支链烷烃或环烷烃类溶析剂。6. 根据权利要求1或5所述的阿维菌素油膏的处理方法，其特征在于，所述步骤b中的溶 析剂为正戊烷、环戊烷、正己烷、环己烷、庚烷、正辛烷、异辛烷、石油醚中的一种或两种以上 任意比例的混合溶析剂。7. 根据权利要求1或5或6所述的阿维菌素油膏的处理方法，其特征在于，所述步骤b中 溶析剂的用量与步骤a中溶剂的用量的质量比为1~2:1。
【文档编号】C07H17/08GK106046085SQ201610394432
【公开日】2016年10月26日
【申请日】2016年6月3日
【发明人】王琳慧, 鲁森, 聂会敏, 郭军杰
【申请人】石家庄市兴柏生物工程有限公司